200∶1库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜的保护作用研究.pdf

200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜的保护作用研究陈梦婷罗秉俊杨芳芳（云南万绿生物股份有限公司，云南玉溪 653100）摘要本文以 50 只 SPF 级 SD 大鼠为试验对象，设置 0.167 g/kg BW 低剂量组、0.333 g/kg BW 中剂量组、1.000 g/kg BW 高剂量组、空白对照组（CK1）、模型对照组（CK2）5 个处理，每个处理 10 只大鼠，其中：低、中、高剂量组分别灌胃 200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉，空白对照组（CK1）和模型对照组（CK2）分别灌胃相同体积的蒸馏水。各处理灌胃体积均为 10 mL/kg BW，每天 1 次，连续灌胃 30 d。之后，除空白对照组（CK1）外，其他处理以无水乙醇作为急性胃黏膜损伤剂给予大鼠。对大鼠进行解剖，比较各处理大鼠胃黏膜损伤积分指数、胃黏膜病理组织学检查病变总积分，研究 200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对无水乙醇引起的大鼠急性胃黏膜损伤能否产生治疗效果。结果表明：200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉 0.167 g/kg BW 低剂量组、0.333 g/kg BW 中剂量组、1.000 g/kg BW高剂量组对大鼠体质量无明显影响；200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉 0.333 g/kg BW 中剂量组大鼠胃黏膜损伤积分指数、胃黏膜病理组织学检查病变总积分显著低于模型对照组（CK2）（P0.05）。可见，200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对于大鼠胃黏膜有着辅助保护功能。关键词大鼠；200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉；胃黏膜；损伤；辅助保护中图分类号R285.5文献标识码A文章编号 1007-5739（2023）18-0189-04DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2023.18.046开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Protective Effect of 200 1 Aloe vera(L.)Burm.f.Gel Freeze-dried Powder on GastricMucosa in RatsCHEN MengtingLUO BingjunYANG Fangfang(Yunnan Evergreen Biological Corporation,Yuxi Yunnan 653100)AbstractTaking 50 SPF grade SD rats as the test objects,this paper set five treatments,which included0.167 g/kg BW low-dose group,0.333 g/kg BW medium dose group,1.000 g/kg BW high-dose group,blank controlgroup(CK1)and model control group(CK2).Ten rats were treated with each treatment.Among the treatments,200 1 Aloevera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder was administered to the low-dose group,medium dose group and high-dosegroup respectively,and the same volume of distilled water was administered to the blank control group(CK1)and modelcontrol group(CK2)respectively.The volume of each treatment was 10 mL/kg BW,once a day,for 30 consecutive days.After that,in addition to the blank control group(CK1),other treatments were given to rats with anhy-drous ethanol asan acute gastric mucosa injury agent.The rats were anatomized，the injury score index and