免疫抑制素（INH）试验对湘西黄牛受孕率影响.pdf

加值及判定范围可知，环丙沙星实际未添加，恩诺沙星实际添加为 80 滋g/kg，根据实验检测结果计算得到回收率在 80%以上，结果判定优秀。通过本次能力验证，实验室中采用的方法、仪器的稳定性、试剂的有效性等都得到了确认，实验室检测人员对采用高效液相色谱仪进行定量检测有了更深的认知，实验室的整体水平得到了很大的提高。参考文献:1 汪春明，张洋，王姝苇，等.茄子中多种农药残留筛查能力验证J.化学分析计量，2021,30(11):78-84.2 毛燕,闫林.实验室参加能力验证活动的意义分析J.食品安全质量检测学报,2014,5(9):2958-2961.3 彭文绣,李 璇,成 昕.鸡蛋中喹诺酮类兽药残留现状及对策建议J.中国兽药杂志,2020,54(10):76-81.4 范广宇,唐 秀,张 琳，等.高效液相色谱-串联质谱法测定鲆鲽类水产品中喹诺酮的不确定度评定J.食品工业科技,2021,42(20):248-254.5 朱品玲，钟茂生，翁才振，等.液相色谱原质谱法测定水产品中喹诺酮类药物J.广州化工,2021,49(11):87-91.6 王翠月，陈大伟，马丽娜，等.动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留现状和检测方法研究进展J.中国家禽,2022,44(12):92-97.7 李倩，王甲，张玉洁，等.动物性食品中喹诺酮类药物残留检测方法研究进展J.食品安全质量检测学报,2021,12(8):3016-3022.收稿日期：2023-04-11抑制素（inhibin，INH）是通过特异性抗体中和动物体内源性 INH，解除对卵泡刺激素分泌的抑制作用，从而使动物体内卵泡雌激素水平上升，达到提高动物繁殖力的效果。母牛繁殖性能对肉牛养殖生产效率和经济效益具有重要意义，母牛繁殖性能的提升可以降低养殖成本，改善肉牛场的经济效益。通过调控母牛内分泌机能及激素水平而达到提高肉牛繁殖性能的目的，一直是反刍动物繁殖领域的研究热点。本试验在湘西黄牛 INH 免疫的基础上，经过同期发情处理后，进行人工定时输精，然后利用 B 超仪进行妊娠检查，将妊娠检查结果进行统计分析，研究 INH 免疫对湘西黄牛受孕率的影响。1 材料与方法1.1 时间地点试验时间为 2020 年 5 月，地点为新晃县某规模养牛场。1.2 试验牛群选择 60 头体质状态良好、处于空怀期且发情周期正常的经产能繁湘西黄牛母牛作为试验对象，随机分成 2 组，每组 30 头（对照组：CON，试验组：INH），每天 07:00 和 17:00 自由采食和饮水，饲喂全株青贮玉米、混合精料和干稻草。1.3 试验牛群处理对选定的湘西黄牛进行同期发情处理，INH 组每头母牛臀部肌肉注射 1 mL INH 抗原和生源（GnRH），INH 蛋白浓度为 1 mg/mL，生源终浓度为100 滋g，CON 组仅注射生源（GnRH），注射后埋植CIDR 阴道栓，第 11 d 从母牛阴道撤出 CIDR，随后注射氯前列醇钠注射液（PGF2）。撤栓后第二天，注射促黄体素释放激素 A3（LHRH-A3），终浓度为25 滋g，同时于 9:00 和 16:00 分别输精一次（如图 1），其中每组 15 头牛配安格斯冻精（AG），另外 15 头配doi:10.3969/j.issn.1006-4907.2023.04.016免疫抑制素（INH）试验对湘西黄牛受孕率影响姚茂清1，田春燕2，文明欢3，谢咏良4，张马兵5（1.湖南省新晃县畜牧水产事务中心，湖南 怀化 418000；2.