下颌前移矫治器对OSAHS腭咽组织和血浆中炎症因子的影响.pdf

论 著 收稿日期2 0 2 1-0 4-2 2 基金项目 国家自然科学基金青年科学基金(8 1 7 0 1 0 1 0);河北省自然科学精准医学联合基金培育项目(H 2 0 2 1 2 0 6 4 3 1)作者简介 赵圆(1 9 9 8-),女,河北衡水人,河北医科大学口腔医院医学硕士研究生,从事正畸科疾病诊治研究。*通信作者。E-m a i l:c h u n y a n l i uh e b m u.e d u.c n下颌前移矫治器对O S A H S腭咽组织和血浆中炎症因子的影响赵 圆,杨 琳,孙超然,杨 婷,彭文涛,刘春艳*(河北医科大学口腔医学院,河北医科大学口腔医院正畸科,河北省口腔医学重点实验室,河北省口腔疾病临床医学研究中心,河北 石家庄0 5 0 0 1 7)摘要 目的 探讨下颌前移矫治器(m a n d i b u l a ra d v a n c e m e n td e v i c e,MA D)对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(o b s t r u c t i v es l e e pa p n e ah y p o p n e as y n d r o m e,O S AH S)兔腭咽组织和血浆中白细胞介素1(i n t e r l e u k i n1,I L-1),白细胞介素6(i n t e r l e u k i n6,I L-6)和肿瘤坏死因子(t u m o rn e c r o s i s f a c t o r,TN F-)的影响,为临床工作中治疗O S AH S提供理论基础。方法3 0只雄性新西兰兔随机分为三组,O S AH S组和MA D组建立O S AH S模型,MA D组戴MA D,对 照 组 不 作 处 理。仰 卧 位 睡 眠8周(46h/d),酶 联 免 疫 吸 附 测 定 法(e n z y m el i n k e di mm u n o s o r b e n t a s s a y,E L I S A)测定血浆中炎症因子的表达,免疫组织化学(i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y,I HC)染色和实时荧光定量聚合酶链反应(r e a l-t i m eq u a n t i t a t i v ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n,q R T-P C R)测定腭咽组织中炎症因子表达。结果E L I S A实验结果显示O S AH S组血清中I L-1、I L-6、TN F-的含量均显著高于对照组和MA D组(P0.0 5)。q R T-P C R结果显示O S AH S组腭咽组织中炎症因子基因表达量比对照组和MA D组均显著升高。T N F-免疫组织化学显示O S AH S组腭咽组织中TN F-阳性细胞明显多于对照组和MA D组。结论MA D治疗可以减轻O S AH S引起的全身及腭咽组织的炎症反应。关键词 睡眠呼吸暂停,阻塞性;正畸矫正器;白细胞介素1;肿瘤坏死因子 d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 7-3 2 0 5.2 0 2 3.0 8.0 0 3 中图分类号 R 7 4 9.7 9 文献标志码 A 文章编号 1 0 0 7-3 2 0 5(2 0 2 3)0 8-0 8 8 3-0 6E f f e c t so fm a n d i b u l a ra d v a n c e m e n td e v i c eo ni n f l a mm a t o r yf a c t o r s i np a l a t o p h a r y n g e a lt i s s u ea n dp l a s m ao fO S A H SZ HAOY u a n,YANGL i n,S UNC h a o-r a n,YANGT i n g,P E NG W e n-t a o,L I UC h u n-y a n*(D e p a r t m e n t o fO r t h o d o n t i c s,H e b e iK e yL a b o r a t o r yo fS t o m a t o l o g y,H e b e iC l i n i c a lR e s e a r c hC e n t e r f o rO r a lD i s e a s e s,S c h o o la n dH o s p i t a l o fS t o m a t o l o g y,H e b e iM e d i c a lU n i v e r s i t y,S h i j i a z h u a n g0 5 0 0 1 7,C h i n a)A b s t r a c t O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ee