1、DOI:10.12131/20230024文章编号:2095 0780(2023)04 0158 10广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素污染分析及食用风险评价江姗姗1,张晨晓21.广西大学 轻工与食品工程学院,广西 南宁 5300042.北部湾大学 食品工程学院/广西高校北部湾海产品高值化利用与预制食品重点实验室,广西 钦州 535011摘要:脂溶性贝类毒素分布广泛,可通过食物链传递,对消费者健康构成巨大威胁。广西北部湾海域是我国重要的海水养殖区,其贝类产量占比超过一半。为评估广西北部湾沿海居民因摄食贝类而引起的脂溶性贝类毒素摄入风险,并为建立毒素限量标准提供科学依据,采用液相色谱串联质谱法(L
2、C-MS/MS)分析脂溶性贝类毒素含量,24 h 膳食回顾法调查居民连续7 d的海产品进食情况,应用海洋生物毒素点评估方法,计算膳食中每日毒素摄入量(Estimated daily intake,ESI),对照欧洲食品安全局推荐的急性参考剂量(Acute reference dose,ARfD)值,评价其食用安全性。结果显示:检出的4种毒素含量均低于欧盟规定的安全限量值。检出率由高到低依次为环亚胺类毒素(Gymnodimine,GYM)(83.02%)、大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)(51.16%)、鳍藻毒素(Dinophysis toxin,DTX-2)(40.91%)和虾夷
3、扇贝毒素(Homo-yessotoxin,Homo-YTX)(8.6%),检出的最高质量分数分别为105.4、31.39、38.19和159.66 gkg1;毒素含量存在季节和物种差异,牡蛎秋季GYM含量最高,冬季OA含量最高。DTX-2更易在秋冬季样品中检出,Homo-YTX仅在夏秋季扇贝和贻贝样品中检出。膳食调查结果显示当地居民贝肉日平均消费量为45 gd1。以当地居民贝肉食用量和人体质量估算,OA组毒素ESI值为0.26 g(kgd)1,小于欧盟规定的ARfD值 0.3 g(kgd)1。但若以欧盟提供的贝肉食用量和人体质量数据估算,ESI值 0.34 g(kgd)1 则高于ARfD值。研
4、究表明,虽然广西北部湾沿海市售贝类产品中脂溶性贝类毒素检出值低于欧盟规定的安全限量值,但当地居民存在OA组毒素膳食暴露风险。关键词:脂溶性贝类毒素;膳食暴露风险评估;北部湾中图分类号:TS 254.2文献标志码:A 开放科学(资源服务)标识码(OSID):Pollution analysis and dietary exposure risk assessment of lipophilictoxins in shellfish from Beibu Gulf seafood market in Guangxi ProvinceJIANG Shanshan1,ZHANG Chenxiao21.
