不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响.pdf

动物营养学报，（）：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响陈颜旭，古再丽努尔艾麦提 郭同军 郭雪峰（新疆畜牧科学院饲料研究所，乌鲁木齐；塔里木大学动物科学与技术学院，阿拉尔）摘 要：本试验为了探索不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响，采用单因素完全随机试验设计，选取体重为（）的杜泊羊湖羊杂交 代公羊 只，随机分为 个组，每组 只。各组饲喂不同饲粮，对照组（组）饲粮不添加万寿菊粕，组、组、组、组饲粮中分别添加、和 万寿菊粕。试验期 ，其中预试期 ，正试期。在第 天，从各组中随机选取 只公羊，经口腔采集瘤胃液，利用高通量测序技术进行瘤胃细菌多样性分析。结果表明：组样品共获得 个操作分类单元（），其中共有 个；组 指数极显著低于 组（），组显著低于 组（）。组 指数极显著低于 组（），组显著低于 组（）。组 指数极显著低于 组（）。各组在门水平的优势菌群为拟杆菌门和厚壁菌门。组拟杆菌门相对丰度极显著高于 组（），组显著高于 组（）；组和 组变形菌门相对丰度极显著低于 组（）；组、组和 组疣微菌门相对丰度极显著低于 组（），组显著低于 组（）；组和 组蓝藻菌门的相对丰度极显著低于 组（），组显著低于 组（）；组和 组浮霉菌门的相对丰度极显著高于 组（），组显著高于 组和 组（），组显著高于 组（）。属水平上的优势菌为普雷沃氏菌属、拟杆菌属、解琥珀酸菌属和奎因氏菌属。组普雷沃氏菌属相对丰度极显著高于 组（）；组解琥珀杆菌属相对丰度极显著低于 组（），组显著高于 组（），组和 组极显著低于 组（），显著低于 组（）；组和 组琥珀酸弧菌属相对丰度显著低于 组（）。组厌氧弧菌属相对丰度极显著低于 组（）。综上所述，在绵羊饲粮中添加万寿菊粕水平为 时，不会影响绵羊瘤胃菌群丰富度和多样性；当添加万寿菊粕水平在 时，会降低绵羊瘤胃菌群丰富度和多样性，改变绵羊的菌群结构，增加拟杆菌门和普雷沃氏菌属的相对丰度，且普雷沃氏菌属和密螺旋体属相对丰度与万寿菊粕水平有较强的正相关性。关键词：万寿菊粕；绵羊；瘤胃细菌；菌群多样性中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：基金项目：新疆维吾尔自治区中央引导地方科技发展资金项目（）作者简介：陈颜旭（），男，重庆人，硕士研究生，研究方向为动物营养与饲料科学。：通信作者：郭同军，研究员，硕士生导师，：万寿菊（）为菊科、万寿菊属 年生草本植物，以花和根入药，具有清热解毒、止咳化痰等功效。据报道万寿菊花产量高，高产田鲜花产量可达 以上。万寿菊粕是万寿菊花经过提取叶黄素后的工业副产物，产量可观，如 果 开 发 利 用 得 当 可 以 缓 解 饲 草 资 源 不足。万寿菊粕的营养成分一定程度优于玉米秸秆、棉花秸秆等粗饲料。万寿菊粕中含有脂质类、酚酸类、生物碱、氨基酸及其衍生物、黄酮类化合物。研究表明，菊花中活性物质（如叶黄动 物 营 养 学 报 卷素类、挥发油类）具有抗氧化、提高免疫力、促进生长性能、改善畜禽产品品质等功能。