时差成像在高质量胚胎选择中的临床应用.pdf

文章编号院员远苑猿鄄圆怨怨缘渊圆园圆猿冤园缘鄄园猿远苑鄄园源窑综摇 述窑时差成像在高质量胚胎选择中的临床应用曹诗雯袁张国庆袁胡摇 慧袁孙小智袁刘摇 悦袁潘晓燕鄢袁孙艳美鄢摇 渊吉林医药学院生殖医学研究中心袁吉林 吉林摇 员猿圆园员猿冤摘摇 要院 多胎妊娠是实施辅助生殖技术过程中最常见的并发症袁如何降低和避免其发生一直是生殖领域研究的热点遥 实施单胚胎移植是避免多胎妊娠的有效措施袁因而选择移植最具发育潜能的胚胎至关重要遥 时差成像技术可对体外胚胎发育全过程进行动态监测袁获得胚胎发育潜能动力学参数的完整信息袁对移植前胚胎质量进行更加全面准确的评估遥 本文通过对近年发表的时差成像技术在胚胎评估临床应用的相关文献进行综述袁旨在为选择高发育潜能的优质单胚胎移植提供参考遥关摇 键摇 词院 时差成像曰时间参数曰卵裂模式曰单胚胎移植曰优质胚胎中图分类号院 砸苑员源援 愿摇 摇 摇文献标志码院 粤摇 摇 目前体外受精渊蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶袁陨灾云冤已成为不孕症的常规治疗手段遥 为获得更高的妊娠率袁通常移植 员 枚以上的胚胎袁多胎妊娠发生率明显高于自然妊娠袁并导致一系列母婴并发症的发生咱员员暂遥 实施单胚胎移植渊泽蚤灶早造藻藻皂遭则赠燥 贼则葬灶泽枣藻则袁杂耘栽冤是降低多胎妊娠最有效的措施袁但会导致临床妊娠率的降低遥 有研究显示袁选择高发育潜能的优质 杂耘栽 可获得与双胚胎移植相似的临床妊娠率袁并显著降低多胎妊娠率咱圆暂遥 因此袁如何精准评估胚胎发育潜能袁选择最优胚胎进行移植至关重要遥员摇 时差成像技术的概述传统的胚胎评估方法为形态学评估袁即在静态下对胚胎细胞数目及形态进行评估袁主观性比较强袁且无法动态评估胚胎发育潜能袁导致不良妊娠结局咱猿暂遥近年兴起的时差成像渊贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤皂葬早蚤灶早袁栽蕴陨冤技术是非侵入性评估胚胎体外发育过程的新技术袁通过在培养箱内配置倒置显微镜袁对培养胚胎进行连续动态拍照袁可实时连续观测培养箱内胚胎的发育情况袁获取胚胎早期发育过程与胚胎质量相关的一系列动力学事件袁精准评估胚胎质量遥 栽蕴陨 的优势在于能够维持稳定的培养环境袁避免了多次将胚胎取出观察造成气体成分尧温度等培养条件的变化袁通过持续监测胚胎发育的过程袁为辅助生殖技术选择优质移植胚胎提供帮助咱源暂遥圆摇 卵裂时间参数对胚胎发育的影响卵裂时间参数包括胚胎分裂的完成时间及胚胎分裂的相对时间渊即胚胎分裂的持续时间冤袁反映了胚胎分裂的同步性遥 卵裂时间过快或过慢的胚胎发育潜能不佳咱缘暂袁通过 栽蕴陨 系统能够确定胚胎分裂的时间袁建立较为科学的卵裂时间评估体系遥圆援 员摇 初次卵裂时间对胚胎发育潜能的影响动物实验表明袁发生初次卵裂较早的胚胎中参与细胞减数分裂的基因表达较高袁具有较好的基因重编能力咱远暂遥 受精后初次卵裂的时间与胚胎发育为囊胚的潜能密切相关袁早期卵裂胚胎囊胚形成率远高于晚期卵裂组袁晚期卵裂的胚胎发育受阻于两细胞胚到八细胞胚阶段之间的比例增加咱苑暂遥 粤噪葬早蚤 等咱愿暂研究了不同激活方式下猪体细胞核移植胚胎的初次卵裂时间与胚胎体外发育潜能的关系袁证实牛胚胎的囊胚形成率随激活至第一次卵裂时间的延长而逐渐降低袁初次卵裂时间 约圆圆 澡 的放线菌酮激活组和初次卵裂时间 约圆远 澡 的茴香霉素激活组胚胎的发育潜能均显著高于初次卵裂时间 跃圆远 澡 的胚胎遥 人受精卵早期卵裂被定义为受精后 圆缘 耀圆苑 澡 发生的胚胎有丝分裂遥基金项目院 吉林省教育厅野十三五冶科学技术研究项目渊允允运匀 圆园员怨员园远缘运允袁允允运匀圆园圆园园源缘源运允冤曰吉林省科技发展计划项目渊圆园圆园园圆园员员猿圆允悦冤曰吉林省卫生与健康青年科技骨干培养计划渊圆园员愿匝园源苑冤曰吉林市科技创新发展计划项目渊圆园员愿猿员苑圆员冤曰山东省中医药科技发展计划项目渊圆园员怨原园源远猿冤曰吉林省大学生创新创业训练计划项目渊圆园圆园员猿苑园远园员缘袁凿糟圆园员怨缘圆袁凿糟圆园员怨缘源冤作者简介院 