5、College of Light Industry and Food Engineering,Guangxi University,Nanning 530004,China2.College of Food Engineering,Beibu Gulf University/Guangxi College and University Key Laboratory of High-Value Utilization ofSeafood and Prepared Food in Beibu Gulf,Qinzhou 535011,ChinaAbstract:Lipophilic shellfis
6、h toxins are widely distributed and will be transmitted to consumers through the food chain,pos-ing a great threat to human health.The Beibu Gulf in Guangxi Province is an important mariculture area in China,accountingfor more than half of the national output.To estimate the potential dietary exposu
7、re risk of coastal residents in that area,and toprovide a scientific basis for the establishment of toxin limit standards,we analyzed the contents of lipophilic shellfish toxins by第 19 卷第 4 期南 方 水 产 科 学Vol.19,No.42023 年 8 月South China Fisheries ScienceAug.,2023收稿日期:2023-02-17;修回日期:2023-02-24基金项目:广西重
8、点研发计划项目(桂科 AB19110020)作者简介:江姗姗(1995),女,硕士研究生,研究方向为海洋贝类毒素。E-mail:通信作者:张晨晓(1975),女,教授,博士,研究方向为海产品加工与质量安全。E-mail:liquid chromatography tandem mass spectrometry.We have used a 24-hour dietary review method to investigate the consump-tion of marine products by coastal residents for seven consecutive days
9、.Then we calculated the value of estimated daily intake(ESI)of toxins in the diet by using the marine biological toxin point assessment method,and evaluated the edible safety by com-paring with the acute reference dose(ARfD)recommended by the European Food Safety Agency.The proportion of samplescont
10、aminated with toxins followed a descending order of gyrodimine(GYM)(83.02%),okadaic acid(OA)(51.16%),dinophy-sis toxin(DTX-2)(40.91%)and homo-yessotoxin(Homo-YTX)(8.6%),with the peak values of 105.4,31.39,38.19 and 159.6gkg1,respectively.The concentrations of toxins varied with different seasons and
11、 species.Among the six kinds of shellfish,thehighest contents of OA and GYM were found in oyster samples,and the peak values were found in winter and autumn samples,respectively.The contents of DTX-2 in autumn and winter samples were significantly higher than those in spring and summersamples.Homo-Y
