褪黑素浸种对滇油杉种子发芽及苗木生长和生理特性的影响_周冬梅.pdf

第 41 卷 第 2 期2023 年 4 月四川农业大学学报Journal of Sichuan Agricultural UniversityVol.41 No.2Apr.2023褪黑素浸种对滇油杉种子发芽及苗木生长和生理特性的影响周冬梅1，2，李莲芳1*，朱存福1*，顾梦1，2，张合瑶1，2，李小军1，刘娴1，侯海雄1，2，王文俊1，2（1.西南林业大学林学院，昆明 650224；2.西南林业大学西南地区生物多样性保育国家林业和草原局重点实验室，昆明 650224）摘要：【目的】了解褪黑素浸种对滇油杉（Keteleeria evelyniana）种子发芽和苗木生理的影响，开展不同浓度褪黑素溶液浸种试验，为滇油杉种子发芽及壮苗培育提供科学理论依据。【方法】采用单因素完全随机试验设计，开展不同浓度（0、0.3、0.6、0.9和1.2 mmol/L）褪黑素溶液浸种研究。计算处理的种子发芽性状，以及测定苗木生长、光合色素及酶活性的变化。【结果】处理的发芽率、发芽势、平均发芽时间、发芽指数、叶绿素、类胡萝卜素含量、SOD、POD、CAT活性和 MDA 含量分别为 40.4%60.0%、14.5%32.1%、12.614.6 d、4.27.2 粒/d、0.961.43 mg/g、0.160.23 mg/g、185.4360.7 U/（gmin）、24.464.9 U/（gmin）、1 532.11 916.3 U/（gmin）、9.525.6 nmol/g，褪黑素处理的所有指标均显著或极显著地优于对照的（P0.05或P0.01）。【结论】0.3 mmol/L褪黑素溶液浸种有益于种子发芽、光合色素形成和提高保护酶的活性，促进苗木生长，可应用于滇油杉的种子处理。关键词：滇油杉；褪黑素；发芽性状；苗木生长；生理特性中图分类号：S723.1+31 文献标志码：A 文章编号：1000-2650（2023）02-0249-08Effect of Melatonin on Seed Germination and Seedling Growth and Physiological Properties of Keteleeria evelynianaZHOU Dongmei1，2，LI Lianfang1*，ZHU Cunfu1*，GU Meng1，2，ZHANG Heyao1，2，LI Xiaojun1，LIU Xian1，HOU Haixiong1，2，WANG Wenjun1，2（1.Forestry College of Southwest Forestry University，Kunming 650224，China；2.Key Laboratory of National Forestry and Grassland Administration on Biodiversity Conservation in Southwest China，Southwest Forestry University，Kunming 650224，China）Abstract:【Objective】In order to understand the effects of seed soaking with the melatonin on seed germination and seedling physiology of Keteleeria everyniana，this study implemented seed soaking trial with different concentrations of melatonin solution to provide scientific and theoretical basis for seed germination and strong seedling cultivation of K.everyniana.【Method】A single factor complete randomized experiment design was employed to carry out the trial of seed soaking with different concentrations of melatonin solutions.Seed germination properties were recorded among treatments，and the changes of seedling growth，photosynthetic pigments and enzyme activities were measured.