贵港市沙门菌血清型、耐药性及PFGE分型特征研究.pdf

艺216Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29No.4应用预防医学2023年8 月第2 9 卷第4期贵港市沙门菌血清型、耐药性及PFGE分型特征研究韦梅霞，蓝美娇1，孔波力，张婧萱1，刘作军1，吴胜，何伟鹏1.贵港市疾病预防控制中心，广西537 10 0；2.贵港市公共检验检测中心摘要：目的了解2 0 2 1年贵港市哨点医院腹泻患者中沙门菌血清型分布、脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型特征、对抗生素的耐药情况以及腹泻患者（患者株）与生鲜猪肉（猪肉株）中鼠伤寒沙门菌的同源性。方法对110 株患者株与10 0 株猪肉株沙门菌进行血清学分型鉴定，采用微量肉汤稀释法对患者株进行15种药物敏感试验，并应用PFGE对腹泻患者的110 株沙门菌、生鲜猪肉中分离出的鼠伤寒沙门菌进行指纹图谱分析。结果患者株中共分离出12 个血清型，鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为优势菌，所占比例分别为6 2.7 3%和9.0 9%；猪肉株中占比最高的也是鼠伤寒沙门菌，共40 株（40.0 0%）。患者株普遍耐药，耐药菌株占比为91.8 2%，对氨芊西林的耐药率最高（8 8.18%）；多重耐药率高达8 3.6 4%。患者株可分为7 3种PFGE带型，有13种带型各包含2 6 株相同带型；患者株与猪肉株间鼠伤寒沙门菌PFGE条带相似度为53.8%10 0.0%，含5组大的克隆群，每组克隆群均含有患者株和猪肉株。结论贵港市哨点医院腹泻患者中鼠伤寒沙门菌所占比例相对较高；沙门菌耐药较为严重；PFGE指纹图谱具有多样性，存在可能由散发的沙门菌引起食物中毒的风险，提示猪肉中的鼠伤寒沙门菌和该市沙门菌散发病例有一定的关联。关键词：腹泻患者；生鲜猪肉；沙门菌；血清型；耐药；脉冲场凝胶电泳（PFGE）中图分类号：R378.2*2文献标识码：A文章编号：16 7 3-7 58 X(2023)04-0216-06Study on the serotype,drug resistance,and PFGE typing characteristicsof Salmonella in Guigang cityWEI Meixia*,LAN Mejiao,KONG Boli,ZHANG Jingxuan,LIU Zuojun,WU Sheng,HE Weipeng*Guigang Center for Disease Control and Prevention,Guigang,Guangxi 537100,ChinaAbstract:Objective To understand the distribution of Salmonella serotypes,PFGE(Pulsed Field GelElectrophoresis)typing characteristics,and antibiotics resistance among diarrhea patients,and the homologyof Salmonella typhimurium between diarrhea patients(patient strains)and fresh pork(pork strains)insentinel hospitals in Guigang city in 2021.Methods Serological identification of 110 patient strains and 100pork strains of Salmonella.Fifteen types of drug sensitivity tests were carried out on patient strains by microbroth dilution method.Fingerprint analysis of 110 strains of Salmonella isolated from diarrhea patients,andSalmonella typhimurium isolated from fresh pork by Pulsed Field Gel Electrophoresis.Results A total of 12serotypes were isolated from the patient strains,and Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis werethe