12、TX was only detected in scallop and mussel samples in summer and autumn.Dietary survey shows that the ave-rage daily shellfish consumption of coastal residents in Beibu Gulf was 45 gd1.The ESI value in OA toxin was estimated to be0.26 g(kgd)1 based on the shellfish consumption and body masses of loc
13、al residents,less than the ARfD value 0.3 g(kgd)1set by the European Union(EU).However,based on the shellfish consumption and body masses of local residents provided bythe EU,the ESI value 0.34 g(kgd)1 was higher than the ARfD value.The results suggest that although the detection rate oflipophilic s
14、hellfish toxin in shellfish samples was lower than the safe limit value set by the EU,there is a risk of dietary exposureto OA toxin for the Beibu Gulf residents.Keywords:Lipophilic shellfish toxins;Dietary exposure risk assessment;Beibu Gulf海洋中存在产毒微藻,双壳贝类由于其滤食性特征,极易蓄积藻毒素,进入贝类体内的藻毒素及其次生代谢产物通常称为贝类毒素1
15、-2。贝类毒素按化学结构分为 8 类:石房蛤毒素(Saxitoxin,STX)、软骨藻酸(Domoic acid,DA)、原多甲藻毒素(Azaspiracid,AZA)、短裸甲藻毒素(Brovetoxin,BTX)、环亚胺(Cyclic imines,CI)、大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)、扇贝毒素(Pectenotoxin,PTX)和虾夷扇贝毒素(Yessotoxin,YTX),根据其溶解性分为脂溶性贝类毒素和水溶性贝类毒素3-5;除STX 和 DA 外,其余均为脂溶性贝类毒素。脂溶性贝类毒素分布范围广,易在贝类的脂肪内蓄积,对消费者健康造成巨大危害。研究表明,OA 及其类似
16、物鳍藻毒素(Dinophysis toxin,DTXs)可抑制蛋白磷酸酶,导致中毒者出现腹泻、腹痛、呕吐等症状;AZAs 对肝脏、心肌产生毒性作用;动物实验表明 CI 类毒素可作用于细胞的 L 型钙离子(Ca2+)通道使动物快速死亡;YTXs 是一种较强的细胞毒素,对肝脏有损伤作用6-10。广西北部湾海域是我国重要的海水养殖区,其海水养殖产量位居中国沿海地区第五,2020 年产量为 150 万吨,其中贝类产量占比过半11。近年来监测发现:广西北部湾贝类中普遍存在脂溶性贝类毒素沾染;20172018 年钦州湾养殖的近江牡蛎(Crassostrea rivularis)普遍沾染脂溶性贝类毒素12。
17、20182019 年对广西北部湾海域贝类中脂溶性藻毒素污染调查发现,环亚胺毒素(Gymnodimine,GYM)普遍存在,牡蛎中检出率最高的毒素为OA 和 GYM13。物种不同、季节变化等因素均会影响脂溶性贝类毒素的蓄积。20142017 年,欧盟监测的 18 862 个贝类样本中,OA 含量在春季达到最大值,而 DTX-2 几乎仅在秋冬季检测到,YTXs 含量在 89 月最高14-15;在 20172020 年采自中国东南沿海的 1 338 份贝类样本中,贻贝、扇贝对亲脂性毒素的蓄积水平高于牡蛎、蛤蜊,PTX-2 和 Homo-YTX 分别在 6 和 7 月达到最大值,OA 在 8 月达到最