【Result】The germination rates，germination potentials，mean germination time，germination index，chlorophyll content，carotenoid content，activities of SOD，POD，CAT and MDA content were 40.4%60.0%，14.5%-32.1%，12.614.6 day，4.27.2 seed/day，0.961.43 mg/g，0.160.23 mg/g，185.4360.7 U/（gmin），24.464.9 U/（gmin），1 532.11 916.3 U/（gmin）and 9.525.6 nmol/g，respectively，with all parameters of doi:10.16036/j.issn.1000-2650.202209188收稿日期：2022-09-28基金项目：国家“十三五”重点计划项目（2017YFD0600504-1）。作者简介：周冬梅，硕士研究生。*责任作者：李莲芳，教授，博士生导师，主要从事森林培育研究，E-mail：；朱存福，硕士，讲师，主要从事森林培育研究，E-mail：。四川农业大学学报第 41 卷 the melatonin-treated seeds or seedlings significantly higher than those of control（P0.05 or P0.01）.【Conclusion】Soaking seeds with 0.3 mmol/L melatonin solution was found to be beneficial for seed germination，photosynthetic pigment formation，improving the activities of protective enzymes，and promoting the growth of seedlings，which could be applied to seed treatment of K.everyniana.Keywords:Keteleeria everyniana；melatonin；germination property；seedling growth；physiological property滇油杉（Keteleeria evelyniana）为松科（Pinaceae）油杉属乔木树种，其主要分布于云南，四川西南部和贵州西部等地区，分布区海拔1 4002 500 m；云南主要以滇中为分布中心1。滇油杉干形通直，树形优美，树皮耐火，因此，可用其作为分布区的优质用材林和防火隔离带树种；其耐荫，可与多种树种混交成林2-5。在滇中，滇油杉的嫩茎叶作为森林蔬菜食用，可结合森林抚育开展资源有效利用。滇油杉种子无坚硬的外种皮保护，种皮富含油腺，种子富含油脂，故此，成熟种子贮存期间油脂易氧化，种子容易失去生活力。已有研究指出，滇油杉种子在室温下贮藏，其生活力最长保持时间为6个月，采集制种后采用0.45 g/L IBA和0.30 g/L IAA混合溶液浸种可提高滇油杉种子发芽率（56.0%）和发芽势（27.0%），缩短发芽时间6-7。姜若超等8发现，0.1 g/L的GA3和0.05%的壳寡糖（chitosan oligosaccharide,COS）溶液混合浸种提高滇油杉种子场圃发芽（69.6%）。褪黑素（melatonin,MT）是一种多功能的植物生长调节剂，其广泛存在于动植物体内9，具有极强的抗氧化功能，有效缓解活性氧积累的伤害，保护细胞结构，清除自由基10。已有研究发现，褪黑素可以有效缓解盐胁迫、干旱胁迫、镉胁迫、低温和高温等胁迫的伤害11-14。黎力乙等15指出，150 mmol/L NaCl溶液胁迫下，0.1 mmol/L褪黑素浸种对苜蓿（Medicago sativa）种子缓解盐胁迫极为有效。