中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病防治方法综述_邓萍.pdf

JOURNAL OF BEE（Monthly）蜜蜂杂志(月刊)2023 年 第 2 期综述中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病防治方法综述邓 萍，唐相友（重庆师范大学生命科学学院，重庆4 0 1 3 3 1）摘 要：欧洲幼虫腐臭病，简称欧幼病，是蜜蜂常见的细菌性传染病，其传染性极强、发病速度快，易导致蜂群的大规模衰弱，严重的会导致蜂业破产，对蜂农造成极大损失。总结了欧幼病的诱发因素、发病规律、表征及防治方法等，以期为中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病为主的细菌病的防治提供一定的理论基础，为中蜂养殖业的蓬勃发展提供一定的参考价值。关键词：中华蜜蜂；欧洲幼虫腐臭病；防治中图分类号：S895文献标识码：A文章编号：1003-9139（2023）02-0001-06Summary of the Control Methods ofChinese bee European FoulbroodDENG Ping,TANG Xiang-you(Chongqing Normal University,Chongqing 401331,China)Abstract:European Foulbrood is a commondisease of honeybees.Its highly contagious,it developsquickly,which is easy to lead to the large-scaleweakening of bee colonies,and serious bee industrybankruptcy,causing great losses to bee farmers.In thispaper,the induced factors,pathogenesis,characterizationand prevention methods of European Foulbrood weresummarized,in order to provide a theoretical basis forthe prevention and control of the bacterial diseasesmainly caused by larval rot ofApis cerana cerana,and toprovide a reference value for the vigorous developmentof the Chinese apiary culture industry.Key words:Apis cerana cerana;EuropeanFoulbrood;prevention and treatment蜜蜂是膜翅目昆虫，是研究社会性生活的首选模式生物。它同时也作为极少数可人工驯养的传粉媒介，在农业上通过为大多数的虫媒植物传粉，为人类生活创造了巨大的经济价值和生态价值1。蜜蜂是膜翅目（H y m e n o p t e r a）蜜蜂科（A p i d a e）蜜蜂属（A p i s）昆虫。众所周知，蜜蜂属下有 9个种，分别是大蜜蜂（A p i s d o r s a t a）、小蜜蜂（A p i s f l o r e a）、黑大蜜蜂（A p i sl a b o r i o s a）、黑 小 蜜 蜂（A p i sa n d r e n i f o r m i s）、西方蜜蜂（A p i s m e l l i f e r a）和东 方 蜜 蜂（A p i sc e r a n a）、沙 巴 蜂（A p i sk o s c h e v n i k o v i）、绿努蜂（A p i s n u l u e n s i s）、印尼蜂（A p i s n i g r o c i n c t a）。中华蜜蜂（A p i s c e r a n a c e r a n a）主要指分布在中国的东方蜜蜂，具有悠久的历史，是我国独特的一种蜜蜂资源，以下简称中蜂。