青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响.pdf

圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期山东中医药大学学报青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响刘国香1袁刘雅欣2袁张震宇1袁邵文卓1袁张德成1袁林桂涛1渊1.山东中医药大学袁山东 济南 250355曰 2.北京学校袁北京 101100冤咱摘要暂 目的院研究青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠体质量增长的影响袁并探索青果发挥减肥作用的机制遥 方法院将 70 只 SPF 级雄性 SD 大鼠随机分为普食组尧模型组尧奥利司他组及青果水提取组尧50%乙醇提取组尧70%乙醇提取组尧95%乙醇提取组袁每组各 10 只袁适应性饲养 7 d 后袁各组分别灌胃给药渊普食组尧模型组灌胃生理盐水曰各提取组灌胃对应青果提取物袁给药剂量为 3.0 g/kg曰奥利司他组灌胃奥利司他溶液袁给药剂量为 10.8 mg/kg冤袁连续灌胃 30 d遥 模型组和各给药组普通饲料喂养 10 d 后袁改为高脂饲料喂养 20 d遥 观察不同时期大鼠体征尧体质量尧Lee爷s 指数尧粪便总脂含量尧血清血脂指标尧小肠 琢-葡萄糖苷酶活性尧腹部及附睾脂肪率尧脂肪组织形态变化遥 结果院灌胃 20 d 时袁模型组大鼠体质量增长明显高于普食组渊P0.01冤袁说明造模成功遥 灌胃 30 d 时袁各青果提取组体质量增长低于模型组渊P0.01冤袁以 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组下降最为明显遥 与模型组比较袁各给药组大鼠粪便总脂含量均升高渊P0.01冤曰青果各乙醇提取组大鼠Lee爷s 指数均降低渊P0.05冤袁以 70%乙醇提取组下降最明显曰青果各乙醇提取组大鼠高密度脂蛋白胆固醇含量升高袁低密度脂蛋白胆固醇尧甘油三酯尧总胆固醇含量均降低渊P0.01冤袁其中 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组血脂指标变化最明显曰青果各乙醇提取组腹部脂肪率显著降低渊P0.05冤袁70%乙醇提取组附睾脂肪率显著降低渊P0.05冤曰各青果提取组大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性均下降渊P0.05 或 P0.01冤袁以 70%乙醇提取物组下降最为明显遥 模型组附睾组织细胞数量明显减少袁细胞边界不清晰袁细胞形状不规则袁含有大量脂滴袁有明显炎症细胞浸润现象遥 各给药组附睾组织细胞体积显著变小袁排列致密袁细胞边界清晰袁含有少量脂滴或无脂滴袁有较轻炎症或无炎症细胞浸润现象袁其中以青果 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组表现最佳遥 结论院青果不同浓度乙醇提取物可以通过抑制 琢-葡萄糖苷酶活性发挥降血脂作用袁防止脂肪沉积和体质量增长曰青果不同浓度乙醇提取物均具有预防肥胖尧降脂减肥作用袁以 70%乙醇提取物作用效果最佳遥咱关键词暂 青果曰乙醇提取物曰减肥曰琢-葡萄糖苷酶曰大鼠曰肥胖曰降血脂咱中图分类号暂 R284.2曰R285.5咱文献标志码暂 A咱文章编号暂 1007-659X渊2023冤05-0624-08DOI院10.16294/ki.1007-659x.2023.05.016Effects of Different Concentrations of Ethanol Extract of Qingguo渊Canarii Fructus冤 onWeight Loss in Nutritive Obesity ModelRatsLIU Guoxiang1袁LIU Yaxin2袁ZHANG Zhenyu1袁SHAOWenzhuo1袁ZHANG Decheng1袁LIN Guitao1咱收稿日期暂 2023-03-25咱基金项目暂 山东省重点研发计划渊重大关键技术及重点产业关键技术冤项目渊编号院2016CYJS08A01-10冤咱作者简介暂 刘国香渊1997要冤袁女袁山东日照人袁2021 年级硕士研究生袁研究方向院中药新制剂尧新技术研究遥 电话院17862997107曰邮箱院遥咱通信作者暂 林桂涛渊1963要冤袁男袁山东烟台人袁教授袁硕士研究生导师袁主要从事中药新制剂尧新技术研究遥 电话院13606376578曰邮箱院遥第 47 卷 第 5 