辰溪县田湾镇人民政府农业综合服务中心，湖南 辰溪 419500；3.辰溪县柿溪乡农业综合服务中心，湖南 辰溪 419500；4.郴州市北湖区畜牧水产事务中心，湖南 郴州 423000；5.湖南农业大学，湖南 长沙 410128）中图分类号：S859.793文献标识码：B文章编号：1006-4907（2023）04-0038-04摘 要院为了观察免疫抑制素（INH）对湘西黄牛受孕率的影响，试验随机选择 60 头湘西黄牛能繁母牛分成 INH 组和对照组，进行同期发情定时输精处理。结果表明：INH 组总计怀孕牛为 17 头，受孕率 56.67%，其中性控冻精怀孕 6 头，受孕率40%，安格斯冻精 11 头，受孕率 73.33%。对照组总计怀孕牛为 19 头，受孕率 63.33%，其中性控冻精怀孕 11 头，受孕率73.33%，安格斯冻精 8 头，受孕率 53.33%。INH 组的湘西黄牛母牛使用性控冻精和非性控冻精的受孕率均低于对照组，说明 INH 免疫对湘西黄牛的受孕率无显著影响。关键词院抑制素；湘西黄牛；受孕率基金项目院湖南省现代农业产业技术体系建设(湘财农指 201997)、湖南创新型省份建设专项（2022NK4153）。作者简介院姚茂清（1976），男，湖南新晃人，畜牧师，主要从事畜牧工作。淫通信作者院张马兵（1989），男，湖南辰溪人，主要从事动物繁殖技术研究，。试验研究38Hunan Animal Science and Veterinary Medicine,No.4,2023.渊Total No.236冤2023 年第 4 期（总第 236 期）图 1 母牛妊娠直肠检查鉴定示意图表 1 湘西黄牛怀孕情况记录组别INH 组对照组处理数量（头）3030发情率（%）100100配种头数（头）3030总受孕率（%）56.6753.33怀孕头数（头）XK611AG118受孕率（%）XK4073.33AG73.3353.33处理方式（头）INH(1mL)+GnRH(100g)+CIDRGnRH(100g)+CIDR试验研究性控冻精（XK）冻精，输精后 30 天进行 B 超妊娠诊断，输精 90 天后进行直肠把握法进行孕检确认。1.4 试剂药品与仪器免疫抑制素（INH）由江苏省农业科学院施振旦教授研究团队提供；孕酮栓（CIDR）、氯前列醇钠（PGF2琢）、促黄体素释放激素 A3（LRH-A3）由宁波市三生药业有限公司出品；兽用妊娠 B 超测定仪（EXAGO，法国）。1.5 试验方法1.5.1 妊娠 B 超检查将待检母牛进行保定，呈站立姿势，左手固定仪器，右手拿 B 超探头。在兽用 B 超仪的探头上涂抹耦合剂。耦合剂以刚好盖住探头头部为宜。在母牛上腹部无毛区呈 45 度角斜向对侧上方，探头紧贴皮肤一点，进行前后、上下定位扇形扫查，动作要慢。探查时无任何损伤和刺激，待显示屏上出现清楚的图像方可按动冻结键把图像冻结下来，两侧子宫角扫描中发现胎儿、胎膜、跳动的脐动脉等指示性图像即可判定妊娠诊断结果为已孕，反之则判定为空怀。1.5.2 妊娠直肠检查鉴定将待检母牛进行保定，将长臂手套涂抹上石蜡油后，操作者将手顺着母牛直肠摸到子宫颈，再将中指向前滑动，寻找角间沟；以胎膜滑落感、子宫羊膜囊液体波动感配合卵巢上的妊娠黄体为妊娠指示判断是否已孕。如有上述指示性触诊结果,判定为已孕，反之则判定为空怀（图 1）。未孕现象：子宫颈、体、角及卵巢均位于骨盆腔内；经产多次的母牛，子宫角可垂入入口前缘腹腔内，两角大小相等，形状亦相似，弯曲如绵羊角状；经产牛有时右角略于左角迟缓、肥厚，能够清楚地提到子宫角间沟。