元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究.pdf

第42 卷 第 8 期2023 年8 月Vol.42 No.8984991分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究颉佳乐1，2，兰婧1，2，曹智铭3，关建丽3，王毅1，2，4，龚行楚1，2，4*（1浙江大学 药学院，浙江 杭州 310058；2浙江大学 智能创新药物研究院，浙江 杭州 310018；3河南福森药业有限公司，河南 南阳 474450；4组分中药国家重点实验室 浙江大学交叉创新中心，浙江 杭州 310058）摘要：建立了适用于元胡止痛口服液原料药材、中间体及制剂中若干生物碱类成分的定量指纹图谱方法。采用DIKMA Diamonsil Plus C18A色谱柱（4.6 mm 250 mm，5 m），以0.04%乙酸铵溶液（冰醋酸调至pH 4.0，A）乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱，在280 nm下进行检测。指纹图谱中含共有峰7个，其精密度、重复性、稳定性的相对标准偏差（RSD）均小于5.0%。对延胡索乙素、去氢延胡索甲素进行定量分析，其分别在6.15 123 g/mL和10.15 203 g/mL范围内线性关系良好，相关系数（r2）0.999，进样精密度、方法重复性的RSD均小于5.0%，供试品溶液在24 h内稳定。延胡索乙素、去氢延胡索甲素在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为89.6%107%，RSD小于3.0%。所建立的分析方法稳定、准确、可靠，能够对药材、中间体及制剂中的中等极性成分进行检测，可用于考察工业生产中元胡成分的量值传递情况，从而为改进元胡止痛口服液制药过程控制水平提供技术支持。关键词：定量指纹图谱；含量测定；元胡止痛口服液；延胡索乙素；去氢延胡索甲素中图分类号：O657.63；R283 文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2023）08-0984-08Study on Quantitative Fingerprints for Raw Medicinal Materials，Intermediates and Preparations of Yuanhu Zhitong KoufuyeXIE Jia-le1，2，LAN Jing1，2，CAO Zhi-ming3，GUAN Jian-li3，WANG Yi1，2，4，GONG Xing-chu1，2，4*（1College of Pharmaceutical Sciences，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China；2Innovation Institute for Artificial Intelligence in Medicine，Zhejiang University，Hangzhou 310018，China；3Henan Fusen Pharmaceutical Co.，Ltd.，Nanyang 474450，China；4State Key Laboratory of ComponentBased Chinese Medicine，Innovation Center in Zhejiang University，Hangzhou 310058，China）Abstract：A quantitative fingerprint method was established for several alkaloids in the raw medicinal materials，intermediates and preparations of Yuanhu Zhitong KoufuyeA DIKMA Diamonsil Plus C18A chromatographic column（4.6 mm 250 mm，5 m）was used for separation with gradient elution.The mobile phase was consisted of solvent A（0.04%ammonium acetate solution，glacial acetic acid was used to regulate the pH value to 4.0）and solvent B（acetonitrile）The detection wavelength was 280 nmThere were 7 common peaks in the fingerprintThe relative standard deviations（RSDs）of precision，repeatability and stability were all less than 5.0%The linear relationships of tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline were