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2015 Waters Corporation1食品种类鉴别以及品牌保护Waters China黄春2015-11-05 BJ2015 Waters Corporation2第一部分:肉、鱼等种类的鉴定2015 Waters Corporation3REIMS Technology Overview(Rapid Evaporative Ionisation Mass Spectrometry)快速蒸快速蒸发离子化离子化质谱技技术介介绍2015 Waters Corporation4+-+-+-Gas phaseions-+快速蒸发离子化质谱技术原理iknife快速快速电击过程程-在组织表面快速形成气态离子去聚集去聚集Declustering高热的电击表面上进行2015 Waters Corporation5+-+-BurgerElectrosurgical generator(电机)Venturi air jet pump气体喷射器-Atmospheric interface 大气压态交互面Monopolar knife电极刀REIMS 在做肉的种类鉴定时的示意图Schematic for meat speciation2015 Waters Corporation6技术要点-1Rapid Evaporative Ionisation Mass Spectrometry(REIMS)Electrosurgical generator&monopolar knife(iknife)or dipolar forceps电机、电极刀、双极镊子 Aerosol“smoke”generated during the diathermic process is directly sampled直接取样,电击过程中产生的“烟雾”喷出 Ionisation process involves diathermy process a heated(900oC)coiled collisionsurface(mechanism not fully understood)离子化过程包括萦绕在接触面上的高热电击(具体机理,不清楚)“Soft ionisation”process allowing access to molecular ion&rich spectralfingerprints“软电离”可以得到母离子信息和丰富的子离子指纹谱图 Particularlyamenablefortheionisationoflipidspecies;phospholipids;phosphosphingolipids;glycerophospholipids;fatty acids特别适合分析高脂质样品种类鉴定:磷脂、甘油磷脂、脂肪酸等2015 Waters Corporation7技术要点-2 Applicable for conductive samples(aq content required)适用于:可电导的样品 Negative&positive ionisation mode正负离子模式都有 Region of interest:300 900 m/z fatty acids phospholipids可测试的质菏比范围:300 900 m/z 脂肪酸磷脂 No sample preparation不需要样品前处理 Rapid sample introduction(seconds)快速进样 Near real time sample characterisation实时可见样品检测结果2015 Waters Corporation8数据采集方面要求2015 Waters Corporation9数据处理方面的要求 数学模型的建立 大数据时代数据处理的瓶颈 越来越多的数据量-挑战软件的数据处理能力 大量的数据”零“点-质疑数据的真实性 海量的生物标记物-挑战软件的鉴定能力 一体化软件的需求-数据处理,统计分析,多组学通路检索 代谢组学普及的需要-挑战软件的易用性使用默认/设好方法,自动完成2015 Waters Corporation10Ion Mobility 优势 定性更准确 Retention Time 会随基质的不同,而改变,Drift time不会 谱图更干净 CCS值的应用,可是痕量化合物的筛查,更准确 能够寻找出更有代表性的MarkAB AB 2015 Waters Corporation11应用实例:3 种动物的肝脏鉴定结合350-1000 m/z 范围内的质谱图PigLambOxPhospholipid region 600-900 m/zPhosphatidic acidsPEsPCs PIs 2015 Waters Corporation12应用实例:3 种白海鱼种类的鉴定结合合350-1000 m/z 范范围内的内的质谱图Leu Enkephalin实时质量校正Coley绿青青鳕Cod鳕鱼Sea Bass2015 Waters Corporation13应用实例:3 种白种海鱼种类的鉴定结合合100-1200 m/z范范围内的内的质谱图2015 Waters Corporation14食品鉴定和打假与女王大学和帝国学院合作肉的种类和肉的质量鱼种类包括英国渔业(species substitution&mis-description of catch method)畜牧业方法(有机的 vs 非常规的)食品打假(贵重商品e.g.牛奶、可可、蜂蜜)2015 Waters Corporation15技术层面的其它考虑 取样&分析 电子刀或双电极镊子 整块组织;处理过的组织&液体样品 冷冻、融化循环 取样原则遵循“代表性样品”精确质量数的采集 库的建立:不同种类肌肉(鱼肉)的特异marker 解析 食品脂质:脂肪酸、三酰甘油、磷脂、鞘磷脂、鞘脂类等.其它类种的markers?真实样品验证 软件:markers(Progenesis QI)ISD 软件分类体系(目前,只可最多分6类)oSW 目前包括3个阶段的数据采集 建立模块 样品分类o涉及的数据文件模式(text,images)食品加工过程对于marker解析的影响 冷冻(freeze/thaw cycle);烹饪(boiling;frying;roasting;grilling etc.);样品搅碎(disruption of the cell membrane)等对于marker完整性的影响2015 Waters Corporation16印度大米的真假鉴定Basmati RiceBasmati Rice2015 Waters Corporation17近年来,印度商人在一些主要市场,像美国,加拿大和欧洲,用低质的CSR 30冒充世界最好的香米Basmati.大米出口商在欧盟享受着Basmati免税优惠,thousands of consumers get duped both in the domestic and export markets,and the stock of traditional grain gets depleted 废弃的on Indian farms.Basmati Rice Economic AdulterationIn Britain,the Food Standards Agency found in 2005 that about half of all basmati rice sold was adulterated with other strains of long-grain rice,prompting rice importers to sign up to a code of practice.8A 2010 U.K.test on rice supplied by wholesalers found four out of 15 samples had cheaper rice mixed with basmati,and one had no basmati at all2015 Waters Corporation18分析流程3 个平行样品2015 Waters Corporation19大气压离子源(APGC)气相色谱/质谱技术2015 Waters Corporation20Waters“组学”研究平台以及Progenesis QI 信息处理软件蛋白蛋白组学学代代谢组学学脂脂质组学学真假真假鉴定定植物植物/食品食品解析解析植物代植物代谢组学学2015 Waters Corporation21初始结果:真假鉴别Basmati?Jasmine?Long Grain?2015 Waters Corporation22查找标记物:MarkerCommon MarkersMarkers prominent in Long GrainMarker ImportanceMarker ConfidenceMarkers prominent in Basmati2015 Waters Corporation23结构鉴定Elucidation by:Elemental Composition Integrated Chemspider Search Fragment Match2015 Waters Corporation24HDMSE 带离子淌度的MSE分离Low EnergyHigh Energy2015 Waters Corporation25让我们来实际看一下:谢谢!
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