子宫角经触摸即收缩，变得有弹性，几乎有确实感，能将子宫握在手中，可判定卵巢大小与其中有无黄体和卵泡。怀孕 90 天（3 个月）：角间沟消失。子宫颈移至耻骨前缘。由于宫颈向前可触到扩大的子宫从骨盆腔向腹腔下垂，两角共宽一掌多。在肠胃内容物多时，子宫被挤入骨盆入口，且子宫壁收缩时，可以摸到整个子宫的范围，体积比排球稍小；偶尔还可触到浮在胎水中的胎儿，有时感到有胎动。但子宫壁一般均感柔软，无收缩。孕角比空角大得多；液体波动感清楚，有时在子宫壁上可以摸到如同蚕豆样大小的胎盘突。2 结果与分析2.1 妊娠 B 超检查如图 2-A 对所有试验牛进行 B 超妊娠诊断，将所有孕检的 B 超图进行冻结保存，然后进行妊娠分析，图 2-C 中未见胎儿、胎膜、跳动的脐动脉等指示性图像，即为未孕，图 2-D 中可以清晰观测出胚胎（画圈部分），即为已孕。2.2 妊娠直肠检查鉴定如图 2-B 所示，利用长臂手套对湘西黄牛进行妊娠检查，并将所有直肠检查数据结果进行统计（表 1），统计结果显示，INH 组总计怀孕牛为 17头，受孕率 56.67%，其中性控冻精怀孕 6 头，受孕率 40%，安格斯冻精 11 头，受孕率 73.33%。对照组总计怀孕牛为 19 头，受孕率 63.33%，其中性控冻精怀孕 11 头，受孕率 73.33%，安格斯冻精 8 头，受孕率 53.33%。3 讨论不断提高母畜繁殖效率是肉牛养殖业提升经济效益的关键。通过抑制素免疫技术调控动物繁殖力能有效提升养殖业的生产水平，具体表现在抑制素免疫技术提高牛双胎与多胎繁殖率、强化禽类产蛋的数量和质量等技术手段。过去几十年里，单胎动物的繁殖效率一直不理想，受机体机能、饲养管理以及环境等因素的制约，导致繁殖性能不断下降。据统计，我国肉牛规模化养殖场的受胎率为30%45%，在夏季高温天气，南方牧场的受胎率仅39Hunan Animal Science and Veterinary Medicine,No.4,2023.渊Total No.236冤2023 年第 4 期（总第 236 期）将 B 超探头伸入怀孕母牛直肠B 超检查结果为空怀图 2 湘西黄牛妊娠检查B 超检查结果为怀孕使用 B 超检查试验研究为 10%左右；另有统计显示，规模化奶牛场在产后首次配种的受胎率从 65%下降到 35%左右1-4。为了缩短母畜的发情周期以及提高养殖场的经济效益，在过去的十几年里，研究人员将抑制素免疫技术应用于牧场繁殖一线，研发了一套提高胚胎产量和质量的高效超排技术，同时配套同期发情和定时输精技术，将南方亚热带地区夏季母畜配种受胎率从 8%提高到 44%，北方地区夏季母畜受胎率从26.7%提高到 64.7%5。受胎率是繁殖性能的重要体现，在卵泡和卵子发育质量有保障的前提下，通过技术处理提高母畜人工授精的受胎率，对养殖场的经济效益提升具有重要意义。有研究认为抑制素免疫和 CIDR 处理相结合，应用到同步排卵和定时输精技术中，能够显著提高奶牛配种的受胎率6。张宁等7研究发现，青年奶山羊经过抑制素免疫技术处理后，两组试验动物受胎率均能达到为 100%，试验组 4 只怀孕母羊产羔 9只，比对照组产羔多 5 只，试验组产羔率比对照组高55%，两组差异显著；其中试验组有 3 只怀孕母羊产双羔，而对照组仅有 1 只产双羔，证实了抑制素免疫技术不影响母羊的受胎率，还可以提高了青年奶山羊的产羔数量，具有提高母畜繁殖力的功能。目前，关于 INH 对肉牛受胎率的影响还鲜有研究报道，主要集中在小鼠、母猪、羊和奶牛等动物激素调节、卵泡发育和胚胎发育研究方向上8-11。