代谢相关脂肪性肝病患者血清HIF-1α、Chemerin和脂联素水平变化及临床意义探讨∗.pdf

基金项目:山东省中医药科研研究项目(编号:2020Q063)作者单位:261042 山东省烟台市 滨州医学院附属烟台医院检验科(蔡欣);血液内科(辛春红);肝胆胰脾外科(牛洪凯);烟台市中医医院检验科(兰春祥)第一作者:蔡欣,女,35 岁,医学硕士,主管检验师。E-mail:li-通讯作者:兰春祥,E-mail:1256447326 非酒精性脂肪性肝病代谢相关脂肪性肝病患者血清 HIF-1、Chemerin和脂联素水平变化及临床意义探讨蔡 欣,辛春红,牛洪凯,兰春祥【摘要】目的分析代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者血清缺氧诱导因子-1(HIF-1)、Chemerin 和脂联素(ADPN)水平变化及其临床意义。方法 2020 年 3 月 2022 年 10 月我院诊治的 MAFLD 患者 86 例和同期经年龄和性别匹配的健康体检者 43 例,应用超声检查评估肝脂肪变程度,采用 ELISA 法检测血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平,应用受试者工作特征曲线下面积(AUC)分析血清指标评估 MAFLD 患者肝重度脂肪变的效能。结果 MAFLD 组血清 HIF-1 和 Chemerin 水平分别为(16.63.1)g/L 和(92.78.9)g/L,均显著高于对照组【分别为(9.22.1)g/L 和(60.49.5)g/L,均 P0.05】,而血清 ADPN 水平为(15.13.8)mg/L,显著低于对照组【(25.46.2)mg/L,P0.05】;35 例重度脂肪变 MAFLD 患者血清 HIF-1 和 Chemerin 水平分别为(19.93.7)g/L 和(107.910.5)g/L,显著高于 29 例中度脂肪变患者【分别为(16.31.9)g/L 和(92.98.7)g/L,P0.05】或 22 例轻度脂肪变患者【分别为(10.51.8)g/L 和(84.08.3)g/L,P0.05】,而血清 ADPN 水平为(12.32.8)mg/L,显著低于中度脂肪变患者【(16.44.8)mg/L,P0.05】或轻度脂肪变患者【(24.24.2)mg/L,P0.05】;多因素 Logistic 回归分析显示,空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、HIF-1 和 Chemerin 高水平及 ADPN 低水平是 MAFLD 患者发生肝重度脂肪变的独立危险因素(P0.05);联合应用血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平评估肝重度脂肪变的 AUC 为 0.920,显著高于三项指标单一评估的 0.846、0.742 和0.795(P0.05)。结论 MAFLD 患者存在血清 HIF-1 和 Chemerin 升高及 ADPN 水平下降,且三者变化与肝脂肪变程度相关,其临床意义值得进一步探究。【关键词】代谢相关脂肪性肝病;缺氧诱导因子-1;Chemerin;脂联素;诊断 DOI:10.3969/j.issn.1672-5069.2023.05.013 Changes of serum HIF-1,Chemerin and adiponectin levels in patients with metabolic-associated fatty liver diseasesCai Xin,Xin Chunhong,Niu Hongkai,et al.Clinical Laboratory,Yantai Hospital Affiliated to Binzhou Medical College,Yantai261042,Shandong Province,China【Abstract】ObjectiveThe aim of this study was to explore the changes of serum hypoxia-inducible factor-1(HIF-1),chemerin and adiponectin(ADPN)levels in patients with metabolic-associated fatty liver diseases(MAFLD).Methods86 patients with MAFLD and 43 healthy individuals at physical healthy examination matched by age and gender were consecutivelyencountered in our hospital between March 2020 and October 2022.Serum levels of HIF-1,Chemerin and ADPN were detectedby ELISA,and the hepatic steatosis was evaluated by ultrasonography.The area under the receiver operating characteristic curve(AUC)was applied to analyze the diagnostic performance of serum indicators on severe