前人研究主要集中在家禽、单胃动物、草食动物和水产养殖等方面，在反刍动物方面的相关研究较少，而反刍动物瘤胃是消化饲粮的重要器官，其中瘤胃内细菌最多也是主要的功能群落，另外反刍动物机体也受到微生物代谢的调控，其中饲料种类、组成比例均会影响瘤胃微生物区系，从而影响动物机体。大量研究表明，精粗比、饲养水平、饲料添加剂和饲料原料类型等变化均能调节瘤胃细菌群落多样性，改善瘤胃微生物区系。本课题组前期研究表明，万寿菊粕中含有的活性成分可对绵羊生长性能、血清生化指标和腹泻率产生一定影响。目前关于万寿菊粕对反刍动物瘤胃菌群调控的研究还鲜有报道，其是否影响瘤胃微生物区系以及微生物对宿主的互作关系有待探究。因此，本研究以绵羊为对象，利用高通量测序技术，通过添加不同水平的万寿菊粕，探究其对绵羊瘤胃内菌群组成及菌群变化的影响，以期为万寿菊粕开发和合理利用提供一定的数据支持。材料与方法 试验材料 万寿菊粕由新疆喀什某生物科技有限公司提供。试验动物及试验设计 在新疆喀什地区巴楚县喀什丰泰农牧科技有限公司羊场选取体重为（）的绵羊公羔 只，经驱虫后依据体重进行单因素完全随机试验设计，随机分为 个组，每组 只，每组小群饲养，其中对照组（组）饲粮不添加万寿菊粕，组、组、组、组饲粮中分别添加、和 万寿菊粕。预试期 ，正试期。试验饲粮与饲养管理 试验饲粮配制参考（）绵羊饲养标准，基于等能等氮原则配制体重 、日增重 的饲粮。具体饲粮组成及营养水平与本课题组前期试验一致，于每天：和：各饲喂 次，自由采食，自由饮水，每天每组保持的剩料量。样品采集 预试期和正试期结束后称重，用于平均日增重计算，第 天晨饲前，从各组中随机选取 只绵羊，用脚踏式瘤胃液采集装置经口腔采集瘤胃液，用 层纱布过滤，然后将收集的滤液立即放入液氮冻存，然后转置 冰箱保存，待后续送于北京百迈客生物有限公司，用 测序平台对细菌 基因进行高通量测序，。样品检测及生物信息分析 的提取：使用 天根生化科技（北京）有限公司提取瘤胃液中细菌，具体操作见说明书。扩增用引物：全长引物（）（）；（）（）。扩增程序：预变性 ，个 循 环（变性 ，退火 ，延伸 ），最后 延伸 。建库测序：提取样品总 后，根据 全长引物 和，合成带有 的特异引物，进行 扩增并对其产物进行纯化、定量和均一化形成测序文库（），建好的文库先进行文库质检，质检合格的文库用 进行测序。下机数据为 格式，通过 分析软件导出 文件，根据 序列识别不同样品的数据并转化为 格式数据。数据预处理：将 下机数据导出为 文件（序列使用 提供的 工具获取）后，主要有如下 个步骤，）识别，使用 软件，通过 对 进行识别，得到 序列数据；）长度过滤，使用百迈客公司自主研发的软件，对 进行过滤，得到有效序列；）去除嵌合体，使用 软件，鉴定并去除嵌合体序列，得到 序列。多 样 性 分 析：在 百 迈 克 生 物 云 计 算 平 台（）进行分析。相关性分析：云计算平台（）选择典范对应（）分析，选择属水平分析同时以万寿菊粕添加水平和平均日增重作为环境因子进行组间分析。数据处理采 用 统 计 软 件 进 行 分析并以 氏法进行多重比较，期陈颜旭等：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响 为差异极显著，为差异显著。数据结果采用“平均值标准差”表示。