good within the range of 6.15123 g/mL and 10.15203 g/mL，respectivelyThe correlation coefficients（r2）were more than 0.999，and RSDs for injection precision and method repeatability were less than 5.0%The sample solution was stable within 24 hThe average recoveries for tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline at low，medium and high levels ranged from 89.6%to 107%，with RSDs less than 3.0%The established method is stable，accurate and reliable，and could be used to detect the medium polar components in the medicinal materials，intermediates and preparations，investigating the quantity and measure value transfer of the components in Corydalis Rhizoma during indusdoi：10.19969/j.fxcsxb.23030303收稿日期：20230303；修回日期：20230410基金项目：国家中医药管理局创新团队与人才支持计划项目（ZYYCXTD-D-202002）；河南省重大科技专项项目（201111310800）；中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（226-2022-00226）通讯作者：龚行楚，博士，副教授，研究方向：中药质量控制，E-mail：第 8 期颉佳乐等：元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究trial productionThe method provides a technical support for improving the control level for pharmaceutical process of Yuanhu Zhitong Koufuye.Key words：quantitative fingerprint；content determination；Yuanhu Zhitong Koufuye；tetrahydropalmatine；dehydrocorydaline延胡索为罂粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）的干燥块茎，味辛、苦，性温，可活血、行气、止痛1。延胡索中含有多种生物碱成分2，其代表性成分为延胡索乙素。醋制得到醋延胡索，各生物碱含量发生变化3，延胡索乙素含量增加4，镇痛作用和促进血液循环的功效增强5。元胡止痛口服液即以醋延胡索为君药，白芷为臣药，经浸泡、回流、浓缩、离心等工艺制备而得，具有理气、活血、止痛的功效，可用于气滞血瘀的胃痛、胁痛、头痛及痛经1。药理研究也表明，延胡索乙素起直接镇痛作用，白芷中的欧前胡素起到辅助作用68。2020版 中国药典（一部）以高效液相色谱（HPLC）法测定元胡止痛口服液中延胡索乙素的含量1。但单指标成分含量测定难以从整体上体现中药质量特征。相比之下，采用多指标成分含量测定和指纹图谱是近年来中药质量检测的重要发展趋势911。指纹图谱能够全面地反映中药的整体情况与组成特征，较全面地体现中药成分的复杂性和相关性12。通过计算不同批次之间的指纹图谱相似度，能够较好地反映批次间一致性1315。目前已有研究报道了元胡止痛制剂的指纹图谱，检测指标包括生物碱、糖类等多类成分1618，但笔者未检索到专门的分析方法用于考察从药材到中间体到制剂整个生产过程中指标成分的量值传递情况。本研究重点关注君药醋延胡索中成分的检测，开发了适用于元胡止痛口服液原药材、中间体和制剂的定量指纹图谱方法。通过采用相同的色谱分离和信号检测条件，完成了3种样品的检测及方法学验证，计算了不同批次的延胡索药材与元胡止痛口服液的相似度，并对相应样品中的延胡索乙素和去氢延胡索甲素进行了定量检测。虽然目前已有报道对延胡索中8种成分同时定量分析19，但本研究的关注点在于建立用于考察制药过程中量值传递情况的方法。考虑到增加定量检测成分种类会增加企业的检测成本，本文选择了延胡索乙素和去氢延胡索甲素两种代表性成分进行定量测定和研究。1 实验部分 1.1仪器与试剂高效液相色谱仪（Agilent 1100系列，Agilent 1260 Infinity 系列，安捷伦科技有限公司）；精密电子天平（XS105，XSR105，瑞士MettlerToledo公司）；MilliQ超纯水机（默克化工技术（上海）有限公司）；LMDTC超静音型超声波清洗机（德国Lumtech 公司）。