18、大值16。目前,广西北部湾地区尚未见有因食用贝类而引发大范围中毒事件的报道,但我国曾发生与贻贝中 OA 和 DTX-1 相关的中毒事件和有毒微藻暴发的记录17-18。有害藻类事件数据库(Harmful algaeevent database,HAEDAT)中记录了太平洋和大西洋沿岸与脂溶性贝类毒素相关的中毒事件共 648起17,19。因此,脂溶性贝类毒素监测是贝类食用安全性评估的重要内容之一。在分析深圳市市售贝类产品中脂溶性贝类毒素的基础上,结合当地居民膳食调查数据发现,深圳居民食用贝类产品的急性风险评估值均低于欧盟规定的急性参考值17。有研究表明,20172018 年钦州湾养殖的近江牡蛎食用
19、安全风险较低,但该评估是以欧盟成员国居民膳食数据为基础12。由于各地饮食习惯不同,所食贝类染毒情况存在差异,目前尚缺乏根据本地居民第 4 期江姗姗等:广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素污染分析及食用风险评价159贝肉摄入量和本地居民人体质量等膳食数据进行的食用风险评估。贝类产品是北部湾沿海居民日常膳食的重要组成部分,调查广西北部湾沿海居民膳食中贝类产品摄入情况,分析贝类毒素污染特征,并对居民膳食贝类产品而引发的食用风险进行评价,可为建立毒素限量标准提供科学依据。本研究于2021 年 11 月2022 年 10 月分别在春、夏、秋、冬四季收集北部湾沿海 3 市(钦州、北海、防城港)居民最常食用的
20、6 种贝类,共 228 份样品。对贝类中 9 种脂溶性毒素含量和分布特征进行分析,包括 OA、DTX1/2、AZA1/3、GYM、SPX1 和 YTX、Homo-YTX。结合膳食调查数据,评估了当地居民脂溶性贝类毒素的急性和慢性暴露风险。1 材料与方法 1.1 化学试剂与仪器OA、DTX1/2、AZA1/3、GYM、SPX1 和YTX、Homo-YTX 标准品(加拿大海洋生物研究所);甲醇、乙腈(质谱纯,美国 Sigma 公司)。TGL-16M 台式高速冷冻离心机(上海卢湘仪离心机仪器有限公司);VORTEX-6 旋涡混匀器(上海五久自动化设备有限公司);液相色谱-质谱联用仪(Liquid C
21、hromatograph Mass Spectrometer)UPLC-MS/MS Waters UPLC(I-class)(美国 Waters 公司);三重四级杆质 Waters Xevo TQ-S Micro(美国 Wa-ters 公司);色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEHC18(2.1 mm50 mm)。1.2 样品采集2021 年 11 月2022 年 10 月按季度从广西北部湾沿海 3 市、7 个主要海鲜批发市场(钦州市:钦州港、东风、鸿发 3 个市场;北海市:侨港、南珠 2 个市场;防城港市:月亮湾、企沙镇 2 个市场)收集贝类样品。其中,钦州市 90 份样品,
22、夏季 24 份,春、秋、冬季各 22 份;北海市 72 份样品,每季度采集 18 份;防城港市 66 份样品,冬季 18 份,春、夏、秋季各采集 16 份。贝类来源通过分销商收集。采集的贝类品种为牡蛎、贻贝、扇贝、平蛤蜊、栉江珧、蛏子 6 种,样品置于冰盒中,4 h 内运回实验室进行处理。1.3 样品制备与毒素提取新鲜贝类样品用自来水清洗干净后,再用纯净水冲洗,去壳,沥干水分,全肉匀浆,匀浆处理后的样品于 80 保存,直至毒素提取。取待测样品(1.000.02)g 加入 3 mL 甲醇,涡旋混匀(300 rmin1,3 min),混合物(4,8 000 rmin1)离心 10 min,将上清液
23、转移至 10mL 容量瓶中,重复 3 次,合并的上清液定容至 10mL,通过 0.22 m 聚酰胺尼龙过滤器过滤到进样瓶中,20 储存直至进行 LC-MS/MS 分析。由于 OA 组毒素易发生酯化反应,需及时对贝肉毒素提取液水解后测定 OA 组毒素总量:取 1 mL 上述提取液于进样小瓶中,加入 125 L 2.5 molL1氢氧化钠(NaOH),涡旋 0.5 min 后 76 加热 40 min,待流水冷却至室温后用 125 L 2.5 molL1盐酸(HCl)中和,通过 0.22 m 滤膜后,于 20 保存,待进行 LC-MS/MS 分析。1.4 LC-MS/MS 测定条件与检测方法毒素检
24、测方法参考刘红河等20和 Qiu 等21。流动相 A:0.1%(体积分数)甲酸+5 mmolL1甲酸铵的水溶液;流动相 B:0.1%(体积分数)甲酸+5 mmolL 1甲酸铵的乙腈溶液。流速:0.35mLmin1,进样量:2 L,柱温:40。质谱条件为:喷雾电压 3.0 kV;锥孔电压 30 V;脱溶剂温度 400;脱溶剂气(N2)1 000 Lh1,通过 LC-MS/MS 测定 9 种脂溶性贝类毒素,毒素质谱参数见表 1。各毒素标准曲线的相关系数均大于 0.99。表1 9 种脂溶性贝类毒素检测参数Table 1 Detection parameters of nine lipophilic