期山东中医药大学学报灾燥造援47袁晕燥援52023 年 9 月JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINESep.2023624圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期渊1.Shandong University of Traditional Chinese Medicine袁Jinan 250355袁China曰2.Beijing School袁Beijing 101100袁China冤AbstractObjective院To study the effects of different concentrations of ethanol extract of Qingguo渊CanariiFructus冤 on weight gain of nutritive obesity model rats袁and to explore the mechanism of Qingguo on weightloss.Methods院Total 70 SPF male SD rats were randomly divided into general diet group袁model group袁orlistatgroup袁and Qingguo water extraction group袁50%ethanol extraction group袁70%ethanol extraction group袁95%ethanol extraction group袁with 10 rats in each group.After 7 days of adaptive feeding袁each group was givenintragastric administration渊General diet group and model group were given normal saline曰Intragastric admini-stration of the corresponding Qingguo extract in each extraction group was 3.0 g/kg曰Orlistat group was givenorlistat solution at the dose of 10.8 mg/kg冤 for 30 days.The model group and each administration groupwere fed with ordinary diet for 10 days袁and then fed with high-fat diet for 20 days.The changes of physicalsigns袁body mass袁Lee爷s index袁total fat content in feces袁serum lipid index袁small intestine 琢-glucosidaseactivity袁abdominal and epididymal fat rate袁adipose tissue morphology of rats were investigated in differentperiods.Results院After 20 days of intragastric administration袁the increase of body mass in model group wassignificantly higher than that in general diet group渊P0.01冤袁indicating that the molding is successful.After30 days of intragastric administration袁the growth of body mass of each Qingguo extraction group were lowerthan that of the model group渊P0.01冤袁and the decrease of 50%ethanol extraction group and 70%ethanolextraction group was most significant.Compared with model group袁total fat content in feces of rats in alladministration groups was