f f e c t so fm a n d i b u l a r a d v a n c e m e n td e v i c e(MA D)o ni n t e r l e u k i n1(I L-1),i n t e r l e u k i n6(I L-6)a n dt u m o rn e c r o s i sf a c t o r(T N F-)i np a l a t o p h a r y n g e a l t i s s u ea n dp l a s m ao fr a b b i t sw i t ho b s t r u c t i v es l e e pa p n e ah y p o p n e as y n d r o m e(O S AH S),a n dt op r o v i d eat h e o r e t i c a lb a s i s f o r t h ec l i n i c a l t r e a t m e n to fO S AH S.M e t h o d s At o t a l o f3 0 m a l eN e w Z e a l a n dr a b b i t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ot h r e eg r o u p s.T h eO S AH Sm o d e lw a s i n d u c e d i nO S AH Sg r o u pa n dMA Dg r o u p.T h ea n i m a l sw e r ee q u i p p e dw i t hMA D s i nMA Dg r o u pa n dn ot r e a t m e n tw a sg i v e n i nt h ec o n t r o l g r o u p.A l l t h ea n i m a l sw e r ek e p t t os l e e p388第4 4卷第8期2 0 2 3年8月 河北医科大学学报J OUR NA L O F HE B E I ME D I C A L UN I V E R S I T Y V o l.4 4 N o.8 A u g.2 0 2 3 i ns u p i n ep o s i t i o n f o r 8w e e k s(4-6h/d).T h ee x p r e s s i o no f i n f l a mm a t o r y f a c t o r s i np l a s m aw a sd e t e r m i n e d b y e n z y m e l i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y(E L I S A),a n d t h e e x p r e s s i o n o fi n f l a mm a t o r yf a c t o r s i np a l a t o p h a r y n g e a l t i s s u ew a sd e t e r m i n e db y i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y(I HC)a n dr e a l-t i m eq u a n t i t a t i v ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n(q R T-P C R).R e s u l t s T h e r e s u l t so fE L I S As h o w e dt h a t t h e l e v e l so f I L-1,I L-6a n dT N F-i nO S AH Sg r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h o s e i nt h ec o n t r o lg r o u pa n d MA Dg r o u p(P0.0 5).T h er e s u l t so f q R T-P C Rs h o w e d t h a t t h eg e n ee x p r e s s i o no f i n f l a mm a t o r y f a c t o r s i np a l a t o p h a r y n g e a lt i s s u e sw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e r i nO S AH Sg r o u pt h a n i nt h e c o n t r o l g r o u pa n dMA Dg r o u p.I HCs h o w e dt h a tp o s i t i v ec e l l sf o rT N F-i np a l a t o p h a