曹诗雯渊圆园园园 原 冤袁女渊汉族冤袁本科生遥通信作者院 潘晓燕袁教授渊耘鄄皂葬蚤造院责曾赠员怨苑怨园员园缘岳 员远猿援 糟燥皂冤通信作者院 孙艳美袁副教授渊耘鄄皂葬蚤造院泽怎灶赠葬灶皂藻蚤员怨苑愿岳员圆远援 糟燥皂冤苑远猿第 源源 卷摇 第 缘 期圆园圆猿 年 员园 月摇 摇吉摇 林摇 医摇 药摇 学摇 院摇 学摇 报允燥怎则灶葬造摇 燥枣摇 允蚤造蚤灶摇 酝藻凿蚤糟葬造摇 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 摇灾燥造援源源摇 晕燥援缘韵糟贼援圆园圆猿摇 摇郧燥贼燥 等咱怨暂利用 栽蕴陨 评估了 圆愿圆 个合子在卵裂早期发育成优质胚泡的能力袁发现当初次卵裂发生在 圆源 澡内时袁圆圆援猿豫的胚胎发育为高质量囊胚曰圆源 澡 后袁该比率降至 愿援 远豫遥 通过计算两次连续分裂之间的时间间隔袁确定第二个细胞周期的持续时间袁发现当时间在 怨 耀员猿 澡 时袁高质量囊胚的比率较高遥 还有研究表明卵裂时间 跃 圆怨 澡 的胚胎囊胚形成率最低咱员园暂袁早期卵裂可作为胚胎选择的参考指标袁结合胚胎的形态学特征渊两个卵裂球大小相同且碎片臆员园豫冤袁选择优质早卵裂胚移植可显著提高 阅猿胚胎移植的妊娠率和分娩率咱员员暂遥 所以在胚胎体外培养的前 猿 凿袁利用 栽蕴陨可以选择出具有发育为高质量囊胚潜能的胚胎袁为杂耘栽 选择优质胚胎提供依据遥圆援圆摇 其他与胚胎发育潜能相关的时间参数以受精为起点袁以下几个时间参数与发育潜力显著相关遥 淤原核消退时间渊贼蚤皂藻 燥枣 责则燥灶怎糟造藻怎泽 枣葬凿藻袁贼孕晕云冤即进入第一个胚胎 酝 期曰于贼圆尧贼猿尧贼源尧贼缘尧贼远尧贼苑和贼愿为达到相应细胞数的时间渊贼圆为发育至 圆鄄细胞的时间袁贼猿为发育至 猿鄄细胞的时间噎噎冤曰盂糟糟圆渊糟糟圆越 贼猿原贼圆冤袁即胚胎从 圆鄄细胞发育至 猿鄄细胞的时间袁反映了 圆鄄细胞期的持续时间曰榆泽圆渊泽圆越 贼源原 贼猿冤袁即胚胎从 猿鄄细胞发育至 源鄄细胞的时间袁反映了第二轮卵裂的同步性曰虞泽猿渊泽猿越 贼愿原 贼缘冤袁即胚胎从 缘鄄细胞发育至 愿鄄细胞的时间袁反映了第三轮卵裂的同步性曰愚桑椹胚形成时间渊贼蚤皂藻 燥枣 皂燥则怎造葬 枣燥则皂葬贼蚤燥灶袁贼酝冤曰舆囊胚扩张时间渊贼蚤皂藻 燥枣 藻曾责葬灶泽蚤燥灶 遭造葬泽贼燥糟赠泽贼袁贼耘月冤遥 有研究显示袁受精后 贼孕晕云渊 跃圆远援 源 澡冤及 贼源渊 跃源员援 猿 澡冤胚胎的囊胚形成率最低咱员园暂遥 在使用延时培养箱研究胚胎的细胞分裂模式和分裂时间对胚胎体外和体内后续发育的影响时袁发现第一次分裂期间形成两个细胞和第二次分裂期间形成四个细胞的胚胎中袁囊胚率和优质囊胚渊囊胚内细胞团和滋养外胚层细胞等级均为 月冤率均较高袁其中在培养后 圆缘援 怨园 澡 和 猿苑援 愿愿 澡 内完成第一次和第二次分裂的胚胎囊胚移植后可获得较高的妊娠率咱员圆暂遥 宰葬灶早 等咱员猿暂等研究表明袁泽圆臆园援 缘园 澡尧贼缘臆源怨援 园苑 澡 的胚胎优质囊胚形成率可达 远愿援 愿豫遥 为寻找预测囊胚质量的潜在标志物袁郧燥增葬澡蚤 等咱员源暂对 圆园园个胚胎进行了评估袁利用时差成像监测 贼缘尧泽圆和 糟糟圆三个时间参数袁发现 贼缘是高质量胚胎和中等质量胚胎具有显著统计学差异的时间参数袁贼缘和 泽圆是高质量胚胎与劣质胚胎具有显著差异性的时间参数袁在高质量胚胎组中参与细胞周期尧阅晕粤 修复尧细胞信号与通讯尧转录和细胞代谢等主要生物学过程的基因与其他组存在差异遥 酝燥贼葬贼燥 等咱员缘暂发现袁卵母细胞浆内单精子注射渊蚤灶贼则葬糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 泽责藻则皂 蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶袁陨悦杂陨冤后预测囊胚形成最有价值的参数为桑椹胚形成时间渊贼酝愿员援 圆愿 耀怨远援园 澡冤和 