ATX、RPR、miR-122与慢性乙型肝炎患者肝纤维化的相关性.pdf

论著A T X、R P R、m i R 与慢性乙型肝炎患者肝纤维化的相关性周晓王晓梅(新乡市第一人民医院消化内科,河南新乡 )摘要【目的】探讨自分泌运动因子(A T X)、红细胞体积分布宽度与血小 板比 值(R P R)、微小R NA (m i R )与慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化的相关性.【方法】选取 年月至 年 月本院收治的 例CHB患者为研究对象,根据S c h e u e r分级标准分为无纤维化组(S级,n)、轻度纤维化组(SS级,n)、中重度纤维化组(SS级,n).比较各组血清A T X、R P R、m i R 水平、肝纤维化指标 透明质酸(HA)、层粘连蛋白(L N)、型前胶原N端肽(PP)、胶原(C)及肝脏硬度.分析血清指标与肝纤维化指标、肝脏硬度的相关性及其对肝纤维化的诊断价值.【结果】与无纤维化组比较,轻度纤维化组、中重度纤维化组血清A T X、R P R水平升高,HA、L N、PP、C水平、肝脏硬度增加,m i R 表达量降低(P),且轻度纤维化组、中重度纤维化组各指标比较,差异有统计学意义(P).A T X、R P R与HA、L N、PP、C、肝脏硬度呈正 相关(P),m i R 与HA、L N、PP、C、肝 脏硬 度呈 负 相关(P).A T X、R P R、m i R 联合检测预测肝纤维化的AU C大于单项检测(P);A T X、R P R高表达患者发生肝纤维化的危险度分别是低表达患者的 倍、倍(P),m i R 低表达患者发生肝纤维化的危险度是高表达患者的 倍(P).【结论】随着CHB患者肝纤维化程度加重,A T X、R P R升高,m i R 表达量降低,其与肝纤维化指标、肝脏硬度有关,对肝纤维化发生具有重要的诊断价值.关键词肝纤维化;乙型肝炎,慢性;红细胞指数;血小板计数;微R NA sT h eC o r r e l a t i o nb e t w e e nA T X,R P R,m i R a n dC h r o n i cH e p a t i t i sBL i v e rF i b r o s i s ZHO UX i a o,WANGX i a o m e i(X i n x i a n gF i r s tP e o p l esH o s p i t a l,X i n x i a n gH e n a n )A b s t r a c t【O b j e c t i v e】T oi n v e s t i g a t et h ec o r r e l a t i o nb e t w e e na u t o t a x i n(A T X),R DW t o P l a t e l e tR a t i o,R P R(R P R),m i c r o R N A (m i R ),a n d l i v e r f i b r o s i s i np a t i e n t sw i t hc h r o n i ch e p a t i t i sB(C H B)【M e t h o d s】At o t a l o f C H Bp a t i e n t s a d m i t t e d t oo u r h o s p i t a l f r o m M a y t oN o v e m b e r w e r e s e l e c t e da s t h e s t u d y s u b j e c t s A c c o r d i n g t oS c h e u e r sg r a d i n gc r i t e r i a,t h e yw e r ed i v i d e d i n t oan o n f i b r o s i sg r o u p(Sg r a d e,n),am i l d f i b r o s i sg r o u p(SSg r a d e,n ),a n dam o d e r a t e t os e v e r e f i b r o s i sg r o u p(SSg r a d e,n)T h e l e v e l so f s e r u m A T X,R P R,m i R ,l i v e r f i b r o s i s i n d i c a t o r sh y a l u r o n i ca c i d(HA),l a m i n i n(L N),N t e r m i n a lp e p t i d eo f t y p ep r o c o l l