主要的动物病原菌.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,球菌,链球菌属,-,猪链球菌,蜂房球菌,肠杆菌科,埃希菌属,大肠埃希氏菌,沙门氏菌属,-,沙门氏菌,巴氏杆菌科及相关属,巴氏杆菌属,-,多杀巴氏杆菌,里氏杆菌属,-,鸭疫里氏杆菌,嗜血杆菌属,-,副猪嗜血杆菌,放线杆菌属,-,胸膜肺炎放线杆菌,革兰氏阴性需氧杆菌,布鲁氏菌属,-,布鲁氏菌,伯氏菌属,-,鼻疽伯氏菌,波氏菌属,-,支气管败血波氏菌,革兰氏阳性无芽孢杆菌,李氏杆菌属,-,产单核细菌李氏杆菌,革兰氏阳性产芽孢杆菌,芽孢杆菌属,-,炭疽芽孢杆菌,梭菌属,-,产气荚膜杆菌,拟幼虫芽孢杆菌,分支杆菌,牛分支杆菌,副结核分支杆菌,螺旋体,猪痢短螺旋体,支原体,鸡毒支原体,猪肺炎支原体,牛支原体,真菌,白僵菌,蜜蜂球囊菌变种（蜜蜂病原）,类菌质体,蜜蜂螺旋菌质体,第,1,节 球菌,葡萄球菌属,和,链球菌属,是人和动物的重要致病菌。,一、链球菌属,链球菌属细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，广泛分布于自然界，多数不致病，有些可导致人或动物各种化脓性炎症、肺炎、乳腺炎、败血症。,链球菌在血平板上的溶血现象分为,型溶血链球菌,在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变成绿色。致病力不强，多为机会致病菌。,型溶血链球菌,菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。,型溶血链球菌,菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。,1,形态及染色,猪链球菌,球形或卵圆形，直径,0.6-1.0um,。呈链状排列，链长短不一。,致病性菌链长，液体培养基中菌链长。,2,、,培养及生化特性,大多数兼性厌氧，少数为专性厌氧。营养要求复 杂，需补充血液、血清、葡萄糖等。,在血液琼脂平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、直径,0.5-0.75mm,的细小菌落。,不同菌株溶血不一。在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。,3.,致病性及毒力因子,可致猪脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、流产和局部脓仲。,二大类毒力因子,一类与黏附有关,一类毒素。,4,微生物学诊断,标本的采集：,根据临床疾病类型的不同，采集适当的,标本,渗出液、脓汁、乳腺炎乳液、脑脊髓液、,尿液和感染组织。,检验方法,（一）直接检查：可直接涂片，革兰氏染色镜检。,（二）分离培养,:,在涂片前先接种血平板，,3724-48h,。,观察菌落形态和溶血情况。然后涂片染色镜检。,（三）细菌鉴定：菌落形态、溶血特性、细菌形态、生,化特性。如定群、定型，则要作血清学试验。,PCR,二、蜂房球菌,欧洲幼虫腐臭病病原为蜂房球菌。一种蜜蜂幼虫病害。,第,2,节 肠杆菌科,大肠埃希氏菌,沙门氏菌,肠杆菌科是由一大群生化和遗传上相关的中等大小杆菌所组成。,其共同特性为：,革兰阴性,、,非抗酸性,、,无芽胞的兼性厌氧菌,。,本科细菌广泛分布于自然界，包括腐生菌、寄生菌和人及动物的病原菌。,代表属,埃希菌属（,Escherichia,）,沙门菌属（,Salmonella,）,大肠埃希菌,本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一，终生伴随，经粪便不断散播于周围环境。,在环境卫生和食品卫生学上，常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。,1.,形态及染色特性,大肠杆菌为革兰阴性无芽胞的直杆菌，大小,0.4-0.72-3m,，,大多数菌株以周生鞭毛运动,，但也有无鞭毛的变异株。,某些致病菌株有荚膜或微荚膜。,革兰染色的大肠杆菌,2.,培养及生化特性,本菌为兼性厌氧菌，,在普通培养基上生长良好,，最适,生长温度为,37,，最适生长,pH,为,7.2-7.4,。