杂猿渊臆愿援 苑愿 澡冤袁而囊胚扩张时间贼耘月渊员园苑援怨 耀员员圆援 怨澡冤和 杂猿渊臆缘援 远苑澡冤与胚泡着床潜能关系最为密切遥 胚胎发育过程是个连续的尧不断变化的过程袁应用 栽蕴陨 确定胚胎早期发育过程中各时间参数袁建立有效的胚胎筛选模式从而减少胚胎的移植数目具有重要的意义遥猿摇 卵裂模式对胚胎发育的影响胚胎的卵裂模式分为正常卵裂与异常卵裂袁其中异常卵裂模式包括不均尧非轴性卵裂尧卵裂球提前融合尧非二倍性卵裂尧发育停滞及卵裂球碎裂遥 有研究显示袁不均性卵裂非整倍体率及多核率显著高于正常卵裂的胚胎咱员远暂遥 在胚胎前三次分裂期间袁卵裂面分裂方向非常重要袁决定了最终卵裂球的空间排列遥 四面体胚胎渊贼藻贼则葬澡藻凿则葬造袁栽耘栽冤冤和非四面体胚胎渊灶燥灶鄄贼藻贼则葬澡藻凿则葬造 藻皂遭则赠燥泽袁灶栽耘栽冤在发育动力学上存在显著差异袁在 灶栽耘栽 胚胎中袁畸形尧多核和不规则混乱分裂的频率较高遥 新鲜移植胚胎中 栽耘栽 和 灶栽耘栽 的优质囊胚率分别为 远圆援 怨豫 和 源源豫曰而在冷冻胚胎移植中栽耘栽 发育到囊胚期的概率也显著增加遥 所以 源鄄细胞期形成 栽耘栽 可能成为预测冷冻移植胚胎最有可能发育成高质量囊胚的参数咱员苑暂遥 匀燥躁灶蚤噪 等咱员愿暂将 缘猿 个合子体外培养猿 凿袁然后全部移入子宫袁对正常和不规则卵裂胚胎的发育和移植结果进行回顾性分析袁发现正常卵裂胚胎移植后植入率为 猿园援 愿豫袁 分娩率为圆猿援 员豫袁但不规则卵裂的胚胎没有植入遥 并且源鄄细胞期的多核胚袁圆鄄细胞期不均匀性卵裂胚袁以及突然分裂成 猿 个或 猿 个以上细胞胚胎袁植入能力均极低咱员猿暂遥因此袁除正常卵裂模式外袁其他卵裂模式均会不同程度影响胚胎的发育潜能袁卵裂模式异常的胚胎往往具有染色体的异常袁从而导致胚胎植入失败或者早期流产的发生咱员怨暂遥 栽蕴陨 的优势在于可以识别出卵裂异常的胚胎袁这些异常的胚胎没有或者具有极低的着床潜能袁选择具有高发育潜能的移植胚胎对于提高辅助妊娠的临床结局具有重要的意义遥源摇 时差成像的临床应用价值为了检验 栽蕴陨 的临床有效性及安全性袁随机抽取员缘苑缘 名进行体外受精的患者应用 栽蕴陨袁结果表明与传愿远猿吉林医药学院学报摇 圆园圆猿 年 员园 月摇 第 源源 卷统的培养方式相比 栽蕴陨 组的活产率从 圆远援 缘豫 增加到猿缘援 圆缘豫咱圆园暂遥 而且采用 栽蕴陨 不会对 陨灾云辕 陨悦杂陨 早期胚胎的发育造成负面影响袁通过预测胚胎发育潜能改善妊娠结局袁基于 栽蕴陨 进行的时间参数和卵裂模式分层筛选模式袁临床妊娠率可达 苑缘援 园豫袁显著高于静态形态学观察渊源苑援 猿园豫冤咱员猿暂遥 在一项主要研究 栽蕴陨 对妊娠率影响的实验中袁员远员 名患者被随机分组并进行分析袁表明 栽蕴陨 组和传统培养组相比袁妊娠率没有显著差异渊栽蕴陨 组 源远援 猿豫袁常规组 猿源援 远豫冤袁但仍具有倾向于 栽蕴陨 选择的趋势咱圆员暂遥 另一项研究则表明 栽蕴陨 培养可显著提高妊娠率渊栽蕴陨 组 缘员援 园豫袁常规组 猿怨援 怨豫冤袁且早期流产率显著降低袁活产率显著增加咱圆圆暂遥 为了验证 栽蕴陨 应用于辅助生殖的有效性袁砸藻蚤早灶蚤藻则 等咱圆猿暂分别将 员缘员 对完全应用 栽蕴栽 的夫妇和 圆缘园 对完全应用传统培养夫妇的临床结局进行回顾性分析袁发现在陨灾云 过程中单独使用 栽蕴陨 能够提高累计总活产率遥还有研究对接受体外受精辕 卵胞浆内单精子注射鄄胚胎移植渊陨灾云辕 陨悦杂陨鄄耘栽冤助孕的 员怨怨怨 份周期资料进行回顾性分析袁发现 栽蕴陨 组移植胚胎数量明显少于常规组袁而且 栽蕴陨 组的临床妊娠率尧着床率尧活产率及抱婴回家率都明显提高咱圆源暂遥 粤凿葬皂泽燥灶 等咱圆缘暂利用 栽蕴陨 与形态学评估相结合袁发现着床率和临床妊娠率明显高于形态学评估组渊着床率院猿园援 圆豫 增泽 员怨援 园豫袁临床妊娠率院远援 园豫 增泽 猿圆援 员豫冤遥 在研究 栽蕴陨 对冷冻移植胚胎的影响中发现袁与传统的胚胎培养方式相比袁栽蕴陨 