王慧等16采用褪黑素溶液叶面喷施和根施干旱胁迫的黑麦草（Lolium perenne）和苜蓿植株，黑麦草的生物量分别增加14.5%和29.6%，苜蓿的则增加36.6%和49.1%；提高黑麦草和苜蓿的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化物酶（peroxidase,POD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性以及 N、P 含量，减少叶片中丙二醛（malondialdehyde,MDA）的积累，抗氧化能力和保护酶活性显著提高。向警等17在水稻（Oryza sativa）种子的试验中发现，0.2 mmol/L的褪黑素溶液浸种后，可有效缓解盐胁迫对水稻种子的伤害，提高种子的发芽率、发芽势、主根长及CAT活性；0.4 mmol/L的褪黑素溶液浸种后则有效提高种子的SOD和POD活性。目前，滇油杉在其分布区森林面积较小，且碎片化，人工林培育是恢复其森林植被的主要途径，苗木培育是造林的基础。虽然已有滇油杉种子发芽和苗木培育的相关试验研究，但促进种子发芽的措施仅开展生长激素浸种等方面的研究。本研究基于滇油杉种子富含油脂而易氧化的特性，采用不同浓度的褪黑素溶液浸种，了解外源褪黑素对滇油杉种子发芽和苗木抗氧化能力的影响，为滇油杉种子发芽及苗木培育提供科学依据，丰富褪黑素在种子发芽方面应用的相关资料。1材料和方法1.1试验地概况与材料试验于2022年3月底在西南林业大学林学院苗圃（10245E，25o03N；海拔约1 890 m）中进行，其属亚热带低纬度高原山地季风气候，日照长，霜期短，年均气温约14.7，年均降水量1 035 mm，年均相对湿度68.2%，年均日照时长2 200 h；土壤类型为山地红壤18，试验地位于滇油杉的分布中心。滇油杉种子于2021年12月采自宜良县国有花园林场（10314E，2492N；海拔约1 700 m），制种后测定的种子生活力为40.0%，种子贮藏于通风干燥的室温条件下，播种时种子已在室温下贮藏4个月。褪黑素购自上海源叶生物科技有限公司（CAS 号S20287）的分析纯粉剂，采用无纺布容器（9 cm9 cm）进行发芽和苗木培育。1.2试验设计根据已有文献和本试验的种子特性确定褪黑素的浓度梯度，其浓度为0.31.2 mmol/L，并增加1个不处理的对照（表1），采用单因素完全随机设计进行试验实施，试验共5个处理，每处理450粒种子（3次重复，每重复150粒）。表1试验的因素水平表Table 1Factorial levels of the trial处理Treatment褪黑素浓度/（mmolL-1）1CK20.330.640.951.2250第 2 期周冬梅，等：褪黑素浸种对滇油杉种子发芽及苗木生长和生理特性的影响试验前平整苗床，将采集的苗圃土分装入容器中，采用0.5%KMnO4溶液对基质和苗床进行消毒。选取大小一致，形态饱满的滇油杉种子，按试验设计分别用纱布包裹后置于不同浓度褪黑素溶液中浸种12 h，浸种结束后，将种子播入无纺布容器中，每处理90个无纺布容器，每个容器中播种5粒种子，播种后均匀覆盖一层基质并浇透水，搭建塑料拱棚，保证种子发芽所需温度，拱棚上覆盖遮阴网。发芽和苗木培育期间定期浇水除草。1.3指标测定种子发芽后，每2 d记录1次发芽数；待发芽结束后，计算发芽率（%）、发芽势（%）、平均发芽时间（d）和发芽指数（粒/d）。发芽指标的计算公式如下19：发芽势=(N0/N)100%(1)发芽率=(n/N)100%(2)平均发芽时间=(nidi)/ni(3)发芽指数=(ni/di)(4)式中，n为测定时间内正常发芽的种子数；N为置床的种子数；N0为日发芽种子数达到最高峰时正常发芽的种子数；di为从播种之日算起的天数，ni为相应各日正常发芽粒数。苗龄65 d时，测定其幼苗生长和生物量，具体方法为苗木取回实验室后测定地径、苗高、胚轴长和针叶数，之后每株编号分根、茎、叶测定生物量鲜重，分单株按编号密封于信封内置入120 烘箱内杀青2 h，再调至50 烘干至恒重，称其烘干重，计算根、茎、叶的含水率。生长和生物量测定的同期，每处理选择35株苗木，随机剪取一定数量的针叶混合，称取0.2 g针叶，采用乙醇浸提法20，测定其叶绿素和类胡萝卜素含量；MDA 含量、CAT、POD 和SOD活性使用苏州格瑞思生物科技的试剂盒采用硫代巴比妥法21、紫外吸收法22、愈创木酚比色法21和WST-8法21于紫外分光光度计（UV-6100 Double Beam Spectrophotometer）上进行测定。