25、shellfishtoxins毒素Toxin电离模式ESI mode母离子Precursorion/(m/z)子离子Production/(m/z)碰撞电压Collisionenergy/eV大田软海绵酸OAM+H 803.4255,563.265,55鳍藻毒素1DTX-1M+H 817.5255.1,113.165,100鳍藻毒素2DTX-2M+H 803.5255.1,563.265,55虾夷扇贝毒素YTXM+H 1 141.51 061.5,855.565,50Homo-虾夷扇贝毒素Homo-YTXM+H 1 155.51 075.5,869.565,50环亚胺毒素GYMM+H+508.
26、3174.3,490.350,35螺环内酯毒素SPX1M+H+692.5444.4,674.445,45原多甲藻酸1AZA1M+H+842.5806.5,824.540,50原多甲藻酸3AZA3M+H+828.5810.4,792.540,50160南 方 水 产 科 学第 19 卷 1.5 膳食消费量调查参照“中国居民营养与健康状况监测总体方案”22,采用分层抽样方法对钦州、北海、防城港 3 市共 450 户家庭合计 1 204 名常住成年居民进行24 h 膳食回顾法调查,问卷调查内容包括性别、年龄、体质量、摄入海产品的种类(鱼类、贝类、藻类、头足类、甲壳类)、食用频率、食用量等。膳食调查由
27、经过培训的调查员入户访问,对调查户成年家庭成员采用询问调查的方式,让被调查者回忆调查 24 h 内进食海产品情况,记录在家和在外所食用的全部海产品,统计居民连续 7 d 海产品进食情况。1.6 膳食暴露风险评估广西北部湾沿海居民脂溶性贝类毒素暴露评估依据食品中化学品风险评估的原则和方法(WHO&FAO,2009),采用海洋生物毒素点评估方法,分别计算膳食中每日毒素摄入量22-23。单位体质量脂溶性贝类毒素每日摄入量(Estimated dailyintake,ESI)按照公式(1)计算:QESI=(C1M/mb)103(1)式中:QESI 为每日单位体质量海洋生物毒素的摄入量 g(kgd)1;
28、C1为某种水产品中某种海洋生物毒素的质量分数(gkg1);M 为某种水产品日消费量(gd1);mb为人体质量(kg)。将计算得到的 ESI值与欧洲食品安全局推荐的急性参考剂量(Acutereference dose,ARfD)进行比较,评价其安全性。ARfD 值指消费者在 24 h 或更短时间内从食物或饮水中摄取某种物质而对其健康无明显危害的估计量19,23。急性膳食暴露评估采用两组数据进行评估,毒素浓度采用检出的最大值,第一组采用广西北部湾沿海居民每日 P99(去除 1%的高值数据,第 99%分位的贝肉食用量)贝肉消费量与居民平均体质量数据,第二组采用欧盟食品安全委员会评估毒素急性参考剂量指
29、定的数据(贝肉 400 g,人体质量 60kg)。慢性膳食暴露评估采用毒素检出值的平均值,第一组贝肉消费量为日均消费量,第二组为每日 P99贝肉消费量。1.7 数据处理描述性统计相关图形通过 Origin 2021 软件生成,采用 IBM SPSS 26.0 软件对毒素在贝类中的含量和季节性变化进行分析,显著性水平设置为 0.05(P0.05),所有实验均设置 3 个平行样(n=3)。2 结果 2.1 脂溶性毒素检出率及含量所采集的 228 份贝类样品中,203 份来自钦州、北海、防城港,其余 25 份来自湛江、威海、广州;牡蛎样品均来自广西北部湾。189 份样品检测到脂溶性贝类毒素,73 份
30、样品只检出 1 种毒素(GYM),116 份样品检出 2 种及以上脂溶性贝类毒素。在检测的 9 种毒素中,检出了 GYM、OA、DTX-2、Homo-YTX 共 4 种毒素,其余 5 种均未检出。GYM 尚无推荐参考值,OA、DTX-2、Homo-YTX 检出的最高含量均低于欧盟规定的限量值(OA、DTX-2 的质量分数160 gkg1,Homo-YTX 的质量分数1 000 gkg1)9,24。检测结果见表 2,GYM 全年检出率最高,在牡蛎、贻贝、蛤蜊中为 100%,在栉江珧和扇贝中为 60%。2.2 脂溶性毒素的物种分布特征如图 1 所示,检出的 4 种贝类毒素在 6 种贝类的分布中呈现