increased渊P0.01冤曰Lee爷s index decreased in all Qingguo ethanol extraction groups渊P0.05冤袁and the decrease was most significant in 70%ethanol extraction group曰The content of high-densitylipoprotein cholesterol increased袁and the content of low-density lipoprotein cholesterol袁triglycerides袁and totalcholesterol decreased in all Qingguo ethanol extraction groups渊P0.01冤袁among which 50%ethanol extractiongroup and 70%ethanol extraction group showed the most significant changes in blood lipid indexes曰Thepercentage of abdominal fat in all Qingguo ethanol extraction group was significantly decreased渊P0.05冤袁and the fat percentage of epididymis in 70%ethanol extraction group was significantly decreased渊P0.05冤曰The activity of 琢-glucosidase in small intestine of rats in all Qingguo extraction groups decreased渊P0.05 orP0.01冤袁and the decrease was most significant in 70%ethanol extract group.In the model group袁the numberof cells in epididymal tissue was significantly reduced袁the cell boundary was not clear袁and the cell shapewas irregular袁there were a lot of fat drops袁and there was obvious inflammatory cell infiltration.The cellvolume of epididymal tissue in each administration group was significantly smaller袁the arrangement was dense袁and the cell boundary was clear袁there were few fat drops or no fat drops袁and there was light inflammatoryor no inflammatory cell infiltration袁and the 50%ethanol extraction group and 70%ethanol extraction groupperformed the best.Conclusions院The ethanol extracts of different concentrations of Qingguo play a role inlowering blood lipid袁preventing fat deposition and body mass growth by inhibiting 琢-glucosidase activity.Different concentrations of ethanol extract of Qingguo can prevent obesity袁reduce fat and lose weight.Theeffect of 70%ethanol extractive was the best.KeywordsQingguo 渊Canarii Fructus冤曰ethanol extract曰weight loss曰琢-glucosidase曰rat曰obesity曰lowering bloodlipids刘国香等院青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响625圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期山东中医药大学学报青 果 为 橄 榄 科 植 物 橄 榄 Canarium albumRaeusch.