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第 60 卷 第 4 期 土 壤 学 报 Vol.60，No.4 2023 年 7 月 ACTA PEDOLOGICA SINICA Jul.，2023 *农业农村部环境保护科研监测所基础前沿项目（2021-jcqyrw-xwm）、中国农业科学院科技创新工程项目和公益性行业（农业）科研专项（201503121-04）资助 Supported by the Fundamental Cutting-edge Projects of Agro-Environmental Protection Institute，Ministry of Agriculture and Rural Affairs，China（No.2021-jcqyrw-xwm），the Scientific and Technological Innovation Project of the Chinese Academy of Agricultural Sciences and the Special Fund for Scientific Research on Agricultural Public Causes of China（No.201503121-04）通讯作者 Corresponding author，E-mail：； 作者简介：胡 菏（1994），女，贵州铜仁人，硕士研究生，主要从事生物多样性与生态农业研究。E-mail： 收稿日期：20211109；收到修改稿日期：20220325；网络首发日期（）：20220510 http:/ DOI：10.11766/trxb202111090520 胡菏，李胜君，王蕊，吴宪，李玉洁，赵建宁，李刚，修伟明.氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响J.土壤学报，2023，60（4）：11231133.HU He，LI Shengjun，WANG Rui，WU Xian，LI Yujie，ZHAO Jianning，LI Gang，XIU Weiming.Effects of Nitrogen Fertilization Combined with Straw Incorporation on Soil Protist Community J.Acta Pedologica Sinica，2023，60（4）：11231133.氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响*胡 菏1，李胜君1，王 蕊1，吴 宪1，李玉洁3，赵建宁1，李 刚2，修伟明1（1.农业农村部环境保护科研监测所农业农村部产地环境污染防控重点实验室，天津 300191；2.农业农村部环境保护科研监测所天津市农业环境与农产品安全重点实验室，天津 300191；3.喀喇沁旗农牧局，内蒙古赤峰市 024400）摘 要：长期施用化肥所致的不利影响严重威胁到环境和人类的健康，已引起全世界的广泛关注。将生态友好的作物秸秆归还农田是减少化肥投入和缓解环境问题的极具潜力的农业管理措施。原生生物是土壤中丰富且多样的真核生物，是土壤微生物组的重要组成部分。为研究氮肥配施秸秆对原生生物群落的影响，设置了 2 4（2 个秸秆还田组4 个氮梯度）全因子交互田间定位试验，采用 Illumina 高通量测序技术研究了 8 种不同施肥处理下土壤原生生物群落多样性、组成和潜在功能的变化，并结合土壤理化性质分析探究驱动土壤原生生物群落变化的关键环境因子。结果表明：绿藻门（Chlorophyta）、锥足亚门（Conosa）、丝足虫门（Cercozoa）和纤毛虫门（Ciliophora）是所有处理中的优势类群。氮肥施用降低了土壤原生生物的多样性，而配施秸秆提升了土壤原生生物的多样性，并且在高施氮水平提升效果更为显著。绿藻门（Chlorophyta）的相对丰度随氮肥施用量增加呈下降趋势。丝足虫门（Cercozoa）和纤毛虫门（Ciliophora）的相对丰度在秸秆还田组中随氮肥施用量的增加而升高。捕食类原生生物（phagotrophs）在所有处理中均为绝对优势类群。与单施化肥处理相比，配施秸秆提高了捕食类原生生物的相对丰度，但降低了光养类原生生物（phototrophs）的相对丰度。单施化肥情况下，寄生类原生生物（parasites）表现出对高施氮量的偏好。土壤有机质和 pH 是土壤原生生物群落变化的重要驱动因子。总之，本研究证明了氮肥施用耦合秸秆还田措施能够影响土壤原生生物群落，同时明确了对农业管理措施变化反应敏感的原生生物类群。关键词：氮肥施用；秸秆还田；原生生物；多样性；群落组成；功能群 中图分类号：X172 文献标志码：A Effects of Nitrogen Fertilization Combined with Straw Incorporation on Soil Protist Community HU He1,LI Shengjun1,WANG Rui1,WU Xian1,LI Yujie3,ZHAO Jianning1,LI Gang2,XIU Weiming1 1124 土 壤 学 报 60 卷 http:/(1.Agro-Environmental Protection Institute,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Key Laboratory of Original Agro-environment Pollution Prevention and Control of Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Tianjin 300191,China;2.Agro-Environmental Protection