dominant bacteria,accounting for 62.73%and 9.09%respectively.Salmonella typhimurium wasaccounted for the highest proportion among pork strains,with a total of 40 strains(40.00%).The patientstrains were generally drug-resistant,and the drug-resistant strains accounted for 91.82%.The drug-resistantrate to ampicillin was the highest(88.18%),and the multi-drug resistance rate was as high as 83.64%.The作者简介：韦梅霞（198 8 一），女，广西贵港人，主管技师，主要从事微生物检验工作。patient strains were divided into 73 types of PFGEband patterns,in which 21 band types eachcontained 2 to 6 strains of same band types.The217Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29 No.42023年8 月第2 9 卷第4期应用预防医学similarity of Salmonella typhimurium PFGE bands between patient strains and pork strains was 53.8%-100.0%,and there were 5 large clonal groups,each of which contained both patient strains and pork strains.Conclusions The proportion of Salmonella typhimurium in diarrhea patients in sentinel hospitals in Guigangcity is relatively high.Salmonella drug resistance is relatively serious,and PFGE fingerprints are diverse.There is a risk of food poisoning caused by sporadic Salmonella,suggesting that there is a certainrelationship between Salmonella typhimurium in pork and sporadic cases of Salmonella in this city.Keywords:diarrhea patients;fresh pork;Salmonella;serotype;drug resistance;PFGE沙门菌为革兰氏阴性肠杆菌，是引起人畜共患肠道疾病的重要病原菌属。沙门菌的血清型别多达2 50 0 种以上，与人类疾病相关的血清型超过1500种1。据报道，在我国由微生物引起的食源性疾病中，沙门菌感染的病例数常列首位2，且在细菌性食物中毒中的比例在7 0%左右，而禽畜产品在沙门菌中毒食品中的比例更是达到90%以上3。我国国民对猪肉的需求量较大，猪肉普遍存在于人们的日常饮食中，而猪肉中沙门菌的污染率相对较高4-5，可见猪肉产品的安全直接影响着消费者的健康。为了解贵港市沙门菌血清学、耐药情况以及分子分型特征，本研究对贵港市哨点医院110 株腹泻患者分离的沙门菌进行血清分型、药敏试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）指纹图谱分析，同时将其与市售生鲜猪肉中的鼠伤寒沙门菌进行同源比对，旨在获得该地区沙门菌感染的流行病学资料以及患者与食品中沙门菌的同源性关联数据，为预防沙门菌引起的食源性疾病提供更全面的指导意见，同时也为食品监管部门进一步加强动物源性食品安全管理及加强防控措施提供依据。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源分离自2 0 2 1年贵港市哨点医院腹泻患者的110 株沙门菌（患者株）；分离自8 0 份市售生鲜猪肉中的沙门菌10 0 株（猪肉株）。