它具有行动敏捷、抗旱、耐寒、采集零散蜜源等优良特性2,3。已于 2 0 0 6 年被收录到 国家级畜禽遗传资源保护名录 中4，研究者和蜜蜂养殖者日益重视中蜂的种质资源保护和利用，蜂群整体形势也向着积极的方向发展。但是，以中蜂欧洲幼虫腐臭病为主的细菌病危害仍影响着中蜂养殖业的发展。欧 洲 幼 虫 腐 臭 病（E u r o p e a nF o u l b r o o d,E F B），简称欧幼病，是一种生物因子传染病，是由蜂房蜜蜂球菌（M e l i s s o c o c c u s p l u t o n）为主要致病菌诱发的，其传染性极强、发病速度快5-8。2 0 世纪 5 0 年代初，最先在广东省被发现，此后，欧幼病逐渐成为阻碍中蜂生存和发展的非常重要的细菌性传染病。欧幼病能够在收稿日期：2022-04-01；修回日期：2023-01-05基金项目：现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-44)，重庆市蜂产业技术体系专项(No.202212)作者简介：邓 萍(1997-),女，在读研究生，主要从事养蜂学研究。E-mail:通讯作者：唐相友(1995-),男，助理研究员，主要从事蜜蜂资源与遗传育种研究。E-mail:1蜜蜂杂志(月刊)JOURNAL OF BEE（Monthly）NO.22023Feb.全国各地快速侵袭的重要原因是它的传染性强、传播速度快，已经严重阻碍了我国中蜂养殖业的蓬勃发展。欧幼病主要发生在春繁时期，秋季可能会复发，该病主要感染蜂王、工蜂和雄蜂幼虫，几乎不会感染成虫 9-1 1。1 2 日龄的幼虫最容易被 E F B感染，在体内潜伏 2 3d后爆发，导致 3 4 日龄幼虫大量死亡、腐烂。患病蜂群中的蜂蜜、花粉、巢脾都可能是潜在的传播源，诸如内勤蜂通过饲喂和卫生行为将病菌带给健康幼虫；蜂王将卵产在被污染的巢脾上会导致孵化的幼虫染病死亡；蜜蜂也可通过起盗、迷巢行为将病菌传播到其他蜂群等。长此以往，导致巢脾幼虫死亡，成蜂不上脾甚至飞逃，造成蜂群崩溃，给中蜂养殖业造成巨大损失。鉴于欧幼病的巨大的危害性，本文总结了欧幼病的诱发因素、发病规律、表征及防治方法等，以期为中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病为主的细菌病的科学防治提供一定的理论基础，为中蜂养殖业的蓬勃发展提供一些参考。1 欧幼病诱发因素、发病规律与表征1.1 诱发因素欧幼病的诱发因素主要是病菌感染诱发，主要是由一些革兰氏阳性菌综合作用诱发的，诸如蜂房蜜蜂球菌（M e l i s s o c o c c u s p l u t o n）、粪肠球菌（E n t e r o c o c c u s f a e c a l i s）、蜂房芽孢杆菌（B a c d l l u s a i a e i）等7。蜂房蜜蜂球菌是最主要的致病菌，其他病菌通常是起到辅助作用，加速病程，使被感染幼虫快速死亡6,1 1。欧幼病的初期临床症状不明显，这也就使得人们难以在第一时间根据临床症状诊断出蜜蜂患有欧幼病，要想对蜜蜂进行确诊还必须要结合实验室诊断才行。并且其主要致病菌蜂房蜜蜂球菌（M e l i s s o c o c c u s p l u t o n），培养条件苛刻，生存能力极强，在体外可以保持很长的活性，在幼虫尸体、花粉、蜂蜜及巢脾中能存活数年之久。正因为欧幼病及其致病菌具有这些特性，也就导致欧幼病逐渐发展成了传播速度快、传染性高、诱发因素多的蜜蜂细菌性传染病。1.2 发病规律欧幼病的发生与气候、蜜源、蜂王、饲料、养蜂用具等都有关系5,1 0。春季群势较弱且气温较低，容易导致蜂群清理能力不足，病菌活性较高，导致欧幼病广泛流行且病情较重；夏季温度高且群势较强，则欧幼病少发或平息；秋季温度低但群势较强，则欧幼病虽流行但病情较轻1 2。当蜜粉源缺乏时，幼虫缺乏营养，蜂农添加被污染的蜂蜜和花粉去哺育幼虫，这极有可能诱导欧幼病发生，这也是诱导欧幼病发生的主要原因之一1 3。当蜜粉源充足、蜜蜂大量繁殖时，蜂农对蜂群进行更换巢脾操作时，若使用被污染的、未经消毒的巢脾，也极有可能诱导欧幼病发生。