Institute,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Tianjin Key Laboratory of Agro-environment and Agro-product Safety,Tianjin 300191,China;3.Agricultural and Pastoral Bureau of Karakqin Banner,Chifeng,Inner Mongolia 024400,China)Abstract:Long-term chemical fertilization(especially nitrogen fertilization)under intensive land-management practices in agriculture is of great concern globally due to its adverse influence on the environment and human health.Returning the eco-friendly crop residues to farmland is a promising way of reducing chemical fertilizer input and alleviating environmental problems.【Objective】Protists are unicellular eukaryotes with enormous abundance and diversity,and play versatile functional roles to improve soil fertility and agricultural productivity.Thus,they comprise an integral component of soil microbiota in the agroecosystem.However,little is known about the responses of the soil protist community to nitrogen fertilization in combination with straw incorporation.【Method】Here,a fixed field trial with 2 4 full-factor interaction was performed to examine the variations in diversity,composition,and potential function of the protistan community using Illumina high-throughput sequencing under eight different fertilization treatments(2 straw returning groups 4 nitrogen gradients),Also,the key forces driving the variation in soil protistan community were determined in combination with edaphic property analysis.【Result】The phyla Chlorophyta,Conosa,Cercozoa and Ciliophora were dominant in the soils for all treatments.Nitrogen fertilization diminished the diversity of soil protists,whereas straw returning in general modified such impacts,with more pronounced effects under higher nitrogen application rates.Regardless of whether straw was added,the relative abundance of Chlorophyta exhibited an overall decrease with increased nitrogen gradient.Cercozoa and Ciliophora presented an increase in proportion with the amount of nitrogen fertilizer in the straw returning group.In the current study,the protistan functional community was predominated by phagotrophs in all treatments.Compared to treatments without straw addition,the implementation of straw returning enhanced the relative abundance of phagotrophs,but suppressed the proportion of phototrophs.Protistan parasites preferred a high nitrogen input under exclusive nitrogen fertilizer,with highest proportion in N300 treatment,which was significantly higher than those in all other treatments.Soil properties were important environmental factors determining the shifts in soil protist community,with soil organic matter and pH exhibiting the most intensive influences as revealed by redundancy analysis(RDA)and Pearsons correlation analysis.