尿蛋白电泳对肾脏疾病的临床应用进展.pdf

尿蛋白电泳对肾脏疾病的临床应用进展刘旭(天津中医药大学第一附属医院检验科，天津3 0 0 1 9 3)【关键词l 尿蛋白电泳：肾脏疾病：临床应用【中围分类号lR 4 4 6 1 2+2【文章标识码】A【文章缩号l1 0 0 9-0 9 5 9(2 0 0 9)0 9-1 4 7 1-0 3l 生理尿蛋白电泳S D S A G E 利用琼脂糖凝胶的选择成分及多孔性结合蛋白质相对分子量来区分尿中不同蛋白组分，并根据尿蛋白分子量的不同，将尿蛋白分为低分子分子量 6 5K D包括转铁蛋白I g G、I g A、I g M、a 2-巨球蛋白3 组蛋白质。尿蛋白组分主要用来反映肾小球滤过膜损伤程度的【I】，因肾小球滤过膜的损伤，引起渗透性的改变，尿液中主要是中分子和高分子蛋白，称为肾小球型蛋白尿；用来反映肾小管重吸收功能障碍的，尿中以低分子蛋白为主，称肾小管型蛋白尿；肾小球和肾小管都受损，尿中同时存在高、中、低分子蛋白，称混合型蛋白尿；尿中仅有少量白蛋白，称生理型蛋白尿。累及肾小管病变的尿蛋白电泳图谱出现的区带，以视黄醇结合蛋白(R B P)为主，尿R B P 排泄量升高是较敏感的肾近嗌小管损伤的诊断指标【2 J。由于S D S A G E 与肾活检结果相符，所以S D S A G E 在早期诊断肾脏疾病、了解肾脏损伤程度、部位判断及治疗上有较高的使用价值【3】。与肾活检相比有取材、操作无创伤性、敏感性高的优点，该方法还可通过光电扫描，半定量分析不同分子量的蛋白百分比，省时且胶片容易保存。2 病理尿蛋白电泳及在儿科肾脏疾病中的应用一直以来，人们对肾损伤的诊断颇为关注，蛋白尿是肾脏疾病的重要表现之一。如需进一步了解肾损伤情况，则需尿蛋白电泳加以证实，尿蛋白电泳能区分各种尿蛋白组份，提示肾损伤的病变部位及损伤程度，使诊治更有针对性。在生理条件下，中分子以上蛋白质绝大部分不能通过肾小球滤过膜，滤过的分子量 6 5K D 的血浆蛋白大部分被肾小管重吸收或分解，为此，正常尿液内蛋白含量甚微。利用琼脂糖凝胶的选择性成分及多孔性，亦根据蛋白质的分子量，将尿蛋白分为混合分子型、大分子型、中分子型、小分子型，而且电泳能区分出各种蛋白成份，在肾损伤的诊治过程中，对病情的动态分析有很大价值：再加上该法采用的染色液敏感性高，尿液不需预先浓缩，可直接进行检测，大大缩短了实验时间，故其在临床实验室的应用越来越普及。根据尿蛋白分子量和电泳图谱可推测肾损伤的部位、肾功能情况及病变的性质。若检出特殊类型的蛋白质，将使临床上治疗更有针对性。目前已证实尿中自蛋白、脂蛋白、转铁蛋白、补体、本周氏蛋白等对肾具有毒性作用。白蛋白可通过它携带的分子刺激间质炎症的发展：转铁蛋白被认为是肾毒性的一种介质：游离轻链的异常升高或单独出现则高度提示单克隆免疫球蛋白沉淀病：视黄醇含量升高则提示肾近曲小管损伤。故其不仅是肾脏疾病的诊断、预后及病情程度判断的必要手段，也是早期发现其它疾病伴肾功能损害的有效方法。儿童肾脏疾病以蛋白尿为其主要表现之一。临床上虽以肾活检来确诊，但肾穿刺属于创伤性诊断技术，患者和家属对此有较大顾虑，而尿蛋白电泳能在无损伤情况下对尿蛋白组份进行分析，用于肾损伤的诊断评价，是一种有效的诊断方法随着。肾脏病的基础研究和肾活检及临床治疗手段的深入发展，对许多肾脏疾病的发生机制和转归有了进一步了解。然而，对肾早期损伤在很大程度上还依赖于实验诊断，尤其对儿童而言，需采用无创伤性痛苦的检测方法。当肾小球通透性上升，肾小管重吸收能力减少，肾或其他组织分泌增加时，即产生蛋白屎。临床上发现4 0-一7 0 的蛋白尿为肾脏疾病所致。尿液的成分改变通常是肾脏疾病，尤其是肾小球病变最早的临床表现 4 1。儿童肾脏疾病尤以肾小球病变为主。以往临床对尿蛋白检查多依赖于2 4h 尿蛋白定量，但儿童具有多动的特性，且自主能力较差，对于2 4h 尿蛋白定量的检测往往不如成人准确。发现尿蛋白含量与肾脏受损程度并不成正比【5 J。