黑木耳菌株的菌丝生长速度对胞外酶活性的影响.pdf

黑木耳菌株的菌丝生长速度对胞外酶活性的影响和耀威向 准李 鹏黄 静熊 雪杨彝华(贵州省生物研究所贵州 贵阳 贵州省食用菌产业技术体系贵州 贵阳)摘 要:以 个菌株为研究对象分别测定漆酶、纤维素酶和木聚糖酶 种胞外酶活性并结合菌丝日均生长速度分析两者的关系为黑木耳优质菌株筛选和选育提供参考依据 结果表明:供试菌株依据长速快慢通过显著性差异(.)分析可分为 组 种胞外酶在多数菌株间存在显著差异漆酶和纤维素酶活性与菌丝长速存在正相关关系而木聚糖酶则无明显相关性说明通过菌丝长速快慢可以初步推断漆酶和纤维素酶活性高低但无法判断木聚糖酶活性情况关键词:黑木耳菌丝生长速度胞外酶中图分类号:.文献标识码:文章编号:()():().(.).:引言黑木耳()是木耳属真菌栽培极为广泛国内产量位居第二多为段木栽培和代料栽培是食、药两用的珍稀食用菌 但在黑木耳生产过程中也存在较多问题一方面出现菌种退化、老化现象加大了栽培风险另一方面因食用菌的特殊性造成菌种市场极为混乱 鉴于当前还不完善的食用菌菌种质量评价体系菌种生产和销售等方面的管理薄弱菌种繁多杂乱的现象无法及时控制造成从业者严重利益损失影响黑木耳等食用菌产业的良性发展 黑木耳生长营养来自于培养基质中的营养物质而能量主要来源于木质纤维素、淀粉等物质但是它们不能直接被利用需要通过胞外酶将其分解成可吸收的小分子碳水化合物生命科学/第 卷本文通过胞外酶的活力可以反映出菌丝对培养基质的利用情况作为切入点选择 个黑木耳栽培菌株为材料通过测定漆酶、纤维素酶和木聚糖酶 种胞外酶活力找出生长速率和胞外酶活力的关系为菌种质量快速评价检测体系提供数据支撑为黑木耳菌种质量保障提供技术支撑 材料与方法.材料供试黑木耳菌株来源见表 表 黑木耳供试菌株菌株编号菌株名称来 源吊棚串串友 吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所圆满吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所岭菌 吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所良知 号吉林省权葳生物科技有限公司吉蕈吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所耳成金吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所金元宝吉林省权葳生物科技有限公司极品康达 号牡丹江市海丰食用菌研究所圆满吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所高产优质王 吉林省蛟河市黄松甸镇吉蕈食用菌研究所枨纯吉林省权葳生物科技有限公司如意 吉林省权葳生物科技有限公司.培养基 培养基:生产自上海博微生物科技有限公司.主要试剂和仪器漆酶、纤维素酶和木聚糖酶活性检测试剂盒为生工生物工程(上海)股份有限公司产品 型双光速紫外/可见分光光度计为上海美析仪器有限公司产品.试验方法.菌种活化制备 个 培养基在超净工作台内将试管母种接种到 培养基平板中心位置每个菌株活化 个平板于 恒温培养箱内培养活化备用.温度试验选取菌丝长至平板/的活化平板用 的打孔器在近菌落边缘位置将其打成圆片然后接种于 培养基上将接种好的平板放置在的恒温培养箱中培养每个菌株 个重复每 天观察和记录一次菌丝生长情况.胞外酶活力测定酶活性测定的实验具体步骤按相关酶测定试剂盒说明书的方法 所有酶活进行 次生物学重复最后取平均值作为最终数据开展分析.统计学分析以上所得数据使用 .进行单因素方差分析 结果与分析.