1.1.22试剂沙沙门菌诊断血清（丹麦SSI公司）；革兰氏阴性菌药敏检测板CHNM4F（赛默飞世尔科技公司）；30 0 0 UXbal限制性内切酶（TaKaRaBio股份有限公司）；SeaKemGoldAgarose琼脂糖（L o n z a 集团）；0.1mol/LTris-HCL缓冲液（赛默飞世尔科技公司）、0.5mol/LEDTA（赛默飞世尔科技公司）、10 0 0 0-SolargelRed染液（北京索莱宝科技有限公司）、10 XTBE缓冲液（北京索莱宝科技有限公司）、ProteinaseK（M ERC K 公司）。所有试剂均在有效期内使用。1.1.3仪器全自动药敏试验菌液接种判读仪（赛默飞世尔科技公司）；脉冲场凝胶电泳仪（美国Bio-Rad公司）；凝胶成像系统（美国Bio-Rad公司）。1.2方法1.2.1血清型鉴定依据食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验（GB4789.4一2016)6对分离的沙门菌进行血清型鉴定，并参照沙门参照菌属血清型诊断7 进行判读。1.2.2药敏试验采用微量肉汤稀释法，对哨点医院腹泻患者的110 株沙门菌进行11个类别15种抗生素药敏检测，根据药敏检测板CHNM4F的操作流程进行操作，参照相关文件标准CLSI8进行结果读取。抑制细菌生长的最低抑菌浓度为MIC值，药敏试验结果分为敏感、中介和耐药，对抗生素耐药种类3的菌株可判为多重耐药菌株。1.2.3PFGE根据沙门菌PFGE标准分型方法，利用脉冲场凝胶电泳仪对哨点医院腹泻患者的110株沙门菌、生鲜猪肉中分离出的40 株鼠伤寒沙门菌和H9812标准菌株进行检测。先将菌悬液浊度调为4.8 麦氏左右，制备小胶块，后经限制性内切酶XbaI酶切后进行脉冲场电泳。电泳条件：2000mL0.5XTBE电泳缓冲液，电压6.0 V/cm，脉冲角度12 0，初始脉冲时间为2.16 s，最终脉冲时间为6 3.8 s，最小和最大分子量分别为30 kb和7 0 0kb，电泳时间为18 h。在电泳结束后进行染色、脱色，通过成像仪获得凝胶图像，并运用B-N7.6软件对电泳图谱进行聚类分析。2结果2.1沙门菌血清型鉴定结果哨点医院腹泻患者的110 株沙门菌共鉴定出12 个血清型，鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌所占比例相对较高，分别是6 9218Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29 No.4应用预防医学2023年8 月第2 9 卷第4期株（6 2.7 3%）和10 株（9.0 9%），斯坦利和韦太夫雷登沙门菌各检出7 株（各占6.36%），其他血清型分别检出15株。见表1。分离自8 0 份生鲜猪肉的10 0 株沙门菌中，鼠伤寒沙门菌为优势菌，共40株（40.0 0%），其余为罗森沙门菌2 5株（2 5.0 0%），德尔卑沙门菌9株（9.0 0%），伦敦沙门菌8 株（8.0 0%），斯坦利、韦太夫雷登、火鸡沙门菌各检出3株，明斯特沙门菌2 株，塞罗、黄金海岸、山道、病牛、姆班达卡、鸭、里地乌沙门菌各检出1株。表12021年贵港市哨点医院腹泻患者110 株沙门菌血清型分布血清型菌株数构成比（%）鼠伤寒6962.73肠炎109.09斯坦利76.36韦太夫雷登76.36罗森54.54德尔卑32.73伦敦32.73科瓦利斯21.82明斯特10.91乙型副伤寒10.91阿贡纳10.91印第安纳10.912.2菌株耐药试验腹泻患者的110 株沙门菌中，仅有9株对所有抗生素药物敏感，其余均对抗生素产生耐药；耐药率最高的是氨芊西林（8 8.18%），其次是四环素（8 6.36%）、氯霉素（7 1.8 2%）、头孢唑林（6 1.8 2%）。对三代头孢类药物的耐药率是7 8.18%，对氟喹诺酮类药物的耐药表22021年贵港市哨点医院腹泻患者110 株沙门菌的药敏试验结果抗生素耐药率（%）中介率（%）敏感率（%）氨芊西林（A M P)88.180.9110.91氨苄西林-舒巴坦（A M S)57.2730.9111.82四环素(TET)86.362.7310.91粘菌素(COL)3.6496.36一氯霉素(CHL)71.821.8226.36复方新诺明(SXT)47.27一52.73头孢唑林(CFZ)61.8226.3611.82头孢噻(CTX)45.45054.55头孢他啶(CAZ)32.73067.27头孢西丁(CFX)5.450.9193.64庆大霉素(GEN)24.555.4570.00亚胺培南(IMI)00100.00茶啶酸(NAL)12.73一87.27阿奇霉素(AZI)3.64一96.36环丙沙星(CIP)4.5560.0035.45率是17.2 8%。本研究菌株均对亚胺培南敏感（10 0.0 0%），对阿奇霉素（96.6 4%）、头孢西丁（93.6 4%）、萘啶酸（8 7.2 7%）也较为敏感。见表2。