1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,湖南省妇幼保健院 病理科,宫 颈 标 本 处 理,的病理学技能,病理技术操作流程,脱 水,包 埋,切 片,HE,染 色,封 片,阅 片,取 材,取材,核对病人的姓名,科室,住院号等。,核对标本性质,取出的部位,标本数目,,临床诊断,是否做标记:如带线、切缘、锥顶等,活检标本的取材,活检组织及时固定,固定液总量,标本,5,倍以上,取材时应描述活检组织大小、颜色、质地,固定好的组织应放滤纸包好放入包埋盒,注意:,较小较碎的组织应用纱布或滤纸包裹,滴入伊红放入包埋盒内,直径小于,0.1cm,的标本,可描述“针尖大
2、小”,直径大于,0.1cm,的标本应记录实际大小,切忌用“米粒大小”或“绿豆大小”等字样描述。,厚度大于,0.5cm,的标本,切开描述切面,切开包埋。,大体可辨认的息肉样组织,则描述之:如,-,色息肉状,-,质地组织,-,块,大小,-,组织学检查的组织厚度不得超过,3mm,并且长短不能超过使用的包埋盒的大小。,大多数实体标本应该切成 边长,10-15mm,厚,2-3mm,大小:,大体描述,1._,色,_,(质地)组织,1,块,大小为,*cm,2._,色,_,(质地)组织,2,块,大小分别为,*cm,及,*cm,3._,色,_,(质地)组织,3,块(或,3,块以上),最大者大小为,*cm,最小者
3、大小为,*cm,阴道镜活检标本的取材方法,用品:,装标本用的冻存管,/,标本瓶,内置固定液。,0.5cm,的微 孔滤膜小块。牙签、镊子、记号笔和登记本。,方法:,用戴有一次性乳胶手套的左手食指紧贴活检钳,右手 持牙签,将活检钳内钳取的标本,拨到食指上摊平,用已备好的滤膜贴附上面,拇指轻压,迅速置于已装好固定液的标本瓶中,固定液的总量必须大于标本块的,5,倍以上。,目的,:便于包埋过程中的定位,防止埋面不当造成组织的平,切。,阴道镜活检标本的取材方法,宫颈锥切标本取材,描述,锥形体的大小(直径和深度)和形状,应该测量基底宽度及高度,描述颜色、外观、体积(应测量忌用比拟)、质地(软,中等、硬等),
4、上皮:颜色,光滑,糜烂,修复,撕裂,肿块(大小,形状,部位),囊肿(内容物,大小),以前活检的部位,宫颈锥切标本,取材,1.,新鲜状态下用缝线标记,12,点位置,2.,将一把锋利的刀尖插入宫颈管在,12,点位置纵向剪开,标本(如没有定位,可在任一部位剪开),3.,粘膜面朝上钉于软木板上固定过夜,取材,:,4.,用墨汁小心涂抹手术切缘,5.,间隔,23mm,做顺时针方向纵性切面,切取的每一面均应包含鳞柱交界处上皮,必要时可修剪掉部分间质。,每一个蜡块在,3,个不同的平面上切片,以观察切缘情况。,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本的取材,宫颈锥切标本的取材,宫颈癌根治标本,子宫
5、切除标本(经腹),1.,测量标本大小并称重,2.,辨认子宫的前后壁,腹膜反折,附件,剖开方式,从前壁宫颈外口处中央向上纵行剪开宫壁至子宫底,然后呈“一”字型切向双侧宫角,.,用锋利的刀从宫颈两侧一直打向双侧宫角,将子宫分为前后两部分,.,子宫切除标本(经腹),3.,如有体积大的肿瘤,平行切开,4.,钉于软木板上固定过夜,宫颈癌根治标本,子宫切除标本,描述,子宫切除术的类型,包含的器官,浆膜面的颜色,纤维性粘连,肿瘤,宫颈外口直径,鳞柱状交界处粘膜性状,宫颈管长度,粘膜性状,切面囊肿,宫体内膜:,外观、厚度、出血、息肉、囊肿、肿瘤,子宫肌壁:,厚度、出血点或斑、肿瘤(部位、数量、,大小、,出血、