,麦康凯琼脂上形成红色菌落,；可与沙门氏菌区别。,在,SS,琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。,一些致病性菌株在绵羊血平板上呈,溶血。,在营养琼脂上生长,24h,后，形成,圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,，直径约,2-3mm,。,S,型菌株在肉汤中培养,18-24h,，呈均匀浑浊，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌环。,本菌能发酵多种碳水化合物产酸产气。大多数菌株可,迅速发酵乳糖和山梨醇,3.,致病性及毒力因子,一类是细菌寄生部位发生改变，如移位侵入肠外组织或器官，成为机会致病菌；,另一类是病原性大肠杆菌，与人和动物的大肠杆菌病（,Colibacilosis,）密切相关，正常情况下极少存在于健康机体内,与动物疾病有关的大肠杆菌可分为五类：,产肠毒素大肠杆菌，,ETEC,：,幼畜腹泻,肠致病型大肠杆菌，,EPEC,产类志贺毒大肠杆菌，,SLTEC,败血性大肠杆菌，,SEPEC,尿道致病性大肠杆菌，,UPEC,（,2,）与大肠杆菌致病有关的毒力因子,定居因子：,粘附素,包括菌毛和非菌毛类蛋白，具有粘附于宿主的小肠上皮细胞的能力，故称为,粘附素,（,adhesin,）,在动物源,ETEC,中已发现的菌毛粘附素主要有,F4,（,K88,）,、,F5,（,K99,）,、,F6,（,987P,）、,F41,、,F42,、,F165,、,F17,（旧称为,FY,或,Att25,）和,F18,。,肠毒素,是,ETEC,在体内或体外生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质毒素，,可分为,不耐热肠毒素,（,heat-labile enterotoxin,，,LT,）和,耐热肠毒素,（,heat-stable enterotoxin,，,ST,）两种。,4.,微生物学诊断,分离培养：,无菌采集病变组织，在血琼脂或麦康凯平板上划线分离培养。,生化鉴定：,挑取,麦康凯平板上的红色菌落,或血平板上呈,溶血的典型菌落，分别转种三糖铁（,TSI,）培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。,抗原鉴定：,将,TSI,琼脂反应模式符合埃希菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做,O,抗原鉴定。,检测毒力因子：,进而检测毒力因子，便可确定其属于何类致病性大肠杆菌。,大肠杆菌,分离鉴定程序,二、沙门氏菌,沙门菌属是一群寄生于人和动物肠道内的革兰阴性杆菌，生化特性和抗原结构相似，兼性厌氧。,绝大多数发酵葡萄糖产酸产气，也偶尔有不产气的。在三糖铁琼脂上常产生,H,2,S,为人类食物中毒的主要病原之一，对医学、兽医学和公共卫生均十分重要。,1.,形态及染色特性,沙门菌的形态和染色特性与同科的大多数其它菌属相似，呈直杆状，,0.7-1.52.0-5m,，革兰阴性。,除雏沙门菌和鸡沙门菌无鞭毛不运动外，其余各菌均以周生鞭毛运动，且绝大多数具有,型菌毛。,致病性,本属具有极其广泛的动物宿主，是一种重要的人畜共患病病原。,不仅引致人的伤寒、副伤寒、急性胃肠炎、败血症等疾病，还侵害幼、青年动物，使之发生败血症、胃肠炎及其它组织局部炎症。,对成年动物则往往引起散发性或局限性沙门菌病，发生败血症的怀孕母畜可表现流产。,在发病的畜禽群中，具有一定比例的个体是隐性感染或康复带菌者，并间歇地排菌，成为主要传染源。,沙门菌很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间通过直接或间接的途径传播，没有中间宿主。,主要传染途径是消化道,。卫生不良、应激以及发生病毒或寄生虫感染，均可诱发易感动物沙门菌病。,（,2,）毒力因子,菌毛,内毒素,肠毒素,4.,微生物学诊断,分离培养：,未污染的被检组织可直接培养基平板上划线分离，但已污染的被检材料需要增菌培养基增菌后，再用鉴别培养基分离。