饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能、血清生化指标、消化酶活性和抗氧化能力的影响.pdf

动物营养学报，（）：饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能、血清生化指标、消化酶活性和抗氧化能力的影响冯鹏霏 潘传燕 马华威 陈秀荔 杨 琼 陈子桂冯勇翔 唐东姣 李 华（广西壮族自治区水产科学研究院，广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，南宁；广西壮族自治区水产引育种中心，南宁；广西壮族自治区扶绥种畜场，崇左；全州县全州镇农业农村综合服务中心，桂林）摘 要：为研究饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼（黄颡鱼瓦氏黄颡鱼）生长性能、血清生化指标、消化酶活性和抗氧化能力的影响，以（）杂交黄颡鱼为研究对象，在饲料中分别添加（对照组）、和 的马尾藻多糖，喂养杂交黄颡鱼 后测定增重率、特定生长率等生长性能指标以及血清生化指标、抗氧化指标和胃、肠道消化酶活性。结果显示：）饲料中马尾藻多糖的添加量为 时，与对照组相比，杂交黄颡鱼的增重率和特定生长率显著增加（），饲料系数显著降低（）；）杂交黄颡鱼血清总蛋白含量各组之间差异不显著（），但以 马尾藻多糖组最高，且在马尾藻多糖添加量为 及以上时，血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活性较对照组显著降低（）；）饲料中马尾藻多糖的添加量为 时，杂交黄颡鱼胃和肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性较对照组显著提高（），且肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性在马尾藻多糖组最高；）与对照组相比，饲料中马尾藻多糖的添加量为 时杂交黄颡鱼血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高（），血清丙二醛含量显著降低（），其中血清超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性均以马尾藻多糖组最高。综合生长性能、血清生化指标、抗氧化酶活性和消化酶活性，建议杂交黄颡鱼（）饲料中马尾藻多糖的添加量为。关键词：马尾藻多糖；杂交黄颡鱼；生长性能；消化酶；抗氧化能力中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：基金项目：广西特 色淡水 鱼产 业创新 团队桂 东南综 合试 验站（）；广 西农 业科技 自筹经 费项 目（，）；广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室开放课题（）作者简介：冯鹏霏（），女，广西岑溪人，高级工程师，学士，研究方向为水产动物营养与饲料。：通信作者：李 华，高级农艺师，：黄颡鱼是一种杂食性淡水鱼，广泛分布于中国的内陆淡水河流中。近年来，我国黄颡鱼养殖产量显著增加，年养殖产量达到 。因黄颡鱼具有口感鲜美、营养丰富、个体大、生长快等特点，深受消费者喜爱。为了满足市场需求，黄颡鱼养殖业迅速发展，养殖模式不断更新，养殖规模不断扩大，养殖密度也在不断增加，黄颡鱼养殖过程中疾病频发，限制了黄颡鱼养殖业的可持续发展。杂交黄颡鱼是以黄颡鱼（）为母本，以瓦氏黄颡鱼（）为父本，人工杂交得到的子一代，在生长速度、抗病能力和肉品质等方面具有优势，成为动 物 营 养 学 报 卷当前推广养殖的主要黄颡鱼品种。