克隆酶供体免疫分析.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,克隆酶供体免疫分析（,CEDIA,）,1,主要内容,定义,原理,特点,应用,2,大片段称为酶受体（,E,nzyme,A,cceptor),小片段称为酶供体（,E,nzyme,D,onor,）,有活性的酶,有活性的酶,ED,标记的抗原,一、定义,3,标本中的抗原,ED,标记的抗原,活性酶,4,二、原理,基本原理,：,标本中的抗原,和,ED,标记的抗原,与特异性抗体竞争结合，形成两种抗原抗体复合物。,ED,标记的抗原与抗体,结合后由于空间位阻，,不能再与,EA,结合,。反应平衡后，剩余的,ED,标记抗原与,EA,结合，形成具有活性的酶，加入底物测定酶活力，酶活力的大小与标本中抗原含量呈正比。,5,三、特点,1.,剂量反应曲线线性,2.,高敏感度,3.,操作简便，快速,6,剂量反应曲线线性,7,高敏感度,a.-,半乳糖苷的高转换率,;,b.,大量的可供选择的商品化的色原底物,如氯酚一红色,-,半乳糖苷；,c.ED,上有许多可供选择的结合配体的特殊位点,8,操作简便,可直接在自动生化分析仪中应用，节省了检验项目的操作时间,该方法易普及,样品预处理快速,能够满足临床大批量分析的需要,9,自动生化分析仪,10,自动生化分析仪外观及主要部件,11,仪器主要性能介绍,分析速度：,800,个测定,/,小时（最大），约,4.5,秒加样一次,可分析项目：,86,项（带,ISE,的话，最大可达,89,项），计算项目,8,项,样本量：,1.535.0l,，,0.1l,可调,试剂量：,20270l,，,1l,可调,总反应体积：,120300l,测光时必须满足该条件,光源灯：保质期,750,小时,比色杯：,20,只,8,组共,160,只，依据杯空白值进行更换,测光系统：采用凹面蚀刻光栅的后分光、双波长测定方式,12,个波长：,340,、,405,、,450,、,480,、,505,、,546,、,570,、,600,、,660,、,700,、,750,、,800nm,稳定性高且可有效补偿样本混浊、溶血、黄疸及电源电压变动引发的干扰,测定过程：,全反应监测，,10,分钟测定,34,次吸光度值。,15,分钟测定,53,次吸光度值,依据实验要求选择相应测光点的吸光度值计算结果,样本容器：样本针有液面探测装置，可使用原始采血管离出血清后直接上机测定,试剂,：同一项目最多可加入四步试剂，两试剂舱位置各,45,个，温度,515,。,反应温度：,370.1,水浴,12,试剂和样本,微量化,。,仪器,线性宽,，量程,0-32000,。,同样一个项目可以同时输入血清和尿液,两套参数,（不占试剂通道）。,反应,过程监测,，可以察看任意时间反应曲线和吸光度,样品可以,自动预稀释,，便于分析高值样本。,13,四、临床应用,测定茶碱血药浓度,测定血清地高辛,监测环孢菌素,A,的浓度,14,测定茶碱血药浓度,EA,试剂盒（定量的,EA,和多克隆抗体）,ED,试剂盒（,ED,茶碱 结合体和酶反应底物）,测定酶活力可以计算得茶碱浓度,(,正比,),CEDIA,420nm,15,测定茶碱血药浓度,试剂盒所带低标和高标,自动生成标准曲线,按输入样本号顺序自动测定,得到样本中氨茶碱的含量,精确性高,样本用量小,自动化批量测定,16,小结,掌握,CEDIA,的原理,熟悉,CEDIA,的定义,熟悉,CEDIA,的特点,了解,CEDIA,的应用,17,谢谢,18,