2.3沙门菌株多重耐药情况15种抗生素的多重耐药分析显示，耐药菌株占比为91.8 2%（10 1/110），多重耐药菌株占比高达8 3.6 4%（92/110）；其中有34株耐药7 种及以上抗生素，占比为30.91%。氨芊西林-四环素-氯霉素-复方新诺明月（AMP-TET-CHL-SXT)、氨苄西林-（氨苄西林-舒巴坦）-四环素-氯霉素-头孢唑林-头孢噻（AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-CTX）和氨苄西林-（氨苄西林-舒巴坦）一四环素-头孢唑林-头孢噻-头孢他啶（A M P-A M S-T ET-C FZ-C T X-C A Z）是本研究中最多见的耐药谱，所含耐药菌株数为2 6 株，占多重耐药谱的2 8.2 6%（2 6/92），其余耐药谱的耐药菌株数为15株。见表3。表322021年贵港市哨点医院腹泻患者110 株沙门菌多重耐药谱耐药菌抗生素耐药谱株数AMP-TET-CHL-SXT12AMP-AMS-TET-CFZ5AMP-TET-CHL-GEN1AMP-AMS-COL-CFZ-NAL2AMP-AMS-TET-CHL-SXT5AMP-TET-CHL-SXT-NAL2AMP-AMS-CHL-SXT-CFZ3AMP-AMS-TET-CHL-SXT-NAL2AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-NAL2AMP-TET-CHL-SXT-CFZ-NAL3AMP-AMS-TET-SXT-CFZ-NAL2AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-CTX8AMP-TET-CHL-CFZ-CTX-CAZ5AMP-AMS-TET-CFZ-CTX-CAZ6AMP-TET-CHL-CFZ-CTX-CAZ-GEN2AMP-TET-COL-CHL-SXT-CTX-CAZ2AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-CTX-CAZ3AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-GEN2AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-CTX-GEN5AMP-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-GEN2AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ3AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-GEN-CIP1AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-GEN2AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-GEN-CIP1AMP-AMS-TET-CHL-CFZ-CTX-CAZ-GEN-NAL-CIP2AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-GEN-AZI3AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-CFX-GEN4AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-CFX-GEN-1AZIAMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-CTX-CAZ-CFX-GEN-1AZI-CIP219Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29 No.4应用预防医学2023年8 月第2 9 卷第4期2.4PFGE分析腹泻患者的110 株沙门菌PFGE指纹图谱聚类分析显示，有7 3种PFGE带型，菌株间条带相似度为48.2%10 0.0%。6 9株鼠伤寒沙门菌包含46 种带型，共有13种相同带型，各包含2 6株菌株。10 株肠炎沙门菌有6 种带型，其中2 种带型包含6 株菌株。见图1。109株鼠伤寒沙门菌（6 9株患者株、40 株猪肉株）聚类分析显示，有6 8 种PFGE带型，菌株间条带相似度为53.8%10 0.0%。根据带型相似度85.0%归为同一克隆群的原则（聚集)9，有7 7 株（7 0.6%）可分为5组大的克隆群，且均含有患者株和猪肉株。