饲粮添加杜仲皮粉对蛋鸡生产性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响.pdf

SILIAO GONGYE2023年第44卷第17期 总第686期摘 要：为探讨杜仲皮粉对蛋鸡生产性能、抗氧化能力以及肠道菌群的影响，试验选用280日龄大午金凤蛋鸡288只，随机平均分为4组，分别为对照组、1%杜仲皮粉添加组（1%组）、3%杜仲皮粉添加组（3%组）、5%杜仲皮粉添加组（5%组），饲喂63 d，分别为7 d的适应性喂养和56 d的正试期。适应性喂养时饲喂正常的蛋鸡全价料，随后7 d逐渐替换为试验饲粮。统计蛋鸡产蛋性能；试验结束后，采集鸡蛋、血清、肝脏、输卵管壶腹部、卵巢、回肠组织，进行蛋品质检测、抗氧化能力检测与肠道菌群测定。结果表明，饲粮中添加杜仲皮粉可提高蛋鸡产蛋率（P0.05），增加平均蛋重，使血清中总抗氧化能力（T-AOC）提高，丙二醛（MDA）含量显著降低（P0.05),increased total antioxidant capacity,decreased the content of malondialdehyde(P0.05),and decreased the number of 饲粮添加杜仲皮粉对蛋鸡生产性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响 韩 雪1 苗小猛1 伍革民1 赵小玲2 陈 勇3 张 帅4 舒 刚4*（1.贵州省畜牧兽医研究所，贵州贵阳 550001；2.四川农业大学动物科技学院，四川成都 611130；3.贵州凤和祥农业发展有限公司，贵州从江 557400；4.四川农业大学动物医学院，四川成都 611130）作者简介：韩雪，研究方向为动物科学。*通讯作者：舒刚，副教授，硕士生导师。收稿日期：2023-06-02基金项目：中央引导地方科技发展资金黔科中引地20214018、4003；四 川 省 衔 接 推 进 乡 村 振 兴 科 技 专 项2022ZHXC0019；宜宾市领军人才专家工作站项目201947单胃动物2023年第44卷第17期 总第686期在家禽养殖中，因为抗生素的不合理使用导致鸡群的免疫力下降、有害菌耐药性增加、肠道菌群失调，严重影响其生产性能；同时，药物残留还会对人类的健康造成严重的威胁。自2020年以来，我国畜牧业正式迎来了无抗时代，从植物中寻找替抗添加剂成为了研究热点，为养殖业健康养殖与增产增收提供了新的思路。杜仲（Eucommia ulmoides，EU）性温，补肝肾，强筋骨，具有镇静、抗炎、抗菌、抗病毒、利胆等功能1，是我国农业农村部许可使用的饲料添加剂之一，其树皮中含有18种黄酮类物质，5种有显著体外肝保护活性2。越来越多的学者开展以杜仲叶粉或其提取物作为饲料添加剂的相关研究3，在基础日粮中添加杜仲叶提取物和杜仲叶粉可提高鸡只生产性能，改善鸡肉品质，提高免疫力、产蛋率和鸡蛋品质4-7。杜仲皮可降血压、抗氧化抗衰老、强筋健骨、补肝肾安胎等8，且具有抗氧化作用，在生猪饲养中应用又会通过抗疲劳、抗衰老作用而提高生产效率，同时还能改善猪肉品质9。但在基础日粮中直接添加杜仲药材废弃物表皮粉的研究相对较少。本试验在日粮中添加不同水平杜仲皮粉对蛋鸡进行饲喂，考察对蛋鸡生产性能和抗氧化功能的影响，以期为开发杜仲皮粉作为添加剂在蛋鸡生产上进行应用提供理论依据。1 材料与方法1.1 试验动物280日龄大午金凤蛋鸡288只，由贵州省涟江农业科技有限公司提供。1.2 添加剂、试剂和用品杜仲皮粉（粒径为80目）由贵州省恒丰豪农业开发有限公司提供，为杜仲树皮表面刮掉的废弃物经粉碎而成。抗氧化试剂盒总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA），均购于南京建成生物工程研究所有限公司。1.3 试验设计与试验日粮选择288只体重相近的280日龄大午金凤蛋鸡，随机分为4组，每组3个重复，每个重复24只，分别为对照组、1%杜仲皮粉添加组（1%组）、3%杜仲皮粉添加组（3%组）、5%杜仲皮粉添加组（5%组）。