【Conclusion】This study provides experimental evidence that nitrogen fertilization coupled with straw incorporation have consequences for the soil protist community.It also shows that the phylogenetic and functional taxa of protists are responsive to such agricultural management regime alterations.Future studies should aim at deciphering the trophic associations among microorganisms,as well as constructing agricultural soil microhabitat beneficial for crops based on reasonable fertilization regimes and utilization of biotic resources like protists.Key words:Nitrogen fertilization;Straw returning;Protists;Diversity;Community composition;Functional groups 集约化农业管理措施的广泛推行旨在提高作物产量以满足人类日益增长的粮食需求。由于作物生长需要大量的氮素，氮素供应成为直接影响作物产量的重要因子1。增加化学氮素投入可显著促进农业生产2，但长期大量施用氮素会导致土壤酸化2、肥力下降3、养分失衡4、温室气体排放上升5以及生物多样性丧失6，继而降低土壤的生态系统服务多功能性7。土壤质量每况愈下，人类健康受到严重威胁。如何培肥地力和提高养分循环效率以实现土壤生产力不断提升与生态环境协调发展，已成为现代农业发展所需解决的关键问题8-9。土壤微生物是土壤-植物系统中生源要素迁移转化的引擎，土壤中有机质的分解与积累，氮素转化（包括生物固氮）等过程无不与微生物的活动密切相关10。现代可持续和环境友好型农业鼓励有机肥和化学氮肥的联合应用。秸秆还田是提升土壤肥力的有效措施，能够显著提高土壤有机碳含量和减少氮素流失11，从而减少化肥过量施用对环境所带来的负面影响。秸秆还田所带入的有机物质和矿质元素有利于土壤微生物的生长和繁殖，反之微生物数量的增加促进了秸秆分解12。秸秆在土壤微生物的分解作用下发生矿化反应，土壤养分得到补充和4 期 胡 菏等：氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响 1125 http:/ 良性循环利用13。秸秆还田措施真正实现了“取之于田，用之于田”。土壤微生物组是维系陆地生态系统地上-地下相互作用的纽带，那么，秸秆还田对土壤微生物多样性的影响直接影响着地下和地上生态系统结构和功能稳定性。有研究7表明，氮肥配施秸秆对土壤理化性质和微生物多样性的影响大于单独施氮处理，其中秸秆还田增强了土壤微生物网络的复杂性。目前有关农业管理措施对土壤微生物组影响的研究大多集中在细菌和真菌群落，而对土壤原生生物群落影响的了解尚不全面。原生生物包括除了植物、真菌和动物外的所有真核生物14，在土壤真核群落中占据很大比例，是土壤微生物组的重要组成部分15。在土壤生态系统中，原生生物具有重要的服务功能，如调节有机质分解、影响养分循环过程、维持土壤肥力和植物生产力14，16。原生生物包括光养类（Phototrophs）、捕食类（Phagotrophs）、寄生类（Parasites）以及兼性营养类等多种功能类群，构成地下微食物网的基础17。捕食类原生生物通过捕食个体更小的生物（如细菌、真菌、藻类、线虫和其他原生生物），控制微生物种群的丰度和功能17-18。而这种捕食活动重新分配了所获猎物体中的养分，促进土壤养分的周转，在调节土壤肥力方面发挥关键作用。此外，原生生物还可通过降低植物根际环境中致病菌的丰度和毒性或与植物有益微生物协同作用，达到抑制植物病害、促进植物生长、保持植物健康的作用18-20。Guo 等20表明原生生物在激发植物性能中发挥重要作用，可以将其作为微生物因子用于调控和指示植物健康。同时，原生生物是微生物组中对施肥处理和季节变化较敏感的种群，具有监测农田土壤质量的潜力7。土壤原生生物是生态系统物质循环的重要参与者，然而，由于原生生物群落的研究起步较晚，开展土地管理策略变化对土壤原生生物群落影响的研究十分必要。为此，本研究通过布设包括 2 个秸秆还田组和 4 个氮肥梯度的全因子交互田间定位试验，探究氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响，明确主要环境驱动因子，以期增进对原生生物在土壤质量变化中的指示作用及其在微生物组中重要性的了解，同时为氮肥施用配合秸秆还田技术的优化提供基础数据与理论支撑。1 材料与方法 1.1 研究区概况与土壤样品采集 田间试验在位于天津市宁河区的农业农村部环境保护科研监测所实验站（3948N，11771E）中进行。该实验站的气候条件、土壤类型等信息见吴宪等21。