乙腈、甲醇（色谱纯，德国Merck公司）；超纯水由MilliQ超纯水机制备；乙酸铵（色谱纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；冰醋酸（色谱纯，美国 ROE Scientific Inc.）。延胡索乙素（批号：211025，纯度 99%）、盐酸巴马汀（批号：211129，纯度 98%）、延胡索甲素（批号：211206，纯度 98%）、去氢延胡索甲素（批号：210921，纯度 98%）、欧前胡素（批号：211103，纯度 99%）、异欧前胡素（批号：210928，纯度 98%）均购自上海融禾医药科技发展有限公司；部分批次延胡索药材（Y1Y3）、元胡止痛口服液、元胡止痛口服液中间体由河南福森药业有限公司提供，部分批次延胡索药材（Y4Y11）自行购入。延胡索药材经浙江大学药学院杨振中副教授鉴定，元胡止痛口服液中间体为二味药材用60%乙醇二次提取后减压浓缩的清膏。1.2对照品溶液的制备指纹图谱对照品溶液：称取适量延胡索乙素、盐酸巴马汀、去氢延胡索甲素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素对照品于同一容量瓶，用甲醇溶解并定容，配制成质量浓度分别为22、4、33、19、8、11 g/mL的对照品混合溶液，充分混匀后经0.22 m有机相微孔滤膜过滤，取滤液，即得。定量方法学考察对照品溶液：分别称取适量延胡索乙素与去氢延胡索甲素于同一容量瓶，用甲醇溶解并定容，配制成质量浓度分别为123、203 g/mL的对照品混合溶液母液，充分混匀后，精密量取适量加甲醇稀释制成一系列质量浓度的混合对照品溶液。各对照品溶液经0.22 m有机相微孔滤膜过滤后，取滤液，即得。985第 42 卷分析测试学报1.3供试品溶液的制备1.3.1药材供试品溶液的制备参照2020版 中国药典 元胡条目含量测定项下供试品溶液制备方法制备药材供试品溶液1。延胡索供试品溶液：取药材粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置于平底烧瓶中，精密加入浓氨试液甲醇（1 20，体积比）混合溶液50 mL，称定重量，冷浸1 h后加热回流1 h，冷却后，再称定重量，用浓氨试液甲醇（1 20）混合溶液补足减失的重量，摇匀，过滤。精密量取滤液25 mL，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5 mL容量瓶中并稀释至刻度，充分混匀后经0.22 m有机相微孔滤膜过滤，取滤液，即得。1.3.2元胡止痛口服液中间体供试品的制备移取1.0 mL元胡止痛口服液中间体至10 mL容量瓶中，使用甲醇稀释定容至刻度线，充分混匀后经0.22 m有机相微孔滤膜过滤，取滤液，即得。1.3.3元胡止痛口服液供试品的制备移取1.0 mL元胡止痛口服液至5 mL容量瓶中，使用甲醇稀释并定容至刻度线，充分混匀后经0.22 m有机相微孔滤膜过滤，取滤液，即得。1.4色谱条件色谱柱：DIKMA Diamonsil Plus C18A色谱柱（4.6 mm 250 mm，5 m）；流动相：A相为0.04%乙酸铵溶液（冰醋酸调至pH 4.0），B相为纯乙腈。梯度洗脱程序：0 10 min，20%B；10 35 min，20%25%B；35 50 min，25%40%B；50 55 min，40%56%B；55 65 min，56%70%B，后运行时间10 min；流速1.0 mL/min；柱温40；进样量10 L；检测波长280 nm。1.5数据处理采用与高效液相色谱仪相配套的采集软件和定量分析软件完成数据的采集与处理；采用 中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）计算延胡索药材、元胡止痛口服液指纹图谱的相似度。2 结果与讨论 2.1色谱条件的优化2.1.1流动相、色谱柱、柱温及流量的选择以元胡止痛口服液中间体为样品，考察了流动相A的pH值分别为3.2、3.5、4.0、4.5、5.0、5.3时的分离效果，发现pH 4.0时的分离度更好。同时对不同梯度进行考察，确定了“1.4”的优化色谱条件。选用Agilent 1100高效液相色谱仪，比较了DIKMA Diamonsil Plus C18A（4.6 mm 250 mm，5 m）及DIKMA Diamonsil C18（2）（4.6 mm 250 mm，5 m）色谱柱的分离效果，发现前者更利于化合物分离。对不同柱温（30、35、40）进行考察，结果显示40 时的分离效果最佳。进一步比较了不同流速（0.8、0.9、1.0 mL/min）的影响。结果显示，流速为0.8 mL/min时更利于延胡索乙素与其前色谱峰分离，但盐酸巴马汀会与其前峰融合，而流速为1.0 mL/min时则无此现象。低流速下对延胡索乙素的分离优势可通过优化柱温来实现，最终选择最佳流速为1.0 mL/min。2.1.2检测波长及进样量的选择使用DAD检测器进行全扫描，得到各对照品的光谱图（见图1）。延胡索的主要化学成分为生物碱类，延胡索乙素、延胡索甲素、盐酸巴马汀、去氢延胡索甲素等原小檗碱类生物碱均为延胡索的代表性成分，其在280 nm处吸收较大且稳定，宜采用该波长进行测定。此时，白芷中的欧前胡素与异欧前胡素虽处于吸收光谱的峰谷区域，难以检测。