的干燥成熟果实袁味甘尧酸袁性平袁属于药食两用中药咱1-2暂遥 青果含有多酚类尧黄酮类尧三萜类尧单萜类尧挥发油尧多糖等化学成分袁其中主要生物活性成分为黄酮类与多酚类咱3-4暂遥 现代药理学研究表明袁青果具有抗炎尧镇痛尧抗氧化和抑制肿瘤细胞增殖的作用咱5-12暂遥 前期体外实验证明了青果不同浓度乙醇提取物能够抑制 琢-葡萄糖苷酶尧琢-淀粉酶和脂肪酶活性袁其中青果 70%乙醇提取物的抑制作用最强遥青果 70%乙醇提取物对 琢-葡萄糖苷酶尧琢-淀粉酶和脂肪酶抑制作用的半数抑制浓度以青果计依次为9.91 mg/mL尧6.65 mg/mL 和 0.26 mg/mL曰青果 70%乙醇提取物对 琢-葡萄糖苷酶尧琢-淀粉酶的抑制作用是可逆的非竞争性抑制遥 由此可推测青果应该具有一定的减肥作用遥 在此基础上袁继续观察青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠的减肥效果袁为更好地开发和利用青果提供依据遥1材料1.1实验动物SPF 级雄性 SD 大鼠 70 只袁体质量 180200 g袁购于济南朋悦实验动物繁育有限公司袁许可证号院SCXK渊鲁冤20190003袁饲养于 SPF 级动物房遥 动物实验相关的内容和程序已通过山东中医药大学动物实验伦理委员会审批渊审批号院SDUTCM20191025010冤遥1.2药品尧饲料及试剂青果院购自山东中医药大学附属医院袁经山东中医药大学李峰教授鉴定为正品遥 奥利司他标准品购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司袁批号 A2002041遥高脂饲料院72.8%基础饲料尧10.0%蔗糖尧10.0%猪油尧5.0%蛋黄粉尧2.0%胆固醇尧0.2%丙基硫氧嘧啶袁委托济南朋悦实验动物繁育有限公司生产遥试剂院水合氯醛渊天津市大茂化学试剂厂袁批号20180716冤曰盐酸渊国药集团化学试剂有限公司袁批号20190222冤曰乙醚渊国药集团化学试剂有限公司袁批号20190308冤曰总胆固醇渊TC冤测试盒渊南京建成生物工程研究所袁批号 20200822冤曰甘油三酯渊TG冤测试盒渊南京建成生物工程研究所袁批号 20200824冤曰高密度脂蛋白胆固醇渊HDL-C冤测试盒渊南京建成生物工程研究所袁批号 20200820冤曰低密度脂蛋白胆固醇渊LDL-C冤测试盒渊南京建成生物工程研究所袁批号20200819冤曰对硝基苯基-琢-吡喃葡萄糖苷渊PNPG袁上海源叶科技有限公司袁批号 K17A10B82914冤曰二硝基水杨酸渊北京索莱宝科技有限公司袁批号20200528冤遥1.3仪器十万分之一电子天平咱梅特勒托利多科技渊中国冤有限公司袁型号 MS105DU暂曰高效液相色谱仪渊日本岛津公司袁型号 Promlnence L 型冤曰紫外可见分光光度计渊上海美谱达仪器有限公司袁型号 UV-6100冤曰高速匀浆机渊杭州旌斐仪器科技有限公司袁型号FSH-2A冤曰台式高速冷冻离心机渊湘仪离心机仪器有限公司袁型号 H-1850D冤曰酶标仪渊上海赛默飞世尔公司袁型号 MK3冤遥2方法2.1青果不同浓度乙醇提取物的制备取青果 4 份袁分别加水尧50%乙醇尧70%乙醇和95%乙醇加热回流提取 2 次袁第一次加 10 倍量袁提取 2 h袁第二次加 8 倍量袁提取 1.5 h袁合并提取液袁滤过袁回收乙醇袁浓缩至无醇味袁加水溶解袁定容袁制成含生药量为 0.6 g/mL 的药液遥2.2动物分组与给药将 70 只 SD 大鼠随机分为普食组尧模型组尧奥利司他组及青果水提取组尧50%乙醇提取组尧70%乙醇提组尧95%乙醇提取组袁每组各 10 只遥 适应性饲养7 d后袁各组于每日 8颐00 灌胃给药袁各青果给药组灌胃剂量均为 3.0 g/kg曰奥利司他组灌胃奥利司他溶液袁剂量为 10.8 mg/kg曰普食组尧模型组灌胃等体积生理盐水遥 连续灌胃 30 d遥 模型组和各给药组普通饲料喂养 10 d 后袁改为高脂饲料喂养 20 d遥2.3观察指标2.3.1大鼠体征及体质量增长情况观察各组大鼠的饮食量尧行为活动尧皮毛尧粪便变化遥 每天记录大鼠体质量增长情况遥2.3.2大鼠粪便中总脂含量给药第 20 天测定粪便中脂肪含量院收集各组大鼠粪便袁取 1.0 g 置于称量瓶袁干燥至恒重袁研细袁称取干燥粪便 0.5 g袁置于具塞三角瓶中袁加 30%盐酸溶液 10 mL袁盖上瓶塞袁沸水浴加热 10 