温度试验结果 个黑木耳菌株在 培养基上的菌丝生长速度及生长状况测定结果见表 根据菌丝生长速度差异显著性(由表 也可以看出再进一步开展的组间显著性差异分析发现各组间存在显著性差异说明不同分组能分别代表低长速、中等长速和高长速的菌株表 黑木耳供试菌株生长特性菌株号生长速度/()长势菌落特征.菌丝边缘整齐较浓密菌落光滑.菌丝边缘整齐浓密洁白.菌丝边缘整齐浓密洁白菌落光滑.菌丝边缘整齐菌丝洁白菌落光滑.菌丝边缘整齐菌丝洁白.菌丝边缘整齐较浓密菌落光滑.菌丝边缘整齐菌丝洁白.菌丝边缘整齐菌丝粗壮菌丝细密.菌丝边缘整齐菌丝细疏贵 州 科 学():续表 菌株号生长速度/()长势菌落特征.菌丝边缘整齐菌丝细密菌落光滑.菌丝边缘整齐菌丝粗壮菌丝细密.菌丝边缘整齐洁白菌丝细疏注:同列里不同英文小写字母表示各菌株在.水平上存在差异显著性下同“”表示长速和菌落特征均较好“”次之表 不同分组菌株生长速度分 组生长速度/().菌株长速对 种胞外酶活性的影响.菌株长速对漆酶活性的影响通过单因素方差检验分析(表)得出:个黑木耳菌株表现的产漆酶能力不同多数菌株间存在显著差异()其中 号菌株漆酶活性最高达到 /其次为 号 /、号 /、号 /、号 /、号 /、号 /、号 /、号 /、号 /、号 /号最小只有 /显著低于其他菌株 由表 可以看出根据 温度实验对长速分组结果为依据 组(长速最快)、组(长速中等)和 组(长速最慢)之间的漆酶活力达到显著差异其中 组最高为 /组 /排中间 组最低只有 /从中可以看出菌丝长速与漆酶活性间存在正相关关系表 不同菌株对胞外酶活性的影响(单因素方差检验)菌株号胞外酶漆酶活性/(/)木聚糖酶活性/(/)纤维素酶活性/(/).续表 菌株号胞外酶漆酶活性/(/)木聚糖酶活性/(/)纤维素酶活性/(/).表 不同长速菌株对胞外酶活性的影响分组胞外酶漆酶活力/(/)木聚糖酶活性/(/)纤维素酶活性/(/).菌株长速对木聚糖酶活性的影响由表 可知供试黑木耳菌株表现的产木聚糖酶能力各不同除菌株 和 号间及 和 号间无显著差异(号 号号 号 号 号 号 号 号 号 号由表 可知木聚糖酶活性在 组(长速最快)、组(长速中等)和 组(长速最慢)之间的显著方面只有 组与其他两组存在显著差异而 组和 组间未达到显著差异 从检测数据上看 组最高为 /组 /排中间 组最低只有 /从中可以看出菌丝长速与木聚糖酶活性间未体现出绝对的正相关关系.菌株长速对纤维素酶活性的影响通过表 中纤维素酶活性结果可以看出供试黑木耳菌株表现的产纤维素酶能力各不同大多数菌株间存在显著差异(号 号 号 号 号 号 号 号 号 号 号 由表 中纤维素酶活性数据可知在 组(长速最快)、组(长速次之)和 组(长速最慢)之间的显著方面只有 组与其他两生命科学/第 卷组存在显著差异而 组和 组间差异不显著其中 组最高为 /组 /次之 组最低为 /从中可以看出菌丝长速与纤维素酶活性间存在正相关关系长速最快的菌株纤维素酶活性最高.菌株长速对 种胞外酶酶活性趋势的影响由图 可以看出基于 个不同长速(组(长速最快)、组(长速中等)和 组(长速最慢)且组间达到显著差异()的菌株组合其漆酶活性和纤维素酶活性的趋势与菌丝生长速度呈现出正相关的关系即菌丝长速越高其酶活性越高反之亦然而木聚糖活性则在菌丝长速逐渐降低时呈现先降后升的趋势且上升趋势较明显通过线性情况可以看出木聚糖酶线性最平缓纤维素酶次之漆酶线性最大 综合可以看出漆酶和纤维素酶活性与菌丝长速存在正相关关系而木聚糖酶则与菌丝长速无正相关关系#$图 基于不同长速的胞外酶活性趋势 讨论与结论胞外酶活性的强弱与黑木耳整体生长发育和生物量关系密切掌握黑木耳全程胞外酶活性特征包括胞外酶的分泌规律、活性强弱及变化趋势等进而指导其在黑木耳各生长发育过程中对基质内木质纤维素等营养成分的降解规律对栽培基质利用率的提升及基质材料选择有重要指导意义 漆酶属于多酚氧化酶能很好地参与木质素的降解过程其活性的高低也能反向说明培养基质对菌株漆酶诱导力的强弱如和耀威等通过 