total score of pathologicalchanges in histopathological examination of rats gastric mucosa in each treatment were compared to study whether200:1 Aloe vera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder could produce therapeutic effect on acute gastric mucosa injuryin rats caused by anhydrous ethanol.The results showed that the 200 1 Aloe vera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder0.167 g/kg BW low-dose group,0.333 g/kg BW medium dose group and 1.000 g/kg BW high-dose group had nosignificanteffecton thebodyweightofrats;theinjuryscoreindexandtotalscoreofpathologicalchangesinhistopathologicalexamination of rats gastric mucosa in 200:1 Aloe vera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder 0.333 g/kg BW medium dosegroup were significantly lower than those in the model control group(CK2)(P0.05).It can be seen that 200 1 Aloe vera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder has an auxiliary protective function against gastric mucosa in rats.Keywordsrat;Aloe vera(L.)Burm.f.gel freeze-dried powder;gastric mucosa;injury;auxiliary protection第一作者 陈梦婷（1991），女，硕士，工程师。研究方向：生物资源开发与利用。E-mail：收稿日期 2023-01-09现代农业科技2023 年第 18 期食品科学189现代农业科技2023 年第 18 期食品科学库拉索芦荟（Aloe vera（L.）Burm.f.）是原产于非洲地中海沿岸的多年生多肉旱生植物，其在生长过程中不需要太多的水，适合在任何类型的土壤中生长，其叶片为肥厚多汁的条状，外表皮多为翠绿色。长期以来，库拉索芦荟在民间常被作为愈合伤口的传统药物。库拉索芦荟是一种兼具观赏和实用价值的植物，也是使用时间最长且被研究最多的芦荟品种之一。国外对库拉索芦荟的研究自 20 世纪 60 年代开始持续至今，芦荟产业发展完善，创造了巨大的价值，在食品、化妆品、保健品等领域库拉索芦荟均有广泛运用。库拉索芦荟活性成分的来源分为两部分：一部分是被切开的叶片中流出的黄色至深棕色的液体，主要包括芦荟素、芦荟大黄素、蒽醌等多种活性化合物；另一部分是剥除叶片外表皮后的无色至白色凝胶，含有多糖类、维生素、酶、氨基酸、矿物质等1。在药理保健领域，库拉索芦荟的药理特性在现代医学研究中得到了验证。国内外研究表明，库拉索芦荟在抗炎症、抗病毒、抗肿瘤、促进伤口愈合、修复损伤胃黏膜等方面有着显著的药理作用2，在药物开发方面具有巨大的潜力。Nizam Rabia 等将库拉索芦荟制成药物并用于治疗患者肛裂后发现，该处方不仅有助于减缓疼痛和炎症，还有利于伤口愈合；该药物是一种安全、使用方便、无副作用和并发症的高性价比药物。芦荟具有抗病毒活性，芦荟中的蒽醌类化合物大黄素对人巨细胞病毒、脊髓灰质炎病毒等具有抗病毒作用3。此外，从芦荟中分离出的含有凝集素的凝胶部分可以直接抑制细胞培养中 CMC（巨细胞病毒）的增殖，芦荟中的乙酰甘露聚糖对感染了免疫缺陷病毒（HIV）的猫有抗病毒活性。Pius 等通过综述芦荟抗病毒和细胞毒性的文献，提出将库拉索芦荟作为对抗COVID-19 的替代解决方案，结果表明，芦荟不仅具有抗病毒特性，而且具有抗炎和免疫阻滞特性，芦荟及其主要次生代谢产物可能在 COVID-19 的治疗中发挥重要作用4。研究认为，芦荟中的糖蛋白（凝集素）和多糖具有抗癌功效5，芦荟凝胶具有抗肿瘤活性，可减少肿瘤负荷，缩小肿瘤，延长生存时间。也有研究报道，芦荟抗肿瘤机理为芦荟凝胶诱导谷胱甘肽 s-转移酶，并抑制其促肿瘤作用6。关于芦荟在伤口愈合上的机制有多种观点：芦荟凝胶能增加上皮细胞迁移，加快胶原蛋白的成熟并减少炎症5；芦荟凝胶所含的糖蛋白可以促进细胞增殖7，或通过影响炎症、纤维组织形成以及胶原蛋白的合成，从而使伤口收缩，加速伤口愈合8等。