6、坏死、钙化),输卵管:,根部其形状、粗度,作横切面,卵巢:,大小,质地、颜色,切面,子宫切除标本,取材,1.,宫颈,从宫颈外口以上大约,2.5cm,处离断宫颈,以锥切标本方式取材并分别标记部位。,宫颈深部浸润性癌:至少取,3,块,其中至少有,1,块为肿瘤浸润最深处,,1,块包含宫颈全层,应取阴道壁切缘和左,右侧宫旁组织,2.宫颈管,如有肿瘤则按肿瘤取材原则取材,3.宫体,如没有明显的肿瘤:接近宫底处至少取,2,块,尽可能包括宫体全层,任何大体异常处另取,如有明显的肿瘤:肿瘤至少取,3,块,其中至少有,1,块为肿瘤浸润最深处,1,块包含宫体全层,非肿瘤性子宫内膜取,2,块,宫体和宫颈交界处取,1
7、,块,子宫切除标本,取材,4.肌瘤,3,个以下每个肌瘤至少取,1,块,体积大者可多至,3,块,,3,个以上仔细观察每个肌瘤的不同切面,切面性状相同或相似者共取,34,块即可,任何大体上的异常的区域均分布取材。,.宫体肌壁,有出血或灰红色斑点状区域多取,6.卵巢和输卵管,7.各站淋巴结,子宫切除标本,取材,卵巢切除标本,描述,_,侧卵巢切除标本一件,大小为,*cm,表面,_,色,光滑,/,凹凸不平,有,/,无乳头状突起。垂直于卵巢长轴做平行切面,见切面呈,_,色,可见黄、白体结构。局部见囊腔,大小为,*cm,单,/,多房,内壁光滑,/,有突起,囊壁厚,*cm,内容物淡黄色清亮液体,。,单纯或预防
8、性切除标本取,12,块,囊肿剔除标本至少取,3,块,尽量囊壁最厚处,薄壁囊肿最好打卷取材,良性畸胎瘤应取到头节,复杂的囊性标本尽量多取乳头处及囊壁较厚处,实性肿瘤部分按照实性肿瘤取材,卵巢切除标本,取材,输卵管,处理步骤,切开前固定标本,如果附着在子宫上,则应在原位固定,测量输卵管长度和最大直径,如果输卵管大小相对正常,则每隔,5mm,连续切开并检查,注意不要完全切断,如果输卵管明显增大,则将输卵管完全纵向剖开,如需要再做平行切面,输卵管,描述,输卵管长度和最大直径,浆膜,:纤维素,出血,纤维性粘连至卵巢或其他器官,壁,:厚度异常?破裂?如有,则描述位置,伞端的外观,:开放?闭合?内翻?,管腔
9、,:明显?扩张?内容物;如果异常增多测量直径,粘膜,:萎缩?增厚?,分别在峡、壶腹及伞部各取,1,块,输卵管,取材,标本为全切,/,阴式切除的全子宫,,部分阴道壁及左,/,右,/,双侧附件。,阴道壁长,*cm,,周径为,*cm,。子宫大小为,*cm,浆膜面,_,色,光滑,/,不光滑,/,粗糙,/,凸凹不平见多个隆起。,子宫颈外口呈,_,色,粘膜光滑,/,粗糙,/,糜烂,/,中重度糜烂,/,见一内生性,/,外生性肿物(肿物大小为,*cm,切面呈,_,色,侵及肌层,/,外膜层,向上累及,/,未累及子宫内膜)。,宫颈管长,*cm,,粘膜呈,_,色,可见一,/,多个息肉,/,小囊肿,大小为,*cm,囊
10、内容,_,子宫内膜呈,_,色,光滑,/,粗糙,/,见一,/,多个息肉状突起,/,见一隆起型肿物(肿物大小为,*cm,,切面呈灰白,/,灰红色,侵及肌层,/,外膜层,向下累及,/,未累及宫颈)。,子宫内膜厚*cm,子宫体肌壁厚*cm,于内膜下/肌壁间/浆膜下可见一个/多个_色结节状肿物,大者大小为*cm,小者大小为*cm,切面_色,编织状明显/不明显,质地_,与周围肌壁组织分界清楚/不清楚,其余肌壁组织切面可见/未见散在暗红色区域。左侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm,右侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm。,总技术流程,(,1,)固定:,(,2,)脱水:,(,3,)透
