复方槐米抗氧化剂抗氧化作用研究.pdf

收稿日期:2009-12-05基金项目:吉林省科技发展计划基金资助项目(20065027)作者简介:侯君(1985-),女,汉族,河南安阳人,长春工业大学硕士研究生,主要从事功能食品方向研究,E-mail:xiaodong16th .联系人:解耸林(1963-),男,汉族,吉林长春人,长春工业大学实验师,主要从事功能食品方向研究,E-mail:.第 31 卷 第 2期长 春 工 业 大 学 学 报(自然科学版)Vol.31 No.22010 年 04月Journal of Changchun University of Techonology(Natural Science Edition)Apr.2010复方槐米抗氧化剂抗氧化作用研究侯 君,解耸林(长春工业大学 化学与生命科学学院,吉林 长春130012)摘要:研究了槐米、甘草提取物复配抗氧化剂对 DPPH 自由基的清除作用和对邻苯三酚自氧化的抑制作用,以及在月饼和香肠中的抗氧化应用。结果表明,复方槐米抗氧化剂在月饼中的最佳配比为甘草槐米=1 1,在香肠中的最佳配比为甘草槐米=21,月饼和香肠的保质期比添加人工合成抗氧化剂的保质期延长一个月,同时,符合人们追求天然、绿色、健康的消费趋势。关键词:槐米;甘草;复方抗氧化剂;抗氧化中图分类号:TS202.3 文献标志码:A 文章编号:1674-1374(2010)02-0207-05Anti-oxidation of compound sophora japonicaHOU Jun,XIE Song-lin(School of Chemical&Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,China)Abstract:The scavenging action of compound sophora japonica and liquorice antioxidant on theremoval of DPPH radical and checking of pyrogallol auto-oxidation are studied,as well as theantioxidant effect to moon cakes and sausages.The results show that the optimum ratio of compoundsophora japonica antioxidant in the moon cake is:licorice sophora japonica=1 1,while in thesausage 21.The shelflife of both the moon cakes and sausages is extended for a month than thatwith synthetic antioxidants,which also meets the healthy need of the public.Key words:sophora japonica;liquorice;compound antioxidant;anti-oxidation.0引言祖国医学认为槐米性味苦平,系豆科植物槐的花蕾,具有清肝明目、凉血止血、清热降血脂等功效;甘草性味甘平,系多年生草本植物,具有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒和调和药性功能 1。现代研究表明,槐米的功能因子是芦丁,属于黄酮醇类化合物;甘草的功能因子是甘草苷,属于二氢黄酮类化合物。从黄酮类物质结构上可以得知,苯环上带有羟基,具有一定的抗氧化能力,可以抑制脂肪的氧化酸败 2。文中通过对天然中草药复方物抗氧化活性进DOI:10.15923/22-1382/t.2010.02.005行研究,开发了一种新型高效食品抗氧化剂,对于解决从原料到成品及货架期易氧化酸败等问题具有重要的应用价值 3。