CD48分子在PD-1_PD-L1通路抑制剂治疗乳腺癌中的作用及机制.pdf

CD48 分子在 PD鄄1/PD鄄L1 通路抑制剂治疗乳腺癌中的作用及机制李思文1,廖摇 佳1,梁计焕1,邓子华2,沈三弟2摇(1郾 广州医科大学附属第六医院胸外科,广东摇 清远摇 511515;2郾 广州医科大学附属第六医院甲状腺乳腺外科,广东摇 清远摇 511515)关键词摇 CD48;免疫检查点抑制剂;乳腺癌;免疫治疗;生物标志物基金项目:清远市科技计划项目项目编号:210708114561360通讯作者:沈三弟摇 摇 乳腺癌是一种具有高度同质性的多基因型肿瘤,在全球范围内的发病率特别高。乳腺癌是中国妇女中发病率最高的一种恶性肿瘤,其死亡原因排名第 6,发病年龄较其他癌种小1鄄3,目前乳腺癌的治疗主要有放射治疗、化疗、靶向治疗、内分泌治疗等。因为不同的乳腺癌患者存在着巨大的个体差异,并且针对特定的亚型乳腺癌,例如预后较差的三阴乳腺癌,所以寻求新的治疗目标是非常有必要的4鄄5。免疫逃避是一种典型的肿瘤生物特性,在癌症的免疫疗法方面科研上有了新的突破,目前已成功研制出抗肿瘤免疫因子的药物并进行了临床实验。Pd鄄1/Pd鄄l1 是一对参与 T 淋巴细胞激活、增殖的免疫因子,目前 pd鄄1/pd鄄l1 的信号转导途径是一种新型的免疫靶向疗法。在各种恶性肿瘤中,包括NSCLC 已经有了很大的进步,美国 FDA 批准了彭布罗珠单抗(PD鄄1)和尼沃单抗(MK鄄3475)和 BMS鄄936558(BMS鄄936558)。近年来由于免疫治疗在多种癌症的深入研究,乳腺癌的治疗有了新的发展趋势6鄄8,通过对pd鄄1/pd鄄l1 的局部免疫疗法进行临床研究,证明其对晚期或转移的肿瘤有较好的治疗效果,为肿瘤的免疫治疗奠定了基础。1摇 CD48 及其受体的分子生物学特性CD48 又叫 BLAST鄄1、SLAMF2,最早在人淋巴细胞的表面被发现,它是一种分子量 40 45 kD 的淋巴细胞激活相关的糖蛋白,属于免疫球蛋白受体超家族。cd2、cd58、cd244(2b4)、ly9、slam 等均为 cd2家族,它们都涉及先天及适应性免疫。Blast 1 基因主要在免疫细胞中表达,例如 B 细胞,有些肿瘤细胞也有表达。blast 1 与其配基 cd244、cd2 相互作用,使 blast 1 表达的信号在机体的免疫反应及免疫调控中发挥着重要作用9鄄10。有专家制出一种能够鉴定 EB 病毒转染 B 淋巴细胞的单克隆抗体,并鉴定出分子量大约 45 000 Da 的 BLAST鄄1 抗原。随后,他们发现 BLAST鄄1 在 B 淋巴细胞、慢性淋巴细胞和淋巴细胞低下的细胞表面上都有表达。CD48 在 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、树突细胞、单核细胞、中性粒细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞中有表达,CD48 在血管内皮细胞的表面也有表达,在很多细胞中病毒、细菌和细胞因子都能调控 CD48 的表达。例如,EBV 感染能调控 B 细胞 CD48 基因的表达,而细菌感染则能调控 CD44 在肥大细胞中的表达,G鄄CSF、IL鄄4 能调控 B、中性白细胞 CD48 的表达,IL鄄3 对嗜酸粒细胞 CD48 的表达有一定的影响,CD48 在 Burkitt Daudi 等多种细胞系中也有表达。福岛等报告称,肿瘤细胞能降低 CD48 膜分子,并能通过改变 GPI 锚定蛋白,增加 CD48 的溶解11。近年来,CD48 基因广泛地表达于免疫细胞,而非静态造血干细胞。但由于环境因素的影响,体外培养的造血干细胞具有一定的生物活性。2摇 CD48 的生物学功能2郾 1摇 CD48 与 T 细胞:Muhammad 等发现 CD48 参与T 细胞活化的早期 TCR/CD3 信号的形成,并且在CD2 信号分子的招募和活化下游信号分子、T 细胞活化前期的生成、T 细胞活化过程中起着重要的作用,CD48/CD244 在 T 淋巴细胞的激活和作用的发生中起到了双重作用。