即使尿蛋白含量仅3 2 1 m g 2 4h，但尿蛋白电泳显示肾脏损伤并不局限于肾小球，已累及肾小管，呈现混合性蛋白尿，而有些患儿虽然尿蛋白含量较高可达70 0 0 m g 2 4h，但病变仅局限于肾小球，排出的蛋白皆为中、大分子量蛋白，呈部分选择性肾小球性蛋白尿。因此用尿蛋白电泳对尿蛋白进行分析。对疾病的诊断和鉴别诊断非常有价值。肾活检虽然对肾脏疾病的病理及免疫分型具极高的诊断性，但由于肾穿刺属于创伤性诊断技术，可能造成出血、感染等并发症，而且穿刺技术，取材部位也会影响穿刺的成功，因此病人对此顾虑较大，而S D S A G E 能在无损伤情况下了解肾脏损伤部位，对于临床不失为一种有效的辅助实验手段。3 尿蛋白电泳在糖尿病肾病中的应用糖尿病(D M)是一种以血糖升高为主，并伴有多种并发症的慢性疾病。糖尿病肾病(D N)是糖尿病的重要并发症之一，是糖尿病人死亡的重要原因。早期表现为肾小球高滤过状态，继之出现微量白蛋白，尿中自蛋白含量逐渐增高进入临床白蛋白尿期，最后发展为终末期肾功能不全失代偿期【6】。因此正确判断蛋白尿性质来源，了解肾脏的损伤类型及程度对临床具有重要意义。糖尿病性肾病(D N)是糖尿病的重要并发症之一，其中肾脏是糖尿病微血管病变最常受累的器官之一，可累及肾血管、肾小球、肾小管和间质p 1。在糖尿病肾病早期起病隐匿，进展缓慢，易被忽视。以判断蛋白质性质的来源，对其有效的治疗、阻止、延缓糖尿病肾病的病程有非常重要的临床价值。从电泳结果看，肾小球型蛋白尿的比例居多，占5 2 5；其次万方数据二誓鱼垒!旦皇墨皇Q 坐!Q 璺!Q!凹皇垡!垒!Q 鱼!鱼堕!g 皇一!Q 旦!1 2 1 兰里!型2：!璺!苎!型2：!12为混合型蛋白尿，占2 7 5；而肾小管型蛋白尿和生理型蛋断高血压病早期肾损害的敏感方法，其简便，无创伤性，比自尿所占比例较小，分别占1 4 5、5 5。以上结果提示单项检测更直观地了解尿蛋白的组分及肾脏受损的部位D N 以肾小球损伤为主，对肾小管的损伤较轻哺】。检测中还和程度，不仅可作为高血压病早期肾损害的诊断方法，亦可发现尿蛋白含量与肾脏受损程度并不呈正比，有些患者尿作为监测疗效和判断预后的指标。蛋白定性+时，尿蛋白电泳显示肾脏损伤并不局限于肾小5 尿蛋白电泳与血清蛋白电泳在疾病中的联合应用球，同时累及肾小管，呈现混合型蛋白尿；而有些患者尿蛋血清蛋白通过醋酸纤维薄膜电泳后可以很好地分为白定性+，但病变仅局限于肾小球，排出的蛋白皆为大、5 条区带(A l b、a l、a 2、p、丫)，在多种疾病和多种因素影中分子量蛋白，呈部分选择性肾小球型蛋白尿。因D N 发响下血清蛋白可出现多种变化。肾脏疾病是常见的影响病隐匿，进展缓慢，逐渐引起全身的小动脉硬化病变，肾脏因素之一。例如血清蛋白电泳结果示肾病综合征患儿白为最常受累的靶器官之一，可累及肾小球和肾小管，在没有蛋白比例显著降低，砣球蛋白比例显著升高，血浆总白蛋干预的情况下，微量清蛋白尿患者在7 年内有5 0 进入尿白含量减少，这种改变与肾病综合征患儿每日尿中丧失大毒症期【9】。这给糖尿病早期肾损害的患者提供了临床诊量小分子血浆蛋白如白蛋白，而分子量大的蛋白质如a 2 巨断依据，得到早期治疗。U T P 阳性的患者则以肾小球性或球蛋白则排出少有关0 4 1；急性肾小球肾炎白蛋白比例轻度混合性蛋白尿为主，符合糖尿病早期肾损害以肾小球受累降低，a 1、葩球蛋白比例轻度升高，血浆总白蛋白含量正为特点，随着病程的进展，混合性蛋白尿例数逐渐增多，出常可能与急性链球菌感染后的急性时相蛋白成分增加所现条带的颜色加深加宽。综上所述，可将非浓缩尿蛋白电致【l5 1。狼疮性肾炎血清蛋白电泳示Y 球蛋白与以球蛋白比泳作为诊断糖尿病早期肾损害的敏感方法，其简便，无创例增加则与其原发的慢性炎症系统性红斑狼疮有判1 6 J。性，比其它项目检测更直观地了解尿蛋白的组分及肾脏受本文结果提示不同的肾脏疾病血清蛋白电泳结果取决于损的部位和程度，故对肾损害的早期定位、鉴别诊断、指原发疾病及尿中排出蛋白的种类与量。有研究者报告尿导治疗和预后判断具有临床价值。糖尿病有1 3 发展为肾中自蛋白与血清白蛋白之比在2 以上者可能为肾病综合病，成为糖尿病患者寿命和生活质量的主要威胁。