但由于本研究重点关注延胡索药材中的成分，因此未对白芷中的成分作进一步检测。考察了 5、10、20 L 3种进样量的分离效果，结果显示，3种进样量均能实现较好分离，但以10 L时的峰形最佳。4种对照品及供试品溶液在280 nm的色谱图见图2。由于去氢延胡索甲素峰的保留时间处于色谱图中部，且峰面积较大、峰形良好，因此选择该峰作为参照峰。综合考虑3种供试品中各峰的峰面积、峰形和分离程度，选择峰面积大、分离度好、峰形对称且为3种供试品中共有的色谱峰为共有峰，即图2中1 7号峰。在前期优化过程中尝试分离2号峰与3号峰之间的色谱峰，但未取得理想的分离效果，因此未将其纳入指纹图谱的共有峰中。图中各色谱峰与参照峰的相对保留时间（RRT）与相对峰面积（RPA）见表1，其中RRT可用于色谱峰指认，RPA可用于判断指标成分含量是否有异常波动。986第 8 期颉佳乐等：元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究图1不同对照品的光谱图Fig.1Spectra of different reference substancesA：tetrahydropalmatine（延胡索乙素）；B：parmatine hydrochloride（盐酸巴马汀）；C：corydaline（延胡索甲素）；D：dehydrocorydaline（去氢延胡索甲素）；E：imperatorin（欧前胡素）；F：isoimperatorin（异欧前胡素）图2不同样品的HPLC色谱图Fig.2HPLC chromatograms of different samplesA：mixed reference substances（混合对照品）；B：Corydalis Rhizoma（延胡索药材）；C：Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate（元胡止痛口服液中间体）；D：Yuanhu Zhitong Koufuye（元胡止痛口服液）；3：tetrahydropalmatine（延胡索乙素）；5：parmatine hydrochloride（盐酸巴马汀）；6：corydaline（延胡索甲素）；7：dehydrocorydaline（去氢延胡索甲素）；8：imperatorin（欧前胡素）；9：isoimperatorin（异欧前胡素）表1延胡索药材、元胡止痛口服液中间体及元胡止痛口服液共有峰的相对保留时间（RRT）及相对峰面积（RPA）Table 1The relative retention times（RRT）and relative peak areas（RPA）of the common peaks for Corydalis Rhizoma，Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate and Yuanhu Zhitong KoufuyePeak number1234567Corydalis RhizomaRRT0.3410.4270.5910.7070.8180.8921.000RPA0.0680.0380.0830.1530.3080.1121.000Yuanhu Zhitong Koufuye intermediateRRT0.3410.4240.5920.7070.8150.9081.000RPA0.1690.0860.1730.2600.1870.2681.000Yuanhu Zhitong KoufuyeRRT0.3400.4220.5930.7030.8190.9071.000RPA0.1470.0940.1430.2510.1730.1701.000987第 42 卷分析测试学报2.2指纹图谱方法学考察及应用参照 中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）20，对指纹图谱进行方法学考察。2.2.1进样精密度、方法重复性及供试品溶液的稳定性按“1.3”方法配制药材供试品溶液、元胡止痛口服液中间体供试品溶液、元胡止痛口服液供试品溶液各1份，取同一份供试品溶液连续进样6次。计算各共有峰与参照峰的保留时间与峰面积的比值，得到各色谱峰RRT的RSD均小于1.0%，RPA的RSD均小于5.0%（见表2），表明进样的精密度良好。按“1.3”方法配制3种供试品溶液各6份，分别进样1次并分析。计算各共有峰与参照峰的保留时间与峰面积的比值，得到各色谱峰RRT的RSD均小于1.0%，RPA的RSD均小于5.0%（见表3），表明方法重复性良好。按“1.3”方法配制3种供试品溶液，分别于0、2.5、5、7.5、10、15、20、24 h进样进行分析。计算各共有峰与参照峰的保留时间与峰面积的比值，得到各共有峰RRT的RSD均小于1.0%，RPA的RSD均小于5.0%（见表4），表明样品的稳定性良好。2.2.2延胡索药材指纹图谱的相似度评价将11批次（Y1Y11，批次信息见表5）延胡索药材供试品溶液的图谱数据导入 中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版），生成对照谱图并计算延胡索药材指纹图谱相似度（如图3A）。比较各供试品溶液的指纹图谱与对照谱图，相似度结果见表5。