a g e n(P P),c o l l a g e n(C),a n d l i v e r h a r d n e s sw e r e c o m p a r e da m o n ge a c hg r o u p W e a n a l y z e d t h e c o r r e l a t i o nb e t w e e n s e r u mi n d i c a t o r sa n d l i v e r f i b r o s i s i n d i c a t o r s,l i v e rh a r d n e s s,a n d t h e i rd i a g n o s t i cv a l u e f o r l i v e r f i b r o s i s【R e s u l t s】C o m p a r e dw i t ht h en o n f i b r o s i sg r o u p,t h e l e v e l so f s e r u m A T Xa n dR P Ri nt h em i l df i b r o s i sg r o u pa n dt h em o d e r a t e t os e v e r e f i b r o s i sg r o u p i n c r e a s e d,w h i l e t h e l e v e l so fHA,L N,P P,C,a n dl i v e rh a r d n e s s i n c r e a s e d T h ee x p r e s s i o no fm i R d e c r e a s e d(P ),a n d t h ed i f f e r e n c e s i nv a r i o u s i n d i c a t o r sb e t w e e n t h em i l d f i b r o s i sg r o u pa n dt h em o d e r a t e t os e v e r ef i b r o s i sg r o u pw e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P )A T Xa n dR P Rw e r ep o s i t i v e l y c o r r e l a t e dw i t hHA,L N,P P,C,a n d l i v e rh a r d n e s s(P ),w h i l em i R w a sn e g a t i v e l yc o r r e l a t e dw i t hHA,L N,P P,C,a n d l i v e rh a r d n e s s(P )T h eA U Co fA T X,R P R,a n dm i R c o m b i n e dd e t e c t i o n f o r l i v e r f i b r o s i sw a s h i g h e r t h a n t h a t o f s i n g l e d e t e c t i o n(P );T h er i s ko f l i v e r f i b r o s i s i np a t i e n t sw i t hh i g he x p r e s s i o no fA T Xa n dR P Rw a s t i m e sa n d t i m e sh i g h e r t h a n t h a t i np a t i e n t sw i t h l o we x p r e s s i o n(P ),r e s p e c t i v e l y T h e r i s ko f l i v e r f i b r o s i s i np a t i e n t sw i t h l o we x p r e s s i o no fm i R w a s t i m e sh i g h e r t h a n t h a t i np a t i e n t sw i t hh i g he x p r e s s i o n(P )【C o n c l u s i o n】A s t h ed e g r e eo f l i v e r f i b r o s i sw o r s e n s i nC H Bp a t i e n t s,A T Xa n dR P Ri n c r e a s e,w h i l em i R e x p r e s s i o nd e c r e a s e