而早期征，在2 以下者肾炎可能性大【1。7 1。尿液成分尤其是尿液蛋诊断和早期介入可大大推迟肾合并症的发生【l0 1。糖尿病白的变化通常是肾脏疾病最早的临床表现。尿蛋白的含引起肾脏损害的病理机制复杂，早期的特点是肾小管蛋白量不一定能完全反映肾脏损害程度，尿蛋白的选择性在一排出量增加，即各种低分子量尿蛋白排出增加。因此，通过定程度上可反映肾脏病变的程度。肾小球损害较轻时，只S D S A G E 非浓缩尿蛋白电泳，正确地了解尿液内各蛋白组有2 0 万U 以下的蛋白透过而排泄于尿中，蛋白尿电泳图谱分的含量及变化对糖尿病肾病的早期诊断、鉴别诊断、以中分子白蛋白区带为主，呈选择性蛋白尿；当肾小球病指导治疗具有较大价值【1 1 1。变进一步加重时，大、中分子的蛋白质均能滤出，即血浆4 尿蛋白电泳在高血压肾病中的应用中的所有蛋白质均无选择性的滤到尿中，电泳图谱可见到高血压病绝大多数起病隐匿，进展缓慢，逐渐引起全身中分子白蛋白区带和高分子区带，称“非选择性蛋白尿”；当的小动脉硬化病变，肾脏为最常受累的靶器官之一，其危害病变同时累及肾小球和肾小管，尿中高、中、低分子蛋白更具隐蔽性和潜在性，目前单项的实验室检查难以发现早同时出现，呈混合型蛋白尿。尿中自蛋白与1，球蛋白之比期肾损伤，往往到病变明显以至无法逆转时才被发现，贻误在6 以上为高选择性，肾脏损害程度轻。部分急性肾小球病情。肾脏病理检查虽然比较灵敏，但必须做侵害性的肾肾炎尿蛋白量含量低，但蛋白电泳可见比例较多的I g G，甚活检，属有创检查，可能引起出血等并发症，许多病人不愿至可见q l 微球蛋白，游离轻链蛋白，此部分患儿多数合并意接受，且技术要求高，难以普遍推广。高血压病患者尿蛋有肾衰竭，病情缓解慢M。而肾病综合征患儿尿蛋白呈高白排泄增加。是系统性高血压传至肾小球使其毛细血管压选择性者对激素敏感，非选择性、混合性蛋白尿者激素治力升高，滤过膜通透性增加的结果，也是肾小管对滤过蛋疗不敏感。总之联合应用血清蛋白电泳和尿蛋白电泳对白重吸收的结果【l2 1。高血压肾损害的早期，肾小管受累较判断肾脏疾病的病情和预后、指导治疗具有参考价值。突出，早于肾小球损害，患者表现为多尿和夜尿，临床检测参考文献发现尿渗透压及尿比重降低，出现不同程度的肾小管性尿1S a m u e l M C o h e n,T a k a m a s a O h n i s h i,N i c o l e M c t m-k,e ta l I n v e a f i g a t i o mo f蛋白及尿酶。尿蛋白阴性组的高血压病患者出现7 0 肾蝴r i m r y B l 们栅c 峨i n o g c n a：C o“。z t i o n,8 哪-删驯哪毗型：孽孽鲁阜曼曼鬈坚尘鐾譬警皂曼，望9 篁壁警皂堡竺型：裳徽呈翥誉：雾嚣篙蒿3 周5：际3 3 检7-验3 4 7 医学杂志。数多于肾小球性蛋白尿的例数，符合高血压病肾损害早期赢磊。工：，1：一”。肾小管受累较突出的特点。随着病程的进展，肾小球性蛋3朱新兴，王永文，郑红英，等肾小管损害各种早期诊新指标的评价 J】检验医自尿的例数逐渐增多，以至出现混合性蛋白尿u 引。总之，高学，2 0 0 5；2 0(3)：2 7 i 一2 7 3血压病肾损害早期多出现肾小管性蛋白尿，随着病情的发4Y o n gZ h o u，A i l i nL i u，W e i W a n g，e ta l-U s i n g t h eP r o t e i n C h i p t oS c r e e n展，肾小球性和混合性蛋白尿不断增加。同时尿m A l b 和A g o n i s t sa n d A n t a g o n i s t 3 砸。也e A n d r o g e nR c c p 州j】J o u m a lo f B 舢1“妇麓竺多量亦增高，随着尿蛋白数量的增加，尿m A l B 和N A G5 慧=0 G 0=：二K J 衄1 a l i t 矗a l 川o f 饥i c m 蛐含量亦增加。