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改良加藤法.doc

1、改良加藤法(Kato-Katz)操作步骤 1.材料的准备 1.1 塑料定量模板(统一供应):规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板,中央孔为圆台形,其短径3mm,长径4mm,高1mm,容积为38.75mm3; 1.2 软性塑料刮片(统一供应):两头刮片型; 1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为80~100目,裁剪成8cm×8cm; 1.4 透明液的配制:取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3%的孔雀绿(或亚甲蓝)1ml,按此比例混合; 1.5 亲水性透明玻璃纸(统一供应):规格为30mm×25mm、厚40um,使用前需在透明液中浸泡24小时以上,使玻璃纸显示绿色或蓝色;

2、 1.6 载玻片:规格为75.5mm×25.5mm、厚1.0mm-1.2mm; 1.7 其它:原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。 2.操作步骤 2.1 编号:每份粪样取3张载玻片进行编号(与待检粪样的编号相同); 2.2 打开待检粪样的包装,将尼龙绢片置于待检粪样上,用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面; 2.3 将定量板放在载玻片中部,然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内,使填满全孔并抹平; 2.4 小心移去定量板,使粪样留在载玻片上; 2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的浸泡液

3、盖在粪样上,用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制,使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘; 2.6 待粪便透明后(一般室温25℃、75%湿度下,涂片放置不宜超过2小时)及时镜检。 3.结果观察 3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上在低倍(10×)镜下进行镜检,镜检时仔细检查每一视野,并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。 3.2 Kato-Katz厚涂片虫卵计数方法。 3.2.1每张涂片发现的鞭虫卵、钩虫卵全片计数。 3.2.2每张涂片发现的蛔虫卵、肝吸虫卵原则上全片计数,由于一些地区蛔虫、肝吸虫感染度特别高,有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个,计数蛔虫卵

4、肝吸虫卵比较费时,为此对Kato-Katz厚涂片蛔虫卵、肝吸虫卵计数作以下规定: 3.2.2.1随意粗查几个视野,若每个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)少于10个,蛔虫卵、肝吸虫卵全片计数 3.2.3.2随意粗查几个视野,若每个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)多于10个,先读完全片的各视野钩虫卵数和鞭虫卵数,再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵、肝吸虫卵数。具体步骤是: 按图1分布固定抽查10个视野,并算出抽查的10个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)总数; 图1. 10个视野分布 计算出该涂片粪膜视野数,再推算出全片蛔虫卵(肝吸虫卵)数。 按一定的规律,如自左而右

5、自上而下,再自右而左,一行接一行,一个视野接一个视野地用推行器移动涂片,数出全片粪膜视野数,则:全片粪膜蛔虫卵(肝吸虫卵)总数=抽查的10个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)数之和×全片粪膜视野÷10 例如:抽查的10个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)数相加为366,全片粪膜视野数为78,则: 全片粪膜蛔虫卵(肝吸虫卵)总数=366×78÷10=2854.8=2855 3.2.3其他虫卵均记录但不计数。 3.3 结果登记 3.3.1观察结果即时记录在原始登记表,并及时转登表。 4.注意事项 4.1亲水性透明玻璃纸:使用前需全部浸入透明液中,浸泡24小时以上。 4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时

6、必须填满中央孔全孔并抹平;压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘,但应避免粪渣溢出; 4.3涂片放置时间长短是关键。一般室温25℃、75%湿度下,涂片放置不宜超过2小时。若温度低,空气湿度大,涂片放置时间可适当延长。总之,涂片放置时间取决于粪样透明度,只要透明了,就应及时镜检,否则透明过度,薄壳虫卵易变形看不清楚,会造成漏检或误判。 4.4 用椭圆孔塑料定量板,每孔所容粪便重量平均41.7mg,每片所得虫卵数乘以24即得每克粪便的虫卵数,填在表2为实际观察到的虫卵数(不乘24)。 4.5 粪样一粪三检,三片全计数取平均值。 4.5.1 阴性片记为零一起算入平均值 4.5.2平均值结果四舍五入保留小数点一位 例如:三片计数结果分别为 15、0、11,则虫卵数为(15+0+11)/3=8.7 若三片计数结果分别为 1、0、0,则虫卵数为(1+0+0)/3=0.3

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