可显著改善新鲜及冻融周期胚胎移植后的活产率及新生儿结局袁显著增加新生儿平均出生体重袁且早产和低出生体重儿的风险显著减低咱圆远暂遥这些可能与 栽蕴陨 可以提供无干扰的培养环境尧不会造成培养环境的不稳定从而影响胚胎的生长发育有关遥 而且通过对胚胎发育过程的连续动态观察袁可检测到形态学正常而卵裂方式异常的胚胎袁这方面是传统形态学评估无法实现的遥 基于 栽蕴陨 在选择移植胚胎方面具有的优势袁可以作为 杂耘栽 的筛选方法遥缘摇 时差成像的局限性和发展方向随着对 栽蕴陨 技术的深入研究袁其局限性也逐渐显露遥 由于 栽蕴陨 技术提供的视角有限袁不能翻转胚胎进行多层面的观察袁当胚胎存在多碎片和卵裂球间相互重叠时可能会影响评估的准确性咱圆苑暂遥 此外袁不同患者以及实验室间袁胚胎发育过程中的行为学和动力学指标也受到培养环境尧受精方式和患者本身特性的影响遥 如接受 陨灾云 吸烟者的裂解发生较慢袁妊娠率明显低于不吸烟者咱圆愿暂遥 有些情况下即使胚胎存在一个或多个异常的形态动力学行为袁也可能成功植入并妊娠咱圆怨暂遥 在利用 栽蕴陨 选择可移植胚胎过程中袁需要全面考虑以上各种影响因素袁结合常规形态学观察建立有效的胚胎筛选模式袁减少胚胎移植的数目袁降低母婴并发症袁提高辅助生殖 杂耘栽 的成功率遥由于 栽蕴陨 技术提供的胚胎发育信息数量巨大袁仅靠人工分析和处理效率有限遥 通过人工智能对胚胎二维图像进行评估和选择袁以及将形态动力学参数与其他非侵入性胚胎评估方法相结合将是 栽蕴陨 技术未来的发展方向遥参考文献院咱员暂摇 张庆颜袁陈士岭袁周星宇袁等援 全面二孩政策下多胎妊娠减胎术 缘缘 例临床结局分析咱允暂援 实用医学杂志袁圆园员怨袁猿缘渊员源冤院圆圆源猿鄄圆圆源缘援咱圆暂 摇陨蕴晕陨栽杂运再 杂袁匀哉郧匀耘杂 蕴袁栽耘运孕耘栽耘再 云袁藻贼 葬造援 耘造藻糟贼蚤增藻泽蚤灶早造藻 藻皂遭则赠燥 贼则葬灶泽枣藻则 蚤灶 贼澡藻 泽藻贼贼蚤灶早 燥枣 枣怎灶凿藻凿 蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤鄄造蚤扎葬贼蚤燥灶院贼憎燥 赠藻葬则泽蒺 藻曾责藻则蚤藻灶糟藻 蚤灶 葬灶 燥灶贼葬则蚤燥 澡燥泽责蚤贼葬造鄄遭葬泽藻凿枣藻则贼蚤造蚤贼赠 糟造蚤灶蚤糟咱允暂援 允 韵遭泽贼藻贼 郧赠灶葬藻糟燥造 悦葬灶袁圆园员怨袁源员渊源冤院源圆员鄄源圆苑援咱猿暂摇 杂悦陨韵砸陨韵 砸袁酝耘杂耘郧哉耘砸 酝援 云燥糟怎泽 燥灶 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 葬灶葬造赠泽蚤泽院遭造葬泽贼燥糟赠泽贼 糟燥造造葬责泽藻 葬灶凿 皂燥则责澡燥皂藻贼则蚤糟 葬泽泽藻泽泽皂藻灶贼 葬泽 灶藻憎枣藻葬贼怎则藻泽 燥枣 藻皂遭则赠燥 增蚤葬遭蚤造蚤贼赠咱允暂援 砸藻责则燥凿 月蚤燥皂藻凿 韵灶造蚤灶藻袁圆园圆员袁源猿渊缘冤院愿圆员鄄愿猿圆援咱源暂摇 粤砸酝杂栽砸韵晕郧 杂袁月匀陨阅耘 孕袁允韵砸阅粤晕 灾袁藻贼 葬造援 栽蚤皂藻鄄造葬责泽藻泽赠泽贼藻皂泽 枣燥则 藻皂遭则赠燥 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 葬灶凿 葬泽泽藻泽泽皂藻灶贼 蚤灶 葬泽泽蚤泽贼藻凿则藻责则燥凿怎糟贼蚤燥灶咱 允暂援 悦燥糟澡则葬灶藻 阅葬贼葬遭葬泽藻 杂赠泽贼 砸藻增袁 圆园员怨袁 缘渊缘冤院悦阅园员员猿圆园援咱缘暂摇 酝陨蕴耘宰杂运陨 砸袁运哉悦 孕袁运哉悦在再晕杂运粤 粤袁藻贼 葬造援 粤 责则藻凿蚤糟贼蚤增藻皂燥凿藻造 枣燥则 遭造葬泽贼燥糟赠泽贼 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 遭葬泽藻凿 燥灶 皂燥则责澡燥噪蚤灶藻贼蚤糟 责葬鄄则葬皂藻贼藻则泽 蚤灶 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 皂燥灶蚤贼燥则蚤灶早 燥枣 藻皂遭则赠燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼咱允暂援 允 