王水莲等12研究发现，用抑制素基因疫苗肌肉注射免疫黄牛，其抗体阳性组的大卵泡数、排卵卵泡直径和黄体直径均显著高于抗体阴性组，在加强免疫第45 d，抗体阳性组的 P4 水平也有显著提升，使受胎率上升；而刘青13通过肌肉注射免疫抑制素基因疫苗发现杂交水牛在非繁殖季节和繁殖季节的受胎率分别为 51.7%、32%，而对照组杂交水牛非繁殖季节和繁殖季节的受胎率分别为 48.8%、37.2%，可以看出抑制素免疫在非繁殖阶段的作用效果要略高于对照组，而在繁殖季节的受胎率要略低于对照组，说明 INH 免疫不影响动物的繁殖受胎率。4 结论在本研究中，INH 组总计怀孕牛为 17 头，受孕率 56.67%，其中性控冻精怀孕 6 头，受孕率 40%，安格斯冻精 11 头，受孕率 73.33%。对照组总计怀孕牛为 19 头，受孕率 63.33%，其中性控冻精怀孕11 头，受孕率 73.33%，安格斯冻精 8 头，受孕率53.33%，从以上结果可以看出，INH 组的湘西黄牛母牛使用性控冻精和非性控冻精的受孕率均低于对照组，说明影响母牛受孕的因素可能与精液性质、输精手法以及环境等因素有关，INH 免疫对湘西黄牛的受孕率无显著影响。参考文献：1 周子超,祖卓鑫,滑国华,等.能量负平衡对奶牛繁殖的影响及相关机理J.动物营养学报,2019,31(4):1518-1524.2 BUTLER W R.Nutritional interactions with reproductive performancein dairycattle J.Animal reproduction science,2000,(60-61):449-457.3 M.C,LUCY.Reproductive loss in high-producing dairy cattle:40Hunan Animal Science and Veterinary Medicine,No.4,2023.渊Total No.236冤2023 年第 4 期（总第 236 期）黑麦草为禾本科牧草，喜温润气候，具有耐低温、耐盐碱，再生能力强、可多次刈割利用等优点，是一种优质的牧草资源。黑麦草鲜草，适口性好，营养物质种类丰富，能促进动物消化吸收；干草粗蛋白含量高，各种氨基酸、维生素等营养物质含量丰富。因其能提高肉鹅生产性能，降低饲养成本，而被广泛应用于肉鹅生产中1。本研究通过在武冈铜鹅饲粮中添加不同比例黑麦草替代部分基础饲粮，探究黑麦草对武冈铜鹅生长性能、屠宰性能及血清生化指标的影响，为黑麦草在肉鹅上的合理使用提供理论参考。1 材料与方法1.1 试验设计和基础饲粮选择同一批出雏、体重相近、公母各半的 21 日龄健康武冈铜鹅 120 只，随机分为 3 组，对照组、试验玉组和试验域组，每个组设 4 个重复，每个重复 10 只鹅，试验期 49 天。基础饲粮为玉米-豆粕型，其营养水平参照商品肉鹅饲养标准（DB37/T27842016）并结合生产实际设置，饲粮组成及营养水平见表 l。将黑麦草收割并晾干露水后切成长度 12 cm的小段，分别按 10%、15%重量的比例添加至基础饲粮中搅拌均匀后饲喂试验玉组和试验域组肉鹅。1.2 饲养管理试验鹅网上平养，定时喂料，自由采食、饮水。1.3 测定指标1.3.1 生长性能指标在试验开始和结束时分别以重复为单位空腹doi:10.3969/j.issn.1006-4907.2023.04.017饲粮添加黑麦草对武冈铜鹅生长性能、屠宰性能及血清生化指标的影响戴先焙1，徐柏林2，蒋二则3，李胜军1，谭 宇4（1.新宁县水庙镇农业综合服务中心，湖南 新宁 422704；2.新宁县动物疾病预防控制中心，湖南 新宁 422799；3.