结果与分析 各组样本操作分类单元（）聚类分析 个瘤胃液样品测序后通过 识别后共获得 条 序列，每个样品至少产生 条 序列，平均产生 条 序列。共产生有效序列 条，经质量控制后得到 条高质量序列，序列长度为 左右。在基于序列相似性大于 的原则划分不同的，组、组、组、组和 组分别有、个，各组共有的 为 个。各组独有的 分别为、个，其中 组的特有 数最多，组和 组 数最少（图）。绵羊瘤胃细菌菌群 多样性及 多样性分析 由表 可知，覆盖率均约等于，表明本次每个样品的测序结果均能反映瘤胃的菌群结构。组 数极显著低于 组和其他各组（），组显著低于组和组（），其他各组间差异不显著（）。组 指数极显著低于 组（），组显著低于 组（），其余各组无显著差异（）。组 指数极显著低于 组（），组显著低于 组（），其余各组无显著差异（）。组 指数极显著低于 组（），其余各组差异不显著（）。不同颜色代表不同分组，由 图可看出不同组之间共有和独有的 数详细情况。，图 维恩图 表 瘤胃细菌菌群样本 多样性指数 项目 组 组 组 组 组 值 线性二次 数目 指数 指数 指数 指数 覆盖率 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（），不同小写字母表示差异显著（），不同大写字母表示差异极显著（）。下表同。，（），（），（）动 物 营 养 学 报 卷由 图 可 知，主 成 分 （）贡 献 率 为，主成分（）的贡献率为，用 非加权距离算法，不同颜色点代表各组中的样本，个样本间点间距越远表明物种组成有明显差异，点距越近表明物种组成相似。组和 组的样本点间距较大，表明 组的菌群组成较 组有明显差异。组相较 组距离较远，说明 组和 组的菌群结构有明显差异。组的置信圈与 组和 组的置信圈间距较近，且样本点较近且集中，说明这 组在 水平上菌群组成较为相似。图 不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌菌群影响的主成分分析 由图 可知，组和 组的箱线图较为集中，表明组内差异较小。，表示各组间为中等差异，表明各组间差异极显著，这说明在本研究中采样或者分组没有出现较大问题，能够证实数据的有效性。绵羊瘤胃细菌门水平的组成分析 由表 可知，组拟杆菌门相对丰度极显著高于 组（），组显著高于 组（），其他各组差异不显著（），而随着万寿菊粕水平的增加各组在二次曲线趋势上无显著差异（）。组和 组变形菌门相对丰度极显著低于 组（），其他各组差异不显著（），各组在二次曲线趋势上无显著变化（）。组、组和 组疣微菌门相对丰度极显著低于 组（），组显著低于 组（），各组在二次曲线趋势上差异不显著（）。组和 组蓝藻菌门的相对丰度极显著低于 组（），组显著低于 组（），其他各组差异不显著（），各组在二次曲线趋势上无显著变化（）。组和 组浮霉菌门的相对丰度极显著高于（），组显著高于 组和 组（），组显著高于 组（），各组在二次曲线趋势上差异不显著（）。横坐标表示所有组间距离和不同分组，纵坐标表示不同的距离。一般：大差异；：中等差异，：小差异。等于 或在 附近，说明组间没有差异。，：；：；：，图 各组瘤胃菌群的相似性分析 绵羊瘤胃细菌属水平的物种组成分析 由表 可知，组普雷沃氏菌属相对丰度极显著高于 组（），其他各组差异不显著（），各组在二次曲线趋势上无显著差异（）。