粤泽泽蚤泽贼 砸藻责则燥凿 郧藻灶藻贼袁圆园员缘袁猿圆渊源冤院缘苑员鄄缘苑怨援咱远暂摇 蕴陨哉 在 郧袁载陨粤晕郧 郧 酝袁载哉 运袁藻贼 葬造援 栽则葬灶泽糟则蚤责贼燥皂藻 葬灶葬造赠泽藻泽则藻增藻葬造 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶葬造 责则燥枣蚤造藻泽 蚤灶 藻葬则造赠鄄 葬灶凿 造葬贼藻鄄凿蚤增蚤凿蚤灶早 责燥则糟蚤灶藻 泽燥皂葬贼蚤糟 糟藻造造 灶怎糟造藻葬则 贼则葬灶泽枣藻则 藻皂遭则赠燥泽咱允暂援郧藻灶藻泽 渊月葬泽藻造冤袁圆园圆园袁员员渊员圆冤院员源怨怨援咱苑暂摇 孕粤砸运 酝 允袁运陨酝 耘 再袁运粤晕郧 酝 允袁藻贼 葬造援 陨灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责燥贼藻灶贼蚤葬造 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 噪蚤灶藻贼蚤糟泽 燥枣 遭燥鄄增蚤灶藻 责葬则贼澡藻灶燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶凿 泽燥皂葬贼蚤糟 糟藻造造 灶怎糟造藻葬则 贼则葬灶泽枣藻则 藻皂鄄遭则赠燥泽 怎泽蚤灶早 葬 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 皂燥灶蚤贼燥则蚤灶早 泽赠泽贼藻皂咱允暂援 悦藻造造 砸藻责则燥鄄早则葬皂袁圆园员苑袁员怨渊源冤院圆源缘鄄圆缘源援咱愿暂 摇粤运粤郧陨 杂袁栽粤酝哉砸粤 杂袁酝粤栽杂哉运粤宰粤 运援 栽蚤皂蚤灶早 燥枣 贼澡藻枣蚤则泽贼 糟造藻葬增葬早藻 葬灶凿 蚤灶 增蚤贼则燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责燥贼藻灶贼蚤葬造 燥枣 遭燥增蚤灶藻怨远猿第 缘 期摇 曹诗雯袁等援 时差成像在高质量胚胎选择中的临床应用泽燥皂葬贼蚤糟 糟藻造造 灶怎糟造藻葬则 贼则葬灶泽枣藻则 藻皂遭则赠燥泽 葬糟贼蚤增葬贼藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼责则燥贼燥糟燥造泽咱允暂援 悦藻造造 砸藻责则燥早则葬皂袁圆园圆园袁圆圆渊员冤院猿远鄄源圆援咱怨暂摇郧韵栽韵 运袁运哉酝粤杂粤运韵 再袁运韵陨运耘 酝袁藻贼 葬造援 孕则藻凿蚤糟贼蚤燥灶 燥枣贼澡藻 蚤灶 增蚤贼则燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 糟燥皂责藻贼藻灶糟藻 燥枣 藻葬则造赠鄄糟造藻葬增葬早藻鄄泽贼葬早藻 澡怎皂葬灶 藻皂遭则赠燥泽 憎蚤贼澡 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤皂葬早蚤灶早 葬灶凿 燥曾赠早藻灶糟燥灶泽怎皂责贼蚤燥灶 则葬贼藻 皂藻葬泽怎则藻皂藻灶贼 咱 允暂援 砸藻责则燥凿 酝藻凿 月蚤燥造袁圆园员愿袁员苑渊猿冤院圆愿怨鄄圆怨远援咱员园暂摇 再粤晕郧 杂 匀袁宰哉 悦 匀袁悦匀耘晕 再 悦袁藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 皂燥则责澡燥鄄噪蚤灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 糟造藻葬增葬早藻 泽贼葬早藻 燥灶藻皂遭则赠燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责燥贼藻灶贼蚤葬造院葬 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 泽贼怎凿赠咱允暂援栽葬蚤憎葬灶 允 韵遭泽贼藻贼 郧赠灶藻糟燥造袁圆园员愿袁缘苑渊员冤院苑远鄄愿圆援咱员员暂摇 蕴耘耘 悦 陨袁蕴耘耘 栽 匀袁匀哉粤晕郧 悦 悦袁藻贼 葬造援 