其中对照组饲喂基础饲粮，试验组按照1%、3%、5%的比例将杜仲皮粉混合入基础饲粮中制备为混合饲粮进行饲喂。本试验分为两个阶段，分别为7 d的适应性喂养和56 d的正试期。基础饲粮为玉米-豆粕型饲粮，日粮组成及营养水平见表1。表1 基础日粮组成与营养水平（风干基础）日粮组成玉米豆粕石粉预混料总计含量(%)64.0024.007.005.00100.00营养水平代谢能(MJ/kg)粗蛋白(%)赖氨酸(%)蛋氨酸(%)钙(%)有效磷(%)11.0816.370.800.363.390.28 注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 7 000 IU、VD3 2 500 IU、烟酰胺 27.5 mg、VE 17.5 IU、VB6 4 mg、VK3 2 mg、叶酸 0.8 mg、VB1 2.5 mg、VB2 7.75 mg、氯化胆碱350 mg、泛酸14 mg、VB12 0.015 mg、生物素 0.09 mg、铜 80 mg、铁 80 mg、锌 50 mg、锰50 mg、碘 0.3 mg、硒 0.1 mg、氯化钠 2.5 g、蛋氨酸 1 g、钙4.0 g、有效磷3.2 g；2.代谢能为计算值，其余为实测值。1.4 饲养管理各组蛋鸡适应性喂养阶段饲喂蛋鸡全价料，7 d逐渐替换为试验日粮。在正试期内，鸡只自由采食和饮水，每日饲喂2次（08：00和16：00）确保料槽中料量均匀，10：00开始人工收蛋。试验期内每天观察试验动物临床表现、采食和饮水情况、统计产蛋情况。对试验中出现不明原因死亡的蛋鸡进行尸检，确定死因。试验蛋鸡采用四层阶梯式笼养，人工补光，光照时间为16 h/d。1.5 生产性能指标测定Escherichia coli in ileum of laying hens.The number of beneficial bacteria bifidobacterium was significantly increased(P0.05为差异不显著，P0.05），但始终高于对照组，且均呈现增高趋势；2956、156 d试验组料蛋比也有所降低，但不显著（P0.05）。项目产蛋率(%)料蛋比时间(d)12829561561282956156对照组83.617.4183.494.6983.556.202.230.192.310.132.270.171%组83.775.2984.658.5484.217.122.270.092.350.252.310.193%组84.973.9286.575.9285.774.902.250.112.230.142.240.135%组85.612.2788.520.8887.072.252.230.072.170.022.200.06表2 杜仲皮粉添加对蛋鸡生产性能的影响注：同行数据肩标不含有相同小写字母表示差异显著（P0.05）；表3表7同。2.2 饲粮中添加杜仲皮粉对蛋品质的影响由表3可知，在试验各阶段与整个时期内，对照组与试验组鸡蛋蛋形指数、蛋壳强度、蛋黄颜色与哈夫单位并无显著差异（P0.05）；第56天时，5%组平均蛋重显著高于对照组（P0.05），也显著高于其余试验组（P0.05）；1%组蛋壳厚度显著低于对照组与其余试验组（P0.05）。2.3 饲粮中添加杜仲皮粉对蛋鸡肝脏、卵巢、输卵管壶腹部、血清抗氧化能力的影响由表4可见，第28天时，3%、5%组蛋鸡血清中MDA含量显著低于对照组，且降低程度与添加剂量成反比（P0.05）。第56天时，3%、5%组MDA含量仍显著低于对照组与1%组（P0.05）。由表5可见，与对照组相比，在第28天时，试验组49单胃动物2023年第44卷第17期 总第686期蛋鸡肝脏 MDA 含量均有所下降，5%组 MDA 含量较对照组有显著下降（P0.05）；3%组与5%组GSH含量较对照组显著降低（P0.05）。