steatosis in patients with MAFLD.Results Serum HIF-1 and chemerin levels in patients with MAFLD were(16.63.1)g/L and(92.78.9)g/L,both significantlyhigher than(9.22.1)g/L and(60.49.5)g/L,P0.05 in the control,while serum ADPN level was(15.13.8)mg/L,significantly lower than(25.46.2)mg/L,P0.05 in the control;serum HIF-1 and chemerin levels in 35 patients withsevere hepatic steatosis were(19.93.7)g/L and(107.910.5)g/L,both significantly higher than(16.31.9)g/L and(92.98.7)g/L,P0.05 in 29 patients with moderate liver steatosis or(10.51.8)g/L and(84.08.3)g/L,P0.05 in 22 patients with mild steatosis,while serum ADPNlevel was(12.32.8)mg/L,much lower than(16.44.8)mg/L,P0.05 in patients with moderate steatosis or(24.24.2)mg/L,P 0.05 in patients with mild steatosis;themultivariate Logistic regression analysis showed that the fastingblood glucose,triglyceride,total cholesterol,low-densitylipoprotein cholesterol,HIF-1 and chemerin and low level ofADPN were the independent risk factors for severe steatosis in456实用肝脏病杂志 2023 年 9 月第 26 卷第 5 期 J Prac Hepatol,September.2023.Vol.26 No.5patients with MAFLD(P0.05);the AUC was 0.920 by the combination of serum HIF-1,chemerin and ADPN levels inpredicting severe steatosis in patients with MAFLD,much larger than 0.846,0.742 and 0.795(P0.05)by the three parameteralone.Conclusion Serum HIF-1 and chemerin levels increase,while serum ADPN level decrease in patients with MAFLD,andthe changes of the above three parameters are related to the steatosis degree in patients with MAFLD,and their clinical implicationsare worthy of further investigation.【Key words】Metabolic-associated fatty liver disease;Hypoxia-inducible factor-1;Chemerin;Adiponectin;Diagnosis 代谢相关脂肪性肝病(metabolic dysfunction as-sociated fatty liver diseases,MAFLD)既往被称为非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver diseases,NAFLD),2020 年亚太肝病学会将其更名为 MAFLD,其疾病谱包括非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎及其相关的肝纤维化和肝硬化等1。近年来,随着大众生活方式和饮食结构的改变,如久坐不动、高脂饮食等,糖尿病、肥胖及其代谢功能障碍人群增多,MAFLD 患病率逐年升高,已成为全球范围内最常见的慢性肝病之一2。早诊断并及时采取有效防治措施是延缓 MAFLD 病情进展、改善患者预后的重要方法,但 MAFLD 发病机制尚未完全阐明,临床仍缺乏积极有效的治疗手段。因此,分析影响 MAFLD疾病进展的相关因素,探究治疗的新方向,已成为国内外学者研究的热点3,4。脂肪负荷过重使 MAFLD患者肝细胞肿胀,引起肝窦变形及微循环障碍,血流减慢,局部组织缺氧,而缺氧是脂肪组织功能障碍的关键因素,可诱导脂肪纤维化及肝脏脂肪代谢异常,加剧 MAFLD 进展。缺氧也是 MAFLD 发生、发展的风险因素5。缺氧诱导因子-1(hypoxia induciblefactor 1,HIF-1)是细胞及组织缺氧标志。近年研究发现6,HIF-1 可通过上调血管内皮生长因子和血管生成素-2 表达,促进肝纤维化发展,诱导肝细胞癌变。