田间试验始于 2015 年 10 月，采取 2 4全因子交互式设计，包括 2 个秸秆还田组（秸秆不还田组和秸秆还田组）和 4 个氮肥梯度，分别是不施氮肥秸秆不还田处理（CK）、N 100 kghm2处理（N100）、N 200 kghm2处理（N200）、N 300 kghm2处理（N300）、秸秆还田处理（S）、秸秆还田配施 N 100 kghm2处理（SN100）、秸秆还田配施 N 200 kghm2处理（SN200）、秸秆还田配施 N 300 kghm2处理（SN300）共计 8 个处理，各 3 个重复小区。试验中施用的肥料包括无机复合肥（NP2O5K2O 为 2888）、磷肥（P2O5含量 12%）、钾肥（K2O含量 60%）、尿素（N 含量 46%）。在冬小麦和夏玉米 播 种 时 分 别 将 相 当 于 纯 氮 量 60 kghm2、120 kghm2、180 kghm2的无机复合肥作为基肥施入相应的试验小区，并在小麦苗期和玉米拔节期分别 将 相 当 于 纯 氮 量 40 kghm2、80 kghm2、120 kghm2的尿素作为追肥施入。所有处理所施用的磷肥和钾肥量均一致（P2O5：187.5 kghm2、K2O：63 kghm2），在冬小麦和夏玉米播种时一次性施入。按照当地常规管理方式，所有处理中小麦秸秆全部粉碎还田，玉米季仅秸秆还田组中的玉米秸秆粉碎为小段后通过耕翻方式还田，因此本研究中的秸秆还田专指玉米秸秆还田。田间管理措施采用当地常规生产方式。在玉米收获前（2020 年 9 月）采集土壤样品，采样深度 020 cm。在每个处理小区中，使用直径5 cm 的土壤采样器随机采集 5 个土芯并混合成 1 个土壤样品，装入灭菌自封袋暂存于低温保温箱中，并 迅 速 运 送 回 实 验 室。将 每 份 土 壤 样 品 过 筛（2 mm），去除杂质后分为 3 份子样品：用于高通量测序分析的子样品于70保存；用于土壤硝态氮和铵态氮的测定的子样品于 4冷藏；第 3 份子样品经风干后于室温保存用于其他理化性质分析。1.2 土壤理化性质测定 土壤理化性质的测定方法参见土壤农化分1126 土 壤 学 报 60 卷 http:/ 析22。采用烘干法测定土壤含水量（Moisture Content，MC）；采用复合电极法测定土壤 pH水土比（v/v）为 2.51；土壤有机质（Soil Organic Matter，SOM）、全氮（Total Nitrogen，TN）、全磷（Total Phosphorus，TP）和有效磷（Available Phosphorus，AP）分别采用重铬酸钾容量法、半微量凯氏法、HClO4-H2SO4消煮钼锑抗比色法和 NaHCO3浸提钼锑抗比色法测定；土壤样品经 0.01 molL1 CaCl2溶液浸提后使用连续流动分析仪（AA3，SEAL Analytical，德国）测定铵态氮（4NH-N）和硝态氮（NO3-N）。1.3 高通量测序及生物信息学分析 使 用Fast DNA Spin Kit for Soil（MP Biomedicals，美国）从0.5 g土壤提取DNA，提取步骤参照试剂盒操作说明书。DNA的完整性通过1.0%的琼脂糖凝胶电泳判断，并使用NanoDrop2000超微量分光光度计（NanoDrop Technologies，hermo Scientific，MA，美国）测定DNA吸光率，计算DNA浓度并检验纯度。用带有barcode序列的引物组F-TAReuk454FWD1/R-TAReukREV323扩增真核生物18S rRNA基因的V4高变区序列。使用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit（Axygen Biosciences，Union City，CA，美国）对PCR扩增子进行纯化，并经QuantiFluor-ST（Promega，美国）定量后，将纯化的扩增子等摩尔混合后，在Illumina MiSeq测序仪上进行测序，扩增子测序交由上海美吉生物医药科技有限公司（Majorbio Bio-Pharm Technology Co.，上海）完成。使用QIIME（Quantitative Insights Into Microbial Ecology）（1.9.1）对原始序列进行质量筛选和修剪24，使用UPARSE软件（7.0.1090）用于嵌合体移除25，在97%的相似度水平上将序列聚类成操作分类单元（Operational Taxonomic Units，OTUs），选择每个OTU中数量最多的序列作为代表性序列用于分类学注 释。通 过 与PR2数 据 库（Protist Ribosomal Reference Database）（version_4.5）比对以确定每个OTU的 分 类 学 信 息26。去 除Rhodophyta、Streptophyta、fungus、Opisthokonta_X、后生动物等真核生物类群以获得最终的原生生物OTU分类表。参照相关文献人工划分原生生物功能群，包括捕食类、光养类、寄生类、其他消费者类（包括一些寄生兼捕食型、光养兼捕食型等）以及其他无法归类的27-28。原始测序数据已提交至美国国家生物技术信 息 中 心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）数据库，登录号为PRJNA 766328。1.4 统计分析 采用单因素方差分析（One-way analysis of variance，AONVA）中的邓肯（Duncan）事后检验法检验不同处理间土壤理化性质的差异，P 值设置为0.05。皮尔森（Pearson）相关分析采用SPSS 20.0（IBM SPSS Inc.）进行。不同处理间原生生物群落结构相异性评价采用基于Bray-Curtis距离矩阵的主坐标分析（Principal Co-ordinates Analysis，PCoA）完成，不同处理间差异显著性通过R语言的vegan包 进 行 相 似 性 分 析（Analysis of Similarities，ANOSIM）和评价。采用冗余分析（Redundancy Analysis，RDA）明确驱动土壤原生生物群落组成变化的关键驱动因子。