我们亦观察至t S D S-A G E 尿蛋白电泳联合尿i nb i o l o g i c“8 咖p hm B l ph 咄b I o o d dm 佃e)o f 慨lm i l l 删_ k mb ym A l b 及N A G 可明显提高检测的阳性率，故可将其作为诊c l e c t r o t h c r m a la t o m i ca b s o r p t i o n 嗍哪叽T o x i c o l o g Ya n d l n d u s t r i n万方数据超敏C R P、血清可溶性C D 4 0 配体、妊娠相关血浆蛋白A 联合检测在冠心病患者的应用刘娟1，刘莹2(1 湖北省襄樊市中心医院心内二科，襄樊4 4 1 0 0 0：2 湖北省随州市中心医院心胸外科，随州4 4 1 3 0 0)【中腿分类号lR 5 4 1 4【文章标识码lA【文章编号l1 0 0 9 0 9 5 9(2 0 0 9)0 9-1 4 7 3-0 2C l i n i c a lV a l u eo fC o m b i n e dD e t e c t i o no fH i g hS e n s i t i v eC n r e a c t i v eP r o t e i n、s C D 4 0 L、P r e g n a n c y a s s o c i a t e dP l a s m aP r o t e i nAi nt h eD i a g n o s i so fC o r o n a r yH e a r tD i s e a s eL i uJ i a a z，L i uV i n e0 3 e p m m e n to f C a r d i o l o g y，C e n t r a lH o s p i t a lo f X i a n g f a n,X i a n g f a n4 4 1 0 0 0，C h i n a；：D e p a r t m e n to f C a r d i o t h o r a c i cS u r g e r y，C e n t r a lH o s p i t a lo fis u i z h o u S n i z 咖4 4 1 3 蛾C h i n a)驴 A B S T R A C T O b j e e t i v e：T oe x p l o r et h er e l a t i o n s h i po ft h r e ei t e m so fp a r a m e t e r si n c l u d i n gh i g hs e n s i t i v eC r e a c t i v ep r o t e i n(h s-C R P)，s C D 4 0 L、p r e g n a n c y-a s s o c i a t e dp l a s m ap r o t ei nAa n dc o r o n a r yh e a r td i s e a s e M e t h o d s：6 5p a t i e n t sw i t hc o r o n a r yh e a r td i g t 燃C H D)(C H Dg r o u p)a n d7 0h e a l t h yp e o p l e(c o n t r o lg r o u p)w e r ee n r o l l e di nt h ei n v e s t i g a t i o 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月在本院住院的6 5 例C H DH 地，J a n2 0 0 6；2 2：3 8 1-3 9 36Z h e n g u a n gC h e n，J i n b i nL i u。