组解琥珀杆菌属相对丰度极显著低于 组和 组（），显著低于 组（），组和 组极显著低于 组（），显著低于 组（），组显著高于 组（），各组在二次曲线趋势上无显著差异（）。组和 组琥珀酸弧菌属相对丰度显著低于 组（），其他各组差异不显著（），各组在二次曲线趋势上差异不显著（）。组厌氧弧菌属相对丰度极显著低于 组和 组（），显著低于 组（），其他各组差异不显著（），各组在二次曲线趋势上无显著差异（）。期陈颜旭等：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响表 不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌门水平相对丰度的影响 项目 组 组 组 组 组 值 线性二次拟杆菌门厚壁菌门变形菌门疣微菌门蓝藻菌门螺旋体菌门拟杆菌门浮霉菌门纤维杆菌门脱硫杆菌门表 不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌属水平相对丰度的影响 项目 组 组 组 组 组 值 线性二次普雷沃氏菌属瘤胃球菌属拟杆菌属月形单胞菌属解琥珀杆菌属奎因氏菌属琥珀酸弧菌属动 物 营 养 学 报 卷续表 项目 组 组 组 组 组 值 线性二次密螺旋体属真杆菌属厌氧弧菌属 不同万寿菊粕水平和平均日增重与瘤胃细菌丰度的相关性分析 由图 可知，瘤胃微生物菌群的变化可能与万寿菊粕添加水平及绵羊平均日增重存在一定关联性，其中，普雷沃氏菌属、密螺旋体属相对丰度与寿菊粕添加水平有较强的正相关关系，琥珀酸弧菌属相对丰度和寿菊粕添加水平呈负相关关系。解琥珀杆菌属、厌氧弧菌属、真杆菌属、奎因氏菌属、瘤胃球菌属、月形单胞菌属、拟杆菌属相对丰度均与平均日增重呈正相关关系。：厌氧弧菌属；：解琥珀杆菌属；：普雷沃氏菌属；：密螺旋体属；：琥 珀 酸 弧 菌 属；：真 杆 菌 属；：奎因氏菌属；：瘤胃球菌属；：月形单胞菌属。图 万寿菊粕水平和平均日增重的 分析 讨 论 不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响 瘤胃作为反刍动物重要的消化器官其功能的发挥离不开其中的各种微生物，而微生物的多样性与品种、年龄、饲粮、饲养环境等因素密切相关，。多样性能够反映出样本中物种的丰富度和多样性，其中 指数和 指数主要与微生物群落丰富度相关，其数值越大说明样品中的物种越多，丰富度越高；而 指数和 指数和微生物群落多样性相关，指数越大表明微生物群落多样性越高，指数越小表明微生物群落多样性越高。肖润等研究表明，在云南云岭牛饲粮中添加桑枝叶粉显著提高了 指数和 指数，改善了云南云岭牛瘤胃的微生物多样性。董春晓等发现，添加油菜秸秆组的湖羊瘤胃微生物群落多样性和丰富度均显著高于其他组，认为是油菜秸秆中多糖、半纤维素及淀粉等成分影响了菌群变化所致。李与琦等研究表明，随着微贮棉秆的添加量增加，湖羊瘤胃中微生物的 指数、数显著降低，这可能和饲粮中高比例微贮棉秆对瘤胃菌群的丰富度的影响有关。等研究表明，高精料饲粮能够显著降低山羊瘤胃菌群的丰富度和多样性，改变瘤胃微生物的组成，同时对瘤胃液和肝脏及血清中代谢物产生影响，这表明高精料型饲粮对山羊整体健康状况产生影响。