陈 珂等9关于库拉索芦荟冻干粉对家兔皮肤创面愈合影响作用的研究表明，库拉索芦荟冻干粉既能促使创面的新生上皮细胞生成，还可以减轻创面局部出血、水肿以及炎性渗出的情况，有促进家兔创面愈合的作用。根据上述背景条件，本研究以 SPF 级 SD 大鼠为研究对象，对其灌胃一定浓度的库拉索芦荟凝胶冻干粉溶液，然后使用无水乙醇引起大鼠急性胃黏膜损伤，再将大鼠解剖，最后通过对应的胃黏膜损伤积分指数以及胃黏膜病理组织学特征和其总积分，确定库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜损伤能否产生治疗效果。1材料与方法1.1试验材料供试材料为 200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉，由云南万绿生物股份有限公司生产，人体口服剂量 2.0 g/d，成人体质量按 60 kg 计算，折合剂量 0.033 3 g/kg BW。1.2试验动物供试动物为 SPF 级 SD 大鼠，体质量 180220 g，由长沙市天勤生物技术有限公司提供。供试动物的生产许可证编号为 SCXK（湘）2019-0014，使用许可证编号为 SYXK（湘）2020-0011，共计 50 只，要求在屏障环境中饲养，环境温度和湿度分别为 2224、51%54%。1.3试验方法依据 对胃黏膜损伤有辅助保护功能评价方法及 保健食品检验与评价技术规范10，试验设 5 个处理，分别为 0.167 g/kg BW 低剂量组、0.333 g/kg BW 中剂量组、1.000 g/kg BW 高剂量组、空白对照组（CK1）和模型对照组（CK2）。每组 10 只 SPF 级 SD 大鼠。试验时，低、中、高剂量组分别取 200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉 3.34、6.66、20.00 g 加蒸馏水定容至 200 mL，空白对照组和模型对照组则给予相同体积的蒸馏水，然后分别对受试大鼠进行灌胃，灌胃体积为 10 mL/kg BW，每天 1 次，连续 30 d。经过灌胃 30 d 处理后，需对所有大鼠严格禁食，其间也不可给予受试物，持续 24 h，但不禁水，除空白对照组以外，按 1.0 mL/只的量给予受试大鼠无水乙醇，1 h 后处死，暴露大鼠的完整胃，并结扎幽门，灌注 10%甲醛溶液适量，固定 20 min 后沿胃大弯剪开，洗净胃中的内容物，在体视解剖镜或190表 1急性胃黏膜损伤镜下评分标准病变程度充血出血上皮细胞变性坏死1 分1/51/51/52 分1/52/51/52/51/52/53 分2/53/52/53/52/53/54 分3/54/53/54/53/54/55 分上皮全层上皮全层上皮全层注：充血、出血以及上皮细胞变性坏死的权重分别为 1、2、3；病变总积分=充血积分+出血积分2+上皮细胞变性坏死积分3。表 2200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠体质量的影响分组模型对照组（CK2）空白对照组（CK1）低剂量组中剂量组高剂量组初始体质量199.48.1201.17.1200.07.3198.96.8200.66.6中期体质量316.914.2312.014.2311.615.8310.114.1317.115.9末期体质量405.423.9407.025.6401.724.6401.032.3404.128.5增重206.018.9205.921.0201.722.8202.227.3203.525.3单位：g表 3各处理大鼠胃黏膜急性乙醇损伤肉眼观察评分结果处理模型对照组（CK2）空白对照组（CK1）低剂量组中剂量组高剂量组损伤发生率/%1000100100100损伤积分指数35.208.800.000.0028.908.9724.406.96*27.406.35损伤抑制率/%-17.930.722.2注：*表示与模型对照组（CK2）相比差异显著（P2 mm 分别为 2 分；出血带长度 1015 mm 为 3 分；出血带长度15 mm 为 4 分。总积分计算方法如下：总积分=出血点分值+长度分值+宽度分值2。用损伤发生率、损伤积分指数和损伤抑制率表示各处理胃黏膜受损情况，计算方法如下：损伤发生率（%）=某组发生出血或溃疡的大鼠数量/该组大鼠总数100；损伤积分指数=组损伤评分总和/组大鼠数量；损伤抑制率（%）=（模型组损伤积分-试验组损伤积分）/模型组损伤积分100。完成大体检查后，切下每只动物损伤最严重的胃黏膜部位，并将其固定在 10%甲醇溶液中，经过常规制片以及 HE 染色后在镜下观察。胃黏膜的正横切面是选择部位，观察包括黏膜全层区域。按充血、出血、黏膜细胞变性坏死对整个黏膜上皮层的累及程度进行评分，相关标准见表 1。1.4数据处理和结果判定利用方差分析法分析数据，按照方差分析的程序先进行方差齐性检验。方差齐，计算 F 值，F 值0.05）。2.2200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜急性乙醇损伤肉眼观察评分的影响如表 3 所示，各药物处理组大鼠胃黏膜损伤发生率与 CK2相比，没有显著差异（P0.05）；中剂量组大鼠胃黏膜损伤积分指数小于 CK2，两者之间差异显著（P0.05）。