31、明显的物种差异,GYM 在贝类中的分布较为普遍,所有的牡蛎、蛤蜊、贻贝样品均有检出,75%的扇贝有检出。牡蛎样品中的质量分数相差较大。OA 在 6 种贝类中的分布相似,检出率为 46.15%62.5%,其在牡蛎、贻贝、扇贝、平表2 贝中脂溶性贝类毒素检出率及含量Table 2 Detection rates and contents of lipophilic shellfishtoxins in shellfish samples脂溶性贝类毒素Lipophilic shellfishtoxin检出值范围Detection range/(gkg1)平均检出值Mean/(gkg1)检出率Dete
32、ctionrate/%环亚胺毒素GYM0.12105.5433.183.02螺环内酯毒素SPX1NDNDND大田软海绵酸OA0.3431.397.9751.16鳍藻毒素1DTX-1NDNDND鳍藻毒素2DTX-20.2938.197.6540.91原多甲藻酸1AZA1NDNDND原多甲藻酸3AZA3NDNDND虾夷扇贝毒素YTXNDNDNDHomo-虾夷扇贝毒素Homo-YTX3.83159.6647.978.60注:ND 表示未检出。Note:ND.Not detected.第 4 期江姗姗等:广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素污染分析及食用风险评价161蛤蜊、栉江珧和蛏子检出的均值差值较小,
33、分别为 12.14、12.94、13.06、12.70、7.34 和 10.26 gkg1。DTX-2 在牡蛎和贻贝中的质量分数与其他贝类相比差异明显,在贻贝样品中检出的最高质量分数(38.19 gkg1)是最低值(0.39 gkg1)的近100 倍,差异较大。Homo-YTX 仅在扇贝和贻贝样品中检出。2.3 脂溶性毒素季节变化特征贝类样品中的脂溶性贝类毒素含量呈现出明显的季节性变化(图 2)。秋冬季 GYM 的检出值普遍较高,而春夏季较低。春夏季,蛏子和栉江珧样品中 GYM 的检出值较低(1.221.29 gkg1)。秋季,牡蛎样品中 GYM 检出值最高(70.22 gkg1),扇贝和贻贝
34、样品也达到最大值。冬季,平蛤蜊、牡蛎、扇贝和贻贝样品中 GYM 的检出值与其他季节相比有显著性差异(P0.05)。春冬季样品中 OA 检出率及检出值较夏秋季的高。牡蛎、贻贝、扇贝、平蛤蜊、蛏子样品中OA 检出值在冬季达到最高,分别为 22.47、20.53、15.98、16.74、15.23 gkg1。春冬季样品中,牡蛎中 OA 的检出率分别为 83.33%和 87.5%,栉江珧检出率均为 50%。贻贝冬季样品中 OA 检出率为 50%。冬季贝类样品中 OA 检出值与夏季样品有显著性差异(P0.05)。秋冬季样品与春夏季样品中 DTX-2 检出值有显著性差异(P0.05)。春夏季样品中,除贻贝
35、外,DTX-2 的检出率均在 20%以下。贻贝春季样品检出率为 66.67%,检出均值为 1.43 gkg1。Homo-YTX 仅在扇贝和贻贝样品中检出,夏秋季贻贝样品中 Homo-YTX 的检出率为 66%,检出均值分别为 15.98、50.92 gkg1。扇贝只在秋季样品检出Homo-YTX,检出最高值为 159.66 gkg1。2.4 广西北部湾沿海居民膳食中贝类摄入量分别于 2021 年 8 月和 10 月对广西北部湾沿海钦州、北海、防城港 3 市共 450 户家庭,合计1 204 位常住成年居民的膳食开展问卷调查,年龄介于 1860 岁,其中男性占比 52%,女性占比 48%。中位线
36、 Median line均值 Mean异常值 Qutilers牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam020406080100环亚胺类毒素质量分数Mass fraction of GYM/(gkg1)牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam01020304050鳍藻毒素质量分数Mass fraction of DTX-2/(gkg1)牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏
37、子Razor clam05101520302535大田软海绵酸质量分数Mass fraction of OA/(gkg1)牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam04080120160虾夷扇贝毒素质量分数Mass fraction of Homo-YTX/(gkg1)图1 贝类样品中脂溶性贝类毒素质量分数Fig.1 Mass fractions of lipophilic shellfish toxins in different shellfish samples162南 方 水 产 科 学第 19 卷调查结果