发现慢性感染患者外周血及肝内 CD244 的含量较急性患者高,而慢性感染患者CD8+T 细胞则表现为 CD8+T 淋巴细胞;CD244 在EBV 感染患者中也有很高的表达,但是在流感患者中 CD244 的表达却很低。CD8+T 淋巴细胞在慢性HBV 感染时有较高的 CD244、pd鄄1 基因,CD244 是其主要的调节因子12。通过调节 CD107a、ifn酌、tnf鄄琢 等基因的表达,能有效地抑制 CD244 信号,并能阻断 CD48 配体,从而提高 CD8+T 的增殖及细胞毒1232吉林医学 2023 年 8 月第 44 卷第 8 期作用,CD48/CD244 是一种新的靶标,它不依赖于PD鄄1 通路。2郾 2摇 CD48 与干细胞:CD48 基因表达于多种造血细胞表面,并与 CD244 分子发生反应。Boles 等发现CD48 可以影响 CD244+的造血干细胞,从而影响到血液中的微环境,特别是 IFN、伽马等。CD48 缺乏引起细胞因子平衡13,使细胞周期内的细胞因子发生失调,细胞周期内的细胞数量失调,细胞周期内的细胞数量不平衡,PAK1/S鄄蛋白激酶的活力也随之增加,这就造成了与人类 X 连锁淋巴增殖症相似的恶性血液病。CD48 在调控造血干细胞、原代细胞和原代细胞的数目,并能有效地抑制肿瘤的形成。2郾 3摇 CD48/CD244 信号与疾病:CD48 在免疫细胞发育、免疫反应、免疫调控中起着举足轻重的作用,在肿瘤免疫、自身免疫等方面具有十分重要的地位,CD48 和它的信号转导途径在肿瘤及自身免疫中起着重要作用。Boles 和其他成员、Watzl 等人发现,CD244 在不同的糖基化位点上的糖基化会对 NK 细胞 CD244 的表达产生重要的影响。在老鼠心脏移植模型中,Qin 等发现单用抗 CD2 或 CD48 中和单抗可以延长移植的存活率,而与 CD3 或 CD48 单克隆抗体结合后 T 细胞的激活会受到抑制,生成辅助和细胞毒 T 细胞,延长了移植的存活率。3摇 PD鄄1/PD鄄L1 的信号通路T 细胞参与了抗肿瘤的免疫反应。T 淋巴细胞的激活是由抗原肽 mhc 复合体和 T 细胞受体两种信号组成,CD28、B7 等共刺激分子为 T 淋巴细胞活化提供了第二个信号,在两种信号作用下 T 细胞表面 CD28 分子活化了下游磷酸肌醇 3 激酶(PI3K)和蛋白激酶 B(AKT)。活化 PI3K/AKT 途径能提高细胞内的血糖水平,使 T 细胞分裂,并产生细胞因子如 IL鄄2、Bcl鄄XL,从而促进 T 细胞活化、增殖及作用14。PD1/PD鄄L1 为 CD28/B7,其在细胞外区的IGV 类区域存在四个糖基化位,其糖基化程度较高。这一结构与 PD鄄L1 分子的胞外型 IGV 型结构结合,在 ITSM 区域 PD鄄1 胞质区内的酪氨酸酶(tyr)被磷酸化,磷酸化 Tyr 能使 PI3K/AKT 途径受阻,从而使T 细胞的增殖受到抑制。通过细胞因子的分化及分泌,可诱导 T 淋巴细胞凋亡,使 CD4+T 细胞向foxp3+调控 T 细胞(Treg)的转化,从而抑制 CD8+T细胞的激活,从而抵抗 CD28/B7。在静止 T 细胞中,PD鄄1 的低表达及 TCR 的激活可使 T 细胞核因子(nfat)的转录和 nfatc1 与 PD鄄1的启动子结合,激活 T 细胞产生 IFN鄄酌,促进 dc 细胞 PD鄄L1 的表达。结果显示:PD鄄1 基因主要在CD8+T 细胞的表面表达,而 PD鄄L1 则主要在肿瘤细胞的表面表达;PD鄄1、PD鄄L1 对 T 淋巴细胞的激活有明显的抑制作用,使 G0/G1 期的 T 淋巴细胞被阻断,使 T 细胞的增殖受到抑制,使 T 细胞失能、甚至凋亡,对肿瘤的免疫功能起到了消极的调控作用15鄄16。结果显示 PD鄄L1 在癌细胞中的表达水平较高,如黑色素瘤、NSCLC、结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌等。PD鄄1/PD鄄L1 抑制剂也已用于多种肿瘤的临床研究,多种 PD鄄1/PD鄄L1 抑制剂单抗已经顺利上市,在治疗黑色素瘤和 NSCLC 上取得了重大进展,随着免疫治疗的深入研究,相信在不久的将来,也会成为乳腺癌治疗及改善预后的重要治疗选择。