1.4数据统计与分析采用 Microsoft Excel 2016 和 SPSS 26.0 软件进行数据整理和分析。处理间若指标呈现显著或极显著差异，采用邓肯氏（Duncans）法进行多重比较；相关性采用Pearson法分析23。2结果与分析2.1不同褪黑素溶液浓度浸种对滇油杉种子发芽的影响不同浓度褪黑素溶液浸种的滇油杉种子发芽率和发芽势分别为41.5%60.0%和14.5%32.1%，CK的则为40.4%和15.2%；低浓度（0.3 mmol/L）褪黑素处理的发芽率和发芽势显著高于对照的（P发芽率=5.50E-050.01，P发芽势=9.42E-070.01），与对照相比提高了48.5%和111.2%，发芽率和发芽势随着褪黑素浓度的升高呈现下降的趋势（图1），结合此二指标，说明低浓度的褪黑素溶液浸种有利于种子发芽。褪黑素处理的平均发芽时间和发芽指数分别为 12.614.6 d 和 4.57.2 粒/d；CK 的为 13.3 d 和4.2粒/d，其中，1.2 mmol/L的平均发芽时间显著地长于其余处理的（P=1.10E-020.05），该浓度浸种延长种子发芽时间，降低发芽率；发芽指数与平均发芽时间相一致，随着褪黑素溶液浸种浓度提高而降低；综合平均发芽时间和发芽指数，0.3 mmol/L的褪黑素溶液浸种，提高种子发芽率和发芽势的同时，实现其发芽整齐一致（图1），即0.3 mmol/L的褪黑素溶液浸种有益于滇油杉种子发芽。2.2褪黑素浸种对滇油杉幼苗生长及其器官含水率的影响2.2.1苗木生长苗龄65 d时，褪黑素处理的地径、苗高、胚轴长、主根长和针叶数分别为 0.80.9 mm、6.77.6 cm、3.03.6 cm、7.49.9 cm 和 17.023.0 针/株（对照的分别为 0.9 mm、6.5 cm、4.3 cm、7.4 cm 和 15.8 针/株），其苗高和针叶数优于对照；处理间，0.3 mmol/L 褪黑素溶液浸种的主根长显著长于除 1.2 mmol/L 以外其余处理（P=5.10E-020.05），针叶数也是该浓度的最多；对照的胚轴较褪黑素浸种的长（表 2）。种子培育的滇油杉苗木，其地上部分为萌蘖芽形成的无性系苗木，较长的胚轴推迟萌蘖芽形成，影响苗木生长，因此，褪黑素溶液浸种缩短胚轴，促进萌蘖芽快速发育，提高种子发芽和促进苗木生长。2.2.3苗木含水率褪黑素处理的根、茎和叶的含水率分别为70.8%75.7%、78.7%80.7%和 75.2%84.8%，对照的分别为67.0%、76.3%和74.3%，褪黑素处理的均高于对照的；处理间，0.3 mmol/L褪黑素溶液浸种的针叶含水率显著地高于其余处理的（P=1.30E-020.05；表2），即褪黑素溶液浸种同时可调节滇油杉幼苗的器官含水量。251四川农业大学学报第 41 卷 2.3褪黑素溶液浸种对滇油杉幼苗叶绿素和类胡萝卜素的影响与生长测定的同期，褪黑素溶液浸种处理的叶绿素和类胡萝卜素含量分别为 0.961.43 mg/g 和0.160.23 mg/g（CK的为0.98 mg/g和0.21 mg/g）；与发芽性状和生长相同，0.3 mmol/L褪黑素溶液浸种的叶绿素含量极显著地高于其余处理的（P=1.75E-050.01），说明该浓度处理后，对种子发芽、叶绿素积累及苗木生长有着重要作用，随着褪黑素浓度的升高叶绿素含量呈逐渐下降的趋势；与叶绿素含量不同，0.9 mmol/L处理的类胡萝卜素含量极显著高于其余处理的（P=4.18E-040.01），随着褪黑素浓度的升高，类胡萝卜素含量呈现先增后降的趋势（图2），表明叶绿素和类胡萝卜素合成对褪黑素浸种浓度的响应不一致，但浓度都不宜较高。表2滇油杉幼苗生长及其器官含水统计Table 2Statistics of seedling growth and water contents in organs of K.evelyniana seedlings处理Treat-ment12345地径Basal diameter/mm0.90.130.80.040.90.060.90.030.90.03CV/%30.910.614.68.88.1苗高Seedling height/cm6.50.597.50.476.70.437.30.367.60.30CV/%20.414.014.311.08.9胚轴长Hypocotyl length/cm4.30.173.60.552.90.353.00.443.20.29CV/%9.233.826.833.320.3主根长Taproot