s,w h i c h i s r e l a t e d t o l i v e r f i b r o s i s i n d i c a t o r s a n d l i v e rh a r d n e s s,a n dh a s i m p o r t a n t d i a g n o s t i c v a l u e f o r t h e o c c u r r e n c eo fl i v e r f i b r o s i s K e yw o r d sH e p a t i cF i b r o s i s;H e p a t i t i sB,C h r o n i c;E r y t h r o c y t e I n d i c e s;P l a t e l e tC o u n t;M i c r o R N A s 中图分类号R 文献标识码Ad o i:/j i s s n 文章编号 ()医学临床研究 年月第 卷第期JC l i nR e s,A u g ,V o l ,N o 肝纤维化是慢性乙型肝炎(C h r o n i cH e p a t i t i sB,CH B)发展为肝硬化的重要阶段,其是由多种原因所致肝内结缔组织异常增生,若未及时采取干预措施,可增加肝硬化、肝癌的发生风险.肝纤维化早期经过有效治疗可逆转,若发展为肝硬化则很难逆转,肝组织活检病理检查是肝纤维化诊断的金标准,但可能存在取材不足而导致漏诊率增加,故寻找无创性诊断肝纤维化的方法具有重要意义.自分泌运动因子(AT X)为分泌型糖蛋白,参与神经血管生成、血小板聚集等过程,可调节机体能量代谢,肝纤维化进展期时肝窦内皮细胞毛细血管化,促使血清AT X水平升高,可反映肝损伤严重程度.红细胞体积分布宽度与血小板比值(R P R)在CH B患者肝纤维化发生过程中具有重要意义,可反映肝纤维化发展进程.微小R NA (m i R )与肝脏疾病发生、发展有关,并可调节机体脂质代谢、肝脏脂肪变性过程,其在肝脏细胞内克隆后聚集于肝组织内,可影响肝炎病毒翻译、复制 过程.本研 究探讨AT X、R P R、m i R 与CH B患者肝脏硬度的相关性及评估肝纤维化的效能,为临床提供简便、可靠的诊断指标.资料与方法一般资料选取 年月至 年 月本院收 治 的 例CH B患 者 为 研 究 对 象,根 据S c h e u e r分级标准分为无纤维化组(S级,n)、轻度纤维化组(SS级,n)、中重度纤维化组(SS级,n).无纤维化组:男例、女例,年龄 ()岁,体重指数(BM I)()k g/m.轻度纤维化组:男 例、女 例,年龄 ()岁,BM I ()k g/m.中重度纤维化组:男 例、女 例,年龄 ()岁,BM I ()k g/m.纳入标准:符合CH B诊断标准;抗病毒治疗前接受肝活检并评估纤维化严重程度;患者及其家属知情本研究,签署知情同意书.排除标准:合并其他系统严重疾病者;心肌损伤者;合并恶性肿瘤者;丙型肝炎病毒感染者;合并自身免疫性疾病者;近期接受手术输血者.三组性别、年龄、BM I比较,差异无统计学意义(P).本研究经本院伦理委员会批准.方法()采集各组入组时空腹静脉血m L,r/m i n离心 m i n,取血清,采用E L I S A法检测血清AT X水平,美国R&D公司提供检测试剂盒.()采用B C 血细胞分析仪(南京迈瑞)检测红细胞体积分布宽度、血小板计数,并计算R P R.()采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q R T P C R)检测血清m i R 表达量,提取血清总R NA,R NA反转录合成c D NA(北京宝日医生物 技术有限公司).q R T P C R反应体系:c D NAL,R e a l T i m eM a s t e rM i x L,正反向引物各L,加入L的d d HO;反应条件:m i n,s,s,s(循环 次),北京天根生化提供q R T P C R检测试剂盒;上海生工生物工程有限公司设计合成m i R 、内参U 引物:m i R 正向引物序列为 C C CG T G AT GC T TC T T T T CT C ,反向引物 AT G T GA GAG G C A G G G T T CAG ;U 正 向 引 物 序 列 为 AT T G GA A C GAT A C AG AGA AGA T T ,反 向 引 物 G GAA C GC T TC A CGAA T T TG .采用 C t法计算m i R 相对表达量.()采用放射免疫法检测肝纤维化指标 透明质酸(HA)、层粘连蛋白(L N)、型前胶原N端肽(PP)、胶原(C),由上海斯信生物提供检测试剂盒,采用F i b r o T o u c h(无锡海斯凯尔医学技术公司)检测肝脏硬度值,每例患者连续检测次,取中位数作为最终检测值.