其中克隆群I有11株（4株患者株、7 株猪肉株），克隆群I有12 株（11株患者株、1株猪肉株），克隆群II有14株（10 株患者株、4株猪肉株），克隆群IV有14株（8 株患者株、6 株猪肉株），克隆群V有2 6 株（12 株患者株、14株猪肉株）。见图2。PFGE-XbalPFGE-XbalKeyMihadate鉴定结论GG2021071疯人肛拭斯坦利沙门菌GG2021087衡人肛拭斯坦利沙门菌GG2021093病人肛工拭斯坦利沙门菌GG2021030商人工式斯坦利沙门菌1GG2021090房人红式鼠伤幕沙门属GG2021091离人红拭鼠伤寒沙门菌GG2021077病人肛拭伤游沙门雕GG2021080疯人旺拭鼠伤寒沙门菌GG20210B1南人工式鼠伤豪沙门窗GG2021078病人肛拭鼠伤家沙门菌GG2021079病人肛拭鼠伤游沙门菌GG2021088病人肛拭斯坦利沙门菌GG2021068病人肛拭斯坦利沙门菌GG2021074病人江拭斯坦利沙门菌GG2021005病人肛拭印第安纳沙门氏菌GG2021049编人肛工拭韦太夫雷登沙门菌GG2021050病人肛拭韦太夫雷登沙门菌GG2021039病人江式韦太夫雷登沙门菌1GG2021069病人肛拭韦太夫雷蟹沙门菌GG2021104病人红拭韦太夫雷登沙门菌GG2021062病人红江拭韦太夫雷蟹沙门菌GG2021021病人江拭韦太夫雷登沙门菌GG2021052病人肛拭乙型副伤家沙门菌GG2021024病人肛拭科瓦利斯沙门菌GG2021040病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021044病人肛拭阿贡纳沙门菌GG2021105病人肛拭鼠伤源沙门断GG2021113病人工拭鼠伤家沙门菌GG2021075人江拭飘伤寒沙门菌GG2021016人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021084病人江拭鼠伤事沙门菌GG2021094病人江拭伤家沙门菌GG2021020病人肛拭鼠伤摩沙门菌GG2021065病人红拭酿伤摩沙门脑GG2021085鼠伤沙门菌GG2021097病人红式凯伤摩沙门菌GG2021059病人肛拭鼠伤海沙门菌GG2021083偏人肛拭飘伤摩沙门菌GG2021086病人肛拭配伤摩沙门菌GG2021098衡入肛拭鼠伤摩沙门菌GG2021035病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021055病人肛拭鼠伤摩沙门菌GG2021070商人肛拭鼠伤寨沙门菌GG2021072病人江拭鼠伤麻沙门菌GG2021061房人肛拭靓伤沙门菌GG2021063病人肛拭鼠伤麻沙门菌GG2021060病人肛拭鼠伤家沙门菌GG2021067病人肛拭鼠伤幕沙门菌GG2021043病人肛拭配伤沙门菌GG2021014病人江拭鼠伤麻沙门菌GG2021073病人江拭配伤蜜沙门菌GG2021025病人肛拭飘伤麻沙门菌1GG2021026病人红拭鼠伤摩沙门菌GG2021033病人红拭鼠伤寒沙门菌GG2021076病人红拭德尔卑沙门氏GG2021010病人肛拭罗森沙门巢GG2021022人红拭罗森沙门菌GG2021100病人虹拭罗森沙门菌GG2021037病人肛拭鼠伤豪沙门雕GG2021051病人肛拭罗森沙门菌GG2021027病人肛式伤寒沙门菌GG2021111病人肛拭鼠伤豪沙门菌GG2021106病入肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021042病人肛拭鼠伤麻沙门菌93GG2021045寓人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021032人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021053病人红工拭鼠伤寒沙门菌GG2021054病人肛拭鼠伤摩沙门GG202100B病入肛拭飘伤家沙门腩GG2021009病人肛拭鼠伤寨沙门GG2021011房入肛拭鼠伤赛沙门脑GG2021041岗人式靓伤磨沙门菌美GG2021089病人肛工拭鼠伤寒沙门菌GG2021099岗人江拭鼠伤摩沙门菌GG2021012席人肛拭鼠伤游沙门菌GG2021034房入红拭鼠伤滚沙门菌GG2021019病人肛拭鼠伤赛沙门wieGG2021047病人肛拭鼠伤豪沙门菌GG2021102病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021031病人肛拭鼠伤家沙门菌GG2021046病人江拭鼠伤家沙门GG2021056病人红拭鼠伤摩沙门菌GG2021108病人江拭鼠伤寒沙门菌GG2021013微人江拭鼠伤摩沙门菌GG2021015