4摇 参考文献1摇 Zhang TZ,Fang Q,Liu P,et al郾 Heme oxygenase 1 overex鄄pression induces immune evasion of acute myeloid leukemia a鄄gainst natural killer cells by inhibiting CD48 J.J TranslatMed,2022,20(1):1399鄄1405郾2摇 罗燕芬,庄奇真,张摇 轩,等 郾 3鄄O鄄C_(12)鄄HSL 通过抑制 lncRNA CD48鄄AS 和 CD48 的表达而阻碍 Mo鄄DCs 成熟J.天津医药,2021,49(12):1233鄄1239郾3摇 汤摇 青,孙立柱,张摇翔,等 郾 三阴性乳腺癌细胞通过PD鄄1/PD鄄L1 信号通路抑制共培养 T 细胞活化、增殖及促进其凋亡J.徐州医科大学学报,2021,41(11):781鄄786郾4 摇ZiblatAndrea,IraolagoitiaXN,NuezSolRN,etal郾 Circulating and tumor鄄infiltrating nk cells from clear cell renalcell carcinoma patients exhibit a predominantly inhibitory pheno鄄type characterized by overexpression of CD85j,CD45,CD48 andPD鄄1
J.Front Immunol,2021,12:1308鄄1315郾5摇苗天培,张震宇,李摇中 郾 三阴性乳腺癌患者 PD鄄1/PD鄄L1 通路表达改变及临床意义J.湖南师范大学学报(医学版),2020,17(3):176鄄178郾6摇 张凤春,张硕渊,陈天恩,等 郾 PD鄄1/PD鄄L1 通路在三阴性乳腺癌预后预测及治疗中的意义J.上海交通大学学报(医学版),2020,40(1):128鄄133郾7摇 Nowlan Bianca,Williams Elizabeth D,Doran Michael R,et al郾 CD27,CD201,FLT3,CD48,and CD150 cell surface stai鄄ning identifies long鄄term mouse hematopoietic stem cells in im鄄munodeficient non鄄obese diabetic severe combined immune defi鄄cient鄄derived strainsJ.Haematologica,2020,105(1):20鄄25郾8摇 Kelsey V,Lott NM,Bauman LC,et al郾 FOXP3,CD48 andautophagy confer the protection of CD4 and CD8 human T cellsfrom T cell receptor restimulation鄄induced cell deathJ.J Im鄄munol,2019,202(1):102鄄111郾9摇 张明辉,王摇燕,张清媛 郾 免疫检查点 PD1/PD鄄L1 通路在乳腺癌中的作用J.中华医学杂志,2017,97(8):635鄄638郾2232吉林医学 2023 年 8 月第 44 卷第 8 期10摇 张郧樊,杨建新 郾 PD鄄1/PD鄄L1 信号通路及其在乳腺癌治疗中的研究进展J.中国医学创新,2017,14(2):145鄄148郾11摇 覃摇 天,邱梅婷,龚智峰 郾 CD48 CD244 介导免疫细胞亚群在乳腺浸润性导管癌不同临床病理因素中的关系J.中国实用内科杂志,2015,35(S1):176鄄177郾12摇 张丽娟,车玉香,高摇伟,等 郾 高碳酸因素对大鼠活化 T 淋巴细胞 CD28/B7 和 CD2/CD48(LFA鄄3)信号转导通路的影响J.哈尔滨医科大学学报,2014,48(6):460鄄463郾13摇 杨摇 鑫,张摇宇,彭路芸,等 郾 CD48 表达可作为区分造血干细胞分裂方式的活性标志J.