杀虫剂生物测定技术市公开课一等奖百校联赛优质课金奖名师赛课获奖课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。,第二章 杀虫剂生物测定技术,1/62,标准试虫,杀虫剂生物测定方法,毒力表示方法,杀螨剂生物测定方法,杀虫剂田间药效试验,2/62,一、标准试虫,标准试虫是指数种被普遍采取含有一定代表性和经济意义及耐药能力较稳定而均匀昆虫群体。标准试虫大量供给与质量均匀是影响生物测定结果正确、稳定与可靠最基本因子，同时也是确保顺利地开展和完成生物测定最基本条件之一。,3/62,（1）粘虫（,Leucania separate,Walker,），代表鳞翅目咀嚼式口器食叶性害虫。（可人工喂养）,（2）玉米螟（,Ostrinia nubilalis,），代表为害杂粮作物钻蛀性害虫。（可人工喂养）,（3）二化螟（,Chilo suppressalis,）,代表钻蛀性水稻害虫。（可人工喂养）,惯用供试昆虫有：,4/62,（4）还有三化螟、棉铃虫、地老虎农业害虫等。,（5）卫生害虫（如蚊、蝇类）,（6）仓库害虫（米象、赤拟谷盗等）,（7）刺吸性害虫（蚜螨类）,5/62,（1）在分类上或经济上有一定代表性不一样种类昆虫；,（2）对药品敏感性符合要求；,（3）轻易喂养，能终年提供试材，使测定工作不受地域或季节限制；,（4）在试验中便于控制操作。,供试昆虫要求,6/62,二、杀虫剂生物测定方法,（1）胃毒作用,（2）触杀作用,（3）熏蒸作用,（4）内吸作用,7/62,夹毒叶片法,液滴饲喂法,口腔注射法,胃毒作用（,stomach action,）测定方法,8/62,叶片夹毒法适合于植食性、取食量大咀嚼式口器昆虫，如鳞翅目幼虫、蝗虫等。其基本原理是用2张叶片，中间均匀地分布一层杀虫药剂，饲喂试虫，按吞食叶片面积计算吞食药量。,夹毒叶片法,（sandwich method）,9/62,对于舐吸式口器昆虫不宜用夹毒叶片法，如家蝇、果蝇、蜜蜂等昆虫喜欢食糖液，可将一定量杀虫剂加入到糖液中，用微量注射器形成一定大小液滴（0.0010.01ml），直接饲喂昆虫。,液滴饲喂法,（Feeding of measured drops）,10/62,普通适用个体较大咀嚼式昆虫，如家蚕，鳞翅目幼虫等，处理时，将药剂溶解后用微量注射器或手细管点滴定量药液注入试虫口器中，昆虫吞食药液后，转入放有新鲜饲料容器中培养观察。,这种方法因为从口腔注入药液时易刺破口腔内软组织，技术难以掌握。所以，应用较少。,口腔注射法,11/62,触杀作用（contact action）测定方法,点滴法,药膜法或残膜法,浸液法,12/62,室内定量测定触杀毒力最惯用方法。在测定触杀毒力时，应尽可能防止药剂从口器或气孔进入虫体。直接将药液点滴到昆虫某一部位。多为幼虫前胸背板，溶剂快速挥发，药剂在体壁上形成药膜而侵入体内。,点滴法,13/62,用喷雾法及喷粉法将药剂定量地分布于一定表面上，如滤纸、玻璃容器内壁及植物叶片等而形成一层均匀药膜。使昆虫在药膜上接触一定时间（424h），检验击倒率或死亡率。求出药剂对试虫毒力。,药膜法或残膜法,14/62,对于水生昆虫（蚊幼虫、螨类和蚜虫）将药剂配成57个不一样浓度有药液，摘取有一定数量蚜虫豆苗叶片，在不一样药液中浸35s，取出后，用吸水纸吸去多出药液，统计叶片上蚜虫数量，对照用清水处理。保湿24h，检验蚜虫死亡数，计算死亡率及校正死亡率，求出LC,50,。,浸液法,15/62,一些药剂有内吸性如许多有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂能够经过植株根、茎、叶等部位吸收到植株内部，伴随植物体液在体内传导，当害虫取食或刺吸植物时，药剂也随之进入害虫体内并将其杀死。,内吸作用（Systemic action）试验方法,16/62,内吸杀虫剂毒力测定方法分为,直接测定法,和,间接测定法,2种。