海藻多糖是海藻提取物中的主要成分，已有研究表明，海藻多糖具有调节免疫、抗氧化、抗病毒和抗肿瘤等多种生物活性，目前已经从海藻中分离提取出多种多糖，如褐藻多糖中的海带多糖、岩藻多糖，蓝藻多糖中的螺旋藻多糖，红藻多糖中的卡拉胶等。海藻多糖在水产养殖中已有应用，研究显示海藻多糖具有提高水产动物的生长性能、保持胃肠道健康状态、提高机体免疫力和饲料利用率、提高养殖成活率、调节肠道菌群等作用，是优质的水产动物饲料添加剂。周岐存等研究发现，饲料中添加海藻粉能提高罗氏沼虾（）的成活率和虾体重量；李文武等研究发现，饲料中添加海带多糖时可改善斜带石斑鱼（）的生长性能和提高消化酶活性；林建斌等指出，海带多糖、紫菜多糖具有提高大黄鱼（）幼鱼生长性能、增强机体免疫力的作用。基于以上海藻多糖在水产动物中的积极作用，我们推测马尾藻多糖可能也有相似的作用。马尾藻作为广西的优势海藻，其多糖在水产养殖中的应用研究较少，有关马尾藻多糖对杂交黄颡鱼影响的研究尚未见报道。因此，本试验将探讨马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长、血清生化指标、消化酶活性和抗氧化能力的影响，以确定杂交黄颡鱼饲料中马尾藻多糖的适宜添加水平，为开发杂交黄颡鱼优质饲料添加剂提供参考。材料与方法 试验材料 试验用马尾藻多糖由广西兽医研究所提供，生产流程为马尾藻经烘干、粉碎、水浴、过滤、离心、真空浓缩、沉淀、离心、干燥后得到粗多糖，粗多糖经纯化后得到马尾藻多糖，采用蒽酮法硫酸法测定多糖含量，多糖含量大于。试验饲料 在杂交黄颡鱼基础饲料配方基础上，分别用、和 马尾藻多糖替代等量的纤维素，配制 种试验饲料，其组成及营养水平见表。将各饲料原料混匀后制粒备用。本试验所需鱼粉等饲料原料均购于广东恒兴饲料实业股份有限公司，并由该公司完成试验饲料制作及其主要营养成分含量的测定，其中粗蛋白质含量的测定采用凯氏定氮法（），粗脂肪含量的测定采用索氏抽提法（），粗灰分含量的测定采用 灼烧称重法（）。表 试验饲料组成及营养水平（干物质基础）（）项目饲料中马尾藻多糖添加量 原料 鱼粉 豆粕 菜籽粕 玉米蛋白粉 面粉 鱼油 豆油 维生素预混料 ）矿物质预混料 ）磷酸二氢钙（）大豆卵磷脂 甜菜碱 期冯鹏霏等：饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能、血清生化指标、消化酶活性和续表 项目饲料中马尾藻多糖添加量 氯化胆碱 纤维素 马尾藻多糖 合计 营养水平 ）粗蛋白质 粗脂肪 粗灰分 ）每千克维生素预混料含有 ：，泛酸钙 ，叶酸 ，烟酸 ，肌醇 ，生物素 。）每千克矿物质预混料含有 ：，（），。）营养水平均为实测值。试验设计 试验用杂交黄颡鱼由广西南宁宏大恒洋水产科技有限公司提供，在广西南宁宏大恒洋水产科技有限公司横州市石塘镇养殖基地进行投喂试验。在投喂试验前，将杂交黄颡鱼置于养殖桶内暂养 周以适应试验环境，暂养期间投喂常规黄颡鱼饲料。暂养结束后饥饿 ，挑选 尾规格均匀、健康无伤的杂交黄颡鱼平均体重为（），随机分配到 养殖桶内，每个养殖桶 尾。本试验共设置 个对照组（投喂不添加马尾藻多糖的试验饲料）和 个试验组（分别投喂添加、和马尾藻多糖的试验饲料），每组分配 个养殖桶作为 个重复，投喂试验为期 。饲养管理 饲料投喂量为试验鱼体重的，试验期间根据试验鱼体重及时调整投喂量。试验期间，根据试验方 案 按 时 投 喂，每 天 投 喂 次（：和：），并在每天：和：将桶底的残饵和粪便吸出，防止污染养殖水体；每天换水量控制在 左右；观察试验鱼的活动情况，记录死亡数量。养殖条件：水温控制在 ，溶解氧浓度在 以上，在 ，总氨氮和亚硝酸盐浓度分别保持在 和 以下。