除此之外，蜂王产卵率下降，抗病能力减弱以及使用未消毒的养蜂用具，也是诱发欧幼病的重要原因1 4-1 6。1.3 表征感染欧幼病的通常是蜂王和 1 2日龄幼虫，初期几乎没有任何症状，具有 2 3 d 的潜伏期，3 4 日龄时发现死亡幼虫。死亡幼虫通常盘曲在巢房中，呈“C”字形，体色呈乳白或灰白、黄白色，失去光泽，几天后，转为黄褐色，呈溶解性腐败，有酸臭味1 7。发病初期死亡幼虫多呈不规则的散点状分布，会形成“插花子脾”的现象，但病情严重后，死亡幼虫呈片状分布，成蜂不上脾、飞逃，造成见子不见蜂，群势下降或蜂群损失的情况1 8。感染欧幼病的幼虫，在没有 3 4 日龄就会死亡，不会封盖，工蜂清理时无需咬盖，不会留下细小穿 孔 痕 迹1 9。这 与 由 中 蜂 囊 状 幼 虫 病 毒（C h i n e s e,C S B V）引起的中蜂囊状幼虫病（C h i n e s e,C S B D）具有明显的区别。感染中囊病的幼虫通常在封盖后化蛹前死亡，体色由白色变成黄色，再转为黑褐色，工蜂清理时需要咬盖，会留下细小穿孔2 0。2 常规防治2.1 蜂场位置选择与蜂场管理防治欧幼病，首先蜂场位置选择非常重要。最好选择在环境良好、蜜源充足的地方，并且尽可能地远离污染源，特别是化工厂、造纸厂、牲畜养殖场等，可以有效降低病害对蜜蜂的侵袭2 1。对蜂场进行科学化管理在欧幼病2JOURNAL OF BEE（Monthly）蜜蜂杂志(月刊)2023 年 第 2 期的防治中发挥重要作用。需要定期清扫蜂场及场内的用具设施，并采用新洁尔灭、甲醛、次氯酸水、硫磺熏蒸等手段进行消毒9,2 2。根据欧幼病的流行规律，在病菌爆发前期，对蜂场及场内的所有用具、设施进行一次彻底的消毒处理，之后定期打扫1 2。对于蜂饲料、箱内保湿物等，采用曝晒、灼烧、煮沸和紫外线等方式进行消毒2 3。当发现有欧幼病轻微感染蜂群时，可以通过将弱群合并成强群9 或将病群蜂赶入新蜂箱的方式2 4 进行治疗。对于感染严重的蜂群，需要尽快通过诸如焚烧、化蜡等方式，对病群、病脾做无害化处理2 5,2 6，并对蜂场的一切养蜂相关设施进行彻底地消毒，以防止病情的继续蔓延，降低损失。2.2 加强饲养管理蜜蜂是社会性昆虫，可以通过个体免疫和群体免疫 2 种方式来抵御病害2 7。在冬季，蜜蜂会尽量减少生理活动，聚集成团保持箱内温度，以度过越冬期2 8。蜂群群势减弱，会在很大程度上降低其群体免疫、抵御病害的能力2 9。饲养强群，加强饲养管理是必不可少手段。在冬季，蜂群保护时期，蜂场管理者要注意适当保温加强蜂群保护，可以采用在箱内隔板之间填充干稻草、旧棉絮等保温物质，以及在箱外包裹棉被，将蜂箱移入室内等保温措施3 0；另外，还要做到尽量箱外观察不开箱。在夏季，酷暑炎热时期，应当采用一些降温手段，如搭棚遮阴等1 0，以保证箱内温度平衡。饲粮也是保证蜂群正常生活的重要保障3 1，尤其是春繁、秋繁及越冬期。王永智3 2 发现在春繁期将弱群合并为强群，保持蜂多于脾，补充蛋白质类饲粮可以有效平息欧幼病，提高蜂群的免疫力，但无法根除蜂房蜜蜂球菌。除此之外，为了充分利用蜜粉源，培养强群还可以采用小转地的方法3 3。2.3 适时换王与抗病蜂王选育抗病选育在鲤（C y p r i n u s c a r p i o）3 4、鸡（G a l l u sg a l l u sd o m e s t i c u s）3 5、三 疣 梭 子 蟹（P o r t u n u s t r i t u b e r c u l a t u s）3 6、小麦（T r i t i c u ma e s t i v u m）3 7 等动植物中均有广泛应用。王丽君等3 8 认为选育抗病蜂王也是提高蜂群对欧幼病抗性的重要手段。针对患病蜂群，应及时更换产卵力强的蜂王或囚禁蜂王，给内勤蜂足够的时间清理腐虫、打扫巢房，增强蜂群对欧幼病的抵抗能力9,3 9。另外，蜂王作为欧幼病的感染对象之一，适时更换蜂王也是预防欧幼病，减少其传播范围的重要手段。3 药物防治3.1 中药防治很多植物都具有极高的药用价值，这些中草药经过特殊的配合，可以非常有效地用于治疗疾病。目前，已有一些学者和蜂场管理者开始采用中草药配方治疗欧幼病。