另外，有研究发现，奶牛饲粮中添加苜蓿黄酮能使瘤胃内细菌的种类和多样性升高，分析可能与黄酮类化合物抑制一些病原微生物、调控各菌群间关系、控制微生物大量生长有关，还可能与黄酮类化合物影响一些微生物代谢进而调控菌群数量有关。在本试验中，随着万寿菊粕添加水平的增加，各组 数、指数、指数、指数均有一定程度降低，组极显著低于 组。本试验中主成分分析结果表明，组样本相较 组较为 期陈颜旭等：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响分散，这也表明高水平的万寿菊粕影响了绵羊瘤胃菌群的多样性。本研究与他人研究结果类似，高添加水平的万寿菊粕可能起到调控瘤胃菌群丰度和多样性的作用，本试验饲粮为等能等氮饲粮，但随着万寿菊粕添加水平的提高，饲粮的精粗比逐渐降低，可能与之有一定关联，但导致瘤胃菌群丰度和多样性变化的因素还有很多，还可能与万寿菊粕中多糖类、黄酮类等物质影响有关。不同水平万寿菊粕对绵羊瘤胃细菌菌群结构的影响 本研究中所有瘤胃液样品中细菌共鉴定得到 个门、个纲、个目、个科、个属和 个种。大量研究结果表明，反刍动物瘤胃内的优势菌门为拟杆菌门和厚壁菌门。拟杆菌门是革兰氏阴性菌，在降解多糖、蛋白质、碳水化合物，以及吸收氨基酸和合成菌体蛋白等功能上较为重要；厚壁菌门是革兰氏阳性菌，以降解纤维为主；变形菌门是革兰氏阴性菌，主要包含较多致病菌，肠道中变形菌门相对丰度的升高反映了肠道微生物群落结构的失调或不稳定。本研究结果显示，瘤胃中门水平优势菌主要是拟杆菌门和厚壁菌门，与前人研究结果一致，并且本研究中随着万寿菊粕添加水平的上升，组的拟杆菌门的相对丰度极显著高于 组，而厚壁菌门相对丰度各组间无显著差异。任伟忠等研究表明，不同比例组合饲料（玉米青贮、谷草、羊草）对干奶期奶牛瘤胃菌群无明显影响，因为各组合精粗比一致，认为这种现象可能与各粗饲料相似性较高，不能引起瘤胃菌群变化有关。此外，有研究表明，拟杆菌门的相对丰度与饲粮中中性洗涤纤维水平呈负相关性。在本试验中，随着万寿菊粕添加水平上升，玉米秸秆比例下降，瘤胃中拟杆菌门相对丰度增加可能与万寿菊粕与玉米秸秆的比例变化有关。等研究表明，在小牛饲粮中添加发酵玉米蛋白粉能有效提高断奶犊牛瘤胃中拟杆菌门相对丰度，降低变形菌门相对丰度，这可能与发酵玉米蛋白粉含有较多氨基酸和小肽有关。还有研究显示，与添加莫能菌素组相比，在犊牛饲粮中添加牛至精油能提高蛋白质降解菌的数量，增加白色瘤胃球菌数量，认为与牛至精油中较高的酚类化合物抗菌作用相关。另外，瘤胃内微生物的变化还受到动物品种、年龄、饲 粮 组 成 和 环 境 等 影响。在本试验中，组和 组变形菌门相对丰度极显著低于 组，表明饲粮添加高水平寿菊粕能够降低致病菌数量并利于绵羊瘤胃的微生物平衡，可能与万寿菊粕中含有活性成分如黄酮类、氨基酸衍生物类影响瘤胃菌群有关，其具体机制还有待探究。本研究中，瘤胃细菌属水平的优势菌属为普雷沃氏菌属，普雷沃氏菌属属于拟杆菌门，能够对半纤维素、淀粉和木聚糖等植物非纤维多糖降解利用，还具有降解蛋白质的作用，解琥珀杆菌属能将饲粮中的碳水化合物分解为琥珀酸，进一步产生丙酸，琥珀酸弧菌属具有一定的纤维降解能力。研究表明，高剂量的苜蓿黄酮能够抑制锥形杆菌属和琥珀酸弧菌属细菌，可能影响半纤维素的降解，还有学者研究显示，缩合单宁也能调控瘤胃内纤维降解菌的相对丰度。朱靖等研究显示，一定量的辣椒碱能够对瘤胃厚壁菌门和拟杆菌门有促进作用，对普雷沃氏菌属影响较多，也能降低瘤胃琥珀酸弧菌属相对丰度，可能是植物提取物中的酚类化合物作用瘤胃微生物所致。