威伤豪沙门菌GG2021006病人肛式鼠伤寒沙门菌GG2021082鼠伤寒沙门GG2021107病人红式鼠伤家沙门面GG2021092佛人红拭鼠伤寒沙门菌GG2021095病人江拭鼠伤家沙门嘴GG2021038病人肛拭罗沙门菌GG2021096病人肛拭科瓦利斯沙门氏菌GG2021004病人江拭鼠伤麻沙门菌GG2021007编人肛拭肠炎沙门菌GG2021036疯人红拭肠炎沙门削GG2021103商人江拭肠炎沙门咖福GG2021112病人肛拭肠炎沙门菌GG2021001房人红拭肠炎沙门菌GG2021101病人肛拭肠炎沙门菌GG202102B房人江式肠炎沙门窗GG2021057肠炎沙门菌GG2021058肠炎沙门菌GG2021003人江拭肠炎沙门菌GG2021002人江拭德尔单沙门氏菌GG2021064病人肚拭德尔卑沙门氏雕GG2021066病人江拭飘伤潮沙门菌GG2021017南人肛拭伦敏沙门菌GG2021018病人江拭伦数沙门菌GG2021023病人肛拭伦教沙门菌GG2021029房人江拭明斯特沙门氏酷图1哨点医院腹泻患者110 株沙门菌PFGE分型图谱聚类分析220Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29 No.4应用预防医学2023年8 月第2 9 卷第4期PFGE-XbalPFGE-XbalKey萌株来源蓝定结论GG2021035病人肛拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-092猪肉飘伤寒沙门菌EGG2021-W-090猪肉凯伤寒沙门菌EGG2021-W-047猪肉鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-04B猪肉鼠伤豪沙门菌EGG2021-W-049猪肉鼠伤寒沙门菌克隆群IEGG2021-W-050猪肉鼠伤摩沙门菌EGG2021-W-091猪肉鼠伤沙门谐GG2021105病人江式藏伤寒沙门菌GG2021113病人江拭鼠伤寒沙门菌GG2021075病人肛拭鼠伤沙门菌GG2021027病人肛拭鼠伤沙门菌GG2021111病人肛拭鼠伤摩沙门菌EGG2021-W-061猪肉鼠伤寒沙门菌GG2021016病人肛凯伤家沙门菌GG20210B4病人肛式鼠伤摩沙门菌GG2021094病人肛拭鼠伤寨沙门菌GG2021020病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021065病人江拭鼠伤沙门菌GG2021085病人旺拭鼠伤赛沙门菌克隆群IGG2021097病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021059人肚拭鼠伤寒沙门菌GG2021083病人肛拭鼠伤麻沙门菌GG2021086病入肛江拭鼠伤沙门菌GG2021098病人肛拭鼠伤沙门菌EGG2021-W-043猪肉鼠伤寒沙门菌GG2021061病人肛拭凰伤寨沙门菌GG2021063病人肛拭伤家沙门菌GG2021060病入肛拭鼠伤沙门菌7GG2021067病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021043病人肛拭鼠伤沙门菌GG2021014疯人肛拭鼠伤豪沙门箱EGG2021-W-086猪肉鼠伤寒沙门菌GG2021072病人红式鼠伤沙门菌克隆群IGG2021073病人肛鼠伤寒沙门随EGG2021-W-089猪肉鼠伤家沙门菌GG2021055病人肛拭靓伤摩沙门菌GG2021070病人旺拭鼠伤寨沙门菌EGG2021-W-070猪肉鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-085猪肉飘伤寒沙门菌GG2021037病人红鼠伤寒沙门菌GG2021025病人江拭鼠伤家沙门菌GG2021026病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021033病人肛拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-027猪肉酿伤寨沙门菌EGG2021-W-075猪肉靓伤沙门菌GG2021106病人肛拭微伤豪沙门菌GG2021092病人肛拭鼠伤豪沙门菌GG2021095病人肛拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-044猪肉鼠伤摩沙门菌GG2021008病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021009病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