所有数据采用R（v4.0.3）或Origin 2018进行可视化处理，并在Adobe Illustrator中进行图像整合。2 结 果 2.1 氮肥配施秸秆后土壤理化性质变化 由表1可见，土壤pH随氮肥施用量的增加而显著降低（P 0.05），秸秆还田整体上提高了土壤pH。与配施秸秆处理相比，单施化肥处理表现出更高的SOM含量（P 0.05）。与单施化肥处理相比，秸秆还田显著降低了土壤3NO-N含量（P 0.05）。双因素方差分析结果表明（表2）：氮肥对土壤SOM、MC、AP、pH、4NH-N、3NO-N、TN影响显著（P 0.05）；秸秆还田显著改变土壤SOM、AP、pH、3NO-N（P 0.05）；施氮与秸秆还田对土壤SOM、MC、AP、3NO-N表现出显著的交互作用（P 0.05）。2.2 土壤原生生物群落多样性和组成变化 本研究共获得1 289 885条高质量的原生生物序列，聚类得到1 045个OTU。如图1所示，秸秆不还田组（单施化肥）中，香农指数随施氮量的增加而降低；而在秸秆还田组中，除0 kghm2施氮量外，香农指数随施氮量增加而增加，但变化幅度较小（3.694.49）。在这些处理中，仅SN300处理的香农指数较相应的N300处理显著增加（P 0.05）。4期 胡 菏等：氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响 1127 http:/ 表 1 氮肥配施秸秆后土壤理化性质 Table 1 Soil physical and chemical properties 处理 Treatment pH 有机质 Organic matter/（gkg1）全氮 Total N/（gkg1）全磷 Total P/（gkg1）有效磷 Available P/（mgkg1）铵态氮 4NH-N/（mgkg1）硝态氮 3NO-N/（mgkg1）含水量 Moisture content/（gkg1）CK 8.400.02a 18.490.39d 0.960.01c 0.780.05b55.941.18bc8.730.28bc 13.870.80d 208.42.7e N100 8.190.02bc 24.810.92a 1.200.04ab0.790.04b49.882.49cd9.890.57bc 21.593.33cd 237.18.3bcN200 8.020.09d 25.271.16a 1.280.07a 0.720.05b50.191.39cd12.775.10ab 91.9021.67a 253.73.5a N300 7.980.04d 26.380.66a 1.310.02a 0.740.05b35.103.30e8.990.59bc 81.409.47a 247.110.5abS 8.400.05a 20.110.93cd 1.040.06c 0.720.01b47.451.95d6.980.23c 16.440.33cd 231.77.3c SN100 8.280.07b 22.311.30b 1.150.11b0.900.10a67.513.87a7.100.61c 17.462.07cd 229.35.0cdSN200 8.220.05bc 20.340.73cd 1.220.05ab0.740.07b56.696.11b10.922.23bc 32.491.68c 250.63.5a SN300 8.170.02c 21.711.58bc 1.220.07ab0.710.02b33.664.88e16.234.78a 58.687.80b 216.811.5de注：数据为平均值 标准差（n=3）；同列不同小写字母表示不同处理间差异显著（P 0.05）。CK为不施氮肥处理、N100为N 100 kghm2处理、N200为N 200 kghm2处理、N300为N 300 kghm2处理、S为秸秆还田处理、SN100为秸秆还田配施N 100 kghm2处理、SN200为秸秆还田配施N 200 kghm2处理、SN300秸秆还田配施N 300 kghm2处理。下同。Note：The data were average value SD（n=3）；different lowercase letters in the same column indicate significant difference between treatments（P 0.05）.CK indicates treatment without nitrogen fertilization and straw incorporation，N100 indicates treatment with N fertilizer application rate of 100 kghm2，N200 indicates treatment with N fertilizer application rate of 200 kghm2，N300 indicates treatment with N fertilizer application rate of 200 kghm2，S indicates treatment with straw incorporation and no nitrogen fertilization，SN100 indicates treatment with straw incorporation and N fertilizer application rate of 100 kghm2，SN200 indicates treatment with straw incorporation and N fertilizer application rate of 200 kghm2，and SN300 indicates treatment with straw incorporation and N fertilizer application rate of 300 kghm2.The same below.