r y n g e a lt i s s u e w e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e ri nO S AH Sg r o u p t h a n t h o s e i n t h e c o n t r o l g r o u pa n dMA Dg r o u p.C o n c l u s i o n MA Dc a nr e s c u e t h es y s t e m i ca n dp a l a t o p h a r y n g e a l i n f l a mm a t i o nc a u s e db yO S AH S.K e y w o r d s s l e e pa p n e a;o b s t r u c t i v e;o r t h o d o n t i ca p p l i a n c e s;i n t e r l e u k i n1;t u m o rn e c r o s i s f a c t o r 阻 塞 性 睡 眠 呼 吸 暂 停 低 通 气 综 合 征(o b s t r u c t i v e s l e e p a p n e a h y p o p n e a s y n d r o m e,O S AH S)作为一种睡眠呼吸障碍性疾病,近年来其发病率有明显增长的趋势1。该病特征是患者进入睡眠状态时出现上气道的阻塞、间歇性低氧同时伴有呼吸力增强2。O S AH S还会伴发有多种并发症3,如冠心病、系统性高血压等,严重降低患者的生活 质 量,甚 至 会 引 发 猝 死4。诸 多 研 究 表 明,O S AH S是一种慢性全身性低水平炎症性疾病,当患者长期处于间断性低氧状态时,会诱导机体产生多种与低氧有关的炎症因子5-6。本实验选取与O S AH S密切相关的三种炎症因子 肿瘤坏死因子(t u m o rn e c r o s i s f a c t o r,T N F-)、白细胞介素6(i n t e r l e u k i n6,I L-6)、白细胞介素1(i n t e r l e u k i n1,I L-1)进 行 研 究。虽 然 持 续 正 压 通 气(c o n t i n u o u sp o s i t i v ea i r w a yp r e s s u r e,C P A P)是目前治疗O S AH S的最有效的方法7,但近年来,下颌前 移 矫 治 器(m a n d i b u l a r a d v a n c e m e n t d e v i c e,MA D)以携带方便、戴用舒适等特点逐渐被临床所接受3,8,成为一种常用的临床方法。本研究旨在通过构建O S AH S和MA D动物模型,利用动物模型研 究 的 优 势,观 察 血 浆 和 腭 咽 组 织 中I L-6、T N F-、I L-1水平的变化,以此分析应用MA D治疗O S AH S对全身和局部炎症因子水平的影响,从而为临床治疗提供依据。1 材 料 与 方 法1.1 动物分组 3 0只雄性6月龄新西兰兔,体重3.03.5k g,购于河北医科大学动物中心,许可证编号:1 7 0 8 1 5 4,动物实验已获得河北医科大学口腔医院医学伦理委员会批准。将动物随机分为三组,每组1 0只,分别是对照组:即正常组O S AH S组MA D组:即下颌前移矫治器组。1.2 建立动物模型 建模方法参照本实验室前期方法9。建模前,三组动物取仰卧位进行上气道C B C T扫描和多导睡眠监测,检查和监测目的是排除解剖性上气道狭窄或先天性O S AH S的存在。将O S AH S组和MA D组动物分别建立为O S AH S动物模型,在口内距软硬腭交界1.5c m处的黏膜下肌层注射凝胶,起到上气道的阻塞作用,并应用上述方法监测观察呼吸睡眠指标及血氧饱和度的变化,来观察O S AH S动物模型是否建立成功9。事先取印模、灌注模型,调拌自凝牙托粉和牙托水制作MA D并进行修整。建模成功的MA D组兔配戴MA D,用玻璃离子黏固剂将MA D黏固于上前牙,调整MA D使其前斜面与上颌平面成6 0,从而达到打开咬合23mm,引导下颌前移34mm的目的(建模前后见图1)。全部建模完成后,应用上述同样的方法进行检查和监测,以评估疗效。对照组不作处理。1.3 仰卧位睡眠 所有动物检查无进水、进食困难之后,每日上午均按46m L/k g的剂量经口腔灌注1 0%水合氯醛,诱导其仰卧位睡眠,连续8周,每日46h,其余时间自由活动、进水和进食。1.4 标本采集 8周后,用1%戊巴比妥钠对兔进行全身麻醉,将四肢固定,打开口腔,剪开两侧口角。将下颌骨脱位,使软腭充分暴露,于咽肌与软腭移行处完整取下包括黏膜和肌层的软组织。各组兔一部分取出的组织立即投入1 0%福尔马林固定,固定完成后分切标本,装框,逐级酒精脱水,石蜡包埋,切片备用。各组兔一部分腭咽组织进行液氮迅速冷冻,488河 北 医 科 大 学 学 报 第4 4卷 第8期并存放于-8 0冰箱中备用。抽取动物血液,并进行离心制成血浆后保存于-8 0冰箱中备用。