11、明:,(,4,)浸蜡:,(,5,)包埋:,(,6,)切片:,(,7,)烤片:,(,8,),HE,染色,常规制片技术,二次固定,固 定,脱 水,透 明,浸 蜡,置换作用,媒介作用,石蜡渗透,固 定,常用,10%,中性甲醛固定液配方:,市售甲醛(,40%,),100ml,D.W.900ml,磷酸二氢钠,4g,磷酸氢二钠,6.5g,固定时间,4h,以上,大标本应在,24h,以上,固定是组织制片的基础及关键步骤,固定是否彻底,影响着整个制片的过程,是整个标本处理过程的一个主要环节,固 定,固定目的:,1.,保持组织形态学特征清晰和稳定,2.,阻止组织、细胞自溶与腐败,3.,凝固或沉淀组织细胞内物质,4
12、.,保存组织细胞抗原性,5.,使组织保持一定的硬度和弹性,固 定,一种好的固定液特性:,1.,渗透力相对较强,能迅速渗入组织内部,2.,组织收缩、膨胀或变硬相对很小,3.,能够硬化、固化组织,增加组织硬度,4.,使得组织对染料产生较强的亲和力,并产生较佳的折光率,影响固定因素:,固定液类型及酸碱度,固定液浓度,固定时间与组织体积,固定的温度,固定液浓度,固定液浓度过低达不到固定效果,浓度过高穿透力降低,易引起组织中央固定不良。,福尔马林的浓度大于,10%,的会增加组织变硬和收缩的程度。,甲醛,酒精 冰醋酸 丙酮,固定时间与组织体积,一般,4-24,小时,组织取材厚度原则在,4mm,以内,对于免
13、疫组化而言:固定不足,组织抗原弥散,结构不佳,固定过度,抗原破坏。,组织固定后如不能及时进入脱水,可置,70%,酒精中进行适度保存。,固定温度,温度降低,减慢了固定液渗透速度;温度升高,分子弥散增加,分子活动加快,渗透速度加快。,大多数组织适宜的固定温度为25C,全自动脱水机温度一般控制在35C左右。,一般不建议加热固定,脱水原则:,1.,将组织内水分脱干净但又不使组织过度脱水,2.,酒精脱水应由低浓度至高浓度进行,脱水剂特性及要求:,1.,能与水、透明剂在任何比例下混合,2.,对组织的穿透性能良好,3.,脱水速度快,4.,对组织有一定硬化作用,脱水,酒精:,最常用脱水剂,具有亲水性,能溶于水
14、和其他有机,溶剂,脱水力强,能硬化组织。,能很好与透明剂混溶,易使组织收缩、变脆,导致透明剂难进入组织,从低浓度开始逐级增加浓度,脱水,低浓度酒精在组织中穿透力很强,比高浓度更易渗透到组织内部,组织在低浓度酒精中脱水充分,高浓度只是脱去从低浓度到高浓度之间的水分,高浓度酒精渗透力不强,延长时间意义不大,反而 会使得组织收缩、变脆,脱水,75%,酒精,(1h),85%,酒精,(1h),95%,酒精,(,1h30),95%,酒精,(1h),100%,酒精,(1h30),100%,酒精,(1h),脱水,二甲苯,(,1h,),二甲苯,(,1h,),脱水,蜡,(,1h30,),58-60,蜡,(,1h3
15、0,),58-60,蜡,(,1h,),58-60,蜡温过高可降低浸蜡时间,浸蜡用的石蜡要定期更新,保持纯度,透明,透明剂在脱水剂和石蜡之间起着桥梁作用,它能与两种溶液相溶,在此过程中,因组织块中的水分被透明剂取代,其 折射指数接近于组织蛋白的折光指数,组织块变得 透亮。,透明,二甲苯,:,最常用的透明剂,无色透明、有毒性,不溶于水、易挥发,透明力强,容易使得组织收缩、变形、变脆,长期接触会呼吸道黏膜有刺激作用,透明,置换组织中的透明剂,石蜡渗入组织,组织浸蜡、包埋,实质上一个目的两个步骤,石蜡是最常用的浸润剂和包埋剂,一般用于浸蜡的石蜡熔点为,56-58C,浸蜡温度应高于石蜡熔点,2-4C,浸