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 藻葬则造赠糟造藻葬增葬早藻 藻皂遭则赠燥泽 蚤皂责则燥增藻泽 责则藻早灶葬灶糟赠 葬灶凿 凿藻造蚤增藻则赠 则葬贼藻泽 燥枣阅葬赠 猿 藻皂遭则赠燥 贼则葬灶泽枣藻则 凿怎则蚤灶早 蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶咱允暂援 栽葬蚤鄄憎葬灶 允 韵遭泽贼藻贼 郧赠灶藻糟燥造袁圆园员远袁缘缘渊源冤院缘缘愿鄄缘远圆援咱员圆暂 摇酝陨在韵月耘 再袁韵再粤 晕袁陨宰粤运陨砸陨 砸袁藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 藻葬则造赠糟造藻葬增葬早藻 责葬贼贼藻则灶泽 燥枣 澡怎皂葬灶 藻皂遭则赠燥泽 燥灶 泽怎遭泽藻择怎藻灶贼 蚤灶增蚤贼则燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 咱 允暂援 云藻则贼蚤造 杂贼藻则蚤造袁圆园员远袁员园远渊圆冤院猿源愿鄄猿缘猿援咱员猿暂摇 宰粤晕郧 杂 杂袁阅陨晕郧 蕴 允袁在匀粤韵 载袁藻贼 葬造援 耘皂遭则赠燥 泽藻造藻糟贼蚤燥灶枣燥则 泽蚤灶早造藻 藻皂遭则赠燥 贼则葬灶泽枣藻则 燥灶 凿葬赠 猿 遭葬泽藻凿 燥灶 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶燥枣 糟造藻葬增葬早藻 责葬贼贼藻则灶泽 葬灶凿 贼蚤皂蚤灶早 责葬则葬皂藻贼藻则泽 蚤灶 蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤鄄造蚤扎葬贼蚤燥灶 责葬贼蚤藻灶贼泽咱允暂援 允 砸藻责则燥凿 酝藻凿袁圆园员远袁远员渊缘辕远冤院圆缘源鄄圆远圆援咱员源暂摇郧韵灾粤匀陨 粤袁粤酝允粤阅陨 云袁晕粤杂砸鄄耘杂云粤匀粤晕陨 酝 匀袁藻贼 葬造援粤糟糟燥皂责葬灶蚤皂藻灶贼 燥枣 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 责葬则葬皂藻贼藻则泽 葬灶凿 糟怎皂怎造怎泽糟藻造造 砸晕粤鄄泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 蚤灶 藻皂遭则赠燥 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶咱允暂援 砸藻责则燥凿杂悦陨袁圆园圆圆袁圆怨渊圆冤院猿怨缘鄄源园怨援咱员缘暂摇 酝韵栽粤栽韵 再袁阅耘 蕴韵杂 杂粤晕栽韵杂 酝 允袁耘杂悦砸陨月粤 酝 允袁藻贼 葬造援酝燥则责澡燥噪蚤灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 葬灶凿 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶 枣燥则 遭造葬泽鄄贼燥糟赠泽贼 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 贼澡则燥怎早澡 葬灶 蚤灶贼藻早则葬贼藻凿 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 泽赠泽贼藻皂咱允暂援 云藻则贼蚤造 杂贼藻则蚤造袁圆园员远袁员园缘渊圆冤院猿苑远鄄猿愿源援咱员远暂摇 月粤蕴粤运陨耘砸 匀袁杂韵允耘悦运陨 粤袁酝韵栽粤酝耘阅陨 郧袁藻贼 葬造援 陨皂责葬糟贼燥枣 皂怎造贼蚤灶怎糟造藻葬贼藻凿 遭造葬泽贼燥皂藻则藻泽 燥灶 藻皂遭则赠燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造糟燥皂责藻贼藻灶糟藻袁皂燥则责澡燥噪蚤灶藻贼蚤糟泽袁 葬灶凿 葬灶藻怎责造燥蚤凿赠 咱 允暂援 云藻则贼蚤造杂贼藻则蚤造袁圆园员远袁员园远渊猿冤院远园愿鄄远员源援咱员苑暂摇阅耘杂粤陨 晕袁郧陨蕴蕴 孕援 月造葬泽贼燥皂藻则藻 