图1 O S A H S建模前后示意图A.建模前;B.建模后;,舌;,软硬腭交界;,凝胶注射部位F i g u r e1 S c h e m a t i c d i a g r a m b e f o r e a n d a f t e r O S A H Sm o d e l i n g1.5 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 法(e n z y m el i n k e di mm u n o s o r b e n t a s s a y,E L I S A)检测血浆中I L-1、I L-6和T N F-浓度 应用兔I L-1、I L-6和T N F-E L I S A试剂盒(武汉基因美生物科技有限公司产品),采用E L I S A双抗体夹心法于E L I S A检测仪上,4 5 0n m处以空白对照孔调零后测各孔O D值,从而检测分析对照组、O S AH S组、MA D组血浆中的I L-1、I L-6、T N F-的浓度。1.6 免疫组织化学染色 利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使酶标记抗体的显色剂(酶)显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、相对定量研究,从而观察对照组、O S AH S组、MA D组腭咽组织T N F-(北京博奥森生物技术有限公司,1 1 0 0稀释)的表达。在显微镜下观察时,先在低倍镜下查找组织及其范围,然后查看整个组织确定阳性产物的表达部位,然后将阳性产物表达部位置于视野正中央,换高倍镜观察。上皮层阳性染色多显示为细胞呈现棕黄色,上皮下层阳性染色多位于腺体周围。1.7 实 时 荧 光 定 量 聚 合 酶 链 反 应(r e a l-t i m eq u a n t i t a t i v ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n,q R T-P C R)取兔腭咽组织,研磨,制成匀浆,常规方法提取腭咽组织中的R NA,按照说明书反转录制成c D NA,提 前 于T h e r m o F i s h e r公 司 定 制I L-1、I L-6、T N F-以及内参基因GA P DH的特异性引物,引物序列如表1所示,按说明书操作,利用实时荧光定量P C R仪进行检测。首先进行反转录,提前将所需试剂进行稀释,将提取的R NA解冻、离心,应用2 0L体系,反转录成c D NA。然后,稀释产物,取1L于新的P C R八联管中,向其中加入1 0L M i x、上下游引物各1L、7L W a t e r,共2 0L,设置反应条件,经变性、退火、延伸,4 0次循环后,生成曲线和数据。最后,对数据进行分析,计算出目的基因I L-1、I L-6和T N F-的相对表达量。表1 引物序列T a b l e1 P r i m e r s e q u e n c e细胞因子及内参基因上游引物(5 -3)下游引物(5 -3)I L-1T T G T C A G T C G T T G T G G C T C TC A GAG GA C G G G T T C T T C T T C AAI L-6AA C T C C T T C A C AA G C G C C CT GAA G T G G G GAAAG C G G T A GTN F-A C G G G C T G T A C C T C A T C T A C TG T G T GA G T GA G GA G C A C G T AGA P DHT C G GA G T GAA C G GA T T T G G CT T C C C G T T C T C A G C C T T GA C1.8 统计学方法 应用S P S S2 2.0统计软件对数据进行分析。用K-S检验各组数据符合正态分布,计量资料组间比较采用单因素方差分析和S NK-q检验。P0.0 5为差异有统计学意义。2 结 果2.1 E L I S A实验结果 E L I S A实验结果 显示,O S AH S组三 组炎症 因 子 水 平 明 显 高 于 对 照 组,MA D组炎症因子水平低于O S AH S组,差异有统计学意义(P0.0 5),见表2。表2 三组血浆因子E L I S A分析结果T a b l e2 E L I S Aa n a l y s i s r e s u l t so fp l a s m a f a c t o r si nt h r e eg r o u p s(n=8,x-s,n g/L)组别I L-1I L-6T N F-对照组2.7 30.4 04.5 10.3 13.1 90.1 6O S AH S组4.4 20.8 8*7.1 20.2 1*5.9 60.2 1*MA D组3.4 50.3 5#6.2 70.4 1#4.8 20.2 0#F值1 6.5 6 21 3 8.0 6 04 2 7.6 3 6P值0.0 0 10.0 0 10.0 0 1*P值0.0 5与对照组比较#P值0.0 5与O S AH S组比较(S NK-q检验)2.2 组织学观察 对腭咽组织进行HE和免疫组织化学染色结果如图2所示。