中国实验血液学杂志,2014,22(3):573鄄579郾14摇 Cui W,Luo Q,Sun SL,et al郾 Efficacy and safety of PD鄄1/PD鄄L1 inhibitors plus chemotherapy for triple鄄negative breastcancer:a systematic review and meta鄄analysis J.Res ProgMed,2022,113(12):郾15摇 Peng C,Li Danni,Zheng Li,et al郾 Chloroquine treatmentinfluences immunological memory through the PD鄄1/PD鄄L1 path鄄way during the initiation of Plasmodium chabaudi infectionJ.International Immunopharmacology,2022,113(PA)郾16摇 Ma Xiaolu,Ding Yongfeng,Qian Jiong,et al郾 NomogramBased on Monocyte鄄to鄄Lymphocyte Ratio to Predict Survival ofUnresectable Esophageal Squamous Cell Carcinoma Who ReceiveFirst鄄Line PD鄄1/PD鄄L1 Inhibitors Combined with ChemotherapyJ.Current oncology(Toronto,Ont郾),2022,29(11).收稿日期:2022鄄12鄄29摇 编校:徐摇 强牙菌斑检测技术及其应用丁博文,段小红,张燕丽摇(军事口腔医学国家重点实验室摇 国家口腔疾病临床医学研究中心摇陕西省口腔医学重点实验室摇 第四军医大学口腔医院口腔生物学教研室,陕西摇 西安摇 710032)关键词摇 牙菌斑;pH 检测;方法;应用基金项目:国家自然科学基金青年项目项目编号:82100958;陕西省自然基金面上项目项目编号:2021JM鄄236通讯作者:张燕丽摇 摇 牙菌斑是牢固黏附于牙面或硬的口腔结构表面的细菌性生物膜,不易被中度水喷冲去,是导致龋病与牙周病的关键因素1,牙菌斑的检测与监测具有重要的临床意义。随着分子生物学和电子显微镜技术等的发展,人们对于牙菌斑的结构与特征有了更深的了解。本文就牙菌斑的传统检测技术、荧光成像技术、pH 检测技术、分子生物学检测技术及其应用作一综述。1摇 牙菌斑的传统检测技术1郾 1摇 菌斑显示剂法:菌斑显示剂通过色素吸附原理使牙菌斑鲜明可见,在视觉上辅助人们定性、定量地判断牙菌斑积累情况。目前牙菌斑显示剂的主要成份有碘、四碘荧光素钠、结晶紫等2,剂型包括片剂、液剂、凝胶剂、牙膏剂、气雾剂等3。此法简单、方便、直观,是最适合民众推广普及的检测方法。1郾 2摇 牙菌斑指数(PLI):该技术是 Silness 和 Loe 于1964 年提出,是依据牙面菌斑厚度评估牙菌斑的指标,用于展示牙菌斑的严重程度,间接评估口腔卫生情况及判断口腔疾病防治效果。目前多采用改良Q鄄H(Quigley鄄Hein)菌斑指数评估法,即牙菌斑计分之和与被检查的牙齿数量的比值:龈缘区无菌斑评估为0 分,龈缘区有少量点状菌斑评估为1 分,牙颈部的菌斑宽度不超过 1 mm 评估为2 分,1 mm菌斑覆盖牙面2/3 评估为 5 分4。将牙菌斑染色与面积、厚度等参数相结合,综合确定牙菌斑指数的等级是目前临床最常用的检测方法。1郾 3摇 菌斑细菌培养法:口腔微生物的种类有上万种,目前可从牙菌斑中分离培养出 700 余种不同的细菌,还有更多菌种在目前条件下尚无法获得纯培养5。菌斑细菌培养法是一种使用选择性培养基使特定细菌增殖的方法,是微生物研究的传统方法。该方法更适用于培养条件要求相对较低的口腔致病菌的检测与鉴定如变异链球菌、具梭核杆菌等。使用选择性培养基鉴定牙菌斑中常见微生物,但不能鉴定未获培养微生物,培养出来的细菌多用于鉴定、科学研究与口腔疾病临床评估。2摇 牙菌斑的荧光成像技术摇 摇 随着光学探测领域的发展,牙菌斑光学检测技术包括数字成像光纤光学透视检测6、光学相干层析成像技术7、扫描仪三维成像技术8、荧光成像技术等,其在临床数据的永久保存方面有着出色的优势。2郾 1摇 菌斑自体荧光成像技术:该技术是基于牙菌斑3232吉林医学 2023 年 8 月第 44 卷第 8 期