,生化鉴定,血清型分型,沙门菌的革兰氏染色,沙门菌的麦康凯培养,第,3,节 巴氏杆菌科及相关属,巴氏杆菌属（,Pasteurella,里氏杆菌属（,Riemerella,）,放线杆菌属,（,Actinobacillus,）,嗜血杆菌属（,Haemophilus,）,多杀巴氏杆菌病,鸭疫里氏杆菌病,猪传染性胸膜肺炎,猪副猪嗜血杆菌病,一、巴氏杆菌属：多杀性巴氏杆菌,本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病（,Pasteurellosis,）的病原体，主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。,广泛分布于世界各地。,在同种或不同动物间可相互传染，也可感染人，大多因被动物咬伤所致。,1.,形态及染色,为球杆状或短杆状菌，两端钝圆，大小为,0.25-0.40.5-2.5,m,。,单个存在，有时成双排列,病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见典型的,两极着色,无鞭毛，不形成芽胞。,革兰染色阴性,美蓝染色,2.,培养及生化特性,需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。,在普通培养基上生长贫瘠，在麦康凯培养上不生长。,在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。,在血琼脂平板上培养,24h,，,长成水滴样小菌落,，无溶血现象。,从病料,新分离的强毒菌株具有荚膜,，菌落为粘液型，较大。,3.,致病性与毒力因子,本菌是多种动物的重要病原菌。,对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、马、兔等都可致病，,急性型呈出血性败血症迅速死亡，如,牛出血性败血症,、,猪肺疫,、,禽霍乱,、兔巴氏杆菌病等；,慢性型则呈现,萎缩性鼻炎（,猪、羊）、关节炎及局部化脓性炎症等。,实验动物中,小鼠极易感染,，鸽对杀禽亚种的易感性强。,猪肺疫,禽霍乱,具有荚膜的菌株有较强的抗性，荚膜成分为,透明质酸,，有抗吞噬作用。,研究表明，杀禽亚种的致病力与菌体的内毒素有关。该内毒素是一种含氮的磷酸脂多糖，与菌体结合不紧密，用福尔马林盐水可洗脱，少量注入鸡体，即可引致禽霍乱，表现出血性败血症状。,已知,A,、,B,、,D,型菌株具有,4,型菌毛。本菌的铁载体名为多杀素（,multocidin,），也与毒力有关。,微生物学诊断,采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色，显微镜检查，如发现典型的,两极着色的短杆菌,，结合流行病学及剖检，即可作初步诊断。,但慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体，须进行培养和动物试验。,可用血琼脂分离培养，疑似菌落再接种在三糖铁培养基，细菌生长，使底部变黄。必要时可进一步做生化反应作鉴定。,动物试验,用病料悬液或分离培养菌，皮下注射,小鼠,、家兔或鸽，动物多在,24-48h,内死亡。,参照患畜的生前临床症状和剖检变化，结合分离菌株的毒力试验，作出诊断。,血清学鉴定,若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型，则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。,检测动物血清中的抗体，可用试管凝集、间接凝集、琼脂扩散试验或,ELISA,。,二、里氏杆菌属：鸭疫里氏杆菌,鸭疫里氏杆菌（,R.anatipestifer,）是本属的代表种，原名鸭疫巴氏杆菌。,该菌与巴氏杆菌属的,rRNA,不同源，与黄杆菌等相近，因此建议建立里氏杆菌新属，归于,黄杆菌科,（,Flavobacteriaceae,1.,形态及染色,菌体呈杆状或椭圆形，大小,0.3-0.50.7-6.5m,，偶见个别长丝状。,多为单个，少数成双或短链排列。,可形成荚膜，无芽胞，无鞭毛。,瑞氏染色可见两极着色。,革兰染色阴性。,培养及生化特性,本菌营养要求较高，普通培养基和麦康凯培养基上不生长。初次分离培养供给,5%-10%,的,CO2,易于生长。