样品采集 在投喂试验结束后，将试验鱼饥饿 ，然后对每个养殖桶的试验鱼进行计数和称重，以计算存活率（，）、增 重 率（，）、特 定 生 长 率（，）和饲料系数（，）；每桶选 尾鱼，用未经肝素浸润过的一次性注射器从尾静脉中抽血，过夜后 离心 获得血清，保存，用于测定血清生化指标和抗氧化指标；将采血后的杂交黄颡鱼置于冰板上解剖，分离胃和肠道，并分别放入 离心管内，在液氮中快速冷冻后保存于 冰箱，用于测定消化酶活性。指标检测 生长性能指标的计算存活率（）（终末试验鱼尾数初始试验鱼尾数）；增重率（）（终末均重初始均重）初始均重；饲料系数摄食的饲料量（）增重（）；特定生长率（）（终末均重 初始均重）养殖天数。血清生化指标的测定 用 全自动生化分析仪（迈瑞医疗国际有限公司）测定血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶和动 物 营 养 学 报 卷碱性磷酸酶活性以及白蛋白和球蛋白含量。消化酶活性的测定 将 冰箱保存的胃、肠道样品进行解冻，将其分别匀浆后进行冷冻离心，离心，取其上清液测定消化酶活性。蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均使用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定。血清抗氧化指标的测定 将 冰箱保存的血清样品进行解冻后测定抗氧化指标。超氧化物歧化酶（，）、过氧化氢酶（，）、谷胱甘肽过氧化物酶（，）活性和丙二醛（，）含量均使用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定。数据统计与分析 试验数据用 进行整理，然后用 软件对数据进行统计分析，先做单因素方差分析（），如果差异显著，再采用 氏法进行多重比较，显著性水平为。结果以平均值标准差（）表示。结果与分析 马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能的影响 由表 可知，饲料中添加不同水平马尾藻多糖对杂交黄颡鱼的成活率无显著影响（），而对增重率、特定生长率和饲料系数均存在显著影响（）。其中，和 马尾藻多糖组的增重率和特定生长率显著高于其余组（），和 马尾藻多糖组之间无显著差异（），以未添加马尾藻多糖的对照组的增重率和特定生长率最低，显著低于除 马尾藻多糖组的其他试验组（）；和马尾藻多糖组的饲料系数显著低于其余组（），这 组之间无显著差异（），以未添加马尾藻多糖的对照组的饲料系数最高。综合来看，和 马尾藻多糖组杂交黄颡鱼的生长性能较佳。表 马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能的影响 项目饲料中马尾藻多糖添加量 存活率 增重率 特定生长率 （）饲料系数 同行数据肩标不同字母表示差异显著（）。下表同。（）马尾藻多糖对杂交黄颡鱼血清生化指标的影响 由表 可知，血清白蛋白含量在各组之间不存在显著差异（），但以 马尾藻多糖组最高；血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性随饲料中马尾藻多糖添加量的增加呈先降低后平稳的趋势，、和 马尾藻多糖组的血清谷草转氨 酶 活 性 显 著 低 于 其 余 各 组（），和 马尾藻多糖组的血清谷丙转氨酶活性显著低于其余各组（），与马尾藻多糖组之间上述 种酶的活性均无显著差异（）；血清碱性磷酸酶活性随饲料中马尾藻多糖添加量的增加呈逐渐下降的趋势，和 马 尾 藻 多 糖 组 显 著 低 于 其 余 各 组（），且 马尾藻多糖组显著低于 马尾藻多糖组（）。