length/cm7.41.02b9.90.24a7.70.50b7.40.84b9.00.25abCV/%31.15.414.625.26.2针叶数 Number of needle/（针 株-1）15.81.39b23.01.92a17.01.34b18.60.81ab20.41.63abCV/%19.718.717.69.817.9根含水率 Root moisture content/%67.01.9971.62.0775.73.6270.81.4873.32.18CV/%6.76.510.74.76.7茎含水率Stem moisture content/%76.32.0580.73.7479.91.9978.72.4678.92.10CV/%6.010.45.67.06.0叶含水率Needle moisture content/%74.32.16b84.83.05a78.31.76b75.21.18b77.91.40bCV/%6.58.04.93.54.0图2滇油杉幼苗叶绿素和类胡萝卜素含量Figure 2Chlorophyll and carotenoid contents of K.evelyniana seedlings不同大写字母表示差异极显著（P0.01），小写字母表示差异显著（P0.05）。下同。Different uppercase letters in the same column indicate significant differences at the level of the P0.01，and different lowercase letters indicate significant differences at the level of the P0.05.The same as below.图1处理的发芽性状Figure 1Germination indexes of treatment252第 2 期周冬梅，等：褪黑素浸种对滇油杉种子发芽及苗木生长和生理特性的影响2.4褪黑素溶液浸种对滇油杉幼苗抗氧化酶的影响褪黑素溶液浸种处理的滇油杉幼苗叶片SOD、POD 和 CAT 活性分别为 210.8360.7 U/（gmin）、24.464.9 U/（gmin）和1 754.61 916.3 U/（gmin），CK 的分别为 185.4 U/（gmin）、34.8 U/（gmin）和1 532.1 U/（gmin），其中，褪黑素处理的SOD和CAT活性均高于对照的，处理间，SOD、POD和CAT活性具有极显著的差异（P=1.20E-063.41E-030.01）；0.3 mmol/L处理的SOD和POD活性最高，CAT活性最高的则是0.6 mmol/L处理的，但0.3 mmol/L处理的与其无显著的差异（图3）。综合来说，0.3 mmol/L的褪黑素浸种提高滇油杉幼苗保护酶活性，可以增强对环境变化的抵御能力，促进苗木生长。褪黑素处理的MDA含量为9.517.0 nmol/g，对照处理的MDA含量（25.6 nmol/g）显著地高于褪黑素处理的（P=1.13E-020.05），与保护酶活性相一致，0.3 mmol/L处理的MDA含量最低（图3）。MDA含量越高，苗木受膜脂过氧化伤害越大，因此，也进一步证明0.3 mmol/L褪黑素处理可以有效清除活性氧，有利于苗木抗性的提高。2.5生长和生理指标间的相关性分析相关分析结果（表3）表明，滇油杉种子发芽率与针叶数、叶绿素含量、SOD活性、POD活性之间，叶绿素含量与SOD活性、POD活性之间呈显著或极显著正相关关系（P0.05或P0.01）；地径和发芽率之间，苗高和地径之间，MDA含量与发芽率、叶绿素含量、SOD活性之间显著或极显著负相关关系（P0.05或P0.01）。表明经褪黑素溶液处理种子，滇油杉种子发芽性状、幼苗器官生长及其含水率、幼苗生理特性间既有相互促进的，也有相互抑制的，可根据其相关性，选择适宜浓度的褪黑素溶液浸种提高种子发芽性状和苗木生长。3讨论与结论3.1讨论生理后熟是指种子的种胚在形态上看似发育完全，但种胚的生理状态不具备发芽条件的现象24。王严严25发现，额敏贝母（Fritillaria meleagroides）种子形态成熟后存在生理后熟现象，其中内源抑制物可能是导致生理休眠的原因。刘自刚等26研究结果指出，桔梗（Platycodon grandiflorum）开花后55 d时，种子发芽率为53.0%，5561 d时，发芽率达93.3%，说明种子具有生理后熟现象。