,在,巧克力,或胰蛋白胨大豆琼脂（,TSA,）平板上，,CO2,培养箱或蜡烛缸中，,37,培养,24-48h,，生长的菌落无色素，呈圆形、表面光滑，直径,1-2mm,。,在含血清或胰蛋白胨酵母的肉汤中，,3748h,培养，呈上下一致轻微混浊，管底有少量沉淀。,本菌不发酵葡萄糖、蔗糖，可与多杀性巴氏杆菌区别。,极少数菌株发酵麦芽糖或肌醇。靛基质、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用、,VP,、甲基红试验、硫化氢产生、尿素分解等均为阴性。,氧化酶、触酶试验为阳性。多不溶血，多液化明胶，,G+C,多为,35mol%,。,致病性与毒力因子,本菌是雏鸭传染性浆膜炎的病原菌。,可引起,1-8,周龄、尤其,2-3,周龄雏鸭大批发病、死亡，生长发育严重受阻。,也从患败血症的鸡、鹅、火鸡、野生水禽分离。兔和小鼠不易感。,豚鼠腹腔注射大量细菌可致死。,微生物学诊断,取发病初期病鸭的脑及心血，用巧克力培养基容易分离到本菌。,肝、脾分离率低，仅,10%,左右。分离时应同时接种麦康凯培养基，以便及时区别大肠杆菌。,分离的细菌应进行葡萄糖和蔗糖发酵试验，也可接种小鼠，与多杀性巴氏菌相区别。,PCR,法可用作快速诊断。,三、嗜血杆菌属：副猪嗜血杆菌,副猪嗜血杆菌病，也写作猪副嗜血杆菌病，又称格拉泽氏病或革拉泽氏病。,引起的猪的疾病，表现为猪的纤维性多发性浆膜炎、关节炎、胸膜炎和脑膜炎等。,血清型,根据热稳定抗原的差异可将本菌分为至少,15,个血清型，约,25%,分离株无法定型，优势菌型为,4,型及,5,型。,不同血清型毒力存在差异，,1,、,5,、,10,、,12,、,13,及,14,型为高毒力,，,2,、,4,、,8,、,15,为中毒力,，其它血清型视为无毒力。但同一血清型的不同菌株毒力可不同。,1.,形态及染色,多为短杆状，也有呈球、杆状或长丝状等多形性。大小为,1.50.3-0.4,m,。,多单个、也有短链排列。,无鞭毛，无芽胞，新分离的致病菌株有荚膜。,美兰染色呈两极,，革兰染色为阴性。,2.,培养及生化特性,初次分离培养时供给,5%-10%CO2,可促进生长。生长需供给,X,因子和,V,因子。,X,因子,是血红蛋白中的血红素及其衍生物,V,因子,为辅酶,即烟酰胺腺嘌噙二核苷酸（,NAD,）或辅酶,血液中的,V,因子一般处于被抑制状态，将鲜血琼脂加热,80-90,，,5-15min,，制成,巧克力培养基,，培养基中的抑制物被破坏，释出,V,因子。,3.,致病性及毒力因子,多发性浆膜炎等,4.,微生物学诊断,TSA,分分离，,PCR,鉴定等,四、放线杆菌属：猪胸膜肺炎放线杆菌,本菌旧称猪胸膜肺炎嗜血杆菌或副溶血嗜血杆菌,但,DNA,杂交试验表明，本菌与林氏放射杆菌有很高的同源性，因此自,1983,年起改为现名，并划归,放线杆菌属,。,本菌引致,猪传染性胸膜肺炎,，是集约化猪场常见猪病之一。,1.,形态及染色,小球杆菌，具多形性。新鲜病料呈两极染色，有荚膜和鞭毛，具运动性。,兼性厌氧，置,10,CO,2,中可长出粘液性菌落。最适生长温度,37,。,在普通营养基不长，需,添加,V,因子,常用巧克力培养基培养。,在绵羊血平板上，可产生稳定的,溶血，金黄色葡萄球菌可增强其溶血圈（,CAMP,试验阳性,）,CAMP,试验,3.,致病及毒力因子,微生物学诊断,取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物作涂片，显微镜检查是否有革兰阴性两极染色的球杆菌。,确诊需取上述病料接种巧克力琼脂或绵羊血琼脂，置,5%CO2 37,越夜培养。如有溶血小菌落生长，应进一步作,CAMP,试验,，。,近年来则采用,PCR,法，检测荚膜合成相关基因等，可达快速诊断和定型。,第,4,节 革兰氏阴性需氧杆菌,布鲁氏菌属,-,布鲁氏菌,伯氏菌属,-,鼻疽伯氏菌,波氏菌属,-,支气管败血波氏菌,胞内菌的基本概念,根据病原菌与宿主细胞的关系，病原菌分为,胞外菌,和,胞内菌,两类。,胞外菌,是指可以在宿主细胞外的细胞间隙、血液、淋巴液、组织液等体液中生长繁殖的细菌。,胞内菌,又分两种，即,兼性胞内菌,和,专性胞内菌,。兼性胞内菌是指在宿主体内，主要寄居在细胞内生长繁殖，在体外无活细胞的培养基中亦可生长。