38、显示,所调查居民的平均体质量为54.5 kg,海产品日均消费量为 122 g,其中贝类消费占比为 36.9%(图 3),所食贝类种类及食用量如图 4 所示。广西北部湾沿海居民所食贝类品种主要为牡蛎、扇贝、贻贝、蛏子、栉江珧和平蛤蜊,牡蛎肉消费量为 15.3 gd1,位列该地区居民所食贝类的首位。居民日均贝肉消费量为 45 g,居民日贝肉 P99(将居民每日贝肉消费量从低到高排序,第99 分位的消费量即为 P99值)的消费量为 205 g。2.5 居民脂溶性贝类毒素暴露风险评估在国标 GB 27332015 中,采用小鼠生物测试法限定了水产品中麻痹性毒素(Paralytic shellfishp
39、oisoning,PSP)、腹泻性毒素(Diarrhetic shellfishpoisoning,DSP)的限量值(PSP4 MUg1,DSP0.05 MUg1),并于 2016 年颁布了腹泻性贝类毒素的检测方法(GB 5009.2122016),但目前对贝类中的毒素浓度尚无具体的参考值。在食品安全评估时往往参考欧洲食品安全委员会对脂溶性贝类毒素的监管限量和急性暴露参考值。部分参考值如表 3所示。急性暴露风险评估结果如表 4 所示,第一组评春季 Spring夏季 Summer冬季 Winter秋季 Autumnbacbbabbcabbabbc牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop
40、平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam020406080100环亚胺类毒素质量分数Mass fraction of GYM/(gkg1)200408060100120140虾夷扇贝毒素质量分数Mass fraction of Homo-YTX/(gkg1)牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam010203040鳍藻毒素质量分数Mass fraction of
41、 DTX-2/(gkg1)ccbabbaaaabbbbaaaabbbbaa牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor clam051015202530大田软海绵酸质量分数Mass fraction of OA/(gkg1)abccaabbbaabcbaababbaaabbabbca图2 不同季节脂溶性贝类毒素质量分数注:同一图中标有不同字母表示有显著性差异(P0.05)。Fig.2 Mass fractions of lipophilic shellfish toxins in shellfish in four seaso
42、nsNote:Different letters within the same figure indicate significant differences(P0.05).贝类鱼类FishShellfsh甲壳类Crustaceans藻类Algae头足类Cephalopoda010203040百分比 Percentage/%图3 广西北部湾沿海居民海产品摄入种类分布Fig.3 Distribution of seafood species intook by residents inBeibu Gulf in Gangxi Province第 4 期江姗姗等:广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素
43、污染分析及食用风险评价163估数据以本地居民膳食调查得到的贝肉消费量和人体质量估算,OA 组毒素 ESI 值为 0.26 g(kgd)1,小于欧盟规定的 ARfD 值 0.3 g(kgd)1)。第二组 ESI 值以欧盟提供的贝肉消费量和人体质量数据(400 g,60 kg)估算,OA 组毒素 ESI 值为 0.34g(kgd)1,超过欧盟规定的 ARfD 值,这些评估结果表明虽然贝肉中 OA 含量较低,但由于该地区居民贝类食用量大,一定程度上存在 OA 组贝类毒素的膳食暴露风险。YTXs 的两组 ESI 值 0.60、1.06 g(kgd)1 远低于欧盟规定的 ARfD 值 25g(kgd)1