马尾藻多糖对杂交黄颡鱼消化酶活性的影响 由表 可知，随着饲料中马尾藻多糖添加量的增加，杂交黄颡鱼胃中蛋白酶和脂肪酶活性呈逐步升高的趋势，、和 马尾藻多糖组胃中蛋白酶和脂肪酶活性显著高于对照组（），同时 和 马尾藻多糖组还显著高于、和 马尾藻多糖组（）；随着饲料中马尾藻多糖添加量的增加，杂交黄颡鱼胃中淀粉酶活性呈先升高后降低的趋势，以 马尾藻多糖组中活性最高，显 期冯鹏霏等：饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能、血清生化指标、消化酶活性和著高于其余各组（）。杂交黄颡鱼肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均随饲料中马尾藻多糖添加量的增加呈先升高后降低趋势，并均在马尾藻多糖组有最高值，显著高于除 马尾藻多糖组外的其余各组（）。此外，各组试验鱼胃中蛋白酶和脂肪酶活性均高于肠道中，而淀粉酶活性则低于肠道中。表 马尾藻多糖对杂交黄颡鱼血清生化指标的影响 项目饲料中马尾藻多糖添加量 总蛋白 （）白蛋白 （）谷草转氨酶 （）谷丙转氨酶 （）碱性磷酸酶 （）表 马尾藻多糖对杂交黄颡鱼消化酶活性的影响 项目饲料中马尾藻多糖添加量 胃 蛋白酶（）淀粉酶（）脂肪酶 （）肠道 蛋白酶（）淀粉酶（）脂肪酶 （）马尾藻多糖对杂交黄颡鱼血清抗氧化指标的影响 由表 可知，饲料中添加不同水平马尾藻多糖可不同程度地提高杂交黄颡鱼血清、和 活性，马尾藻多糖添加量在 及以上时均可达到显著水平（），血清 和 活性均以 马尾藻多糖组最高，血清 活性以 马尾藻多糖组最高，但与马尾藻多糖组差异不显著（）；随着饲料中马尾藻多糖添加量的增加，杂交黄颡鱼血清 含量呈逐步下降的趋势，且 和 马尾藻多糖组显著低于其余各组（）。讨 论 已有研究表明，饲料中添加海藻多糖对水产动物具有明显的促生长作用，如罗氏沼虾、斜带石斑鱼及大黄鱼等，其原因可能是海藻多糖对提高消化酶活性和调节肠道菌群有积极作用。本研究中，饲料中添加马尾藻多糖提高了杂交黄颡鱼的生长性能，并降低了饲料系数，这可能是马尾藻多糖的添加提高了消化酶活性，改善了肠道菌群结构，促进了杂交黄颡鱼对营养物质的吸收与利用，进而提高了杂交黄颡鱼的增重率和特定生长率，从而促进了鱼体生长。一方面，马尾藻多糖丰富的活性物质有利于鱼体的蛋白质合动 物 营 养 学 报 卷成；另一方面，马尾藻多糖不能被杂交黄颡鱼消化，但其能被肠道微生物分解为分子质量更低的低聚糖，转化成短链脂肪酸，优化肠道微生态，从而促进消化道的酶促活化和营养消化；此外，有益菌在微生态环境中抢夺条件致病菌的生态位，对条件致病菌的定植和生长有抑制作用，进一步发挥保护肠道的功能。在罗非鱼（）饲料中添加黄芪多糖、大口黑鲈（）饲料中添加黄芪多糖和（或）壳寡糖、红鲷（）饲料中添加岩藻多糖也得到了类似结果。但当饲料中马尾藻多糖的添加量超过 时，其对杂交黄颡鱼的促生长作用不再明显，这也说明适宜的海藻多糖添加量才能对鱼类的生长起到促进作用。表 马尾藻多糖对杂交黄颡鱼血清抗氧化指标的影响 项目饲料中马尾藻多糖添加量 超氧化物歧化酶（）过氧化氢酶（）谷胱甘肽过氧化物酶（）丙二醛（）血清生化指标常用来评价动物机体的物质代谢和健康状况。鱼类血清中的蛋白具有多种生理作用，与抗病力和环境适应性密切相关。谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活性反映了鱼体肝脏的健康状况，当肝脏损伤出现炎症、坏死等病症时，它们在血液中的活性会上升。本研究中，马尾藻多糖组杂交黄颡鱼的血清总蛋白含量最高，说明该添加量下的马尾藻多糖有利于杂交黄颡鱼的蛋白质代谢。饲料中添加一定量的马尾藻多糖后杂交黄颡鱼血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶的活性降低，说明马尾藻多糖可以有效改善杂交黄颡鱼的肝脏损伤。已有类似的研究报道，例如，在饲料中添加裂壶藻、盐藻和小球藻后，王子鱼（）血清转氨酶活性降低。