专性胞内菌则不论在体内体外，都必须在活细胞内生长繁殖,一、布氏杆菌属：布氏杆菌,有羊、牛、猪、鼠、绵羊和犬,6,个种，,20,个生物型。,是引起多种动物和人发病的病原。,1.,形态与染色,球杆状，无鞭毛，不形成芽孢。,革兰氏阴性。,2.,培养及生化特性,此属细菌,专性需氧,，但许多菌株，尤其是在初代分离培养时尚需,5%-10%CO2,。最适生长温度,37,，最适,pH,为,6.6-7.4,。,泛酸钙和内消旋,赤藓糖醇,可刺激某些菌株生长。,大多数菌株在初次培养时生长缓慢，在,48h,内罕见形成菌落，常需,5-10d,甚至,20-30d,，但实验室长期传代保存的菌株，培养,48-72h,即可生长良好。,普通培养基上生长缓慢；在含有,35%,的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好；,菌落特点,甘油琼脂：细小、光滑、圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落,血琼脂：,不溶血,马铃薯培养基：蜂蜜状粘稠菌苔，颜色由淡黄色淡褐色深褐色；对鉴定有价值,孔雀绿酸性复红培养基上，形成淡绿色菌落,麦康凯上不能生长,在液体培养基中呈轻微浑浊生长，无菌膜。,但培养日久，可形成菌环，有时形成厚的菌膜；在固体培养基上，菌落可以分为,光滑（,S,）型菌落,粗糙（,R,）型菌落,粘胶状的粘液（,M,）型菌落,3,致病性和毒力因子,将本属分为该属现包括,6,个种,20,个生物型，,马尔他布氏杆菌,（,Br.melitensis,）生物型,13,、,流产布氏杆菌,（,Br.abortus,）生物型,19,猪布氏杆菌,（,Br.suis,）生物型,15,绵羊布氏杆菌,（,Br.ovis,）,沙林鼠布氏杆菌,（,Br.neotomae,）,犬布氏杆菌,（,Br.canis,）,6,个种。,毒力差异,在不同种别和生物型，甚至同型细菌的不同菌株之间毒力差异明显。,对豚鼠的致病性顺序是,马尔他布氏杆菌猪布氏杆菌流产布氏杆菌沙林鼠布氏杆菌犬布氏杆菌绵羊布氏杆菌。,引致多种动物和人的布氏杆菌病。细菌,可经气溶胶传播,，是潜在的生物武器。,本菌,不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素,。,光滑型的流产布氏杆菌入侵机体粘膜屏障后，,被吞噬细胞吞噬,成为,胞内寄生菌,，并在淋巴结生长繁殖形成感染灶。,潜伏期,2,周至,7,个月，一旦侵入血流，则出现菌血症，由于,内毒素的作用致使机体发热,。,之后细菌定位于,网状内皮系统、乳腺及生殖器,官。,在妊娠中期，细菌在富含,赤藓醇,的胎盘绒毛膜及其周边大量繁殖，导致坏死性胎盘炎，致使孕畜流产。,4.,微生物学诊断,鉴于布氏杆菌病有可能由实验室感染所致，所以发达国家规定凡涉及本菌的,样本检测,，均应在,生物安全,2,级实验室,进行，凡涉及,本菌的培养,，则需在,生物安全,3,级实验室,内操作。,布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要,依靠血清学检查,及,变态反应检查,。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其它特殊情况。,（,1,）细菌学检查,病料最好用,采集,流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。,也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其它有局部病变的器官。,显微镜检查 病料,可,直接涂片,染色镜检,，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。,（,2,）分离培养鉴定,无污染病料,:,可直接划线接种于前述适宜培养基，,污染病料,:,则应接种到加有放线菌酮,0.1mg/ml,、杆菌肽,25 IU/ml,、多粘菌素,B 6 IU/ml,和加有色素的选择性琼脂平板。均一式接两套份，分别置大气环境及,5%10%CO2,环境，,37,培养。每,3d,观察一次，如有细菌生长，可挑选可疑菌落做细菌鉴定；如无细菌生长，可继续培养至,30d,后，仍无生长者方可认为阴性。