021011病人肛拭靓伤寒沙门菌GG2021041病人肛拭酿伤寒沙门菌GG2021089病人肛飘伤寒沙门菌GG2021099病人肛拭鼠伤豫沙门菌GG2021034病人肛拭凯伤沙门菌克隆群IVGG2021012病人肛拭凯伤麻沙门菌EGG2021-W-011猪肉鼠伤沙门菌EGG2021-W-012精肉鼠伤寒沙门照EGG2021-W-018猪肉微伤家沙门菌EGG2021-W-019猪肉鼠伤廉沙门菌EGG2021-W-087猪肉载伤穿沙门菌EGG2021-W-045猪肉鼠伤家沙门菌GG2021042病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021045病人肛拭鼠伤豪沙门菌GG2021032病人肛拭鼠伤豪沙门菌GG2021053病人肛拭飘伤寒沙门菌GG2021054病人江拭鼠伤豪沙门菌GG2021040房人肛拭鼠伤麻沙门菌GG2021031病人红拭鼠伤滚沙门菌GG2021046病人肛江拭鼠伤摩沙门菌GG2021056病人江式鼠伤享沙门菌GG2021108病人肛拭鼠伤沙门菌囍EGG2021-W-072猪肉鼠伤事沙门菌EGG2021-W-073猪肉鼠伤家沙门菌EGG2021-W-076猪肉鼠伤沙门菌EGG2021-W-077猪肉鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-094猪肉飘伤寒沙门菌EGG2021-W-095猪肉鼠伤豪沙门菌GG2021006病人肛拭鼠伤家沙门菌GG2021082病人肛拭鼠伤家沙门菌GG2021107房人肛拭鼠伤幕沙门菌克隆群VGG2021013病入肛拭鼠伤源沙门菌GG2021015廣人红拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-001猪肉鼠伤豫沙门菌EGG2021-W-005猪肉鼠伤豪沙门菌EGG2021-W-007猪肉鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-010猪肉鼠伤寨沙门菌GG2021102病人肛拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-078猪肉飘伤豪沙门菌EGG2021-W-079猪肉鼠伤家沙门菌EGG2021-W-080猪肉鼠伤摩沙门菌EGG2021-W-074猪肉鼠伤沙门菌GG2021019病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021047病人肛拭鼠伤事沙门脑GG2021090病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021091病人肛拭伤寒沙门菌GG2021077病人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021080人肛拭鼠伤寨沙门菌2GG2021081病人肛拭飘伤豪沙门菌GG2021078病人肛工拭鼠伤沙门菌GG2021079人肛拭鼠伤寒沙门菌GG2021004人肛拭鼠伤幕沙门菌美EGG2021-W-066猪肉酿伤寒沙门菌EGG2021-W-100猪肉鼠伤家沙门脑GG2021066病人肛拭鼠伤寒沙门菌EGG2021-W-064猪肉鼠伤沙门EGG2021-W-093猪肉鼠伤寨沙门圈GG2021028人肛拭肠炎沙门照图2腹泻患者与猪肉中的10 9株鼠伤寒沙门菌PFGE分型图谱聚类分析3 讨 论本研究发现，贵港市腹泻患者中沙门菌的优势血清型是鼠伤寒沙门菌（6 2.7 3%）和肠炎沙门菌（9.0 9%），与国内其他地区比较，如张韶华等10 、朱惠芳等 报道的南京市、无锡市人类肠道疾病沙门菌中肠炎沙门菌占比高于鼠伤寒沙门菌有所不同，提示不同地域存在一定差异，可作进一步研究。分离自8 0 份生鲜猪肉的10 0 株沙门菌中，鼠伤寒沙门菌占比最大（40.0 0%）。可见腹泻患者与生鲜猪肉中沙门菌的优势菌都是鼠伤寒沙门菌，提示人源沙门菌的主要血清型分布可能与食物中生鲜猪肉关联较大。耐药结果显示，贵港市沙门菌耐药情况较为严重，虽对亚胺培南、221Applied Prev Med,Aug.2023,Vol.29 No.42023年8 月第2 9 卷第4期应用预防医学阿奇霉素、头孢西丁、萘啶酸较为敏感，但对氨西林、四环素类和氯霉素类药物的耐药率高达71.82%8 8.18%，形成普遍耐药。其中氯霉素的耐药率（7 1.8 2%）高于湖南省杨翊等12 报道的40.00%，但萘啶酸耐药率（12.7 3%）又低于辽宁马景宏等13 报道的6 1.0 0%以及广州市张晶等14 报道的6 1.13%。