改良加藤法.doc

改良加藤法（Kato-Katz）操作步骤
1．材料的准备
1.1 塑料定量模板(统一供应)：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3；
1.2 软性塑料刮片(统一供应)：两头刮片型；
1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为80～100目,裁剪成8cm×8cm；
1.4 透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3％的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，按此比例混合；
1.5 亲水性透明玻璃纸(统一供应)：规格为30mm×25mm、厚40um，使用前需在透明液中浸泡24小时以上，使玻璃纸显示绿色或蓝色；
1.6 载玻片：规格为75.5mm×25.5mm、厚1.0mm－1.2mm；
1.7 其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。
2．操作步骤
2.1 编号：每份粪样取3张载玻片进行编号（与待检粪样的编号相同）；
2.2 打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待检粪样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面；
2.3 将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内，使填满全孔并抹平；
2.4 小心移去定量板，使粪样留在载玻片上；
2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液，盖在粪样上，用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘；
2.6 待粪便透明后（一般室温25℃、75％湿度下，涂片放置不宜超过2小时）及时镜检。
3．结果观察
3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上在低倍（10×）镜下进行镜检，镜检时仔细检查每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。
3.2 Kato-Katz厚涂片虫卵计数方法。
3.2.1每张涂片发现的鞭虫卵、钩虫卵全片计数。
3.2.2每张涂片发现的蛔虫卵、肝吸虫卵原则上全片计数，由于一些地区蛔虫、肝吸虫感染度特别高，有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个，计数蛔虫卵、肝吸虫卵比较费时，为此对Kato-Katz厚涂片蛔虫卵、肝吸虫卵计数作以下规定：
3.2.2.1随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵（肝吸虫卵）少于10个，蛔虫卵、肝吸虫卵全片计数
3.2.3.2随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵（肝吸虫卵）多于10个，先读完全片的各视野钩虫卵数和鞭虫卵数，再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵、肝吸虫卵数。具体步骤是：
按图1分布固定抽查10个视野，并算出抽查的10个视野蛔虫卵（肝吸虫卵）总数；

图1. 10个视野分布
计算出该涂片粪膜视野数，再推算出全片蛔虫卵（肝吸虫卵）数。
按一定的规律，如自左而右，自上而下，再自右而左，一行接一行，一个视野接一个视野地用推行器移动涂片，数出全片粪膜视野数，则：全片粪膜蛔虫卵（肝吸虫卵）总数＝抽查的10个视野蛔虫卵（肝吸虫卵）数之和×全片粪膜视野÷10
例如：抽查的10个视野蛔虫卵（肝吸虫卵）数相加为366，全片粪膜视野数为78，则：
全片粪膜蛔虫卵（肝吸虫卵）总数＝366×78÷10＝2854.8＝2855
3.2.3其他虫卵均记录但不计数。
3.3 结果登记
3.3.1观察结果即时记录在原始登记表，并及时转登表。
4．注意事项
4.1亲水性透明玻璃纸：使用前需全部浸入透明液中，浸泡24小时以上。
4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出；
4.3涂片放置时间长短是关键。一般室温25℃、75％湿度下，涂片放置不宜超过2小时。若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜检，否则透明过度，薄壳虫卵易变形看不清楚，会造成漏检或误判。
4.4 用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24即得每克粪便的虫卵数，填在表2为实际观察到的虫卵数（不乘24）。
4.5 粪样一粪三检，三片全计数取平均值。
4.5.1 阴性片记为零一起算入平均值
4.5.2平均值结果四舍五入保留小数点一位
例如：三片计数结果分别为 15、0、11，则虫卵数为（15+0+11）/3＝8.7
若三片计数结果分别为 1、0、0，则虫卵数为（1+0+0）/3＝0.3