免疫组织化学结果对比显示,对照组上皮层和结缔组织层有散在阳性细588河 北 医 科 大 学 学 报 第4 4卷 第8期胞,而O S AH S组腭咽组织的上皮、结缔组织层和腺泡细 胞 周 围 有 大 量T N F-阳 性 细 胞,MA D组T N F-阳性细胞较O S AH S组少。O S AH S组的兔腭咽肌周围和腺体间染色呈阳性,炎症反应较正常组明显,MA D组炎症反应较O S AH S组轻。图2 兔腭 咽组 织H E染 色和T N F-免疫组织化学染色A.正常组HE染色(1 0 0);B.O S AH S组HE染 色(1 0 0);C.MA D组HE染 色(1 0 0);D.正常组I HC染色(2 0 0);E.O S AH S组I HC染色(2 0 0);F.MA D组I HC染色(2 0 0);G.正常组I HC染色(2 0 0);H.O S AH S组I HC染色(2 0 0);I.MA D组I HC染色(2 0 0);J.正常组I HC染色(4 0 0);K.O S AH S组I HC染色(4 0 0);L.MA D组I HC染色(4 0 0);M.正常组I HC染色(4 0 0);N.O S AH S组I HC染色(4 0 0);O.MA D组I HC染色(4 0 0)F i g u r e2 H Es t a i n i n go f r a b b i tp a l a t o p h a r y n g e a l t i s s u ea n d i mm u n o h i s t o c h e m i c a l s t a i n i n go fT N F-2.3 q R T-P C R O S AH S组腭咽组织炎症因子基因表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.0 5),MA D组炎症因子表达水平较O S AH S组降低。见表3。表3 三组腭咽肌组织匀浆P C R基因相对表达量分析结果T a b l e3 P C Ra n a l y s i s r e s u l t so f r e l a t i v e e x p r e s s i o no fg e n e s i nh o m o g e n a t eo fp a l a t o p h a r y n g e a lm u s c l et i s s u e i nt h r e eg r o u p s(n=6,x-s)组别I L-1I L-6T N F-对照组111O S AH S组3.4 60.1 0*3.8 10.3 1*4.1 80.0 6*MA D组1.2 90.0 6#1.4 70.1 3#2.1 80.5 5#F值17 3 6.5 5 92 4 4.7 5 148 9 7.1 1 9P值0.0 0 10.0 0 10.0 0 1*P值0.0 5与对照组比较#P值0.0 5与O S AH S组比较(S NK-q检验)设对照组为1,去计算另外两组结果的相对表达量3 讨 论O S AH S发病率高,危害性大,是一种慢性全身性低水平炎症性疾病。经HE染色发现O S AH S会造成腭咽组织上皮钉突延长,腺体结构紊乱。MA D治疗可减轻O S AH S引起的结构损伤,在组织学上证明了MA D治疗O S AH S的有效性1 0。MA D作为治疗O S AH S的一种有效的非创伤的方法,通过牵引下颌,使其向前移动,抬高软腭,扩大口咽容积,从而降低上气道狭窄的程度,缓解低通气的症状1 1-1 2。当患者长期处于间断性低氧状态时,会诱导机体产生多种与低氧有关的炎症因子。动物研究发现6,O S AH S小鼠模型的中枢神经系688河 北 医 科 大 学 学 报 第4 4卷 第8期统和组织中T N F-和I L-6的水平均有不同程度的升高。同时,长期的低氧状态会使血清中I L-1增加,它可与免疫细胞相互作用,二者之间形成恶性循环,从 而 对 机 体 造 成 损 伤5。本 研 究 通 过 构 建O S AH S和MA D动物模型,观察血浆和腭咽组织中I L-6、T N F-、I L-1水平的变化,以此分析应用MA D治疗O S AH S对全身和局部炎症因子水平的影响,从而为临床治疗提供依据。本研究中免疫组织化学染色结果显示正常组仅存在少量的T N F-阳性细胞,而O S AH S组大量的T N F-抗原抗体复合物在各层都有沉积,包括上皮层,上皮下层和腺体之间,表明该部位存在炎症反应并有组织的局部破坏。E L I S A和P C R实验结果分别表明O S AH S组兔全身和局部腭咽组织的炎症因子水平明显高于正常组。其可能的机制1 3是O S AH S特有的慢性间歇性低氧(c h r o n i c i n t e r m i t t e n th y p o x i a,C I H)是一种周期性的低氧-再给氧过程,再给氧过程中的低氧水平会引起机体产生交感神经兴奋等一系列的反应,导致氧化应激反应的发生1 4,此过程会激活对氧化还原反应敏感的转录因子如核因子 B(n u c l e a rf a c t o r B,N F-B)1 5,从而激活N F-相关炎症通路。