本研究制种后测定的滇油杉种子生活力为40.0%，室温储藏4个月后播种，褪黑素处理的发芽率为 60.0%，对照的40.4%，发芽率均高于生活力，与前述两篇文献的类似，滇油杉种子是否也具有生理后熟现象，需要开展相关的研究进行判断。种子发芽是苗木培育的基础，其发芽性状直接影响后期的苗木生长14。褪黑素作为一种植物生长调节剂，被广泛用于种子发芽与苗木生长的试验中。已有研究表明，褪黑素有促进种子发芽，提高根系生长发育的作用15。刘珂等27发现，0.1 mmol/L褪黑素处理后显著改善香椿（Toona sinensis）种子的图3不同处理幼苗的抗氧化酶Figure 3Antioxidant enzymes of different treatment seedlings253四川农业大学学报第 41 卷 发芽性状；董秋丽等28试验表明，干旱胁迫下，0.15和0.20 mmol/L褪黑素分别处理12和6 h时，达乌里胡枝子（Lespedeza davurica）种子发芽率最高；李阳29研究发现，褪黑素处理棉花（Gossypium spp.）种子后，可有效缓解NaCl胁迫对棉花幼苗根系活力的抑制作用，提高其发芽率，促进幼苗下胚轴生长；唐鸿吕30研究指出，0.15 mmol/L褪黑素处理种子，显著提高低温胁迫下甘蓝（Brassica oleracea var.capitata）种子的发芽率、发芽势和幼苗胚根长，促进幼苗地上部分、地下部分的生长及苗木生物量的积累。本研究中，0.3 mmol/L褪黑素浸种后，极显著地提高滇油杉种子的发芽率和发芽势，随着褪黑素浓度的升高，发芽率呈下降趋势，与前述文献低浓度的褪黑素有益于种子发芽的类似，但本研究改善种子发芽性状的褪黑素浓度略高于文献的，是否更低浓度褪黑素浸种会更有利于提高滇油杉种子的发芽率，有待进一步试验研究。叶绿体是植物进行光合作用的重要场所，叶绿素存在于光合膜上31。已有研究表明，外源褪黑素处理可提高植物的叶绿素含量。张盼盼等12进行褪黑素处理生菜（Lactuca sativa）幼苗的试验指出，褪黑素溶液根施可缓解干旱胁迫对生菜幼苗的伤害，显著增加总根长、地上地下部分干物质质量、叶绿素含量等（P0.05）。史中飞等32发现低温胁迫下0.1 mmol/L褪黑素预处理后油菜（Brassica napus）幼苗的叶绿素含量增加28.5%。本研究中，0.3 mmol/L和0.6 mmol/L褪黑素处理显著提高滇油杉幼苗的叶绿素含量和类胡萝卜素含量，与对照相比提高32.7%和9.0%，与史中飞等32的研究结果基本一致。随着褪黑素浓度的升高，叶绿素的含量呈下降趋势，即高浓度的褪黑素对叶绿素的合成产生不同程度的抑制，低浓度促进叶片叶绿素合成，这与徐向东等33的研究结果相一致，也许叶绿素合成与褪黑素的浓度间存在一个匹配阈值。已有研究表明，褪黑素可通过提高植物的抗氧化能力而降低逆境引发的氧化胁迫对植物生长发育的影响34。古咸彬等9发现，中低浓度（0.10.2 mmol/L）褪黑素通过抑制H2O2和MDA的生成，增强抗氧化酶的活性，从而缓解干旱对桃（Prunus persica）苗木的氧化伤害。施雨35发现，低浓度褪黑素处理后，苜蓿种子中MDA含量随褪黑素浓度的增加先下降后上升。刘建龙36研究表明，褪黑素浸种后，显著降低干旱胁迫下番茄（Solanum lycopersicum）幼苗叶片中的 MDA 含量，增加 SOD、CAT 和POD活性。张娜等37的试验研究指出，褪黑素处理后，可有效提高NaCl胁迫下狼尾草（Pennisetum alopecuroides）SOD、CAT和POD等抗氧化酶活性，降低MDA的含量，从而缓解盐胁迫对狼尾草幼苗的伤表3滇油杉幼苗生长指标和生理指标间的相关性分析Table 3Correlation analysis between growth index and physiological index of K.evelyniana seedlings类目Category地径苗高胚轴长主根长针叶数根含水率茎含水率叶含水率类胡萝卜素叶绿素SODPODMDACAT发芽率Germination rate-0.584*0.441-0.1110.4550.569*-0.189-0.1260.283-0.0470.883*0.883*0.588*-0.536*0.162地径Basal