min袁取出冷626圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期却至室温袁加乙醚 50 mL袁振摇 3 min袁静置袁吸取上层乙醚提取液 20 mL袁置于恒重蒸发皿中袁4050 益水浴蒸干袁移至干燥箱袁干燥至恒重袁转移到玻璃干燥器袁冷却至室温袁称重遥 粪便总脂含量=乙醚萃取物质量/粪便质量100%遥2.3.3Lee爷s 指数最后一次给药结束后袁各组大鼠禁食 12 h袁称取大鼠体质量袁10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠袁大鼠平坦仰卧袁用卷尺测量体长渊鼻尖至肛门外沿的长度冤袁计算 Lee爷s 指数遥Lee爷s 指数渊g/cm冤=m3姨103L袁m 为大鼠处死前体质量渊g冤袁L 为大鼠体长渊cm冤遥2.3.4血清血脂指标麻醉大鼠后袁腹主动脉取血袁4 益下离心 10 min袁4000 r/min袁离心半径 5 cm袁分离血清袁在-80 益条件下保存袁测定 TG尧TC尧HDL-C尧LDL-C 含量遥2.3.5腹部及附睾脂肪率麻醉大鼠并腹主动脉取血后袁快速分离附睾脂肪和腹部脂肪袁称鲜重袁计算附睾脂肪率尧腹部脂肪率遥脂肪率=脂肪质量/体质量100%遥2.3.6小肠 琢-葡萄糖苷酶制备及活性测定2.3.6.1小肠 琢-葡萄糖苷酶制备将大鼠解剖后立即取出小肠袁采用预冷的生理盐水溶液清洗肠道脂肪组织袁并纵向切开洗净内容物袁吸去小肠表面液体袁用载玻片轻刮下小肠黏膜袁加入 4 益预冷的磷酸钠渊PB冤缓冲液渊pH 值为 6.8冤袁匀浆袁于 4 益下离心 20 min袁4000 r/min袁离心半径5 cm袁分离上清液袁加 PB 缓冲液稀释至 10 mL袁即得大鼠小肠来源 琢-葡萄糖苷酶袁-80 益贮存袁备用遥2.3.6.2以 PNPG 为底物的大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性测定吸取各组小肠上清液 600 滋L 和 PB 缓冲溶液600 滋L 置 5 mL 离心管中袁振荡混匀袁37 益恒温孵育20 min袁加入 3.3 mmol/L 的 PNPG 400 滋L袁振荡混匀袁在 37 益恒温反应 5 min袁加入甲醇 1600 滋L 终止反应袁经 0.22 滋m 滤膜滤过袁滤液用高效液相色谱法检测对硝基苯酚峰面积渊A冤袁计算 琢-葡萄糖苷酶活性遥此测定方法色谱条件院流动相为乙腈渊A冤-0.1%磷酸水溶液渊B冤袁梯度洗脱渊03 min袁26%寅40%A曰35 min袁40%寅41%A曰58 min袁41%A寅41%A曰812 min袁41%寅50%A曰1217 min袁50%寅80%A曰1720 min袁80%寅 100%A冤曰流速为 1.0 mL/min曰柱温为 35 益曰检测波长为 315 nm遥2.3.6.3以淀粉为底物的大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性测定标准曲线的制作院精密称取葡萄糖标准品配置成0.284 mg/mL尧0.709 mg/mL尧1.418 mg/mL尧2.836 mg/mL尧5.672 mg/mL尧8.507 mg/mL 的标准品溶液袁分别精密吸取不同浓度标准品溶液 500 滋L袁置 10 mL 的容量瓶中袁加入 PB 缓冲液 1000 滋L袁在 37 益水浴中孵育15 min袁加入 500 滋L 37 益的 1%可溶性淀粉溶液袁混匀后孵育 15 min袁立即加入 0.9 mL 二硝基水杨酸显色并终止反应袁煮沸 5 min 后袁冰水中静置 20 min袁PB 缓冲液定容至 10 mL遥 在 540 nm 波长下测溶液吸光值袁试验重复 3 次遥 另设置空白对照组遥 浓度和吸光度为横纵坐标袁回归方程为 Y=0.1043X+0.0564渊相关系数为 0.9992冤袁葡萄糖对照品的线性范围为0.284 mg/mL8.508 mg/mL遥活性测定院吸取各组小肠上清液 500 滋L袁分别置于 10 mL 容量瓶中袁加入 PB 缓冲液 1000 滋L袁置于 37 益水浴中预温 15 min袁加入 500 滋L 在 37 益水浴中同时预温的 1%可溶性淀粉溶液袁混匀后反应10 min遥 其余操作同标准曲线制作实验步骤袁测吸光值遥 另设置空白对照组遥 根据标准曲线计算各组 琢-葡萄糖苷酶活性遥2.3.7脂肪组织病理学观察剥离大鼠附睾脂肪组织称重后袁切取一小块附睾脂肪组织袁用 4%多聚甲醛固定袁石蜡包埋袁切片袁苏木精-伊红染色袁200 倍视野观察遥2.4统计学方法采用 SPSS 22.0 软件进行统计学分析袁数据以xs 