16、蜡,采用石蜡包埋法,镊子夹取组织薄片,立埋(切记不能平埋)于包埋模中(埋鳞状上皮的那面)。,把包埋修好的蜡块按号顺序排列。,放入,4,冰箱中保存待切片,包埋,注意调节组织平面,使之保持垂直,并与刀刃平行。,切片机的切片厚度标尺,一般,3,4nm,活检组织需连续切片,每张切片上,4-8,张组织片。,切片,石蜡切片烤后从温箱中拿出应迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蜡。,时间宁长勿短,否则脱蜡不尽无法着色。,HE,染色,各级酒精洗去切片中的二甲苯,使切片逐级酒精入水。,HE,染色,苏木精染色时间:依染液的新旧与着色能力强弱有关,染色时间应随时观察切片着色程度,伊红染色时间:染色程度应以苏木精对核的着色程
17、度为参照标准,以求达到对比鲜明。,HE,染色,脱水、透明,HE,染色,中性树胶浓度适宜。,过浓气泡不易扩散,不易排出。,过稀易溢出玻片,胶内二甲苯挥发后产生气泡不便观察。,封固,建议每个实施单位,有,2,名病理医师阅片,如果诊断一致,确定诊断,如果不一致,应增加第三位医师阅片,对确实有争议的病例,可请上级专家阅片诊断。,病理阅片,鳞状细胞癌的组织学报告内容,包括以下几个方面:,1,、组织学类型及分级,2,、肿瘤部位,3,、浸润深度或厚度,4,、肿瘤大小,5,、血管淋巴管浸润,6,、淋巴结状况,7,、切缘状况,诊断报告,宫颈癌 微浸润癌 病理报告模板,宫颈,,LEEP,,宫颈锥切,宫颈切除术,子
18、宫切除术,浸润性癌,浸润深度:,mm,浸润横径:,mm,淋巴管,/,血管间隙受累:,切缘,宫颈内口:,宫颈外口:,深部:,其他,宫颈微浸润癌诊断模板 范例,宫颈,LEEP,活检,:,1,、子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(,0,点至,3,点),浸润深度:,3mm,,可见两处病灶浸润深度:,5mm,淋巴管,/,血管间隙受累:未查见,2,、切缘:,宫颈内口切缘:,4,点处可见浸润癌,宫颈外口切缘:未查见癌组织,深切缘:阴性,3,、其他:子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变,3,级,并见一处原位腺癌,以上格式在国内可能被简化为如下报告,宫颈,LEEP,活检标本,1.,子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(
19、,0,点至,3,点),间质浸润深度,3mm,,最大宽度,5mm,,可见两处病灶,2.,宫颈,LEEP,标本的内口切缘在,4,点处可见癌组织,其余切缘阴性,未见淋巴,/,血管间隙受累,3.,子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变,3,级,一处见原位腺癌。,宫颈浸润性癌诊断模板,子宫,宫颈,卵巢,输卵管,筋膜内,/,筋膜外次全,/,次广,/,广泛全子宫根除术,双侧附件切除术:,浸润性癌,肿瘤部位:(以,12,点为准),组织学分级:(,FIGO1,2,3,级,如适用的话),肿瘤大小:,cmX,cmX,cm,浸润深度:,mm,,占子宫颈壁厚度的,%,淋巴管,/,血管间隙受累:,阴道壁断端:;切缘阳性,/,阴性,阴性切缘与肿瘤的最近距离:,mm,宫旁组织:(如有累及,标明哪一侧),子宫内膜:,子宫肌层:,子宫浆膜层:,左右卵巢:,左右输卵管:,注意:,锥切或根治标本要报切缘及锥顶或者颈管,根治标本要报宫旁,学习要点:,1.,宫颈锥切标本的取材,2.,宫颈癌根治标本的取材,3.,宫颈病变的报告模式,思考,1.,宫颈锥切组织的取材注意事项?,2.,宫颈病变诊断报告怎样才完整?,谢谢,!,