种栽培基质诱导毛木耳 液体发酵比较其产漆酶活力情况发现麦麸更适合作为提高毛木耳 菌株产漆酶能力的诱导物 纤维素酶对纤维素的分解具有重要作用它属于诱导酶其分泌量与菌丝生长发育过程存在正相关性因此其活性高低在一定程度上也能反映菌龄长短 木聚糖酶属于水解酶和胞外酶类它能破坏植物纤维组织是一组能降解半纤维素的酶的总称关于胞外酶和食用菌生长发育等相关研究开展已有较好的基础如韩增华等对 个黑木耳原种胞外酶活性的研究发现胞外漆酶、多酚氧化酶和纤维素酶活性的变化趋势大致相似严培兰等通过对不同黑木耳菌株开展抗霉能力、产量和胞外半纤维素酶、漆酶、多酚氧化酶、羧甲基纤维素酶、过氧化物酶活性间相关性最终发现不同胞外酶的活性高低与抗霉性强弱存在一定相关性而产量高低则与抗霉性强弱呈正比韩增华等开展的黑木耳胞外酶活变化与栽培性状比较的研究结果表明黑木耳菌株都会产生纤维素酶但对纤维素的降解水平存在差异纤维素酶活力和产量无相关性但试验得出纤维素酶活性高峰出现早晚与菌丝长速呈现正相关的关系李娟等开展的金顶侧耳不同生长期几种胞外酶活性变化研究中也发现纤维素酶活性高峰出现早晚与菌丝长速呈现正相关的关系而赵淑英等对 个金针菇菌株菌丝的生长速度及胞外酶活力比较则发现长速最慢的菌株 号其木聚糖酶、漆酶的活力却较高 本研究中发现漆酶和纤维素酶活性虽然有差异但是其变化趋势与菌丝长速一致而木聚糖酶活性变化与菌丝长速则无明显相关性甚至出现长速最慢的组活性显著高于长速居中的组的现象研究结果与前人较为一致本试验以长速达到显著差异的()组菌株作为试验材料以漆酶、纤维素酶和木聚糖酶活性作为指标以期揭示菌丝长速与 种胞外酶的相关性发现漆酶和纤维素酶活性与菌丝长速存在正相关木聚糖酶活性与菌丝长速无明显相关性表明可通过菌丝长速快慢基本判定漆酶和纤维素酶活性的高低而无法判定木聚糖酶的活性 本研究结果能为黑木耳优质菌株的筛选和选育提供参考依据为黑木耳种质资源数据库及菌种质量快速检测提供数据支撑参考文献【】姚方杰张友民鲁丽鑫等.黑木耳遗传育种研究进展.菌物研究():.姚方杰孙鹏张友民.黑木耳种质杂交创新的流程与关键技术.吉林农业大学学报():.李长田谭琦边银丙等.中国食用菌工厂化的现状与展望.菌物研究():.贵 州 科 学():贵州悬钩子属一新记录何选泽官纪元陈云飞龙 婷李晓芳杨加文(贵州省植物园贵州 贵阳)摘 要:贵州省地理环境多样造就了丰富的植物资源随着调查工作的不断深入越来越多的野生植物资源在贵州被发现 本文报道了贵州悬钩子属一新记录种三叶悬钩子 .它在贵州的发现丰富了贵州的维管束植物资料为贵州中草药和水果增加了本底资源具备一定的科学研究价值关键词:贵州新记录三叶悬钩子中图分类号:文献标识码:文章编号:().():.:刘斌.食用菌栽培学实验课教学改革与实践.菌物研究():.赖春芬杨羽茜张海洋等.种食用菌废菌糠的营养成分及胞外酶活性.贵州农业科学():.和耀威李鹏向准等.种栽培基质诱导对毛木耳 液体发酵产漆酶活力的影响.贵州科学():.韩增华张介驰张丕奇等.黑木耳原种胞外酶活性的研究.生物技术():.严培兰高君辉谭琦等.黑木耳的抗霉能力、产量性状与不同胞外酶活的相关性.食用菌学报():.韩增华张丕奇孔祥辉等.黑木耳胞外酶活变化与栽培性状比较的研究.食用菌学报():.李娟倪新江樊守金等.金顶侧耳不同生长期几种胞外酶活性变化.吉林农业大学学报():.赵淑英王立安.个金针菇菌株菌丝的生长速度及胞外酶活力比较.湖北农业科学():.收稿日期:修回日期:基金项目:贵州省科技计划项目(黔科合重大专项字号、黔科合成果 号、黔科合支撑一般)贵州省食用菌现代化农业产业技术体系建设任务书(年度)作者简介:和耀威()男云南人傈僳族学士研究实习员主要从事野生食用菌资源开发与栽培相关研究通讯作者:向 准()男贵州人苗族硕士副研究员主要从事食用菌品种选育与栽培相关研究生命科学/第 卷