N F-可以通过调节多种促炎因子的转录和表达过程,使白介素、肿瘤坏死因子等炎症因子的释放显著增加,同时释放大量自由基使细胞膜完整性受到破坏,导致局部和全身性炎症反应的发生1 6。研究证明,N F-B蛋白的表达水平与O S AH S的严重 程 度 呈 明 显 正 相 关 性,这 也 进 一 步 反 映 出O S AH S的严重程度与炎症反应水平有关1 5。有研究发现炎症因子会作用于上气道肌,增加肌疲劳性,使病情不断地恶化,从而引发并加剧全身的炎症反应,以此形成恶性循环加重O S AH S程度1 7。本研究结果显示,MA D组腭咽组织中T N F-阳性细胞较O S AH S组明显减少,说明MA D治疗降低了由O S AH S引起腭咽组织中T N F-的含量,原因可能是MA D打开了上气道,慢性间歇性低氧症状得以缓解,T N F-释放减少。血浆E L I S A实验结果和腭咽组织P C R结果同样显示MA D组全身和腭咽组织的T N F-、I L-6、I L-1的浓度、基因表达 较O S AH S低,说 明MA D治 疗 可 以 减 轻O S AH S引起的全身及腭咽组织局部的炎症反应。M a t s u m u r a等1 8对经MA D治疗前后的患者进行C T扫描分析,观察到腭咽部软组织体积较治疗前显著减小,上气道容积明显增加,进一步证实MA D可以有效改善O S AH S患者低氧症状,减轻氧化应激反应从而降 低炎症因子 水平。有学者1 9曾将MA D与C P A P的治疗效果进行对比,就呼吸紊乱指数(a p n e ah y p o n e a i n d e x,AH I)来看C P A P效果仍优于MA D,但对于患者来说更倾向于痛苦小、方便易行的MA D治疗。MA D的治疗效果主要与患者的依从性有关2 0,依从性越好,治疗效果越显著。综上所述,从组织学形态上观察到MA D治疗可以改善由O S AH S引起的腭咽肌结构损伤,从蛋白水平及基因表达方面观察到O S AH S组I L-6、I L-1、T N F-水平均较正常组有不同程度的升高,表明这些炎症因子共同参与了O S AH S的发生、发展并影响其严重程度,而O S AH S本身又加重炎症刺激,进而形成恶性循环。MA D组炎症因子水平相较于O S AH S组有显著降低,证明MA D治疗可减轻O S AH S引起的全身及局部腭咽组织的炎症反应。本研究可帮助加深临床工作者对该疾病的认识、正确诊断并进行及时有效的干预,为MA D治疗O S AH S的可行性提供有力的理论依据。参考文献1 G u oX,Z h a oY,W a n gM,e t a l.T h ep o s t e r i o rp h a r y n g e a lw a l lt h i c k n e s si s a s s o c i a t e d w i t h O S AH S i n p a t i e n t s w i t ha c r o m e g a l ya n dc o r r e l a t e sw i t hI G F-1l e v e l sJ.E n d o c r i n e,2 0 1 8,6 1(3):5 2 6-5 3 2.2 L a b a r c aG,G o w e rJ,L a m p e r t iL,e ta l.C h r o n i c i n t e r m i t t e n th y p o x i a i no b s t r u c t i v es l e e pa p n e a:an a r r a t i v er e v i e wf r o mp a t h o p h y s i o l o g i c a lp a t h w a y st oap r e c i s i o nc l i n i c a la p p r o a c hJ.S l e e pB r e a t h,2 0 2 0,2 4(2):7 5 1-7 6 0.3 L i uC,K a n g W,Z h a n gS,e ta l.M a n d i b u l a ra d v a n c e m e n td e v i c e sp r e v e n t t h e a d v e r s e c a r d i a c e f f e c t s o f o b s t r u c t i v e s l e e pa p n e a-h y p o p n e as y n d r o m e(O S AH S)J.S c iR e p,2 0 2 0,1 0(1):3 3 9 4.4 C a i nMA,R i c c i u t i J,L o u i s J M.S l e e p-d i s o r d e r e db r e a t h i n ga n df u t u r ec a r d i o v a s c u l a rd i s