44、,说明目前该地区居民 YTXs 毒素暴露风险较低。慢性暴露风险分别以贝肉的日均消耗量和P99消费量计算,毒素含量采用平均值,结果如表 5 所示。慢性接触剂量为急性接触剂量的 3%4%,评估值可为慢性暴露极限值提供参考。3 讨论脂溶性毒素污染存在明显的物种差异。本研究结果显示,牡蛎、贻贝和扇贝比其他贝类更易沾染毒素,且毒素水平较高。不同物种对毒素的蓄积有明显差异。GYM 在所有贝类中均有检出,检出率最高。根据对广西北部湾沿海海域为期 1 年的毒素监测,发现 GYM 类毒素的全年检出率为 46.6%,且在牡蛎中的检出率最高(92%)13。中国南海、东海和渤海的贝类样本中均检测出 GYM16,26-
45、29,说明贝类中 GYM 污染在我国已十分普遍。OA 和DTX-2 易在牡蛎和贻贝中蓄积,Homo-YTX 仅在扇贝和贻贝样品中检出。不同贝类蓄积毒素的差异与其规格、解毒率和生物转化率密切相关30-32,不同贝类摄食时的最大过滤速率不同也是可能原因之一8,33。表3 脂溶性贝类毒素的毒性等效因子与急性参考值Table 3 Toxic equivalent factors and ARfD of some shellfish toxins毒素组Toxin group毒素Toxin毒性等效因子Toxion equivalence factor急性参考剂量ARfD/g(kgd)1参考文献Refere
46、nce大田软海绵酸OA大田软海绵酸TOA10.36,25鳍藻毒素1TDTX-11鳍藻毒素2TDTX-20.6虾夷扇贝毒素YTXsHomo-虾夷扇贝毒素THomo-YTX1259,2545-OH-虾夷扇贝毒素T45-OH-YTX145-OH-Homo虾夷扇贝毒素T45-OH-Homo-YTX0.5菲律宾蛤仔Short-necked clam泥蚶Mud clam文蛤Clam05101520贝肉日均消费量Mean daily consumption of shellfsh meat/g牡蛎Oyster贻贝Mussel扇贝Scallop平蛤蜊Flat clam栉江珧Horn clam蛏子Razor c
47、lam图4 广西北部湾沿海居民贝肉日均消费量Fig.4 Mean daily shellfish meat consumption of residents in Beibu Gulf in Guangxi Province164南 方 水 产 科 学第 19 卷季节变化对贝类脂溶性毒素含量影响显著。秋冬季贝类样品中 GYM 含量普遍较高,春夏季较低。牡蛎、扇贝和贻贝中 GYM 含量最高的均为秋季样品。春冬季样品 OA 检出率及检出值较夏秋季样品高,最高含量出现在冬季样品中。冬季样品中 DTX-2 检出率和检出值均较其他季节高。仅在夏秋季贻贝样品和秋季扇贝中可检出 Homo-YTX。不同季节水
48、温、光照等环境因素的变化会影响贝类中脂质代谢相关酶的活性从而影响其对毒素的代谢速率33-36。有研究发现,钦州湾地区香港牡蛎(C.hongkongensis)中脂溶性贝类毒素在冬季检出含量最高,海水中毒素在夏季检出含量最高,说明牡蛎中的毒素含量较海水有延迟11。广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素含量低于欧盟标准,但当地居民存在 OA 毒素暴露风险。膳食调查结果显示,广西北部湾沿海居民膳食中贝肉的日均消费量高于其他地区,牡蛎为消费量最大的贝类。贝肉日均消费量是深圳市居民(4.5 g)17的10 倍,这与该地区特殊的地理位置及丰富的贝类资源有关。以本地居民贝肉消费量和人体质量数据估算的 OA 组毒素
49、 ESI 值,小于欧盟规定的ARfD 值,但是以欧盟提供的贝肉消费量和人体质量数据估算,OA 组毒素 ESI 值超过欧盟规定的ARfD 值。这些评估结果说明,虽然贝肉中 OA 含量较低,但由于该地区居民贝类消费量大,一定程度上存在 OA 组贝类毒素膳食暴露风险。无论以本地膳食调查数据还是以欧盟提供的参考数据估算YTXs 的 ESI 值,均远低于欧盟规定的 ARfD 值,说明目前该地区居民 YTXs 毒素暴露风险较低。本研究检测到广泛存在的 GYM 毒素,最初于新西兰采集的牡蛎(Tiostrea chilensis)中发现,由于缺乏GYM 相关毒理研究数据2,10,目前国内外尚未对其检出限量作出
50、规定,故无法对其暴露风险进行分析。急性膳食风险评估适用于短时间内的高消耗量情况。研究表明,长期接触环亚胺类毒素会对人脑造成不利影响,如记忆衰退等10,37-38。故长期食用含有低水平脂溶性贝类毒素的贝肉带来的慢性健康风险是一个不可忽视的问题。本研究提供的广西北部湾沿海城市居民脂溶性贝类毒素慢性暴露水平,为今后慢性暴露极限值的建立提供了有益的探索。牡蛎和贻贝中脂溶性毒素检出率及检出值较高,说明这两种贝类更易沾染并蓄积毒素,因此对牡蛎和贻贝的食用安全性风险评估更为迫切。脂溶性贝类毒素有多种结构类似物或代谢物,本研究未对所有毒素进行检测,贝类毒素含量和食用风险可能被低估,因此应进一步开展对脂溶性贝类