由表5可知，各供试品溶液的指纹图谱与对照谱图的相似度均在0.93以上，表明各批次延胡索药材的一致性良好。表2延胡索药材、元胡止痛口服液中间体及元胡止痛口服液指纹图谱的进样精密度Table 2The injection precisions of the fingerprints for Corydalis Rhizoma，Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate and Yuanhu Zhitong Koufuye/%Peak number1234567RSD forCorydalis RhizomaRRT0.050.050.030.030.030.020.00RPA2.60.450.190.630.140.380.00RSD forYuanhu Zhitong Koufuye intermediateRRT0.170.220.120.090.080.100.00RPA1.91.91.21.22.40.990.00RSD forYuanhu Zhitong KoufuyeRRT0.050.080.020.060.020.040.00RPA2.72.92.73.74.73.10.00表3延胡索药材、元胡止痛口服液中间体及元胡止痛口服液指纹图谱的方法重复性Table 3The method repeatabilities of the fingerprints for Corydalis Rhizoma，Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate and Yuanhu Zhitong Koufuye/%Peak number1234567RSD forCorydalis RhizomaRRT0.620.680.300.430.240.060.00RPA2.04.004.00.240.390.610.00RSD forYuanhu Zhitong Koufuye intermediateRRT0.220.190.500.230.060.080.00RPA4.00.871.30.222.01.60.00RSD forYuanhu Zhitong KoufuyeRRT0.130.130.150.140.310.190.00RPA3.52.04.33.71.92.10.0表4延胡索药材、元胡止痛口服液中间体及元胡止痛口服液指纹图谱样品的稳定性Table 4The sample stabilities of the fingerprints for Corydalis Rhizoma，Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate and Yuanhu Zhitong Koufuye/%Peak number1234567RSD forCorydalis RhizomaRRT0.840.900.380.440.290.070.00RPA2.30.980.781.30.631.00.00RSD forYuanhu Zhitong Koufuye intermediateRRT0.180.430.120.100.100.090.00RPA1.61.72.60.991.20.990.00RSD forYuanhu Zhitong KoufuyeRRT0.090.090.070.250.030.080.00RPA1.91.81.81.91.34.60.00988第 8 期颉佳乐等：元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究2.2.3元胡止痛口服液指纹图谱相似度评价将11批次（S1S11，批次信息见表5）元胡止痛口服液供试品溶液的图谱数据导入 中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版），生成对照谱图并计算元胡止痛口服液指纹图谱相似度（如图3B）。比较各供试品溶液的指纹图谱与对照谱图，相似度结果见表5。由表5可知，各供试品溶液的指纹图谱与对照谱图的相似度均在0.98以上，表明各批次元胡止痛口服液的一致性良好。2.3方法学考察及应用2.3.1线性范围与相关系数按“1.2”方法配制系列用于定量方法学考察的对照品溶液，分别进样10 L进行分析。以两种成分的质量浓度为横坐标（x，g/mL），峰面积为纵坐标（y）分别绘制标准曲线，得到线性方程、相关系数（r2）及线性范围。可见对于两种待测成分，延胡索乙素、去氢延胡索甲素分别在6.15 123 g/mL、10.15 203 g/mL范围内线性关系良好，线性方程分别为y=8 909.8x+5.613 8和y=32 687x+31.272，相关系数分别为0.999 7和0.999 6。2.3.2进样精密度、方法重复性及样品稳定性实验方法同“2.2.1”。分别计算延胡索乙素与去氢延胡索甲素峰面积的RSD。结果显示，各峰面积的RSD均小于2.0%，说明进样精密度良好。根据延胡索乙素与去氢延胡索甲素峰面积以及“2.3.1”中的标准曲线，计算两种成分的含量及RSD。结果显示，各峰面积的RSD均小于4.0%，说明方法的重复性良好。分别计算延胡索乙素与去氢延胡索甲素峰面积的RSD。