这为我国中草药作为食品添加剂的开发利用另辟了一条新路,也为延缓高脂食品的自动氧化酸败提供了很好的解决思路,而且对医药卫生、营养学均有重要的实际意义 4。1试验材料与设备1.1试验材料槐米,购于北京同仁堂药房长春分店;甘草,购于北京同仁堂药房长春分店;Vc,购于广东省食品工业研究所;邻苯三酚溶液,购于天津市光复精细化工研究所;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼),购于美国 Sigma 公司;无水乙醇、无水乙醚、甲醇、冰醋酸、氯仿,均为国产分析纯试剂。1.2试验设备752 紫外光栅分光光度计,上海第三分析仪器厂;101-1AB 型电热鼓风干燥箱,天津市泰斯特仪器有限公司;RE-52C 旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;QPG-1 型喷雾干燥机,辽宁市石化电控设备厂。1.3实验试剂制备T ris-HCl 缓冲溶液(pH 值为 8.2)配制:0.1 mol/L三羟甲基氨基甲烷(T ris)溶液 50 mL与 0.1 mol/L 盐酸 22.9 mL 混匀,并稀释至100 mL。2试验方法2.1槐米和甘草粗提物的制备工艺2.1.1 槐米粗提物的提取槐米粉碎 过 40 目筛子 水浴微沸提取40 min(料液比为 115)冷却 抽滤 真空浓缩喷雾干燥 槐米粗提物,备用。2.1.2 甘草粗提物的提取甘草粉末 过 40 目筛子 回流提取 1 h(料液比为 1 10 的 75%乙醇溶液,于 60 恒温水浴中)冷却抽滤 真空浓缩 喷雾干燥 甘草粗提物,备用。2.2槐米和甘草粗提物清除自由基能力试验2.2.1 邻苯三酚自氧化试验 5 首先测 A0,将 9 mL Tris-HCl 缓冲溶液配制加入到试管中,并加入0.2 mL 蒸馏水,25 预热20 min,加入预热至 25 的邻苯三酚溶液50 L,摇匀,每隔 30 s 测定一次,420 nm 下测吸光度,3 min后加入一滴 Vc,静置 5 min 后测其吸光度,即为 A0。然后测 As,将 9 mL Tris-HCl 缓冲液加入到试管中,然后加入 0.2 mL 各样品,样品浓度梯度为 0,0.1,0.5,1.0,1.5,2.0 g/L,25 预热20 min后,加入预热至 25 的邻苯三酚溶液50 L,每 30 s 测一次 420 nm吸光度。3 min 后滴入一滴 Vc,静置 5 min 后测其吸光度,即为 As。实验安排见表 1。表 1邻苯三酚自氧化抑制率作用表试管号测定值内容物1为 A0消零Tris-HCl 缓冲溶液(9 mL)2A0Tris-HCl缓冲溶液(9 mL)+邻苯三酚溶液(50 L)3为 As消零Tris-HCl 缓冲溶液(9 mL)+抑制剂溶液(0.2 mL)4AsTris-HCl缓冲溶液(9 mL)+抑制剂溶液(0.2 mL)+邻苯三酚溶液(50 L)抑制率=A0-AsA0100%2.2.2 DPPH 自由基清除试验DPPH 是一种稳定的自由基,当有自由基清除剂存在时,清除剂与其单电子配对使 DPPH 在517 nm 波长处吸光度下降,可以用清除率来恒定其对有机自由基的消除能力。用中草药对 DPPH的清除能力来表示其抗氧化活性,清除率越大,抗氧化活性越高 6。配置不同浓度甘草和槐米复配抗氧化剂样品液:50,40,30,20,10,9,8,7,6,5,4,3,2,1 mg/mL,精 确吸取 样品溶 液 2.0 mL,加入208长 春 工 业 大 学 学 报(自然科学版)第 31 卷DPPH溶液 2.0 mL,摇匀,放置 30 min,以溶剂(70%乙醇)为空白,517 nm 处测吸光度 Ai。同时,测定样品溶液 2.0 mL 与乙醇 2.0 mL混合液 517 nm 处吸光度 Aj;再测定 DPPH 溶液2.0 mL 与乙醇 2.0 mL 混合液 517 nm 处吸光度Ac;进一步实验采用最大抑制率时浓度 7。抑制率=1-Ai-AjAc100%式中:Ai 样品液与 DPPH 溶液混合液吸光度;Aj 样品液与乙醇混合液吸光度;Ac DPPH 溶液与乙醇混合液吸光度。