e t 曩1 U s eo fS o d i u mL a n r o y lS a r c o s i n a t ei na1 3m g h-S e n s i f i v i t yP r o t e i nA s s a y b yR e s o n a n c eL i g h tS c a t t e r i n gT e c h n i q u e 忉J o u r n a l o f B i o m o l e c o l a r S c r e e n i n g J u n 2 0 0 6；l l：4 0 0-4 0 67M i c h a e lS K o s t a p a n o s。m r a l m p o sJ M i l i n n s，e ta 1 R o s u v a s t s t i nm c R c 8a1 4lM i c r o g i o h n l i nU r i n a r yE x c r e t i o ni nP a t i e n t sW i t hP r i m a r yD y s l i p i d e m i a 叨T h eJ o u r n a lo f C l i n i c a lP h a r m a c o l o g Y,N o v2 0 0 6；4 6：1 3 3 7 1 3 4 38张友华，张敏；蛋白屎的实验室检查【J】福建医药杂志，2 0 0 6；(1)：1 0 7 1 0 91 59撕c h a e lS K o s t a p a n o s。H a r a l a m p o sJ M i l i o n i s，e ta 1 A nO v e r v i e wo f t h eE x t r a-L i p i dE f f e c t so f R o e n v a s t s t i n J J o u r n a lo f C a r d i o v a s c u l a rP h a r m a c o l o g ya n dT h e r a p e u t i c s。S e p2 0 0 8；1 3：1 5 7-1 7 4l OCB a r b e r,LO e l d e n h u y s a n dJOH a n l y S u s t a i n e dr e m i s s i o no fl u p u s1 6o e p h n 血f f L u p u s，F e b2 0 0 6；1 5：9 4-1 0 1C a t h e r i n eJ K 1 e i n F o r t e a tH N i e l s e n,e ta 1 T r a c eE l e m e n tL o s si nU r i n ea n dE f f l u e n tF o l l o w i n g J】T r a u m a t i cI n j u r yJ o u r n a lo fP a r e n t e r a la n dE n t e r a l1 7N u t r i t i o n,M 2 0 0 8；3 2：1 2 9 一1 3 91 2M u h d d e sG u l e c。M u s t a f aI r a z。HR a m a z a nY i l m a z，e ta 1 T h ee r i e c t so fg i n k g ob i l o b ae x t r a c to nt i s s u ea d e n o s i n ed e a m i n a s e。x a n t h i n eo x i d a s e，1 8m y e l o p e r o x i d a s e，m a l o n d i a l d e h y d e，a n dn i t r i co x i d ei nc i s p l a t i n-i n d u c e dn e p h r o t o x i e i t y J T o x i c o l o g ya n dI n d e s 城a lH e a l t h,A p t2 0 0 6；2 2：1 2 5 1 3 0OS o b e r