也有研究显示，在水牛饲粮中添加一些植物次级代谢物（挥发油、皂苷、单宁）未对黄色瘤胃球菌产生影响，而使琥珀酸丝状杆菌的相对丰度显著降低。李世歌等研究表明，饲喂杂交构树青贮能够使瘤胃内普雷沃氏菌属相对丰度有增加趋势，推测是高比例杂交构树青贮降低了饲粮整体中性洗涤纤维水平以及高比例下杂交构树青贮中含有的抗营养因子单宁含量较高共同所致。还有研究报道，体外发酵条件下添加板栗单宁能够极显著提高普雷沃氏菌属和月形单胞菌属的丰度，甜叶菊提取物能够增加密螺旋体属的相对丰度。本试验中，万寿菊粕添加水平的增加极显著提高了普雷沃氏菌属的相对丰度，此外，组解琥珀杆菌属和琥珀酸弧菌属相对丰度均有显著降低，推测高水平万寿菊粕饲粮能够影响纤维瘤胃降解纤维素的能力。万寿菊粕添加水平和平均日增重与瘤胃菌群的相关性分析 关联性分析中，普雷沃氏菌属和万寿菊粕添加水平有较高相关性，拟杆菌属、奎因氏菌属相对丰度和平均日增重有一定关联性，瘤胃内微生物菌群之间作用复杂，菌群间的协同、拮抗作用均会导致瘤胃内微生物菌群变化。还有学者研究发现，高精料饲粮会导致山羊瘤胃菌群的丰动 物 营 养 学 报 卷富度下降，使普雷沃氏菌属丰度增加，同时高精料诱导的瘤胃上皮损伤和菌群结构的变化还会使白细胞介素 和白细胞介素 的基因表达量以及脂多糖含量增加，这种情况会导致瘤胃代谢紊乱，还可能进一步影响山羊机体健康导致蹄叶炎的产生。胡晓宇的研究表明，奶牛瘤胃酸中毒下的菌群紊乱导致菌群丰度和多样性改变能促使致病菌过度生长繁殖，致使血液中脂多糖含量增加引起炎症。本研究中，组菌群丰度和多样性相较 组有显著变化，随着万寿菊粕添加水平增加，菌群多样性及丰度显著降低，可能与高水平万寿菊粕组中饲粮含有的活性成分较高相关，另外也可能和高添加水平组饲粮精粗比变化有关，并且本课题组前期试验显示饲粮中万寿菊粕添加水平在 时可能是生物碱等含量升高导致绵羊明显腹泻，这也可能与瘤胃菌群丰度和多样性降低导致菌群结构异常有一定关联。结 论 本试验条件下，饲粮万寿菊粕水平为 时，不会影响瘤胃细菌丰富度和多样性。本试验条件下，饲粮万寿菊粕水平高于时，会降低绵羊瘤胃菌群丰富度和多样性，改变绵羊的菌群结构，增加拟杆菌门和普雷沃氏菌属相对丰度。本试验条件下，绵羊瘤胃普雷沃氏菌属和密螺旋体属相对丰度与万寿菊粕水平有较强的正相关性。参考文献：王志东，梁容瑞，李宗芳中药野菊花的药理作用研究进展医学综述，（）：，（）：（）张晓媛，段立华，赵丁菊花化学成分及药理作用的研究时珍国医国药，（）：，（）：（）蒋征奎，李晓，罗彬野菊花挥发油抗炎镇痛作用中国实验方剂学杂志，（）：，（）：（）朱亚，赵永平，李维翠，等不同栽培密度对万寿菊产量及产量构成的影响安徽农学通报，（）：，（）：（）赵舰菊花粕在蛋鸡日粮中的应用硕士学位论文保定：河北农业大学，：，（）武婷婷非常规饲料资源在肉牛育肥中的应用与典型日粮配方的研究硕士学位论文南宁：广西大学，：，（）袁玲，王学梅，王秋菊，等万寿菊粉的营养价值评定东北农业大学学报，（）：，（）：（）王泳，宋杰，何海迎，等羊用 