糟造藻葬增葬早藻 责造葬灶藻 燥则蚤藻灶贼葬贼蚤燥灶葬灶凿 贼澡藻 贼藻贼则葬澡藻凿则葬造 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 葬则藻 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 憎蚤贼澡 蚤灶糟则藻葬泽藻凿责则燥遭葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 葬 早燥燥凿鄄择怎葬造蚤贼赠 遭造葬泽贼燥糟赠泽贼 枣燥则 糟则赠燥责则藻泽藻则增葬鄄贼蚤燥灶 燥则 贼则葬灶泽枣藻则院葬 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 泽贼怎凿赠咱允暂援 云藻则贼蚤造 杂贼藻则蚤造袁圆园员怨袁员员员渊远冤院员员缘怨鄄员员远愿援咱员愿暂摇 匀韵允晕陨运 晕袁灾蕴粤陨杂粤灾蕴允耘灾陨悦 灾袁运韵灾粤悦陨悦 月援 酝燥则责澡燥噪蚤鄄灶藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责燥贼藻灶贼蚤葬造 燥枣 蚤灶 增蚤贼则燥糟怎造贼怎则藻凿 藻皂遭则赠燥泽 枣则燥皂 灶葬贼怎则葬造 糟赠糟造藻泽 蚤灶 责葬贼蚤藻灶贼泽 憎蚤贼澡 责燥燥则燥增葬则蚤葬灶 则藻泽责燥灶泽藻 咱允暂援 月蚤燥皂藻凿 砸藻泽 陨灶贼袁圆园员远袁员员 渊圆园冤院源圆愿远缘圆愿援咱员怨暂摇 阅耘杂粤陨 晕袁郧韵蕴阅月耘砸郧 允 酝袁粤哉杂栽陨晕 悦袁藻贼 葬造援 粤则藻 糟造藻葬增鄄葬早藻 葬灶燥皂葬造蚤藻泽袁皂怎造贼蚤灶怎糟造藻葬贼蚤燥灶袁燥则 泽责藻糟蚤枣蚤糟 糟藻造造 糟赠糟造藻 噪蚤鄄灶藻贼蚤糟泽 燥遭泽藻则增藻凿 憎蚤贼澡 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤皂葬早蚤灶早 责则藻凿蚤糟贼蚤增藻 燥枣 藻皂鄄遭则赠燥 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 糟葬责葬糟蚤贼赠 燥则 责造燥蚤凿赠钥 咱允暂援 云藻则贼蚤造 杂贼藻则蚤造袁圆园员愿袁员园怨渊源冤院远远缘鄄远苑源援咱圆园暂摇 月匀陨阅耘 孕袁杂砸陨运粤晕栽匀粤砸粤允粤匀 粤袁蕴粤晕在 阅袁藻贼 葬造援 栽陨蕴栽院栽蚤皂藻鄄蕴葬责泽藻 陨皂葬早蚤灶早 栽则蚤葬造鄄葬 责则葬早皂葬贼蚤糟袁皂怎造贼蚤鄄糟藻灶贼则藻袁贼澡则藻藻鄄葬则皂 则葬灶凿燥皂蚤泽藻凿 糟燥灶贼则燥造造藻凿 贼则蚤葬造 贼燥 葬泽泽藻泽泽 贼澡藻 糟造蚤灶蚤糟葬造 藻枣枣藻糟鄄贼蚤增藻灶藻泽泽 葬灶凿 泽葬枣藻贼赠 燥枣 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤皂葬早蚤灶早 蚤灶 蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤造鄄蚤泽葬贼蚤燥灶 贼则藻葬贼皂藻灶贼咱允暂援 栽则蚤葬造泽袁圆园圆园袁圆员渊员冤院远园园援咱圆员暂摇 运韵灾粤悦杂 孕袁酝粤栽再粤杂 杂袁云韵砸郧粤悦杂 灾袁藻贼 葬造援 晕燥灶鄄蚤灶增葬泽蚤增藻藻皂遭则赠燥 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽藻造藻糟贼蚤燥灶 怎泽蚤灶早 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 皂燥灶蚤贼燥鄄则蚤灶早院砸藻泽怎造贼泽 燥枣 葬 则葬灶凿燥皂蚤扎藻凿 糟燥灶贼则燥造造藻凿 泽贼怎凿赠咱允暂援 耘怎则 允韵遭泽贼藻贼 郧赠灶藻糟燥造 砸藻责则燥凿 月蚤燥造袁圆园员怨袁圆猿猿渊圆冤院缘愿鄄远猿援咱圆圆暂摇运粤蕴蕴耘粤杂 阅袁酝悦耘灾韵再 运袁匀韵砸晕耘 郧袁藻贼 葬造援 蕴蚤增藻 遭蚤则贼澡则葬贼藻 枣燥造造燥憎蚤灶早 怎灶凿蚤泽贼怎则遭藻凿 藻皂遭则赠燥 糟怎造贼怎则藻 葬贼 造燥憎 燥曾赠早藻灶 蚤灶葬 