表示袁多组数据比较采用单因素方差分析遥 取琢=0.05 为检验标准遥3结果3.1各组大鼠体征比较模型组大鼠精神萎靡尧倦怠少动尧体毛无光泽尧粪便形状不规则曰普食组及各给药组大鼠行为活动尧刘国香等院青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响627圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期山东中医药大学学报表 1各组大鼠体质量变化情况比较渊xs袁g冤组别只数灌胃 10 d灌胃 20 d灌胃 30 d总变化普食组1030.746.331.525.996.782.8939.044.25模型组1030.5514.0430.787.43*3.105.1564.436.79*青果水提取组1039.557.6132.547.70*-7.284.51*#64.815.85*青果 50%乙醇提取组1031.588.1029.227.05*-11.694.94*#49.114.96*#青果 70%乙醇提取组1031.0414.0225.556.23*-13.044.54*#43.554.52*#青果 95%乙醇提取组1031.8813.0428.225.74*-8.724.68*#51.385.76*#奥利司他组1025.1310.0529.515.31*6.655.1161.296.25*注院灌胃 10 d 的体质量变化指灌胃 10 d 大鼠体质量与开始灌胃时的体质量之差袁灌胃 20 d 的体质量变化指灌胃 20 d 大鼠体质量与第 10 天的体质量之差袁灌胃 30 d 的体质量变化指灌胃 30 d 大鼠体质量与第 20 天的体质量之差袁体质量总变化指灌胃 30 d 的体质量与开始灌胃时的体质量之差遥与普食组比较袁*P0.01曰与模型组比较袁#P0.01遥表 2各组大鼠粪便总脂含量比较渊xs袁%冤组别样本数总脂含量普食组33.680.12模型组37.680.19*青果水提取组38.670.13*#青果 50%乙醇提取组38.850.07*#青果 70%乙醇提取组310.050.16*#青果 95%乙醇提取组39.320.10*#奥利司他组327.380.27*#注院与普食组比较袁*P0.01曰与模型组比较袁#P0.01遥表 3各组大鼠 Lee爷s 指数比较渊xs袁g/cm冤组别只数Lee爷s 指数普食组10285.185.72模型组10296.765.61*青果水提取组10292.826.74*青果 50%乙醇提取组10286.543.36#青果 70%乙醇提取组10284.831.92#青果 95%乙醇提取组10289.045.43#奥利司他组10292.624.08*注院与普食组比较袁*P0.05曰与模型组比较袁#P0.05冤遥 改为高脂饲料喂养 20 d 后袁模型组大鼠体质量增长明显高于普食组渊P0.01冤袁说明造模成功遥 灌胃 30 d袁各青果提取组体质量增长低于模型组袁差异有统计学意义渊P0.01冤袁以 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组下降最为明显遥 综合 30 d 体质量总变化情况袁青果各乙醇提取组大鼠体质量增长低于模型组袁差异有统计学意义渊P0.01冤遥 见表 1遥3.3各组大鼠粪便总脂含量比较与普食组比较袁模型大鼠各组粪便总脂含量均升高袁差异有统计学意义渊P0.01冤遥 与模型组比较袁各给药组大鼠粪便总脂含量均升高袁差异有统计学意义渊P0.01冤袁其中奥利司他组明显高于其他给药组袁青果各提取组中以 70%乙醇提取组升高最明显遥见表 2遥3.4各组大鼠 Lee爷s 指数比较与普食组比较袁模型组大鼠 Lee爷s 指数升高袁差异有统计学意义渊P0.05冤遥 与模型组比较袁青果各乙醇提取组大鼠 Lee爷s 指数均降低袁差异有统计学意义渊P0.05冤袁以 70%乙醇提取组下降最明显遥 见表 3遥3.5各组大鼠血脂指标含量比较与普食组比较袁模型组大鼠血清 HDL-C 含量下降尧LDL-C尧TG尧TC 含量均升高袁差异有统计学意义渊P0.05冤遥 与模型组比较袁青果各乙醇提取组大鼠血清 HDL-C 含量升高袁LDL-C尧TG尧TC 含量均降低渊P0.01冤袁其中 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组血脂指标变化最明显遥 见表 4遥3.6各组大鼠脂肪率比较与普食组比较袁模型组大鼠附睾脂肪率及腹部脂肪率均升高袁差异有统计学意义渊P0.05冤遥 与模型组比较袁青果各乙醇提取组腹部脂肪率显著降低渊P0.05冤袁70%乙醇提取组附睾脂肪率显著降低遥见表 