种植物性非常规饲料营养价值评定饲料工业，（）：，（）：（）吴瑞凤，阚春刚，赵文渊，等内蒙古地区万寿菊植株营养成分分析广州化工，（）：，（）：（）李禹辰，王迪，樊蕊，等亚临界丙酮提取万寿菊渣中抗氧化活性成分的研究食品工业科技，期陈颜旭等：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响（）：，（）：（）马娜万寿菊花中主要有效成分的盐析萃取硕士学位论文石河子：石河子大学，：，（）李健，宋帅娣，张若男，等黑龙江产万寿菊花精油的化学 成 分 研 究 化 学 与 黏 合，（）：，（）：（），（）：李朋帅，乔梦泽，张雪，等万寿菊提取物对太行鸡抗氧化能力及肠道形态的影响中国畜牧杂志，（）：，（）：（）陈祥宇，孙二东，陈一凡，等万寿菊提取物对太行鸡生产性能、蛋品质、免疫功能和抗氧化能力的影响动物营养学报，（）：，（）：（）林城丽万寿菊粉与角黄素对黄金锦鲤着色，生长及抗氧化能力的影响硕士学位论文天津：天津农学院，（）：，（），（）（），（）：王秀菊花粉在兔饲料中的应用江西饲料，（）：，（）：（），（）：，：柏妍，郎侠，王彩莲，等饲粮中添加牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛血清生化指标、消化酶活性及瘤胃微生物区系的影响畜牧兽医学报，（）：，（）：（），：，：马晓文，李发弟，李飞，等饲粮大麦粉碎粒度对湖羊瘤胃微生物组成及肌肉脂肪酸的影响草业学报，（）：，（）：（）陈颜旭，郭同军，古再丽努尔艾麦提，等饲粮添加万寿菊粕对绵羊生长性能、瘤胃发酵参数和血清生化指标的影响 动物营养学报，（）：，（）：（）动 物 营 养 学 报 卷 ：，：，（），：肖润，郑旺，郑琳，等桑枝叶粉对云南云岭牛瘤胃微生物区 系 的 影 响 草 业 科 学，（）：，（）：（）董春晓，吕佳颖，牛骁麟，等粗饲料来源对育肥湖羊瘤胃微生物区系及肌肉脂肪酸组成的影响草业科学，（）：，（）：（）李与琦，阳建华，张涛，等日粮中添加不同比例微贮棉秆对湖羊瘤胃微生物区系的影响微生物学报，（）：，（）：（），（）：占今舜苜蓿黄酮对奶牛生产性能、瘤胃代谢和免疫性能影响的研究博士学位论文扬州：扬州大学，：，（），（）：张红涛不同玉米青贮水平对荷斯坦后备牛瘤胃液微生物组及其代谢组的影响博士学位论文北京：中国农业大学，：，（）韩旭峰日龄、日粮精粗比对陕北白绒山羊瘤胃微生物区系影响的研究博士学位论文杨凌：西北农林科技大学，：，（），（），（）（），（）：，：，（）：任伟忠，李妍，曹玉凤，等不同比例全株玉米青贮、谷草和羊草组合饲粮对干奶前期奶牛体况、瘤胃发酵和血液生化指标的影响 中国兽医学报，（）：，（）：（），：，：李勇两种不同物理形态开食料对羔羊生长和瘤胃发育的影响及其机制研究博士学位论文兰州：甘肃农业大学，：，（），期陈颜旭等：不同万寿菊粕水平对绵羊瘤胃细菌多样性的影响，（），：，（）：，：，：，（），（）：，：，：朱靖，林红，裴明财，等辣椒碱对泌乳前期奶牛产奶性能、血清生化指标、瘤胃微生物及代谢组的影响动物营养学报，（）：，（）：（），（）：李世歌，陈光吉，李小冬，等杂交构树青贮对务川白山羊瘤胃微生物区系的影响中国饲料，（）：，（）：（），（）：，（）：胡晓宇奶牛瘤胃菌群紊乱与乳腺炎的关联性及机制研究博士学位论文长春：吉林大学，：，（）动 物 营 养 学 报 卷，：（责任编辑 陈 鑫），（，；，）：，（），（），（），（）（），（）（）（），（）（），（）（）（），（）（），（），（），（）（）（），（）：；