项目T-AOC(U/mL)T-SOD(U/mL)MDA(nmol/mL)GSH(U/mL)时间(d)2856285628562856对照组0.890.230.660.18110.511.74108.532.7314.380.83a9.521.17a26.445.5327.223.931%组0.790.180.770.08110.431.35110.711.1315.431.02a7.740.49a19.652.7425.832.093%组0.860.170.740.14110.291.47108.680.5710.931.34b4.901.49b20.234.1626.122.965%组0.810.120.750.13111.051.12108.312.636.551.08c4.140.25b17.530.6625.962.94表4 杜仲皮粉添加对蛋鸡血清抗氧化指标的影响项目T-AOC(U/mg prot.)T-SOD(U/mg prot.)MDA(nmol/mg prot.)GSH(U/mg prot.)时间(d)2856285628562856对照组3.240.254.270.6027.732.6428.561.831.190.24a0.170.02198.3614.12a154.5018.911%组3.010.284.161.0427.905.2728.931.571.000.14a0.150.06193.738.58a156.5829.403%组2.980.244.240.6133.123.7826.992.920.830.22ab0.170.03166.0713.29b156.2721.185%组2.960.124.440.2932.986.3627.171.370.740.20b0.150.02144.7911.59b156.989.40表5 杜仲皮粉添加对蛋鸡肝脏抗氧化指标的影响项目蛋形指数蛋壳强度（N/cm2）平均蛋重（g）蛋壳厚度（mm）蛋壳比例（%）蛋黄颜色蛋黄比例（%）哈夫单位时间(d)28562856285628562856285628562856对照组1.290.041.310.0433.345.6527.464.4761.313.7263.984.90b0.360.030.350.03a13.851.1014.541.9012.750.4312.500.6530.111.4130.991.9977.915.2275.664.871%组1.300.051.320.0433.784.7827.905.2262.234.4162.172.14b0.350.030.320.03b13.141.9414.171.1312.330.8512.500.6531.423.2530.381.9883.674.2279.965.323%组1.310.041.290.0433.185.6030.724.0162.352.9161.623.07b0.360.020.340.02a14.121.2414.271.2812.580.7612.500.5028.501.9030.261.0281.644.9279.946.765%组1.310.021.310.0433.465.8531.253.3161.813.2266.053.88a0.360.020.330.03a13.930.6513.521.0612.500.7611.920.6430.912.7830.921.3779.833.5980.653.87表3 杜仲皮粉添加对蛋鸡蛋品质的影响由表6可见，与对照组相比，第28天时，试验组蛋鸡卵巢T-SOD含量均有所上升，且3%组有显著上升（P0.05），试验组MDA含量较对照组均有所上升，且3%、5%组均有显著上升（P0.05），5%组GSH含量较对照组有显著降低（P0.05）。由表7可见，第28天时，试验组蛋鸡输卵管壶腹部T-AOC能力均高于对照组，且1%、5%组显著高于对照组（P0.05）；1%组T-SOD含量显著低于对照组与其余试验组（P0.05）。