diameter-0.504*0.2220.178-0.1950.2030.2310.1270.112-0.300-0.325-0.4820.1270.071主根长Taproot length0.418*0.1420.2620.452*-0.3410.4600.467-0.147-0.1030.400针叶数Number of needle0.092-0.0750.164-0.2640.4840.666*0.267-0.174-0.135根含水率Root moisture content0.506*0.472*-0.187-0.153-0.116-0.137-0.1770.593*茎含水率Stem moisture content0.774*0.121-0.085-0.146-0.323-0.0820.124叶绿素Chlorophyll0.930*0.605*-0.607*0.140SOD0.584*-0.636*0.141注：*表示显著相关（P0.05），*表示极显著相关（P0.01）。Note：*indicates correlation at the level of the P0.05，*indicates correlation at the level of the P0.01.254第 2 期周冬梅，等：褪黑素浸种对滇油杉种子发芽及苗木生长和生理特性的影响害。本研究中，未经褪黑素处理的滇油杉幼苗的MDA含量均高于褪黑素处理的，除1.2 mmol/L处理的POD活性低于对照的外，其余POD、SOD和CAT活性均高于对照的，揭示褪黑素处理后，可以有效清除活性氧，降低膜脂过氧化对滇油杉种子的伤害，提高幼苗的POD、SOD和CAT活性，与张娜等37研究结果一致。MDA是膜脂过氧化的产物，未经褪黑素处理的滇油杉种子，内部油脂氧化后对种子发芽产生胁迫，从而种子产生的多余自由基导致膜脂过氧化，对种子的发芽产生伤害，也许这是导致未经褪黑素处理的种子发芽率较低的原因。基于褪黑素可以缓解植物体内受多种因素胁迫的结论9,11-17,27-30,32-39，本研究褪黑素处理后，提高滇油杉种子的发芽率和发芽势，促进主根生长，显著提高幼苗的光合色素含量，降低膜脂氧化损伤，抑制MDA的积累，提高抗氧化酶的活性，有益于苗木生长。3.2结论本试验采用单因素完全随机设计，开展褪黑素不同溶液浓度处理对滇油杉种子发芽及幼苗生长和生理指标影响的试验。褪黑素溶液浸种显著或极显著提高滇油杉种子发芽性状、影响光合色素含量及抗氧化物质的活性（P0.05或P0.01）。综合发芽、幼苗生长和生理特性，0.3 mmol/L褪黑素溶液浸种全面提高种子发芽性状、光合色素形成和改善保护酶的活性，促进苗木生长，可应用于滇油杉的种子处理。参考文献：1 付志高，李莲芳，王凯，等.缓释肥及氮和磷肥配施对滇油杉野生移栽苗木生长和生物量的影响 J.四川农业大学学报，2021，39（2）：212-219.2 许彦红，李小英，左政，等.滇中地区滇油杉混交林空间结构分析 J.西南林业大学学报，2011，31（6）：40-44.3 陈美卿，王崇云，张宗魁，等.云南油杉种子散布的生态适应特征研究 J.云南大学学报（自然科学版），2010，32（2）：233-238.4 牟凤娟，段胜芝，字雪松，等.旱地油杉种子形态及散布特征研究 J.西南林业大学学报，2016，36（6）：29-33.5 牟凤娟，戴兴芬，李双智，等.油杉属植物研究动态 J.西部林业科学，2012，41（6）：92-99.6 王姝茜，李莲芳，刘畅，等.外源激素和基质对滇油杉种子发芽的影响 J.中国农学通报，2022，38（10）：15-21.7 王姝茜.贮存及激素和基质对滇油杉种子发芽和幼苗生长的影响 D.昆明：西南林业大学，2022.8 姜若超，李莲芳，李俞鑫，等.IAA、GA3和壳寡糖浸种对滇油杉种子发芽的影响J.西部林业科学，2021，50（6）：110-116.9 古咸彬，陆玲鸿，宋根华，等.外源褪黑素预处理对干旱胁迫下桃苗生长的缓解效应 J.植物生理学报，2022，58（2）：309-318.10 GARCA J，LPEZ-PINGARRN L，ALMEIDA-SOUZA P，et al.Protective effects of melatonin in reducing oxidative stress and in preserving the fluidity of biological membranes：a reviewJ.Journal of Pineal Research，2014，56（3）：225-237.11 郭爱华.