5遥628圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期表 4各组大鼠血脂指标含量比较渊xs袁mmol/L冤组别只数高密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白胆固醇甘油三酯总胆固醇普食组100.8920.0280.8410.0470.3610.0295.7110.123模型组100.7070.020*1.2700.026*0.7620.015*8.4230.401*青果水提取组100.7150.011*1.2030.010*0.6980.024*#7.4720.354*#青果 50%乙醇提取组100.8120.016#0.6540.035*#0.3020.039#6.2500.173*#青果 70%乙醇提取组100.8730.025#0.5400.006*#0.2030.022*#5.7520.182#青果 95%乙醇提取组100.7670.015*#0.9810.036#0.3210.049#7.1200.334*#奥利司他组100.7120.017*1.2220.028*0.7430.115*8.2500.102*注院与普食组比较袁*P0.05曰与模型组比较袁#P0.05袁#P0.01遥表 6各组大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性比较渊xs袁U/mL冤组别只数以 PNPG 为底物酶活力以淀粉为底物酶活力普食组1010.350.211.310.15模型组1011.040.38*1.420.11*青果水提取组109.050.21*#1.020.09*#青果 50%乙醇提取组106.700.17*#0.940.07*#青果 70%乙醇提取组106.200.22*#0.760.12*#青果 95%乙醇提取组108.000.35*#0.970.16*#奥利司他组109.960.241.160.11注院PNPG 为对硝基苯基-琢-吡喃葡萄糖苷遥与普食组比较袁*P0.05袁*P0.01曰与模型组比较袁#P0.05袁#P0.01遥表 5各组大鼠附睾及腹部脂肪率比较渊xs袁%冤组别只数附睾脂肪率腹部脂肪率普食组100.660.130.530.16模型组100.900.13*0.770.23*青果水提取组100.880.08*0.740.12*青果 50%乙醇提取组100.770.100.580.12#青果 70%乙醇提取组100.690.11#0.560.09#青果 95%乙醇提取组100.830.15*0.540.18#奥利司他组100.880.14*0.780.11*注院与普食组比较袁*P0.05曰与模型组比较袁#P0.05遥刘国香等院青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响3.7各组大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性比较与普食组比较袁模型组大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性增强袁差异有统计学意义渊P0.05冤遥 与模型组比较袁青果各提取组大鼠小肠 琢-葡萄糖苷酶活性均下降袁差异有统计学意义渊P0.05 或 P0.01冤袁以 70%乙醇提取物组下降最为明显遥 见表 6遥3.8各组大鼠附睾脂肪组织病理变化比较模型组附睾脂肪组织细胞数量明显减少袁细胞边界不清晰袁细胞形状不规则袁含有大量脂滴袁有明显炎症细胞浸润现象遥 各给药组附睾组织细胞体积显著变小袁排列致密袁细胞边界清晰袁含有少量脂滴或无脂滴袁有较轻炎症或无炎症细胞浸润现象袁其中以青果 50%乙醇提取组和 70%乙醇提取组表现最佳遥见图 1遥4讨论中医药理论认为袁肥胖主要是由于过食肥甘厚味尧多逸少劳袁导致痰湿内聚尧脂瘀互结引起的咱13-14暂遥肥胖日久易并发其他诸症袁因此肥胖常伴随高脂血629圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期山东中医药大学学报图 1各组大鼠附睾脂肪组织病理照片渊200冤普食组模型组青果水提取组青果 50%乙醇提取组青果 70%乙醇提取组青果 95%乙醇提取组奥利司他组症尧肝脏功能异常咱15暂遥 橄榄酚类提取物能减轻大鼠肝损伤袁抑制肝脏脂肪堆积袁起到降脂保肝作用咱16暂遥 