结果显示，各峰面积的RSD均小于5.0%，说明样品稳定性良好。2.3.3加标回收率加标回收实验所用延胡索药材为Y3、所用元胡止痛口服液中间体为Z3、所用元胡止痛口服液为S11。将9份已知浓度的供试品分为低、中、高3组，配制与供试品中待测成分浓度一致的对照品溶液，每个水平重复3次进行测定。按低、中、高3个水平分别加入与供试品溶液体积比例为0.8 1.0、1.0 1.0，1.2 1.0的对照品溶液，用甲醇定容至5 mL，充分混匀后经0.22 m有机相微孔滤膜过滤，进行分析。各供试品中延胡索乙素和去氢延胡索甲素原有量、对照品加入量、实际测得量和加标回收率见表6。结果显示，二者的平均回收率为89.6%107%，RSD均小于3.0%。表明该方表511批延胡索药材指纹图谱及11批元胡止痛口服液指纹图谱的相似度评价结果Table 5Fingerprint similarity evaluation results of 11 batches of Corydalis Rhizoma and 11 batches of Yuanhu Zhitong KoufuyeSerial numberY1Y2Y3Y4Y5Y6Y7Y8Y9Y10Y11Batch number220301201101202111152022061520220721202205212022072520220601202207262022072020220723Similarity0.9840.9960.9920.9990.9920.9840.9940.9960.9360.9800.994Serial numberS1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11Batch number1803022118090121180902211907012119070221190703212011012121030121210901212109022121090321Similarity0.9860.9930.9900.9960.9990.9970.9920.9970.9970.9980.997图3 11批次延胡索药材（A）及11批次元胡止痛口服液（B）的指纹图谱Fig.3 The fingerprints of 11 batches of Corydalis Rhizoma（A）and 11 batches of Yuanhu Zhitong Koufuye（B）989第 42 卷分析测试学报法准确可靠，可用于多种供试品中延胡索乙素与去氢延胡索甲素的定量检测。2.3.4实际样品的测定取 11批次延胡索药材（Y1 Y11，批次信息见表5），按“1.3”制备供试品溶液，“1.4”进样分析，每批次各测定一次，计算得到11批次延胡索药材中延胡索乙素含量为0.052%0.088%（均高于药典所规定的 0.05%），去 氢 延 胡 索 甲 素 含 量 为 0.069%0.222%（见图4A）。取 3 批次（Z1：2109011；Z2：2109021；Z3：2109031）元胡止痛口服液中间体，按“1.3”制备供试品溶液，“1.4”进样分析，每批次各测定一次，计算得到3批次样品中延胡索乙素质量浓度为154.19 207.25 g/mL，去氢延胡索甲素质量浓度为372.70 538.79 g/mL（见图4B）。取11批次元胡止痛口服液（S1 S11，批次信息见表5），按“1.3”制备供试品溶液，“1.4”进样分析，每批次各测定一次，计算得到11批口服液中延胡索乙素质量浓度为80.52 117.87 g/mL（均高于药典所规定的80 g/mL），去氢延胡索甲素质量浓度为175.83 256.79 g/mL（见图4C）。3 结 论 本研究优化得到了适用于元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的HPLC定量指纹图谱方法，通过与对照品对比，指认了来源于延胡索药材中的延胡索乙素、盐酸巴马汀、延胡索甲素、去氢延胡索甲素。选定7个共有峰建立指纹图谱，选择了药典所规定的指标成分延胡索乙素以及峰面积最大的去氢延胡索甲素进行定量检测，考察了该方法的可靠性，并用于元胡止痛口服液系列供试品中的延胡索乙素与去氢延胡索甲素的检测。通过检测药材、中间体和制剂，获得了企业生产过程中指标成分的量值传递情况，表明提取是对量值传递影响较大的步骤。相比于其他方法，本方法有利于研究药材中间体制剂之间成分的相关表6延胡索药材、元胡止痛口服液中间体及元胡止痛口服液的加标回收实验Table 6The recovery experiments of Corydalis Rhizoma，Yuanhu Zhitong Koufuye intermediate and Yuanhu Zhitong KoufuyeSampleCorydalis RhizomaYuanhu Zhitong Koufuye intermediateYuanhu Zhitong KoufuyeTetrahydropalmatineOriginal/g18.4666.2528.50Added/g23.6824.0028.8054.5668.2081.8423.6829.6035.52Detected/g40.4540.3045.80114.62127.94139.7353.8260.1966.52Average