第56天时，3%、5%组T-AOC能力显著高于对照组（P0.05）；各试验组 MDA含量均显著低于对照组（P0.05）；各试验组乳酸杆菌数均低于对照组，且差异不显著（P0.05）；5%组双歧杆菌数显著高于对照组与其余试验组（P0.05）。3 讨论3.1 杜仲皮粉对蛋鸡生产性能的影响50SILIAO GONGYE2023年第44卷第17期 总第686期有研究表明，蛋鸡在产蛋后期产蛋率与鸡蛋品质都会出现降低的趋势，饲粮中添加杜仲可以增强动物免疫力，提高畜禽生产性能，改善畜产品质量。李学民10的研究表明饲粮中添加杜仲发酵产物可以提高项目T-AOC(U/mg)T-SOD(U/mg)MDA(nmol/mg)GSH(U/mg)时间(d)2856285628562856对照组0.650.06b0.640.1037.572.78b40.195.321.500.20b0.160.0987.4112.75a111.6118.751%组0.740.07ab0.700.2333.533.89b36.625.391.610.21b0.190.1092.4113.85a108.9118.153%组0.810.20a0.670.1643.872.56a35.652.943.270.28a0.250.0591.5714.56a84.8010.755%组0.630.05b0.730.1240.698.43ab36.695.932.760.39a0.200.1170.5815.88b86.4011.04表6 杜仲皮粉添加对蛋鸡卵巢抗氧化指标的影响项目T-AOC(U/mg)T-SOD(U/mg)MDA(nmol/mg)GSH(U/mg)时间(d)2856285628562856对照组0.390.04b0.680.15b58.153.33a42.539.394.000.523.470.50a138.9616.80132.9431.891%组0.480.06a0.710.02b50.541.17b45.102.545.890.450.370.02b124.2621.12141.975.163%组0.420.04ab0.850.12a52.885.08a46.083.163.780.220.210.01c136.7626.36155.9022.345%组0.480.05a0.940.15a61.284.73a48.394.863.980.550.380.03b130.5135.66154.9722.96表7 杜仲皮粉添加对蛋鸡输卵管壶腹部抗氧化指标的影响项目对照组1%组3%组5%组大肠杆菌（Escherichia coli）4.120.473.750.493.060.443.630.45乳酸杆菌（Lactobacillus）2.520.382.280.322.110.332.360.09双歧杆菌（Bacillus bifida）2.960.26b2.630.48b2.640.15b3.120.04a表8 杜仲皮粉添加对蛋鸡肠道菌群的影响（lg CFU/g）注：同列数据肩标不含有相同小写字母表示差异显著（P0.05）。蛋鸡产蛋率，降低料蛋比，降低软破蛋率，改善平均蛋重，其中采用40 g/kg添加量可有效提高生产性能，延长产蛋期。刘青翠等11研究表明添加300 g/t的杜仲叶提取物可以有延缓蛋鸡产蛋率下降的趋势。这与本试验结果一致。本研究结果显示，饲粮中添加杜仲皮粉使蛋鸡产蛋率提高，可能是由于杜仲皮粉中黄酮类化合物促进成骨细胞增殖，加速成骨细胞分化和矿化，并且能够刺激胃肠道，增加消化酶的分泌，促进血液循环，提高机体消化率和吸收率，提高蛋鸡生产性能。本研究中，第56天时杜仲皮粉添加组鸡蛋平均蛋重与鸡蛋蛋壳强度提高，说明杜仲皮粉可提高平均产蛋重量，改善蛋壳强度。添加组蛋壳强度有上升趋势可能是由于杜仲皮中矿物质及有机酸可溶性强，能显著增加血液中钙、磷的含量，在蛋壳形成过程中增加蛋壳钙沉积量，影响蛋壳质量有关11。3.2 杜仲皮粉添加对蛋鸡抗氧化功能的影响肝脏中的T-AOC、SOD、GSH等是动物抗氧化防御系统中必不可少的抗氧化酶12。