本研究显示袁模型组经高脂饲料喂养后袁后期出现精神萎靡尧倦怠少动尧体毛无光泽尧体质量增加尧脂肪率增长尧血脂异常等袁各青果提取组高脂饮食诱发的各类病症显著减轻遥本实验结果表明袁与模型组比较袁青果不同浓度乙醇提取物能显著改善高脂饲料喂养诱发的肥胖模型大鼠体质量的增长尧Lee爷s 指数及脂肪率遥 青果各乙醇提取物能够明显抑制大鼠体质量增长袁灌胃30 d 后能够减轻大鼠体质量袁其中青果 70%乙醇提取物效果最明显遥 灌胃 30 d袁青果水提取组大鼠体质量总增长量与阳性药奥利司他组没有显著差异袁原因可能与灌胃前 20 d 青果水提取组大鼠体质量增长过多有关遥 Lee爷s 指数是评价大鼠肥胖程度的有效指数咱17-18暂袁从实验结果可以看出袁青果各乙醇提取物具有明显的降脂减肥作用遥 肥胖主要表现为体内脂肪堆积过多遥 附睾脂肪率和腹部脂肪率与大鼠体内总脂肪量呈一定的比例关系咱19-21暂袁所以常用附睾脂肪率和腹部脂肪率反应大鼠体内的脂肪积累遥青果各乙醇提取物能够明显降低高脂饮食大鼠腹部脂肪率袁70%乙醇提取物还能明显降低附睾脂肪率遥附睾脂肪组织切片表明袁青果各乙醇提取物能够明显抑制脂肪细胞的增大尧细胞内脂肪的沉积和炎症细胞浸润遥 此外袁肥胖患者常存在血脂代谢异常情况袁高脂饮食会导致血清 LDL-C尧TC尧TG 含量升高袁HDL-C 含量降低遥 本研究显示袁青果提取物干预对血脂异常有改善作用袁各乙醇提取物可降低血清LDL-C尧TC尧TG 含量袁升高血清 HDL-C 含量遥青果抑制体质量增长和脂肪沉积的作用与其抑制 琢-葡萄糖苷酶的作用有关袁竞争性抑制葡萄糖淀粉酶尧麦芽糖酶等袁以减少小分子糖在肠道内吸收袁降低血糖水平袁进而发挥降脂减肥的作用遥 青果不同浓度乙醇提取物对以 PNPG 和淀粉为底物 琢-葡萄糖苷酶均有一定抑制作用袁最为明显的是 70%乙醇提取物遥 青果不同浓度乙醇提取物能够增加大鼠粪便中脂肪含量袁说明青果可能与奥利司他一样能够抑制脂肪酶的活性袁减缓摄入脂肪的分解尧吸收袁达到降脂减肥作用遥在以临床价值为导向的中药研究背景下袁以生物效应检测法衡量中药提取尧精制尧浓缩和干燥等工艺的合理性将成为中药制剂研究的主要手段遥 生物效应检测法结合成分测定可以找出影响中药制剂安全性尧有效性的关键质量属性咱22暂袁此法对于有效成分多样尧复杂或不明确的中药而言袁是科学合理的遥 本研究前期测定了青果不同溶剂提取物中相关成分630圆园23 年 9 月第 47 卷第 5 期刘国香等院青果不同浓度乙醇提取物对营养性肥胖模型大鼠减肥作用的影响渊鞣花酸尧没食子酸尧总黄酮冤的含量袁结果表明 70%乙醇提取物中鞣花酸尧没食子酸尧总黄酮含量最高袁水提取物中最少袁50%乙醇提取物和 95%乙醇提取物成分相近遥 结合本实验结果分析袁青果抑制 琢-葡萄糖苷酶发挥降脂减肥作用可能与多酚类和黄酮类成分相关遥综合分析本次实验结果和前期相关成分测定结果袁青果不同浓度乙醇提取物抑制营养性肥胖模型大鼠体质量和脂肪组织增长的作用效果明显袁其中以青果 70%乙醇提取物最佳遥 因此袁可以将鞣花酸尧没食子酸和总黄酮作为青果提取尧精制尧浓缩与干燥等工艺的关键质量属性来进行深入研究袁为开发中药减肥新制剂及新剂型奠定基础遥咱参考文献暂咱1暂 国家药典委员会.中华人民共和国药典院一部咱M暂.北京院中国医药科技出版社袁2020院206.咱2暂 陈姣袁游宇袁廖婉袁等.药食同源中药青果的保健功效及现代应用探析咱J暂.中草药袁2021袁52渊20冤院6442-6454.咱3暂 YANG L P袁GU X L袁CHEN J X袁et al.Chemical con-stituents from Canarium album Raeusch and their anti-influenza A virus activities咱J暂.J Nat Med袁2018袁72渊3冤院808-815.咱4暂 杨洛萍.青果化学成分及其抗病毒活性研究咱D暂.广州院南方医科大学袁2018.咱5暂 何颖袁杨桂林袁胡祥宇袁等.青果总黄酮的抗炎作用研究咱J暂.安徽农业科学袁2012袁40渊5冤院2632袁2650.咱6暂 KUO Y H袁YEH Y T袁PAN S Y袁et al.Identification andstructural elucidation of anti-inflammatory compounds fromChinese olive渊Canarium album L.冤 fruit extracts咱J暂.Foods袁2019袁8渊10冤院441.咱7暂 徐富翠袁刘明华袁孙玉红袁等.青果抗炎镇痛活性部位的筛选研究咱J暂.中药药理与临床袁2014袁30渊6冤院121-124.咱8暂 ZENG H 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