表 2 土壤理化性质和原生生物多样性的双因素方差分析 Table 2 Two-factor ANOVA for soil physical and chemical properties and protist diversity 有机质 Organic matter 含水量 Moisture content 有效磷Available PpH 铵态氮4NH-N硝态氮 3NO-N全磷 Total P 全氮 Total N 香农指数 Shannon index N 0.00*0.00*0.00*0.00*0.01*0.00*0.01*0.00*0.36 S 0.00*0.24 0.03*0.00*0.84 0.00*0.73 0.31 0.26 NS 0.00*0.00*0.00*0.01*0.01*0.00*0.11 0.12 0.05 注：N为氮肥施用，S为秸秆还田，NS为氮肥施用与秸秆还田交互作用。*表示 P 0.05，*表示 P 0.001。Note：N indicates the influence factor of nitrogen fertilization，S indicates the influence factor of straw returning，and NS presents the double factors of nitrogen fertilization and straw returning.*indicates P 0.05，*indicates P 0.001.系统发育分析表明，原生生物群落分属9个超级组、19个门、61个纲、108个目、202个科、338个属和396个种。土壤原生生物群落在门水平上的组成情况如图2所示，不同处理的优势门相同，其中绿藻门（Chlorophyta）平均相对丰度为20.74%42.21%，锥足亚门（Conosa）平均相对丰度为15.50%35.05%，丝足虫门（Cercozoa）平均相对丰度为11.18%27.09%，纤毛虫门（Ciliophora）平均相对丰度为4.29%15.95%。如图3所示，秸秆不还田组，随施氮量的增加，绿藻门（Chlorophyta）的相对丰度降低，锥足亚门（Conosa）和纤毛虫门（Ciliophora）的相对丰度均呈降低-升高-降低趋势，丝足虫门（Cercozoa）的相对丰度呈升高-降低-升高趋势，而顶复门（Apicomplexa）的相对丰度在N300处理中最高（P 0.05）。秸秆还田组，随施氮量的增加，绿藻门（Chlorophyta）的1128 土 壤 学 报 60卷 http:/ 相对丰度整体降低，而锥足亚门（Conosa）和丝足虫门（Cercozoa）的相对丰度呈增加趋势。注：*表示P 0.05。下同。Note：*means P 0.05.The same below.图 1 不同处理土壤原生生物群落的香农指数 Fig.1 Shannon index of soil protist community of different treatments 图 2 门水平上的土壤原生生物群落组成 Fig.2 Soil protist community composition at the phylum level 图 3 原生生物群落优势门的相对丰度变化 Fig.3 Changes in relative abundances of the dominant phylum of protist community 2.3 土壤原生生物群落功能组成变化 土壤原生生物群落的功能组成如图4所示。各处理中，捕食类原生生物占比57.00%79.57%，光养类占比12.11%27.78%，寄生类占比1.40%13.54%。同等施氮量条件下，秸秆还田处理较秸秆不还田处理的捕食类原生生物的相对丰度提高了4期 胡 菏等：氮肥配施秸秆对土壤原生生物群落的影响 1129 http:/ 7.95%14.01%，而光养类原生生物的相对丰度则降低了0.8%12.0%。N300处理的寄生类原生生物比例（13.54%）显著高于其他处理（P 0.05）。注：其他消费者类包括一些光养兼捕食类或寄生兼捕食类等消费者。Note：Other consumers include some consumers which both are phototrophic and phagotrophic or parasitic and phagotrophic.图 4 土壤原生生物群落功能组成 Fig.4 Functional composition of soil protist community 2.4 土壤原生生物群落结构变化 PCoA分析结果（图5）表明，秸秆不还田组中，各处理间原生生物群落结构差异不显著，但均显著 图 5 土壤原生生物群落的主坐标分析（PCoA）Fig.5 Principal coordinates analysis（PCoA）of soil protist community 不同于N200处理。而就秸秆还田组而言，仅SN100与SN200间群落结构差异显著。对比秸秆不还田组与秸秆还田组发现，仅N200与SN200处理间群落结构表现出显著差异。2.5 土壤原生生物群落与土壤理化性质间的关系 冗余分析（Redundancy Analysis，RDA）结果表明，轴1和轴2分别解释原生生物群落变异的21.12%和5.26%（图6）。Mantel检验结果表明，pH（R2=0.562，P=0.001）、TN（R2=0.458，P=0.002）、SOM（R2=0.337，P=0.017）、3NO-N（R2=0.492，P=0.003）和4NH-N（R2=0.309，P=0.034）是影响原生生物群落组成的关键因子。注：MC表示含水量，SOM表示土壤有机质，TN表示全氮，TP表示全磷，4NH-N表示铵态氮，3NO-N表示硝态氮，AP表示有效磷。Note：MC indi