2.3200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜急性乙醇损伤病理组织学检查评分的影响从表 4 可以看出：CK2大鼠胃黏膜病理组织学检查病变积分明显高于 CK1，两者差异显著（P0.05）；中剂量组胃黏膜病理组织学检查病变积分明显低于CK2，两者差异显著（P0.05）。陈梦婷等：200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉对大鼠胃黏膜的保护作用研究191现代农业科技2023 年第 18 期食品科学表 4各处理大鼠胃黏膜急性乙醇损伤病理组织学检查评分结果分组模型对照组（CK2）空白对照组（CK1）低剂量组中剂量组高剂量组病变情况/分充血15212911出血180141112上皮细胞变性坏死1001079病变总积分/分812705262病变积分/分8.102.080.200.42*7.001.945.201.69*6.201.993结论与讨论本试验结果表明，200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉0.167 g/kg BW 低剂量组、0.333 g/kg BW 中剂量组、1.000 g/kg BW 高剂量组对大鼠体质量无明显影响；200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉 0.333 g/kg BW 中剂量组大鼠胃黏膜的损伤积分指数、病理组织学检查病变总积分显著低于模型对照组（P0.05）。可见，200 1库拉索芦荟凝胶冻干粉对于大鼠胃黏膜有着辅助保护功能。这为 200 1 库拉索芦荟凝胶冻干粉用于胃黏膜损伤的临床治疗以及相关保健品的开发提供了理论依据。芦荟具有抗炎、抑菌、愈合伤口、抗溃疡、修复胃黏膜的功效。胃黏膜修复机理复杂，关于芦荟修复胃黏膜损伤的机理可能是芦荟多糖能减少攻击因子的产生，促进上皮细胞生长，进而增强胃黏膜清除自由基的能力，达到修复胃黏膜的效果12。除此之外，芦荟多糖可以有效抑制胃酸、胃蛋白酶的分泌产生，在胃黏膜表层附着并形成保护膜，从而起到预防和降低胃酸对胃黏膜刺激的目的13-14。当然，大量自由基会对细胞膜产生一定的损伤，而芦荟中的芦荟素 A 对细胞膜、细胞骨架具有稳定作用，可对抗自由基的作用，从而保护胃黏膜15。库拉索芦荟在食品、化妆品、保健品、日化用品等领域的开发应用广泛，国内外有不少从事库拉索芦荟种植、开发的公司，相关产业经济效益巨大。国内外对芦荟药理作用的应用由来已久16-17。在现代科学验证下，芦荟在临床应用及健康产业上展现出了独特的价值，在全球健康产业的发展中有着巨大的潜力。参考文献1 FREITAS V S，RODRIGUES R A F，GASPI F O G.Pro-priedades farmacolgicas da Aloe vera（L.）burm.FJ.Revi-sta Brasileira De Plantas Medicinais，2014，16（2）：299-307.2 KEIVAN Z，ISUP，MOLOUD A Z，et al.Antiviral activity ofAloe vera against Herpes simplex virus type 2：an in vitrostudyJ.African Journal of Biotechnology，2007，6（15）：1770-1773.3 BARNARD D L，HUFFMAN J H，MORRIS J L B，et al.Eva-luation of the antiviral activity of anthraquinones，anthronesand anthraquinone derivatives against human cytomegalovi-rusJ.Antiviral Research，1992，17（1）：63-77.4 MPIANA P T，NGBOLUA K T N，TSHIBANGU D S T，et al.Aloe vera（L.）burm.F.as a potential anti-COVID-19 plant：a mini-review of its antiviral activityJ.European Journal ofMedicinal Plants，2020：86-93.5 REYNOLDS T，DWECK A C.Aloe vera leaf gel：a reviewupdateJ.Journal of Ethnopharmacology，1999，68（1/2/3）：3-37.6 KIM H S，LEE B M.Inhibition of benzoapyrene-DNA ad-duct formation by Aloe barbadensis millerJ.Carcinogenesis，1997，18（4）：771-776.7 YAGI A，EGUSA T，ARASE M，et al.Isolation and characte-rization of the glycoprotein fraction with a proliferation-promoting activity on human and hamster cells in vitro fromAloe vera gelJ.Planta Medica，1997，63（1）：18-21.8 CHITHRA P，SAJITHLAL G B，CHANDRAKASAN G.In-fluence of Aloe vera on the healing of dermal wounds indiabetic ratsJ.Journal of Ethnopharmacology，1998，59（3）：195-201.9 陈珂，扈正桃，罗秉俊，等.