T-AOC是反映机体抗氧化酶系统与非酶系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢状态的综合性指标，用于衡量机体氧化系统功能状况13；T-SOD能够清除超氧阴离子自由基，阻断 OH的生成途径14，是生物体内抗氧化防御系统的重要组成成分；MDA是脂质过氧化产物，因此SOD和MDA是衡量机体氧化和抗氧化的重要指标。本研究表明，不同比例的杜仲皮粉添加入饲粮中可提高蛋鸡输卵管壶腹部T-AOC，降低蛋鸡肝脏、输卵管壶腹部与血清中的MDA含量，提高了机体的抗氧化能力，但是对56 d鸡只肝脏、卵巢、输卵管壶腹部中GSH则没有显著的作用。向灿辉等15研究了杜仲叶提取物的抗氧化活性，并同维生素C进行了比较，结果表明，杜仲叶提取物具较强的抗氧化能力，抗氧化能力与总黄酮含量密切相关，在一定浓度范围内呈线性关系，对DPPH 有较强的清除作用。杜仲叶提取51单胃动物2023年第44卷第17期 总第686期物中含有大量的绿原酸等酚（酸）类物质及黄酮类化合物，因而具有显著的清除机体自由基和抗氧化功效16。Yen等17报道，杜仲叶的水浸提物具有极高的抗氧化活性，能够体外清除羟自由基和超氧阴离子自由基，且黄酮类物质含量越高，其抗氧化能力越强。因此，本研究中试验组蛋鸡体内抗氧化能力增强可能是由于杜仲皮粉中的黄酮类物质淬灭活性氧类，并抑制氧自由基活性，阻止活性氧游离自由基对正常细胞的侵害，提高机体抗氧化能力。3.3 杜仲皮粉添加对蛋鸡肠道菌群的影响杜仲提取物具有广谱抗菌功效，该作用与其所含的高浓度绿原酸有关18。其机制可能与酚类物质通过去极化等多种手段影响病原微生物的细胞膜通透性，最终杀灭病原菌有关19。乳酸杆菌、双歧杆菌等益生菌在肠道内的增殖可合成大量的B族维生素，可以产生乳酸、乙酸等有机酸及细菌素等抑菌物质，有助于动物对抗有害微生物，抵御病原微生物的侵袭，提高动物的免疫能力20。本研究表明，添加不同比例的杜仲添皮粉可使蛋鸡回肠大肠杆菌数量有降低的趋势，同时添加5%杜仲皮粉使蛋鸡回肠双歧杆菌数量显著提高，与何云等21研究结果基本一致。吕武兴等20研究表明，日粮中添加杜仲提取物能降低盲肠中大肠杆菌的数量，促进盲肠、回肠中乳酸杆菌和双歧杆菌的增殖。在生产性能方面，添加杜仲皮粉后提高了大午金凤蛋鸡的产蛋率，降低了料蛋比，可能与杜仲皮粉增加了回肠中双歧杆菌等益生菌数量，从而改善了肠道消化功能，提高饲料利用率有关。4 结论饲粮中添加杜仲皮粉能提高大午金凤蛋鸡产蛋率，显著增加鸡蛋平均蛋重，提高生产性能；且能改善蛋鸡抗氧化能力，增加回肠双歧杆菌数量并减少大肠杆菌数量，其中饲粮中添加5%杜仲皮粉效果最佳。参考文献1 龚频,韩业雯,翟鹏涛,等.杜仲叶的活性成分、药理作用及其在食品加工中的应用J.食品工业科技,2022,43(10):395-404.2 WANG Y,TAN X,LI S,et al.The total flavonoid of Eucommia ulmoides sensitizes human glioblastoma cells to radiotherapy via HIF-alpha/MMP-2 pathway and activates intrinsic apoptosis pathwayJ.Onco Targets and Therapy,2019,12:5515-5524.3 何明先,李诗林,方明英,等.杜仲的活性成分及其在鸡饲料应用中的研究进展J.饲料博览,2018(10):47-49.4 胡忠泽,王立克,周正奎,等.杜仲对鸡肉品质的影响及作用机理探讨J.动物营养学报,2006(1):49-54.5 陈玉敏,黄涛,宋小珍,等.饲粮中添加杜仲叶提取物对爱拔益加肉鸡生长性能及免疫功能的影响J.动物营养学报,2015,27(7):2224-2230.6 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