乙肝突变.ppt

乙型肝炎病毒PreC/BCP突变与疾病进展的相关性研究北京大学医学部病原生物学系 王佳 高志勇 庄辉 李杰 李雅娟 王杰温 州 医 学 院 杜季梅北 京 地 坛 医 院 董庆鸣山 东 省 聊 城 人 民 医 院 庞保军国家十五攻关课题（2004BA718B02）慢性化机制乙型肝炎临床表现HBVPreC/BCP变异HBV基因型型特异性引物PCR法检测HBV基因型收集慢性HBV感染者血清标本选取C基因型HBV慢性感染者血清标本本研究结论HBV DNA定量检测HBV血清学标志物检测HBV PreC/BCP基因PCR产物测序分析应用SPSS 10.0软件进行数据统计分析Type D 119bp 1st PCR819 bpP1S4RType E 167bpType F 97bpType A 68bpType B 281bpType C 122bp2nd PCR with type-specific primersMix AMix B型特异性引物PCR法检测HBV基因型B2BA1RB2BB1RB2BC1RBD1B2RBE1B2RBF1B2Rpre-S1pre-S2Snt 28483205 155nt 833(nt2823-2845，A-F，正义链)(nt417-436，A-F，反义链)Naito H.et al.J Clin Microbiol,39:362-364,2001HBV PreC/BCP 结构示意图XORF18351814 PreC/C ORFDR2(1590-1600)DR1(1824-1834)HBV DNACore promoterURRBCP16131849174216271774ENIIab本研究扩增区域nt1604-nt2073，包括全部PreC/BCP，并包括部分X基因和部分C基因诊断符合2005年发布的慢性乙型肝炎防治指南 ASC：无症状携带者；CHB：慢性乙型肝炎患者；LC：肝硬化患者 88例C基因型慢性HBV感染者血清标本HBeAg(+)HBeAg(-)ASC(36)24 12 CHB(36)19 17LC(16)7 9Total 50 38HBVPreC/BCP区1st PCR扩增电泳图 470bp(nt1604nt2073)HBVPreC/BCP区2nd PCR扩增电泳图 454bp(nt1611 nt2064)PCR分型产物电泳结果图李雅娟,等.乙型肝炎病毒感染者病毒基因型和亚型分布及其临床意义.中华肝脏病杂志,2005,13:724-729.ASC组临床资料及PreC/BCP突变情况NS8.3(1/12)0A1896%NS00T1846PreCNS8.3(1/12)4.2(1/24)缺失NS00A1764NS16.7(2/12)12.5(3/24)T1762/A1764%NS8.3(1/12)4.2(1/24)C/G1753BCP0.0013.71.57.30.8Log10HBV DNANS24.73.826.34.7AST(IU/L)NS26.64.626.95.4ALT(IU/L)NS23.36.626.110.6年龄NS50(6/12)58.3(14/24)男性HBeAg(-)(n=12)HBeAg(+)(n=24)P值 无症状携带者组(ASC)特征NS：无统计学意义CHB组临床资料及PreC/BCP突变情况NS41.2(7/17)15.8(3/19)A1896%NS23.5(4/17)5.3(1/19)T1846PreCNS5.9(1/17)5.3(1/19)缺失NS5.9(1/17)10.5(2/19)A1764NS58.8(10/17)42.1(8/19)T1762/A1764%NS11.8(2/17)15.8(3/19)C/G1753BCPNS6.31.36.81.0Log10HBV DNANS275.4319.5287.6429.5AST(IU/L)NS290.4267.5432.8686.0ALT(IU/L)0.0541.515.329.713.1年龄NS64.7(11/17)57.9(11/19)男性HBeAg(-)(n=17)HBeAg(+)(n=19)P值 慢性乙肝组(CHB)特征NS：无统计学意义 LC组临床资料及PreC/BCP突变情况比较NS55.6(5/9)14.3(1/7)A1896%NS22.2(2/9)28.6(2/7)T1846PreCNS11.1(1/9)0缺失NS11.1(1/9)0 A1764NS66.7(6/9)100(7/7)T1762/A1764%NS55.6(5/9)28.6(2/7)C/G1753BCPNS6.11.16.51.1Log10HBV DNANS66.850.9221.1223.9AST(IU/L)NS42.121.8220.4269.1ALT(IU/L)NS45.115.852.710.0年龄NS66.7(6/9)71.4(5/7)男性HBeAg(-)(n=9)HBeAg(+)(n=7)P值 肝硬化组(LC)特征NS：无统计学意义HBeAg阳性HBV感染者临床资料及PreC/BCP突变情况比较NS14.3(1/7)15.8(3/19)0A1896%0.0528.6(2/7)5.3(1/19)0T1846PreCNS05.3(1/19)4.2(1/24)缺失NS010.5(2/19)0A17640.05100(7/7)42.1(8/19)12.5(3/24)T1762/A1764%NS28.6(2/7)15.8(3/19)4.2(1/24)C/G1753BCPNS6.51.16.81.07.30.8Log10HBV DNA0.05221.1223.9287.6429.526.34.7AST(IU/L)0.05220.4269.1432.8686.026.95.4ALT(IU/L)0.00152.710.029.713.126.110.6年龄NS71.4(5/7)57.9(11/19)58.3(14/24)男性肝硬化慢性乙肝无症状携带者P值HBeAg(+)(n=50)特征NS：无统计学意义HBeAg阴性HBV感染者临床资料及PreC/BCP突变情况比较0.0555.6(5/9)41.2(7/17)8.3(1/12)A1896%NS22.2(2/9)23.5(4/17)0T1846PreCNS11.1(1/9)5.9(1/17)8.3(1/12)缺失NS11.1(1/9)5.9(1/17)0A17640.0866.7(6/9)58.8(10/17)16.7(2/12)T1762/A1764%0.0555.6(5/9)11.8(2/17)8.3(1/12)C/G1753BCP0.016.11.16.31.33.71.5Log10HBV DNANS66.850.9275.4319.524.73.8AST(IU/L)0.0142.121.8290.4267.526.64.6ALT(IU/L)0.0145.115.841.515.323.36.6年龄NS66.7(6/9)64.7(11/17)50(6/12)男性肝硬化慢性乙肝无症状携带者P值HBeAg(-)(n=38)特征NS：无统计学意义50例HBeAg(+)患者中，ASC、CHB和LC组的T1762/A1764双突变率和T1846突变率分别为12.5%、42.1%和100%，以及0%、5.3%和28.6%，均有显著差异(P值分别为0.03和0.02)38例HBeAg(-)患者中，ASC、CHB和LC组的T1762/A1764双突变率分别为16.7%、58.8%和66.7%，也有明显差异(P=0.08)HBV T1762/A1764双突变与C基因型HBV慢性感染者的疾病进展有关。