脂联素(adiponectin,ADPN)为脂肪细胞特异性分泌蛋白,具有抗炎作用,还可增强肝脏对胰岛素的敏感性,延缓脂肪性肝炎进程,可能是 MAFLD疾病进展的保护因子7。另外,Chemerin 是一种新发现的脂肪因子,与机体血脂、血压、胰岛素抵抗等均存在相关性,参与代谢功能障碍的发生。近年研究指出8,Chemerin 可能通过调节脂代谢、炎症和胰岛素等通路,参与 MAFLD 的发病过程。本研究检测了 MAFLD 患者血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平变化,现将结果报道如下。1 资料与方法1.1 病例来源 2020 年 3 月 2022 年 10 月我院诊治的 MAFLD 患者 86 例,男性 52 例,女性 34 例;年龄为 30 63 岁,平均年龄为(38.66.9)岁。符合2020 年亚太肝病学会更新的 MAFLD 诊断标准9:基于血生化、影像学检查,同时符合超重/肥胖;型糖尿病;代谢功能障碍。3 项中任一项阳性,支持诊断。排除标准:既往有肝脏、脾脏或胆道手术史;合并病毒性肝炎;合并自身免疫性、酒精性肝病或药物性肝损害;合并甲状腺功能亢进或减退症、血液系统疾病、心肺功能不全、恶性肿瘤;妊娠或哺乳期女性;入组前 1 个月内应用过非甾体类抗炎药物。另选择同期经年龄和性别匹配的健康体检者 43 例作为对照组,男性 26 例,女性 17 例;年龄为 30 62 岁,平均年龄为(38.26.5)岁。本研究获得我院医学伦理委员会审核、批准。1.2 肝脏脂肪变程度判断 使用日本佳能 Aplio i900彩色多普勒超声诊断仪(探头频率为 1 8 MHz)探测肝脏,参考非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年更新版)9将肝脏脂肪变程度分为轻度(肝实质回声密集增强,肝内管道结构及膈肌清晰可见)、中度(肝脏形态饱满,近场回声增强,远场回声稍衰减,光点密集,肝内管道结构显示不清,膈肌回声中断)和重度(肝脏增大,近场回声明显增强,远场回声明显衰减,肝内管道结构和膈肌不可见)。1.3 实验室指标检测使用日本奥林巴斯株式会社提供的全自动生化分析仪检测空腹血糖(fastingplasma glucose,FPG)和其他血生化指标;采用 ELISA法检测血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平(武汉新启迪生物科技有限公司)。1.4 统计学方法 应用 R 4.1.2 软件进行统计学分析。对计量资料先行 Shapiro-Wilk 检验,判断是否服从正态分布。对符合正态分布者,以(xs)表示,采用 t 检验。应用 Logistic 回归分析影响 MAFLD 患者发生重度肝脂肪变的危险因素,并建立受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,以曲线下面积(areas under curve,AUC)分析血清指标评估 MAFLD 患者重度肝脂肪变的效能。可信区间为 95%,所有检验均为双侧检验,P0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 两组血糖和血脂水平比较 MAFLD 组 FPG、血清TG、TC 和 LDL-C 水平显著高于对照组(P0.05,表1)。556实用肝脏病杂志 2023 年 9 月第 26 卷第 5 期 J Prac Hepatol,September.2023.Vol.26 No.5表 1 两组血糖和血脂水平(xs)比较例数FPG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)MAFLD865.80.92.90.45.60.83.40.61.10.3对照组435.00.81.60.34.30.82.70.51.20.3 与对照组比,P0.052.2 两组血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平比较 MAFLD 组血清 HIF-1 和 Chemerin 水平显著高于对照组,而血清 ADPN 水平显著低于对照组(P0.05,表 2)。表 2 两组血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平(xs)比较例数HIF-1(g/L)Chemerin(g/L)ADPN(mg/L)MAFLD8616.63.192.78.915.13.8对照组439.22.160.49.525.46.2 与对照组比,P0.052.3 不同肝脂肪变的 MAFLD 患者血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平比较重度肝脂肪变的MAFLD 患者血清 HIF-1 和 Chemerin 水平显著高于中度或轻度脂肪变患者,而血清 ADPN 水平显著低于中度肝脂肪变或轻度肝脂肪变患者(P0.05,表3)。表 3 不同脂肪变患者血清 HIF-1、Chemerin和 ADPN 水平(xs)比较肝脂肪变例数HIF-1(g/L)Chemerin(g/L)ADPN(mg/L)轻度2210.51.884.08.324.24.2中度2916.33.992.98.716.44.8重度3519.93.7107.910.512.32.8 与轻度组比,P0.05;与中度组比,P0.052.4 影响 MAFLD 患者肝脂肪变程度的多因素Logistic 回归分析经 Logistic 回归分析显示,血清FPG、TG、TC、LDL-C、HIF-1 和 Chemerin 高水平及血清 ADPN 低水平是影响 MAFLD 患者肝重度脂肪变的独立危险因素(P0.05,表 4)。