e a s er i s kJ.S e m i nP e r i n a t o l,2 0 1 5,3 9(4):3 0 4-3 0 9.5 S a p i nE,P e y r o n C,R o c h e F,e ta l.C h r o n i ci n t e r m i t t e n th y p o x i a i n d u c e sc h r o n i cl o w-g r a d en e u r o i n f l a mm a t i o ni nt h ed o r s a lh i p p o c a m p u so fm i c eJ.S l e e p,2 0 1 5,3 8(1 0):1 5 3 7-1 5 4 6.6 K h e i r a n d i s h-G o z a lL,G o z a lD.O b s t r u c t i v es l e e pa p n e aa n di n f l a mm a t i o n:p r o o fo fc o n c e p t b a s e d o n t w oi l l u s t r a t i v ec y t o k i n e sJ.I n t JM o lS c i,2 0 1 9,2 0(3):4 5 9.7 A b u dR,S a l g u e i r o M,D r a k eL,e ta l.E f f i c a c yo fc o n t i n u o u sp o s i t i v ea i r w a yp r e s s u r e(C P A P)p r e v e n t i n gt y p e2d i a b e t e sm e l l i t u si np a t i e n t sw i t ho b s t r u c t i v es l e e pa p n e ah y p o p n e as y n d r o m e(O S AH S)a n di n s u l i n r e s i s t a n c e:as y s t e m a t i cr e v i e wa n dm e t a-a n a l y s i sJ.S l e e pM e d,2 0 1 9,6 2:1 4-2 1.(下转第9 4 0页)788赵 圆等 下颌前移矫治器对O S AH S腭咽组织和血浆中炎症因子的影响1 5 1 5-1 5 1 9.6 R o t h eT,S p a g n o l o P,B r i d e v a u x P O,e ta l.D i a g n o s i sa n dm a n a g e m e n to f a s t h m a-t h es w i s sg u i d e l i n e sJ.R e s p i r a t i o n,2 0 1 8,9 5(5):3 6 4-3 8 0.7 L e eDH,Kw o nJ W,K i m HY,e ta l.A s t h m ap r e d i c t i v e i n d e xa sau s e f u ld i a g n o s t i ct o o li n p r e s c h o o lc h i l d r e n:ac r o s s-s e c t i o n a l s t u d yi nK o r e aJ.C l i nE x pP e d i a t r,2 0 2 0,6 3(3):1 0 4-1 0 9.8 C a a sJ A,S a s t r eB,R o d r i g o-M u o zJ M,e ta l.E x o s o m e s:an e wa p p r o a c h t oa s t h m ap a t h o l o g yJ.C l i nC h i mA c t a,2 0 1 9,4 9 5(1):1 3 9-1 4 7.9 王艳艳,安淑华,李权恒,等.患儿首次喘息发作的转归及治疗随访研究J.河北医药,2 0 1 9,4 1(1 6):2 5 2 7-2 5 2 9,2 5 3 3.1 0 P h oH,B e r g e rS,F r e i r eC,e t a l.L e p t i nr e c e p t o r e x p r e s s i o n i nt h ed o r s o m e d i a lh y p o t h a l a m u ss t i m u l a t e sb r e a t h i n gd u r i n gN R EMs l e e p i nd b/d bm i c eJ.S l e e p,2 0 2 1,4 4(6):z s a b 0 4 6.1 1 吕晓江,刘增荣,康迁,等.肥胖伴哮喘患儿自身体质指数变化与脂肪因子、肺功能的相关性研究J.四川医学,2 0 1 9,4 0(1 1):1 0 9 0-1 0 9 2.1 2 I h r i eMD,M c Q u a d eV L,W o m b l eJ T