直接法包含茎或叶局部涂药、根际施药及种子处理等。间接法是用处理后植物，取其叶片研磨成为水剂，加在水中，测定对水生昆虫毒力。,17/62,定义,杀虫药剂以气体方式经过害虫呼吸系统进入虫体，而起到毒杀作用称熏蒸作用。,目标,熏蒸作用毒力测定目标主要有2个：一是用判别杀虫剂有没有熏蒸作用；二是测定熏蒸剂杀虫毒力。,注意,要求在一个密闭条件下进行，且药剂不与试虫接触。,熏蒸作用（fumigation action）测定方法,18/62,毒力表示方法及计算,致死中量（LD,50,：Median lethal dose）或致死中浓度（LC,50,：Median lethal concentration）：药剂杀死某种生物群体50所需剂量（LD,50,）或浓度（LC,50,）。,19/62,结果检验与LD,50,计算,胃毒作用,触杀作用,20/62,以夹毒叶片法,为例,昆虫取食后放在洁净容器中，加入新鲜植物叶片，在2472h后检验死亡率。因为各昆虫取食量不一样，所以必须单独观察统计。,21/62,依据取食面积、单位面积上着药量（g/g），依据单位体重受药量，由小至大次序排列，因为在取食量较小时试虫无死亡；伴随取食量加大，出现死、活都有出现剂量范围；再加大取食量，试虫全部死亡。这三种表现自然分成三组：（1）生存组（2）生死组（3）死亡组。如试验中三组数值均出现，则说明试验成功，如缺其中一组，应重做。生存组和死亡组是划分生死组（中间组）界限。,22/62,将中间组死虫每项单位体重药量累加，除以总死虫数得A；中间组活虫每项单位体重相加除以活虫数得B。将AB除2即得致死中量（g/g），计算公式为,致死中量（LD,50,）（AB）/2,23/62,供试药剂设计56个浓度梯度，每个浓度为一个处理，每个处理4060头，重复46次，每个重复10头。,用微量点样器在供试昆虫前胸背板上点一定体积药量，2448h后检验死亡虫数。统计死亡率，计算LD,50,。,触杀毒力结果检验,24/62,LD,50,（LC,50,）计算,死亡率（%）死虫数/供试虫数X100%,校正死亡率（%）处理组死亡率对照组死亡度/100对照组死亡率X100,单位体重受药量（g/g）处理浓度（ppm）X点滴药量(l)/试虫平均体重(g)X100,25/62,LD,50,计算方法,作图法,Excel法,最小2乘法,26/62,例：用点滴法测定辛硫磷对玉米螟5龄幼虫毒力，试虫平均体重为0.046g/头，每头试虫点滴0.8l药剂丙酮液，48h检验试虫死亡率，结果如表1-1。试计算辛硫磷对玉米螟5龄幼虫LD,50,。,27/62,28/62,29/62,30/62,31/62,32/62,33/62,34/62,35/62,36/62,37/62,用计算器求毒力方程及,L,D,50,或,LC,50,打开计算器开关，先按,MODE,2,进入“,LR,”,按,INV,AC,去除旧存数字,按,INV,MR,去除贮存数字,将浓度对数值作为,X,输入到,XD,YD,，将死亡率查机率值作为,Y,输入到,RUN,顺次输入，输完后，按,Kout 3,检验输入数字组数。,38/62,按INV7显示数字为a值,按INV8显示数字为b值,按INV9显示数字为r值,已知 a b，就可写出回归方程y=a+bx,39/62,求LC,50,或LD,50,、LC,90,、LC,95,求,LC,50,，,按5INVYX；再按INVLog，显示数字为,LC,50,求,LC,90,按6.2816 INV Y X；再按INVLog，显示数字为LC,90,LC,95,按6.6449 INV Y X；再按INVLog，显示数字为LC,95,40/62,41/62,（1）死亡率校正：普通情况，若有对照死亡，需要校正，若对照死亡超出20%，应重做；如对照死亡率小于5%时，也可无须校正。,（2）死亡率范围：普通，最少有4个浓度处理试虫死亡率应在1090%。这么计算得到LD,50,更可靠。