e r,MU r b a n,H-WH a g o d o m,na 1 D e t e r m i n a t i o no ft w om e r c a p U a i ca c i d sr e l a t e dt oc r o t e n a l d e h y d ei nh u m a nu F i n e-i n f l u e n c eo f s m o k i n g 阴H u m a na n dE x p e r i m e n t a lT o x i c o l o g y,J a n2 0 0 7；2 6：3 7-4 7B o b b yS h a ha n dJ o s e p hD T o b i a s O s m o t i cD e m y e l i n a t i o na n dH y p e r t o n i eD e h y d r a t i o ni na9-Y e a r-O l dG i r l：C h a n g e si nC e r e b r o s p i n a lF l u i dM y e l i nB a s i cP r o t e i n J J o u r n a lo f I n t e n s i v eC a r eM e d i c i n e D e e2 0 0 6；2 1：3 7 玉d 7 6M a r kA D o m i o i c k，M e l o nR W h i t e，e ta 1 U r o t h e l i a lC a r c i n o g e n e s i si nt h eU r i n a r yB l a d d e ro fM a l eR a mT r e a t e dw i t hM u r a g i i t a z a s,aP P A R a T A g o n i s t：E v i d e n e ef o rU r o l i t h i a s i sa st h eI n c i t i n gE v e n ti nt h eM o d eo fA c t i o n J T o x i c o l o g i cP a t h o l o g y,D e c2 0 0 6；3 4：9 0 3 9 2 0A i k oI s h i i。Y u k i k oS a k a i e ta 1 M o l e c u l a rP a t h o l o g i c a lE v a l u a t i o no fC l m t e d ni naR a tM o d e lo fU n i l a t e r a lU r e t e r a lO b s u m c t i o n 聃aP o s s i b l eB i o m s r k e ro fN e p h r o t o x i c i W 田T o x i c o l o g i cP a t h o l o g y,A p t2 0 0 7；3 5：3 7 8 2S h a h i r o s eP r e m j i，T a n i sF e n t o n，e l；a 1 D o e sA m o u n to fP r o t e i ni nF o r m u l aM a t t e rf o rL o w-B i r t h w e i g h ti n f a n t s?AC o e h n m eS y s t e m a t i cR e n e w J J o u r n a lo f P a r e n t e r a la n dE n t e r a lN u t r i t i o n,N o v2 0 0 6；3 0：5 0 7 5 1 4陈忠城。李朝霞，陈文思肾病综合征患者尿T R F,M A 和I g G 及轻链(c 的检测及其临床意义 J 广东医学,2 0 0 7；(7)：1 1 2-1 1 6女iigli43P万方数据