recovery/%93.089.6107RSD/%2.21.62.9DehydrocorydalineOriginal/g59.5844.6953.40Added/g48.6460.8072.9637.4446.8056.1642.2452.8063.36Detected/g107.51118.48131.2982.6592.94101.1094.51104.01115.53Average recovery/%97.910297.1RSD/%1.81.72.8图411批延胡索药材（A）、3批元胡止痛口服液中间体（B）及11批元胡止痛口服液（C）中延胡索乙素及去氢延胡索甲素含量的测定Fig.4Determination of tetrahydropalmatine and dehydrocorydalinecontent in 11 batches of Corydalis Rhizoma（A），3 batches of Yuanhu Zhitong Koufuye intermediates（B）and 11 batches of Yuanhu Zhitong Koufuye（C）990第 8 期颉佳乐等：元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究性，以及该过程中的量值传递规律，还可用于工业生产中工艺变更前后的质量评价。参考文献：1Chinese Pharmacopoeia Commission.Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China.11th ed.Beijing：China Medical Science Press（国家药典委员会.中华人民共和国药典.11版.北京：中国医药科技出版社），2020.2Deng A P，Zhang Y，Zhou L，Kang C Z，L C G，Kang L P，Nan T G，Zhan Z L，Guo L P，Huang L QPhytochemistry，2021，183：112644.3Li Z Y，Ding Q，L W S，Guan Y H，Wei M，Sun D M，Huo W J，Deng T，Qin SCent.South Pharm.（李振雨，丁青，吕渭升，官永河，魏梅，孙冬梅，霍文杰，邓韬，秦升中南药学），2021，19（8）：15371542.4Wu H W，Waldbauer K，Tang L Y，Xie L W，Mckinnon R，Zehl M，Yang H J，Xu H Y，Kopp BMolecules，2014，19（8）：1148711504.5Chen L L，Verpoorte R，Yen H R，Peng W H，Cheng Y C，Chao J，Pao L HJ.Food Drug Anal.，2018，26（Suppl.2）：S96S114.6Chen Y TStudy of Effect Components for the Yuanhu Painkillertreat of Primary Dysmenorrhea.Xian：Fourth Military Medical University（陈岳涛元胡止痛片治疗痛经的功效成分及组方原理初步研究.西安：第四军医大学），2013.7Wang Z，Shang H H，Li Y Z，Zhang C，Dong Y，Cui T，Zhang H B，Ci X Y，Yi X L，Zhang T J，Yan F Y，Zhang Y P，Huang X，Wu W D，Liu C XActa Pharm.Sin.B，2020，10（9）：16461657.8Le J，Lin Z B，Song L，Wang H，Hong Z YJ.Pharm.Biomed.Anal.，2019，176：112807.9Wu X F，Zhou X，Huang X L，Xie BJ.Instrum.Anal.（吴学峰，周熙，黄晓兰，谢斌分析测试学报），2022，41（3）：299308.10Feng N，Gan H X，Li Y F，Han Y PChina Meas.Test（冯楠，干泓侠，李远飞，韩泳平中国测试），2023，49（4）：8084，105.11Wang S，Bao Y R，Li T J，Yang X X，Meng X SJ.Instrum.Anal.（王帅，包永睿，李天娇，杨欣欣，孟宪生分析测试学报），2021，40（1）：132138.12Li Y，Shen Y，Yao C L，Guo D AJ.Pharm.Biomed.Anal.，2020，185：113215.13Yang T，Yang H Z，Ling G X，Sun G XSpectrochim.Acta A，2022，270：120820.14Teng K X，Fu H，Wang Z C，Shen Y Q，Xie X Y，Zhao J，Qu H BChin.Tradit.Herb.Drugs（滕凯旋，傅豪，王中昌，沈逸群，谢欣媛，赵洁，瞿海斌中草药），2022，53（3）：712-719.15Li X，Yang H，Sun W Y，Sun G X，Zhang HMicrochem.J.，202