新宁县农业综合行政执法大队 湖南 新宁 422799；4.湖南武冈铜鹅农业发展有限责任公司 湖南家禽产业技术体系湘中试验站，湖南 武冈 422400）摘 要院为探究不同比例黑麦草对武冈铜鹅生长性能、屠宰性能及血清生化指标的影响，选取同一批出雏、体重相近的 21 日龄武冈铜鹅 120 只，随机分为 3 组，每组 4 个重复，每个重复 10 只鹅。结果显示：1）试验组的平均日增重、平均日采食量和料重比与对照组无显著差异（P0.05）；试验组的平均日增重、平均日采食量和料重比与对照组和试验组均有显著差异（P0.05）；3）各处理组间的总蛋白和甘油三酯无显著差异（P0.05）；试验组和试验组的总胆固醇、尿酸和碱性磷酸酶均无显著差异（P0.05），但与对照组相比均差异显著（P0.05）。综上所述，饲粮中添加适量黑麦草能够改善武冈铜鹅的生长性能、屠宰性能和血清生化指标，其中添加10%的黑麦草效果最好。关键词院黑麦草；生长性能；屠宰性能；武冈铜鹅作者简介院戴先焙（1978），男，湖南新宁人，农艺师，主要从事种养结合技术推广工作。试验研究where will it End?J.Journal of dairy science,2001,(84):1277-1293.4 杨利国.我国奶牛繁殖现状与最新研究进展J.中国乳业,2009(12):54-58.5 F C.Rectifying cow infertility under heat stress by immunization a原gainst inhibin and supplementation of progesteroneJ.Domestic ani原mal endocrinology,2022,80:106726.6 GUO R,CHEN F,MEI C,et al.Conception Rate and ReproductiveHormone Secretion in Holstein Cows Immunized against Inhibin andSubjected to the Ovsynch ProtocolJ.Animals:an open access jour原nal from MDPI,2020,10(313):1-10.7 张宁.抑制素主动免疫对青年奶山羊生殖的影响 D.陕西杨凌:西北农林科技大学,2007.8 蒋静思.抑制素基因转染对大鼠间质细胞增殖、凋亡和激素分泌的影响D.湖南长沙:湖南农业大学,2014.9 何培源.免疫抑制素结合 hCG 促黄体处理提高母猪繁殖性能的新技术研究D.广东广州:仲恺农业工程学院,2018.10SOTO P,NATZKE R P,HANSEN P J.Actions of tumor necrosis fac原tor-alpha on oocyte maturation and embryonic development in cattle J.American journal of reproductiveimmunology,2015,50(5):380-388.11 孙晓萍,刘建斌,张万龙,等.不同来源抑制素抗原对牛羊繁殖力影响研究J.黑龙江畜牧兽医,2014,(24):43-44.12王水莲.抑制素 pCISI 基因免疫对黄牛生殖及内分泌的影响D.湖南长沙:湖南农业大学,2006.13刘青.抑制素基因疫苗免疫杂交水牛的方法学和安全性研究D.湖北武汉:华中农业大学,2016.收稿日期：2023-06-30中图分类号：S828.4文献标识码：B文章编号：1006-4907（2023）04-0041-0341