,（3）相关系数R：普通应在0.9以上。,注意事项,42/62,叶片浸液法,玻片浸液法,叶片残毒法,杀螨剂毒力测定方法,43/62,1 用盆栽豆苗（大豆苗）繁殖叶螨（如棉叶螨），测定时用成螨，且发育时间（日龄）一致。,2 将成螨转到无虫豆苗上，每株40头左右。,叶片浸液法,44/62,3 将待测药剂（乳油或可湿性粉剂）用水稀释成系列浓度，每一浓度可配4050ml，置于小烧杯中。,4 将接上螨豆苗浸入药液6s，取出后用吸水纸吸去多出药液。处理时先用清水处理对照(CK)，再由低浓度至高浓度处理，每一浓度重复45次。,45/62,5 处理后豆苗置于25恒温箱中，保持24h后检验死亡率。为了预防红蜘蛛逃逸，可在叶柄基部涂上一圈凡士林。,6 将药剂浓度取对数值，24h校正死亡率（或减退率）取机率值，用统计分析法求出毒力回归式Ya+bx及LC,50,值。,46/62,本法适于测定各种雌成螨，喂养时必须将螨种判别、纯化，使之为单一个类。以苹果实生苗喂养山楂红蜘蛛，以柑桔苗喂养柑桔红蜘蛛，螨龄期应一致。,浸玻片法,47/62,1将双面尼龙胶带剪成2cm长，贴在惯用载玻片一端。,2用零毫毛笔挑起34日龄雌成螨，将其背部粘在胶带上，每行10头，粘23行或用毛笔将雌成螨集中在一起。然后将贴在胶带玻片胶面部分轻轻地压向成螨背部，以粘着为准，再用毛笔将重合或不规则或死亡挑去，使其成行保留，这么比较省时也省工。,48/62,3用水将药剂配成系列浓度，置于小烧杯中，用手持纸片无螨一端，将粘有螨一端置药液中浸5秒钟，取出后用吸水纸吸去多出药液。对照用清水处理。各处理重复4次。,49/62,4取一白瓷盘，盘底铺厚2cm海绵，其上铺一块略小一点蓝布，再铺一层塑料薄膜，然后加蒸馏水至蓝布。将粘有螨玻片平放在盘中，再用纱布罩住，置25，相对湿度85左右温室中，经24h检验死亡率。用毛笔尖轻轻触动螨足，以不动者为死亡。求出毒力回归式及LC,50,值。,50/62,编号,浓度,名称,日期,。,浸玻片法示意图,注：。表示为成螨,51/62,叶片残效法,此法适合用于测定卵、若螨及背部刚毛过长雌成螨（不易用浸玻片法）。,1 在直径为9cm培养皿内放入保温叶片,2 在叶片上接20头雌成雌成螨，让其在叶片上产卵，24h后移去成螨，保留螨卵。,3 将待测药剂用水稀释成5个系列浓度,52/62,4 将有螨卵叶片在待测药液中浸5s，每一药液浓度重复5次，对照用清水处理。,5 将培养皿保持在22，相对湿度95恒温箱内，天天观察记载卵孵化数及若螨存活数，直至对照组全部孵化成若螨。,6 计算药剂各浓度杀卵或杀死若虫效果。求出药剂杀卵或若虫毒方程及LC,50,。,53/62,杀虫剂田间药效试验,54/62,处理组死亡率对照组死亡率,校正死亡率（%）,1对照组死亡率,X100,注意：,自然死亡在20 以内，能够用上面公式,计算，不然不行；,自然死亡在5以内，无须校正死亡率。,55/62,田间防治试验中最惯用是虫口减退率：,56/62,Henderson-Tilton,（享德森递尔顿）公式：,Ta处理区防治后存活个体数量；,Tb处理区防治前存活个体数量；,Ca对照区防治后存活个体数量；,Cb对照区防治前存活个体数量。,57/62,一、填空,1。胃毒作用测定方法有,夹毒叶片法,、,液滴饲喂法,和,口腔注射法,。,2。,触杀作用测定方法有,点滴法,、,药膜法或残膜法,和,浸液法,。,3。内吸杀虫剂毒力测定方法分为,直接测定法,和,间接测定法,2种。,58/62,4。杀螨剂毒力测定方法有,叶片浸液法,、,玻片浸液法,和,叶片残毒法,。,59/62,1.供试昆虫有哪些要求？,2.在杀虫剂毒力测定试验中有哪些注意事项？,3.依据熏蒸作用原理，设计一个对根结线虫方案。,二、简答题,60/62,4.依据内吸作用原理，设计一个对蔬菜蚜虫毒杀作用方案（用直接法）。,61/62,三、计算题,依据所给数，计算LD,50,或EC,50,62/62,