,挑选可疑菌落，做涂片、染色和镜检，确定为疑似菌后进行纯培养，再以布氏杆菌抗血清（高免血清或,A,、,M,单相血清，如不凝时，可再用,R,血清）作玻片凝集试验。,PCR,法作快速诊断。,（,3,）血清学检查,有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。,用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。,荧光抗体技术,反向间接血凝试验,间接炭凝集试验,免疫酶组化法染色,动物在感染布氏杆菌,715d,可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。,（,4,）变态反应检查,皮肤变态反应一般在感染后的,2025d,出现，因此不,适,宜作早期诊断。,本法适于动物,绵羊和山羊及猪,的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。,检测时，将布氏杆菌水解素,0.2ml,注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，,24,及,48h,后各观察反应一次。,若注射部发生红肿，即判为阳性反应,。,二、伯氏菌属,-,鼻疽伯氏菌,鼻疽伯氏菌旧名鼻疽假单胞菌，为马、骡、驴等,单蹄兽鼻疽,的病原，也能感染人，其他家畜和多种野生动物，,是一种人兽共患的重要病原。,1.,形态与染色：革兰氏阴性,2.,培养及生化特性：专性需氧,3.,致病性及毒力因子：马属动物，人可感染,4.,微生物学诊断：变态反应；生物安全等级,3,级；血清学检查,三、波氏杆菌：支气管败血波氏菌,最初从犬中分离，可感染多种哺乳动物,1.,形态与染色：革兰氏阴性,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子：,犬传染性支气管炎,4.,微生物学诊断：细菌学检查；血清学检查。,第,5,节 革兰氏阳性无芽孢杆菌,李氏杆菌属,-,产单核细菌李氏杆菌,可引起人和动物的李氏杆菌病。,1.,形态与染色：,革兰氏阳性，无芽孢,2.,培养及生化特性,培养基上长成露滴状小菌落，,型溶血,3.,致病性及毒力因子,多种动物感染，败血症，流产等,4.,微生物学诊断,增菌后分离培养；动物试验：小鼠；血清学鉴定,第,6,节 革兰氏阳性产芽孢杆菌,芽孢杆菌属,-,炭疽芽孢杆菌,梭菌属,-,产气荚膜杆菌,一、芽孢杆菌属,-,炭疽芽孢杆菌,1.,形态与染色,菌体两端平切，培养基中呈,竹节状，革兰氏阳性,。,2.,培养及生化特性,粗糙型菌落,3.,致病性及毒力因子,是引起人和各种动物炭疽的病原。,4.,微生物学诊断,严禁解剖,二、梭菌属,-,产气荚膜杆菌,曾称为魏氏梭菌。,1.,形态与染色,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子,A,型菌引起人气性坏疽和食物中毒；,B,型菌引起羔羊痢疾；,C,型菌引起绵羊猝疽等；,D,引起羔羊等败血症；,E,引起犊牛、羔羊肠毒血症。,4.,微生物学诊断,第,7,节 分枝杆菌属,牛分枝杆菌,副结核分枝杆菌,本属菌许多是人和多种动物的病原菌。,对动物有致病性的主要是,结核分枝杆菌,牛分枝杆菌,禽分枝杆菌,副结核分枝杆菌,一、牛分枝杆菌（,M.bovis,）,本菌与人的结核分枝杆菌（,M.tuberculosis,，简称结核杆菌）和禽分枝杆菌（,M.avium,）许多特性相近，,Cycle of,Mycobacterium bovis,transmission between cattle and humans.,The thickness of the arrows suggests probability.Adapted from,Collins and Grange,(1987).,1.,形态与染色,结核分枝杆菌为细长、直或微弯的杆菌，单在、少数成丛，大小为,0.2,0.51.5,4.0m,。牛分枝杆菌菌体较短而粗，禽分枝杆菌呈多形性。,在陈旧的培养基或干酪性病灶内的菌体可见分枝现象。,与一般革兰阳性菌不同，本菌的细胞壁不仅有肽聚糖，还有特殊的糖脂。,糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免疫系统，,分枝杆菌因此被制成免疫佐剂得到普遍应用，著名的弗氏佐剂（,Freund,s adjuvant,）即是例证,。,2.,培养与生化特性,本菌为专性需氧菌，对营养要求严格，最适,pH 6.4,7.0,，,最适温度为,37,37.5,，在,30,34,可生长；低于,30,或高于,42,均不生长，但禽分枝杆菌可在,42,生长。,在添加特殊营养物质的培养基上才能生长，但,生长缓慢,，特别是初代培养，一般需,10,30d,才能看到菌落。,3.,致病性及毒力因子,致病过程以,细胞内寄生,和形成局部病灶为特点。,细菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡，被巨噬细胞吞噬，但不被消化降解，相反在其内繁殖，形成病灶，产生干酪样坏死。,坏死灶被吞噬细胞、,T,细胞与,B,细胞等包围，形成结核结节。,牛分枝杆菌主要引起牛结核病，其他家畜、野生反刍动物、人、灵长目动物、犬、猫等肉食动物均可感染。,实验动物中豚鼠、兔有高度敏感性。,对仓鼠、小鼠有中等致病力，对家禽无致病性。,4.,微生物学诊断,显微镜检查,取患病器官的结核结节及病变与非病变交界处组织直接涂片，抗酸染色后镜检，如发现红色成丛杆菌时，可做出初步诊断。,分离培养,将病料中加入,6,H,2,SO,4,或,4,NaOH,液处理,15min,后,，经中和、离心，取少许沉淀物接种在培养基斜面上，每份病料接,4,6,管，管口封严，置,37,培养,8,周，每周观察一次，培养阳性时，需进行培养特性和生化特性鉴定。,动物接种,将上述经处理的供分离培养用的病料接种于动物，皮下或腹腔注射,0.5ml,，,禽分枝杆菌可使鸡致病；结核杆菌对豚鼠有较强的致病性，皮下注射,3,5,周可引起明显病变；,牛分枝杆菌对兔有致病性，接种后,3,周至,3,个月死亡。,变态反应,临床上最广泛应用的是迟发性变态反应试验，即结核菌素试验，采用,PPD,皮内注射法，,按我国,动物检疫操作规程,规定，牛颈部皮内注射,0.1ml,（,10,万,IU,ml,）,72h,后局部炎症反应明显，皮肿胀厚度差,4mm,为阳性；,如局部炎症不明显，皮肿胀厚度差在,2,4mm,间，为疑似；如无炎症反应，皮肤肿胀厚度差在,2mm,以下，为阴性。,凡判为疑似反应牛，,30d,后需复检一次，如仍为疑似，经,30,45d,再次复检，如仍为疑似可判为阳性。,血清学检查,鉴于结核病,细胞免疫与体液免疫的分离现象，,抗体阳性意味着病情恶化，正处于感染活动期，检测特异性抗体可诊断结核病。,酶联免疫吸附试验（,ELISA,）是目前检测抗体的较好方法，决定,ELISA,特异性的关键是选择结核杆菌特异性诊断抗原。,PCR,广泛应用于于分离菌株及结核病人的临床样本（痰液）的检测，特异性强而且快速。,二、副结核分支杆菌,引起反刍动物慢性消耗性传染病。,1.,形态与染色,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子,4.,微生物学诊断：分离培养，变态反应；抗体检测,第,8,节 螺旋体,猪痢短螺旋体,1.,形态与染色：存在,2-4,个弯曲；,2.,培养及生化特性：严格厌氧；,3.,致病性及毒力因子：引起猪痢疾，又名血痢、黑痢。,4.,微生物学诊断,第,9,节 支原体,一、鸡毒支原体，又名禽败血支原体。,1.,形态与染色,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子：感染鸡和火鸡，,4.,微生物学诊断：难以分离培养。,二、猪肺支原体，,1.,形态与染色,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子：只感染猪，引起猪喘气病。,4.,微生物学诊断,三、牛支原体,1.,形态与染色,2.,培养及生化特性,3.,致病性及毒力因子：引起牛传染性胸膜肺炎，又称牛肺疫。,4.,微生物学诊断,第,10,节 真菌,一、白僵菌,引起家蚕的白僵病。,1.,生长发育周期及形态特征,2.,白僵菌的代谢产物,3.,分生孢子的生存力与抵抗力,二、蜜蜂球囊菌变种（蜜蜂病原）,谢 谢,电话：,13814076553,Email:vszw,