统计学分析采用S P S S 软件进行统计分析,计数资料采用例数()表示,组间比较行检验;计量资料采用(xs)表示,两组间比较行t检验,多组间比较采用单因素方差分析(两两间比较采用L S D t检验);采用受试者工作特征(R O C)曲线分析AT X、R P R、m i R 对肝纤维化的诊断价值;P 为差异有统计学意义.结果各组血清AT X、R P R、m i R 水平比较与无纤维化组比较,轻度纤维化组、中重度纤维化组血清AT X、R P R水平升高,m i R 水平降低(P);与轻度纤维化组比较,中重度纤维化组血清AT X、R P R水 平 升 高,m i R 水 平 降 低(P),见表.表各组血清A T X、R P R、m i R 水平比较(xs)组别nAT X(n g/L)R P Rm i R 中重度纤维化组 )轻度纤维化组 )无纤维化组 )与无纤维化组比较:P;)与轻度纤维化组比较:P 医学临床研究 年月第 卷第期JC l i nR e s,A u g ,V o l ,N o 各组肝纤维化指标、肝脏硬度比较与无纤维化组比较,轻度纤维化组、中重度纤维化 组HA、L N、PP、C水平、肝脏硬度增加(P);与轻度纤维化组比较,中重度纤维化组HA、L N、PP、C水平、肝脏硬度增加(P),见表.表各组肝纤维化指标、肝脏硬度比较(xs)组别nHA(n g/m L)L N(n g/m L)PP(n g/mL)C(n g/mL)肝脏硬度(k P a)中重度纤维化组 )轻度纤维化组 )无纤维化组 )与无纤维化组比较:P;)与轻度纤维化组比较:P 血清各指标水平与肝纤维化指标、肝脏硬度相关性分析P e a r s o n相关性分析显示,AT X、R P R与HA、L N、PP、C、肝 脏 硬 度 呈 正 相 关(P),m i R 与HA、L N、PP、C、肝脏硬度呈负相关(P),见表.表血清各指标水平与肝纤维化指标、肝脏硬度相关性分析指标AT XrPR P RrPm i R rPHA L N PP C 肝脏硬度 R O C曲线分析血清各指标对肝纤维化的诊断价值以 例轻中重度纤维化患者为阳性样本,以 例无纤维化患者为阴性样本,绘制R O C曲线,结果显示,AT X、R P R、m i R 联合检测预测肝纤维化的AU C大于单项检测(P),见表.表R O C曲线分析血清各指标对肝纤维化的诊断价值指标AU C C I最佳截断值敏感度()特异度()PAT X n g/L R P R m i R 联合 血清各指标不同表达患者发生肝纤维化的危险度分析参考结果中最佳截断值值将CH B患者分为高表达、低表达,AT X、R P R高表达患者发生肝纤维化的危险度分别是低表达患者的 倍、倍(P),m i R 低表达患者发生肝纤维化的危险度是高表达患者的 倍(P),见表.表血清各指标不同表达患者发生肝纤维化的危险度分析指标n肝纤维化(n)无肝纤维化(n)R R(C I)PA T X高表达 ()低表达 R P R高表达 ()低表达 m i R 高表达 ()低表达 讨论肝纤维组织增生至一定程度可破坏肝小叶结构,促使正常肝组织形成假小叶,进一步进展为肝硬化,由于其早期无明显症状而导致诊断效能较低,目前尚缺乏可靠指标预测肝纤维发生风险.AT X与肝硬化、肝功能失代偿密切相关,细胞核因子 B(N F B)可促进AT X转录,促使其在肝硬化细胞中表达量增高,AT X可依赖于溶血磷脂酶D发挥作用,进而参与肝脏疾病的发生、发展过程.本研究中随着肝纤维化程度加重,血清AT X水平随之升高,表明AT X水平与CH B患者肝纤维化有关,其可能参与肝纤维化发生过程.肝纤维化发展过程中生成大量炎症因子,可能激活N F B炎症信号通路,进而促进AT X表达.AT X可促进血管组织发育,促进溶血磷脂酸表达,激活肝星形细胞增生,促进肝纤维化发生、发展.本研究结果显示,AT X与HA、L N、PP、C、肝脏硬度呈正相关,HA、L N、PP、C属于细胞外基质蛋白降解产物,提示上述指标可反映肝纤维化进程,但存在非肝脏特异性,易受肝外组织炎症活动影响,同时炎症反应、水肿、组织肿胀等可增加肝脏硬度,表明AT X水平升高与肝纤维化指标、肝脏硬度密切相关.随着肝纤维化持续进展,CH B患者血清AT X水平升高,导致溶血磷脂酸活性增强,促进炎症细胞发生浸润,增加肝脏硬度,进一步加快肝纤维化发展进程.R P R与慢性丙型肝炎肝硬化代偿期发生、纤维化发展进程有关,可在一定程度上反映肝纤维化变化情况,R DW、血小板变化与肝炎病毒感染所致慢性肝脏疾病发生、发展有关,肝脏功能降低可影响肝脏组织内造血原料储存、代谢、合成,促使骨髓造血功能紊乱,降低红细胞生成量,升高R DW.