马景宏等13 报道中的菌株主要来源于分离自食品的沙门菌，张晶等14 报道中的菌株与本研究相同，来源于哨点医院腹泻病例，提示不同地区、不同来源的菌株，其耐药性有明显差异。此外，耐药菌株占比为91.8 2%，多重耐药菌株占比为8 3.6 4%，耐药谱复杂，最多见的为AMP-TET-CHL-SXT、A M P-A M S-T ET-C H L-C FZ-C T X和AMP-AMS-TET-CFZ-CTX-CAZ3种（合计占比为2 8.2 6%），上述3种耐药谱中所包含的抗生素在临床使用上也较为普遍；提示贵港市沙门菌耐药情况较为严重，有关部门应高度重视，进一步加强对抗生素临床使用的合理控制。PFGE技术具有高分辨率，结果稳定可靠的特点。本研究结果显示，110 株腹泻患者的沙门菌PFGE带型呈多样性但也有成簇型出现，共分为7 3种带型；患者中6 9株鼠伤寒沙门菌共分为46 种带型，10 株肠炎沙门菌有6 种带型，结合血清型特点，提示该市食源性沙门菌感染以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主，可能存在由鼠伤寒沙门菌散发引起的食物中毒。腹泻患者与生鲜猪肉中的10 9株鼠伤寒沙门菌聚类分析显示，有7 7 株主要集中在5组克隆群（共含45株患者株，32 株猪肉株），每组克隆群均同时含有患者株和猪肉株，最大的克隆群V由12 株患者株和14株猪肉株组成；提示源于腹泻患者、生鲜猪肉的菌株间具有高度同源性和亲缘关系，猪肉中的鼠伤寒沙门菌和该市沙门菌散发病例有一定的关联。后续可进一步做全基因组测序分析以及开展流行病学调查，不仅有助于提高贵港市对沙门菌引起的食源性腹泻暴发的预警能力，同时还可以为食品安全监督管理部门做好生鲜食品安全管理工作提供更科学的依据。参考文献1陈建辉，欧剑鸣，陈伟伟，等.198 4一2 0 16 年福建省人源与食源性沙门菌血清分型和耐药特征研究刀.疾病监测，2 0 19，34(4)：316-32 1.2张建群，袁士杰，苗超.2 0 0 7 一2 0 18 年浙江省余姚市沙门菌血清型变迁及耐药分析J.疾病监测，2 0 2 0，35(7):627-632.3刘鲜鲜，黄秀梅，周波，等.猪肉产品中沙门菌的风险评估J.动物医学进展，2 0 15，36(8)：97-10 0.4姚雪婷，蒋玉艳，谭冬梅，等.2 0 12 一2 0 17 年广西壮族自治区市售食品中沙门菌监测数据分析刀.中国食品卫生杂志，2 0 19，31（5）：449-455.5侯小刚，刘书亮，韩新锋，等.四川部分地区猪肉产业链中沙门氏菌的分离及其鉴定J.食品科学，2013，34(11)：2 50-2 53.6中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验：GB4789.4一2 0 16 S.北京：中国标准出版社，2 0 16.7朱超，许学斌.沙门菌属血清型诊断M.上海：同济大学出版社，2 0 0 9：145-2 92.8Clinical Laboratory Standards Institute.Performancestandards for antimicrobial susceptibility testingMJ.23thed.Wayne:Clinical and Laboratory Standards Institute,2013.9Fakhr MK,Nolan LK,Logue CM.Multilocus suquencetyping lacks the discriminatory ability of pulsed-field gelelectrophoresis for typing Salmonella enterica serovarTyphimurium JJ.J Clin Microbiol,2005,43(5):2215-2219.10 张韶华，葛藤，金萍，等.南京市哨点医院96 株沙门菌血清分型及耐药敏试验结果分析J.医学动物防制，2 0 2 2，38(3)：2 2 1-2 2 5.11朱惠芳，何迎峰，管红霞，等.无锡地区沙门菌血清型分布特征研究J.中国卫生检验杂志，2 0 2 0，30(19):2330-2332.12 杨翊，贾华云，任国峰，等.2 0 13一2 0 17 年湖南省沙门菌耐药状况及其分布J.中国抗生素杂志，2 0 2 0，45(6):621-626.13马景宏，张眉眉，马妮，等.辽宁食源性沙门菌血清型、耐药谱及PFGE分型特征J.中国微生态学杂志，2018，30(3)：2 6 8-2 7 2.14张晶，张欣强，侯水平，等.广州市56 6 株腹泻病例沙门菌的血清型分布及耐药性分析刀.实用预防医学，2 0 16，2 3(5)：6 16-6 17，6 2 3.收稿日期：2 0 2 2-11-14编辑：韩彦彬，周圆