研究显示，植物多糖具有保护肝脏损伤效果，其主要是通过激活核因子 相 关 因 子 （，）血 红 素 氧 合 酶 （，）、抑制丝裂原活化蛋白激酶（，）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（，）等通路实现保护作用。马尾藻多糖的肝脏保护作用还可能与其对机体脂肪代谢的影响相关，具体机理有待进一步研究。蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶是重要的消化酶，分别与蛋白质、淀粉和脂质的消化密切相关。消化酶活性的增强表明鱼类从蛋白质来源获取营养物质 的 能 力 增 强。本 研 究 中，饲 料 中 添 加 马尾藻多糖可不同程度地提高杂交黄颡鱼胃和肠道中消化酶活性，综合来看，马尾藻多糖添加量为 时，胃、肠道中消化酶活性最高，说明马尾藻多糖能提高杂交黄颡鱼胃、肠中消化酶活性，促进杂交黄颡鱼对饲料中营养物质的消化吸收，进而促进鱼体生长，这与本研究中杂交黄颡鱼生长性能结果一致。此外，已有研究证实，海藻多糖具有调节肠道菌群结构和丰度的作用，如海带多糖能改善斜带石斑鱼和大黄鱼肠道菌群结构、浒苔多糖能够改善小鼠肠道菌群、羊栖菜多糖能调节小鼠肠道菌群紊乱和改善肠道菌群结构等。因此，我们推测马尾藻多糖除通过提高消化酶活性来促进杂交黄颡鱼生长以外，对杂交黄颡鱼肠道菌群也具有调节作用，两者协同作用，使得杂交黄颡鱼的生长性能提高，后续将进一步探索验证。在鱼类的正常代谢过程中，活性氧（，）的产生和消除维持着动态平衡。期冯鹏霏等：饲料中添加马尾藻多糖对杂交黄颡鱼生长性能、血清生化指标、消化酶活性和通常，鱼类的抗氧化防御系统可以通过抗氧化酶阻止 产生。在抗氧化防御系统中，抗氧化酶被认为是机体抗氧化防御的第 道防线。抗氧化酶活性的变化在一定程度上反映了环境应激条件下机体抗氧化系统的变化。研究显示海藻多糖可以提高鱼类的抗氧化能力。例如，岩藻多糖能显著影响红鲷仔鱼和黄颡鱼的抗氧化性能，雨 生 红 球 藻 可 有 效 增 强 虹 鳟（）的抗氧化性能。本研究中，饲料中添加马尾藻多糖可提高杂交黄颡鱼血清抗氧化酶（、）活性，马尾藻多糖添加量在及以上时，其活性显著升高，说明马尾藻多糖改善了杂交黄颡鱼的氧化应激，降低了 的生成，从而防止氧化活性失衡，避免细胞氧化损伤。这与已有研究得出的马尾藻多糖提高奥尼罗非鱼（）和南美白对虾（）抗氧化性能的结果一致。马尾藻多糖进入杂交黄颡鱼消化道后水解产生低分子质量的寡糖物质，其经水解吸收后可直接在动物机体内清除氧自由基。此外，马尾藻多糖还可能通过激活或抑制杂交黄颡鱼机体的免疫及抗氧化通路，调节细胞因子的表达来改善机体抗氧化能力。但马尾藻多糖影响杂交黄颡鱼抗氧化能力的作用机理还需进一步探究。结 论 饲料中添加马尾藻多糖可提高杂交黄颡鱼的生长性能，降低饲料系数，提高消化酶活性和抗氧化能力，综合分析各项 指 标，建 议 杂 交 黄 颡 鱼（）饲料中马尾藻多糖的添加量为。参考文献：中华人民共和国农业农村部渔业渔政管理局，全国水产技术推广总站，中国水产学会中国渔业统计年鉴北京：中国农业出版社，：，（），（），（）：孙俊霄，韩广坤，刘娅，等杂交黄颡鱼与普通黄颡鱼幼鱼生长性能及耐低氧能力的比较水生生物学报，（）：，（）：（）罗先群，王新广，杨东升海藻多糖的结构、提取和生物活性研究新进展中国食品添加剂，（）：，（）：（）王安利，胡俊荣海藻多糖生物活性研究新进展海洋科学，（）：，（）：（），（），：，（）：刘晋，郭长江，刘嘉喜海藻多糖免疫调节作用的研究进展中国食物与营养，（）：，（）：（）林建斌，黄志坚，朱庆国，等海洋生物多糖开发及在海水养殖中应用研究福州：福建省淡水水产研究所，：动 物 营 养 学 报 卷 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