本研究结果显示,R P R与CH B患者肝纤维化有关,随着纤维化程度增加其比值明显升高,且与HA、L N、PP、C、肝脏硬度呈正相关,提示R P R可反映CH B患者肝纤维化严重程度.肝纤维化患者存在炎症反应可影医学临床研究 年月第 卷第期JC l i nR e s,A u g ,V o l ,N o 响促红细胞生成素生成、铁代谢过程,CH B患者脾功能亢进可进一步破坏红细胞,同时血小板减少可增加肝硬化发生风险,进而升高R P R,可能反映肝纤维化动态变化.m i R 可影响胆固醇代谢、肝细胞生长周期,并可影响慢性肝病患者肝纤维化程度,其表达量与肝纤维化程度呈负相关.本研究结果显 示,轻 度 纤 维 化 组、中 重 度 纤 维 化 组 血 清m i R 表达量低于无纤维化组,且中重度纤维化组低于轻度纤维化组,可能是由于随着肝纤维化程度加重,患 者 体 内 正 常 肝 细 胞 数 量 减 少,进 而 降 低m i R 表达量,导致m i R 对肝纤维化抵抗能力减弱,最终加重肝纤维化程度.m i R 可调节肝脏脂代谢,其与CH B患者H B V复制、肝纤维化有关,可反映病毒性肝炎发展进程.本研究表明AT X、R P R、m i R 与CH B患者肝纤维化密切相关,并可反映肝纤维化严重程度,但其联合检测对肝纤维化 的 预 测 效 能 尚 未 明 确,本 研 究 结 果 显 示,AT X、R P R、m i R 联 合 检 测 预 测 肝 纤 维 化 的AU C大 于 单 项 检 测,提 示 联 合 检 测AT X、R P R、m i R 水平可提高肝纤维化诊断效能.同时,本研究结果显示,AT X、R P R升高、m i R 表达量降低可能增加CH B患者肝纤维化发生风险.参考文献张荣荣,周瑾,赵鹏,等剪切波弹性成像与血清肝纤维化指标无创评估慢性乙型肝炎患者肝 纤维化效能比较 J肝 脏,():魏铁军,张恒,郭艺静,等慢性丙型肝炎患者血清A T X水平与肝纤维化程度的关系研究 J胃 肠病学和肝病 学杂志,():赵小军红细胞体积分布宽度与血小板比值在慢性乙型肝炎患者肝纤维化评估中的临床价值J检验医学与临床,():李华忠,蔡笃雄,陈才利乙型肝炎肝纤维化患者血清m i R 与m i R 表达及其对肝纤维化的预测作用分析J标记免疫分析与临床,():丁荣蓉,陆伟,王雁冰,等采用瞬时弹性成像技术和血清标志物预测丙氨酸转氨酶轻度升高的慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度J中华传染病杂志,():中华医学会感染病学分会,中华医学会肝病学分会慢性乙型肝炎防治 指 南(年 版)J中 华 肝 脏 病 杂 志,():陆长春,丁敏侠血清活性A L DH和A DH水平变化预测老年C H B患者肝纤维化进展的价值J中国实验诊断学,():李丹,张才江溶血磷脂酸受体、自分泌运动因子在肝硬化肝性脑病患者中的表达及意义J肝脏,():余卫中,张刚,甘洪颖血清自分泌运动因子诊断非酒精性脂肪肝合并肝纤维化的价值研究J临床内科杂志,():杨寸芯,张贺彬,黄国庆,等二维超声斑点追踪显像技术评估肝硬化患者左心室功能及其与R P R、A P R I关系分析J浙江医学,():张小燕慢性肝病患者血清m i R NA 变化及与肝功能、肝纤维化的关系分析J检验医学与临床,():贾学友,藏小晴血清m i R 水平对慢性丙型肝炎患者肝纤维化程度的诊断价值J医学临床研究,():(本文编辑:张兴珍)收稿日期 (上接第 页)中华医学会妇产科学分会妊娠期高血压疾病学组妊娠期高血压疾病 诊 治 指 南()J中 华 妇 产 科 杂 志,():中华医学会妇产科学分会产科学组胎盘早剥的临床诊断与处理规范(第版)J中华妇产科杂志,():龙娅静,张卫萍妊娠期高血压疾病并发胎盘早剥与母婴不良预后的关系J医学综述,():蒋锴凯,李青,于慧妊娠期高血压疾病与胎盘早剥的相关性分析J中国妇幼保健,():王娜娜,唐增军,于璨,等妊娠期高血压疾病患者发生胎盘早剥预测模型的建立与评价J现代妇产科进展,():陈敦金,余琳妊娠期高血压疾病与胎盘早剥J实用医学杂志,():宋迎春,朱冰冰,张丹妊娠期高血压疾病并发胎盘早剥 例分析J中国误诊学杂志,():何云妊娠中晚期胎盘血管化参数与妊娠期高血压疾病患者不良妊娠结局的关系研究J中国计划生育和妇产科,():赵雪峰,杨万杰妊娠期高血压疾病严重并发症的研究进展J医学综述,():林南娟重度子痫前期并发胎盘早剥的临床分析J实用医学杂志,():武军,姬明杰,孙丽君基质金属蛋白酶 与妊娠期高血压疾病及胎盘早剥的关系J河北医药,():(本文编辑:邓丽萍)收稿日期 医学临床研究 年月第 卷第期JC l i nR e s,A u g ,V o l ,N o