库拉索芦荟冻干粉对家兔皮肤创面的愈合作用J.华西药学杂志，2009，24（3）：272-274.10 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范M.北京：人民卫生出版社，2003.11 胡余明，周月婵，刘上，等.护胃软胶囊对胃黏膜损伤的辅助保护研究J.实用预防医学，2015，22（11）：1382-1384.12 郭成吉，李芹，阚京梅，等.芦荟及运动对大鼠胃组织EGF及自由基代谢的影响J.安徽农业科学，2009，37（32）：15853-15854.13 孙培.芦荟的药理作用研究进展J.湖北中医杂志，2012，34（4）：79-81.（下转第 200 页）192现代农业科技2023 年第 18 期食品科学点。一是做到田间农艺与晾房及配套设施设备融合。应结合田间生产、晾制工艺和技术要求，将田间鲜烟叶采收成熟标准、晾制密度等环节紧密结合，不抢采、不漏采、不过熟采、不穿编密、不装烟密，防止超容量、超负荷运转。二是做到晾制工艺与相关设备的融合。晾制核心是晾房内的温度、相对湿度和通风相互协调，完全满足晾制工艺技术要求。与其他植烟区域不同，元谋县种植烟区高温低湿，蒸发量大，晾制期间相对湿度为 70%左右。为解决湿度问题，应进一步改进和完善新建晾房加湿系统。三是做到晾制专业技术人员与晾制系统全面融合。雪茄烟叶晾制专业技术人员和晾制系统是一个整体，基本上所有晾制工艺的实现都需要通过人工来操作。晾制专业人员要充分了解、熟悉、掌握这些系统的性能，做到运用自如、得心应手；要不断提升综合技术水平，深刻领悟雪茄烟叶四段式晾制工艺调控技术的原理，灵活掌握各晾制阶段要点、技术要求、目标任务及操作流程，科学晾制出好烟。3.2注重细节，抓好落实从管理方面来讲，建议着重做好以下三点。一是强化组织落实，着力稳固雪茄烟叶种植、生产、晾制等全产业链的产业人员队伍，培育一支稳定的、懂技术的专业工人队伍，夯实雪茄烟叶人才队伍基础；二是强化科技措施落实，着力提高雪茄烟叶生产整体水平，科技赋能，助力雪茄烟叶质量再上新台阶；三是强化管理落实，着力提升管理能力和管理水平，以智能化、信息化等技术手段为支撑，促使雪茄烟叶晾制阶段减工降本、提质增效赋能。3.3注重创新，促进发展雪茄烟叶晾制本身就是持续创新的过程，建议着重做好以下三点。一是处理好温度与湿度之间的关系。温度与湿度伴随晾制的全过程，温度从 25 缓慢上升到 40，湿度从 90%缓慢下降到 35%，就是这一升一降完成了雪茄烟叶质量的华丽转变。二是处理好鲜烟叶与晾房容量之间的关系。每座新建晾房计划晾制茄衣 0.57 hm2、茄芯 0.67 hm2。从实际晾制结果看，不论茄衣、茄芯，每 0.53 hm2左右配套 1 座晾房比较适宜。在正常情况下，由于气候条件、栽培管理水平不同，田间鲜烟叶数量可能要比理论数量多10%20%。因此，晾房必须留有余地才能满足晾制质量需求。三是处理好通风与排湿之间的关系。晾制前期（变黄期、变棕期）对雪茄烟叶品质影响最大。随着温度的上升，晾房内的湿度明显增加，要历时 15 d左右。烟叶长时间处于高温、高湿的条件下，会发霉、腐烂变质等。因此，要通过通风和排湿，降低湿度，但是忌掉温太多、排湿太快，精准调控温度和湿度是重中之重。参考文献1 宫长荣.烟草调制学M.北京：中国农业出版社，2003.2 蔡斌，耿召良，高华军，等.国产雪茄原料生产技术研究现状J.中国烟草学报，2019，25（6）：110-119.3 王卫峰.密集烤房烘烤温湿度条件对烟叶生理生化特性及品质的影响D.郑州：河南农业大学，2006.4 王洁.海南茄衣采收成熟度及调制发酵技术研究D.郑州：河南农业大学，2015.5 唐大鹏.鄂西南雪茄烟种植关键技术研究D.北京：中国农业科学院，2014.6 徐世杰，王洁，王慧方，等.调制过程中不同温湿度条件对海南雪茄茄衣烟叶质量的影响J.山东农业科学，2016，48（1）：29-34.7 朱忠，冼可法，杨军.烟叶成熟度与其化学成分的相关性研究进展J.烟草科技，2002，35（8）：33-35.8 蒋东来.海南雪茄茄衣成熟特征与采收时间研究D.郑州：河南农业大学，2021.（上接第 192 页）14 傅继华，温涛，徐琛，等.芦荟多糖对动物实验性胃溃疡的影响J.中草药，2006，37（6）：894-897.15 张昆茹.芦荟对小鼠胃黏膜的保护作用J.西北大学学报（自然科学版），2002，32（6）：699-701.16 朱鸿哲.芦荟多糖对免疫功能影响的实验研究J.中医药信息，2018，35（4）：34-37.17 舒克钢，劳方毅，黄祖权，等.芦荟苷体内外对大鼠骨关节炎模型的炎症抑制效应J.免疫学杂志，2021，37（5）：425-432.200