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤灶糟怎遭葬贼燥则 糟燥皂责葬则藻凿 贼燥 葬 澡蚤早澡鄄择怎葬造蚤贼赠 遭藻灶糟澡鄄贼燥责 蚤灶糟怎遭葬贼燥则咱允暂援 匀怎皂 云藻则贼蚤造渊悦葬皂遭冤袁圆园圆园袁圆远院员鄄苑援咱圆猿暂 摇砸耘陨郧晕陨耘砸 粤袁 蕴耘云耘月灾砸耘 栽袁 蕴韵哉月耘砸杂粤悦 杂袁 藻贼 葬造援栽蚤皂藻鄄造葬责泽藻 贼藻糟澡灶燥造燥早赠 蚤皂责则燥增藻泽 贼燥贼葬造 糟怎皂怎造葬贼蚤增藻 造蚤增藻遭蚤则贼澡 则葬贼藻 葬灶凿 泽澡燥则贼藻灶泽 贼蚤皂藻 贼燥 造蚤增藻 遭蚤则贼澡 葬泽 糟燥皂责葬则藻凿 贼燥糟燥灶增藻灶贼蚤燥灶葬造 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂 蚤灶 糟燥怎责造藻泽 怎灶凿藻则早燥蚤灶早陨悦杂陨咱允暂援 允 粤泽泽蚤泽贼 砸藻责则燥凿 郧藻灶藻贼袁圆园圆员袁猿愿渊源冤院怨员苑鄄怨圆猿援咱圆源暂摇 纪冰袁马学工袁李斌业袁等援 栽蚤皂藻鄄造葬责泽藻 培养与常规培养卵裂期胚胎移植的妊娠及新生儿结局分析咱允暂援 实用医学杂志袁圆园圆园袁猿远渊圆员冤院猿园园员鄄猿园园源援咱圆缘暂 摇粤阅粤酝杂韵晕 郧 阅袁粤月哉杂陨耘云 酝 耘袁孕粤蕴粤韵 蕴袁藻贼 葬造援 陨皂鄄责则燥增藻凿 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻泽 燥枣 凿葬赠 猿 藻皂遭则赠燥 贼则葬灶泽枣藻则泽 憎蚤贼澡贼澡藻 怎泽藻 燥枣 葬灶 葬怎贼燥皂葬贼藻凿 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻鄄藻灶葬遭造藻凿 贼藻泽贼 贼燥 葬蚤凿 蚤灶藻皂遭则赠燥 泽藻造藻糟贼蚤燥灶咱允暂援 云藻则贼蚤造 杂贼藻则蚤造袁圆园员远袁员园缘渊圆冤院猿远怨鄄猿苑缘援咱圆远暂摇 酝粤杂悦粤砸耘晕匀粤杂 酝袁云韵载 杂 允袁栽匀韵酝孕杂韵晕 运袁藻贼 葬造援 悦怎鄄皂怎造葬贼蚤增藻 造蚤增藻 遭蚤则贼澡 则葬贼藻泽 葬灶凿 责藻则蚤灶葬贼葬造 燥怎贼糟燥皂藻泽 憎蚤贼澡 贼澡藻怎泽藻 燥枣 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 蚤皂葬早蚤灶早 蚤灶糟怎遭葬贼燥则泽 枣燥则 藻皂遭则赠燥 糟怎造贼怎则藻院葬则藻贼则燥泽责藻糟贼蚤增藻 糟燥澡燥则贼 泽贼怎凿赠 燥枣 员愿愿圆 粤砸栽 糟赠糟造藻泽咱允暂援 月允韵郧袁圆园员怨袁员圆远渊圆冤院圆愿园鄄圆愿远援咱圆苑暂摇 陈龙彬袁顾亦凡袁林戈援 时差成像技术在人类胚胎评估中的临床应用咱允暂援 中华生殖与避孕杂志袁圆园员怨袁猿怨渊员员冤院怨缘员鄄怨缘缘援咱圆愿暂摇 砸韵悦匀粤 允 悦袁孕粤杂杂粤蕴陨粤 云 允袁酝粤栽韵杂 云 阅袁藻贼 葬造援 粤 皂藻贼澡鄄燥凿 遭葬泽藻凿 燥灶 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 蚤灶贼藻造造蚤早藻灶糟藻 贼燥 枣怎造造赠 葬怎贼燥皂葬贼蚤扎藻 贼澡藻 藻鄄增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 遭燥增蚤灶藻 遭造葬泽贼燥糟赠泽贼 蚤皂葬早藻泽咱允暂援 杂糟蚤 砸藻责袁圆园员苑袁苑渊员冤院苑远缘怨援咱圆怨暂摇 杂悦陨韵砸陨韵 砸援 哉泽藻 燥枣 贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 皂燥灶蚤贼燥则蚤灶早 蚤灶 皂藻凿蚤糟葬造造赠 葬泽鄄泽蚤泽贼藻凿 则藻责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽院葬 皂蚤灶蚤鄄则藻增蚤藻憎 咱允暂援 在赠早燥贼藻袁圆园圆员袁圆怨渊圆冤院怨猿鄄员园员援渊收稿日期院 圆园圆猿鄄园猿鄄猿园冤摇 摇园苑猿吉林医药学院学报摇 圆园圆猿 年 员园 月摇 第 源源 卷