邓位喜等4 0 配制“消腐汤”，黄连 1 8 g、黄芩 1 5 g、黄檗 1 5 g、穿心莲 1 5 g、鸭跖草 1 2 g、如意花根 1 5 g 等，煎煮浓缩至 5 0 0 m L，加白糖配制呈 6 0%6 5%含糖量药液。刘正忠 4 0 报道穿心莲、蒲公英每群蜂各 5g，金银花 3g，甘草 1g，水煎2 0m i n三次，溶解成 5 0%糖液，3d喂一次。周婷等4 1 以黄连、黄芩、金银花、菊花、板蓝根、枝子、马齿苋、蒲公英等熬制中草药，可以抑制蜂房蜜蜂球菌的生长。陈强等4 2 报道有 2 个中草药配方可用于防治欧幼病：一是黄芩 1 0g，黄连 1 5 g，加水 2 5 0 m L，煎至1 5 0 m L，脱蜂喷脾；二是黄连 2 0 g，黄檗 2 0 g，茯苓 2 0 g，金不换 2 0 g，大黄 1 5 g，桂圆 3 0 g，麦芽 3 0 g，银花 3 0 g，穿心莲 3 0 g，雪胆 3 0 g，青黛 2 0 g，五加皮 2 0 g，熬制 3 0 m i n 后滤渣，配制成糖液饲喂。除上述中药防治外，也有报道采用大蒜汁防治欧幼病4 3。3.2 西药防治欧幼病是由细菌感染所致，像西药中的抗生素理应也可以有效治疗欧幼病，但抗生素的长期使用往往会导致抗药性的产生和蜂产品中的药物残留4 4-4 6。研究者针对欧幼病的抗生素防治也做了很多地尝试，Wa i t e 等4 7 使用土霉素进行欧幼病防治，且防治效果较好。别斯帕勒科等4 8 发现使用链霉素治疗欧幼病同治疗美洲幼虫腐臭病同样有效。孙宏田4 9 按一定比例向糖浆或凉白开中加入庆大霉素，喷洒蜂脾，连续 2 年没有一群复发欧幼病。王喜寿5 0 使用青霉素喷蜂，可平息了欧幼病。朱毅5 1 使用3蜜蜂杂志(月刊)JOURNAL OF BEE（Monthly）NO.22023Feb.E M原露用糖水稀释后饲喂蜜蜂可以有效防治欧幼病。4 其他防治4.1 灭活疫苗灭活疫苗是近年来研发的热点，也是治疗疾病的一类重要生物制剂，诸如新型冠状病毒5 2、猪流行性腹泻病毒5 3、塞内卡病毒5 4 等均采用灭活病毒进行防治。灭活疫苗也是防治欧幼病的重要手段。有研究表明，使用灭活疫苗，用福尔马林灭活的腐臭菌细胞培养物悬液，可以有效预防和治疗欧幼病1 0,1 9。4.2 细菌干预2 0 世纪 7 0 年代，研究人员首次发现用幼虫芽孢杆菌培养物注射蜜蜂，会导致一种抗菌物质的大量产生。近年来，研究人员又发现，蜂群中的一种幼虫芽孢杆菌（p a e n i b a c i l l u s l a r-v a e s u b s p.p u l v i f a c i e n s，P L p），可以有效治愈欧幼病，治愈率达到 7 4%，复发率低于土霉素，并且没有药物残留5 5,5 6。B i e l i k 等5 7 发现昆式乳杆菌（A p i l a c t o b a c i l l u s k u n k e e i）V 1 8 对蜂房蜜蜂球菌具有明显地抑菌作用。细菌干预为防治中蜂欧幼病提供了新的思路和见解。4.3 转录因子敲除转录因子（t r a n s c r i p t i o n f a c t o r，T F），是一种蛋白质分子，能够与基因上游的顺式作用元件相结合，进而调控目的基因表达。T a k a m a t-s u 等5 8 通过敲除蜂房蜜蜂球菌中的 S p x A 1 a 转录因子，导致蜂房蜜蜂球菌对蜂王浆及其抗菌成分 1 0-H D A的敏感性增加，增强蜂王浆对欧幼病的抗性。转录因子敲除防治欧幼病具有创新性，但基因敲除技术成本较高。5 展望目前，研究者对于欧幼病的流行规律和致病机理已经有了比较清晰的了解，对于如何预防和治疗欧幼病，研究者们开展了大量的尝试和研究，形成了一系列的防治方法。这些方法在预防和治疗欧幼病上发挥了一定的积极影响。但是，蜜蜂始终是社会性昆虫，群体防御才是蜜蜂繁衍生息、蓬勃发展的重要原因，只是简单地采用抗生素、中草药等药物对患病蜂群进行干预，可能会对蜂群的群势产生一定的消极影响。中蜂是我国非常重要的蜜蜂种质资源，应当贯彻以“预防为主，治疗为辅”的策略，进行欧幼病的防治，这将有利于中蜂的健康高效养殖和蜂蜜的安全生产。参考文献：1 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