外源褪黑素对盐胁迫下苦菜幼苗生长的影响 J 江苏农业科学，2022，50（13）：153-157.12 张盼盼，高研，王小林，等.PEG胁迫下褪黑素对生菜幼苗形态和生理特性的影响 J.北方园艺，2022，46（10）：1-8.13 刘仕翔，黄益宗，罗泽娇等外源褪黑素处理对镉胁迫下水稻种子萌发的影响 J.农业环境科学学报，2016，35（6）：1034-1041.14 吕馨宁，王玥，贾润普，等.不同温度下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄采后品质的影响 J.中国农业科学，2022，55（7）：1411-1422.15 黎力乙.外源褪黑素对盐胁迫下苜蓿种子萌发和幼苗生长的影响 D.乌鲁木齐：新疆农业大学，2022.16 王慧，王冬梅，张泽洲，等.外源褪黑素对干旱胁迫下黑麦草和苜蓿抗氧化能力及养分吸收的影响 J.应用生态学报，2022，33（5）：1311-1319.17 向警，黄倩，鞠春燕，等.外源褪黑素对盐胁迫下水稻种子萌发与幼苗生长的影响 J.植物生理学报，2021，57（2）：393-401.18 周冬梅，顾梦，李莲芳，等.外源激素和养分溶液浸种对君迁子场圃发芽的影响 J.广西林业科学，2022，51（1）：29-35.19 李杨涛，孟梦，李莲芳，等.施肥和IBA对思茅松种子发芽和苗木生长的影响 J.西部林业科学，2019，48（3）：61-68.20 李小方，张志良.植物生理学实验指导 M.5版.北京：高等教育出版社，2016：48-51.21 王学奎，黄见良.植物生理生化实验原理与技术 M.3版北京：高等教育出版社，2015：131-170，276-289.22 邹琦.植物生理学实验指导 M.北京：中国农业出版社，2000：168-169.23 韩汉鹏.试验统计引论 M.北京：中国林业出版社，2006：93-98.24 王艳梅，张小雪，朱秀征，等.林木种子休眠与萌发机制研究进展 J.林业科学，2021，57（10）：128-144.25 王严严.额敏贝母种子解除休眠及萌发机理的研究 D.乌鲁木齐：新疆农业大学，2019.26 刘自刚.桔梗种子的成熟生理动态研究 J.中草药，2009，40（2）：300-303.27 刘珂，张嘉欣，杜清洁，等.外源褪黑素对盐胁迫下香椿种子萌发及幼苗生长的影响 J.中国瓜菜，2020，33（5）：53-58.28 董秋丽，王聪聪，郑川，等.褪黑素引发对达乌里胡枝子种子干旱萌发的影响 J.中国草地学报，2022，44（7）：114-120.29 李阳.外源褪黑素对盐胁迫下棉花幼苗生长及光合特性的研究 D.阿拉尔：塔里木大学，2021.30 唐鸿吕.外源褪黑素对低温胁迫下甘蓝苗期生长、生理特性255四川农业大学学报第 41 卷 及成株产量的影响 D.杨凌：西北农林科技大学，2022.31 胡锋，黄俊丽，秦峰，等.植物叶绿体类囊体膜及膜蛋白研究进展 J.生命科学，2011，23（3）：291-298.32 史中飞，梁娟红，张小花，等.外源褪黑素对低温胁迫下油菜幼苗抗寒性的影响 J.干旱地区农业研究，2019，37（4）：163-170.33 徐向东，孙艳，郭晓芹，等.高温胁迫下外源褪黑素对黄瓜幼苗光合作用及叶绿素荧光的影响 J.核农学报，2011，25（1）：179-184.34 刘德帅，姚磊，徐伟荣，等.褪黑素参与植物抗逆功能研究进展 J.植物学报，2022，57（1）：111-126.35 施雨.褪黑素对盐胁迫下紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长生理特性的影响 D.扬州：扬州大学，2022.36 刘建龙.外源褪黑素对干旱胁迫下番茄抗氧化系统及产量和果实品质的影响 D.杨凌：西北农林科技大学，2015.37 张娜，蒋庆，李殿波，等.外源施加褪黑素对NaCl胁迫下狼尾草种子萌发及相关生理指标的影响 J.中国农业大学学报，2014，19（4）：54-60.38 HANCI F，NAL H，ARSLAN A.Effects of L-Tryptophan and Melatonin on seed germination performance of radish and spinach in low and high temperature conditions J.Uluslar