表 4 影响 MAFLD 患者肝脂肪变程度的 Logistic 回归分析 值SE 值Wald x2值OR 值95%CIPFPG0.8210.2967.6932.2731.105 4.6760.006TG0.7660.2777.6472.1511.033 4.4780.006TC0.6390.2675.7281.8951.012 4.4010.017LDL-C0.6120.2595.5831.8441.009 4.3470.018HIF-10.8050.2758.5692.2371.118 4.4740.018Chemerin0.7530.2817.1812.1231.024 4.5110.007ADPN-0.8060.2897.7780.4470.155 0.8400.0052.5 血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 评估 MAFLD患者肝重度脂肪变的效能情况经 ROC 曲线分析显示,联合应用血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 水平评估 MAFLD 患者肝重度脂肪变的 AUC 显著大于三项指标单一评估(P0.05),其评估效能最高(表5、图 1)。表 5 血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 评估 MAFLD 患者肝重度脂肪变的效能截断点AUC95%CI敏感度(%)特异度(%)P 值HIF-117.7g/L0.8460.754 0.93880.080.40.001Chemerin93.0g/L0.7420.632 0.85374.366.70.001ADPN15.8mg/L0.7950.703 0.88788.664.70.0013 项联合-0.9200.862 0.97894.362.70.001图 1 血清 HIF-1、Chemerin 和 ADPN 评估MAFLD 患者肝重度脂肪变的效能3 讨论目前,MAFLD 发病机制尚在探索阶段,但普遍认为其主要与脂代谢紊乱、胰岛素抵抗和氧化应激反应有关10。MAFLD 患者胰岛素敏感性显著降低,导致其对糖脂代谢的调节作用减弱,造成血糖及血脂水平异常,而这种改变越明显,肝脏脂肪沉积就越重,肝损伤也进一步加剧11。Chemerin 作为本世纪初期发现的脂肪因子,与肥胖和代谢综合征发生机656实用肝脏病杂志 2023 年 9 月第 26 卷第 5 期 J Prac Hepatol,September.2023.Vol.26 No.5制密切相关,可募集单核细胞源性巨噬细胞和浆细胞样树突状细胞聚集于炎症反应部位,调控局部炎症反应12。近年来有报道称13,Chemerin 可通过蛋白激酶 B 磷酸化及磷酸腺苷活化激酶活化,影响胰岛素敏感性,且能募集中性粒细胞和淋巴细胞聚集于肝内,加剧肝组织炎症反应,而作为胰岛素敏感性调节因子和炎症反应介质,参与 MAFLD 的发生和发展。Chemerin 与疾病发生机制的相关报道主要集中在肥胖和代谢综合征14,其是否通过影响胰岛素敏感性及肝内炎症反应,调控 MAFLD 的发生。健康人群血浆含有丰富的 ADPN,而在代谢综合征、肥胖和糖尿病人群 ADPN 水平显著下降15。MAFLD 患者肝组织和血浆 ADPN 水平均显著下降。ADPN 可通过影响肝组织炎症反应,参与 MAFLD 的发生16。在慢性乙型肝炎合并 MAFLD 患者,肝脂肪变越严重者血清 ADPN 水平越低17。肝脂肪变不仅可引起肝细胞处于缺氧状态,脂肪沉积于肝组织也可导致肝脏对缺血缺氧的耐受性下降,更易发生肝损伤。据文献报道18,MAFLD 患者肝细胞处于缺氧状态,可诱导 HIF-1 上调,激活转化生长因子 1 和血管内皮生长因子信号通路,诱导血管新生,加速病情进展19。在小鼠模型实验发现,酒精性脂肪性肝病肝组织 HIF-1 表达也显著上调,并通过调节炎症反应及氧化应激水平,参与肝损伤的发生。研究发现20,21,缺氧诱导 HIF-1 激活,使核因子 B 亚基向核转运,诱导一系列炎症因子的分泌和释放,增强炎症反应。【参考文献】1Eslam M,Sanyal AJ,George J,et al.MAFLD:A consensus-driven proposed nomenclature for metabolic associated fatty liver dis-ease.Gastroenterology,2020,158(7):1999-2014.2包静文,朱宇莉,徐庆玥,等.超声声衰减成像评估代谢相关脂肪性肝病肝脂肪变程度的应用价值.中华超声影像学杂志,2021,30(10):868-873.3夏巧云,鲁迪,张建民,等.MAFLD 不同病变阶段动物模型中肠道菌群的多态性.中华肝脏病杂志,2021,29(11):1069-1076.4Subramanian P,Hampe J,Tacke F,et al.Fibrogenic pathways inmetabolic dysfunction associated fatty liver 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