2.3复配抗氧化剂在月饼与香肠中应用2.3.1 月饼和香肠中抗氧化剂的配方月饼和香肠中抗氧化剂的配比方案见表 2。表 2月饼和香肠中抗氧化剂的配比方案月饼配比添加量(以脂肪计)/%香肠配比添加量(以脂肪计)/%1 号甘草槐米=110.201 号甘草槐米=110.202 号甘草槐米=110.402 号甘草槐米=210.203 号甘草槐米=210.203 号异 Vc-Na5 g4 号甘草槐米=210.405 号BHT0.106 号空白2.3.2 月饼和香肠中油脂的前处理2.3.2.1月饼皮料中油脂的提取称取月饼皮料 50 g,用研钵将其研碎,浸泡于料液比为 15 的无水乙醚中 24 h,抽滤,滤液利用旋转蒸发仪将乙醚和油脂分离,从而得到油脂。2.3.2.2香肠中油脂的提取称取香肠 30 g,剪碎后浸泡于料液比为 1 5的无水乙醚中 48 h,抽滤,滤液利用旋转蒸发仪将乙醚和油脂分离,从而得到油脂。2.4月饼和香肠中油脂的过氧化值和酸价测定2.4.1 过氧化值测定 8月饼和香肠中的油脂处理按文献 9 规定操作,并按文献10 分析方法测定。2.4.2 酸价的测定 8月饼和香肠中的油脂酸价按文献 9 方法测定。3结果与讨论3.1对邻苯三酚自氧化的抑制作用及对 DPPH自由基的清除作用对邻苯三酚自氧化的抑制作用及对 DPPH自由基的清除作用分别如图 1 和图 2 所示。图 1对邻苯三酚自氧化的抑制作用图 2对 DPPH 自由基的清除作用由图 1 可知,甘草槐米复方抗氧化物浓度为1.5 g/L 时,对邻苯三酚自氧化的抑制率最高,为67.64%,复方槐米抗氧化剂对邻苯三酚自氧化有209第 2 期 侯君,等:复方槐米抗氧化剂抗氧化作用研究明显的抑制作用,且得到最佳浓度时的最高抑制率。由图 2 可知,甘草槐米复方抗氧化物浓度为10 g/L 时,对 DPPH 自由基的清除作用最高,为62.88%,对 DPPH 自由基的清除作用达到最佳值,抗氧化活性最强,即槐米和甘草提取物的清除自由基抗氧化活性强。3.2过氧化值测定结果月饼和香肠过氧化值趋势图分别如图 3 和图4所示。图 3月饼过氧化值趋势图图 4香肠过氧化值趋势图由图 3 可知,月饼过氧化值最优为 2 号样品,即甘草 槐米=1 1(添加量为脂肪含量的0.40%),月饼皮料中油脂的酸败程度最缓慢。由图 4 可知,香肠过氧化值最优为 2 号样品,即甘草 槐米=2 1(添加量为脂肪含量的0.20%),香肠中油脂的酸败程度最缓慢。3.3酸价测定结果月饼和香肠酸价趋势图分别如图 5 和图 6 所示。由图 5 可知,月饼酸价最优为 2 号样品,即甘草槐米=11(添加量为脂肪含量的0.40%),月饼皮料中游离脂肪酸的含量最少。由图 6 可知,香肠酸价最优为 2 号样品,即甘草槐米=21(添加量为脂肪含量的0.20%),香肠中游离脂肪酸的含量最少。图 5月饼酸价趋势图图 6香肠酸价趋势图4结论4.1对邻苯三酚自氧化的抑制作用和对 DPPH自由基的清除作用结论槐米、甘草提取物中含有黄酮类化合物,它们均表现出很强抗氧化活性。通过实验得知,复方槐米抗氧化剂对邻苯三酚自氧化有明显的抑制作用,且得到最佳浓度时的最高抑制率;同时,对DPPH 自由基的清除作用达到最佳值,抗氧化活性最强,即槐米和甘草提取物的清除自由基抗氧化活性强。4.2复方槐米抗氧化剂在月饼和香肠应用中的结论根据过氧化值和酸价的测定结果可以得出,复方槐米抗氧化剂在月饼中的最佳配比为甘草槐米=11,在香肠中的最佳配比为甘草 槐米=21,月饼和香肠的保质期比添加人工合成抗氧化剂延长一个月,同时,符合人们天然、绿色、健康的需求。参考文献:1 解朝霞,陈庆先.甘草的研究现状及展望 J.中国医药研究,2004,2(5):49-51.2 张睿,徐雅琴.黄酮类化合物提取工艺研究 J.食210长 春 工 业 大 学 学 报(自然科学版)第 31 卷品与机械,2003,1:21-22.3 何璐,王勇.甘草黄酮的提取分离及抗菌活性研究 J.湖北农业科学,2008,47(2):217-219.4 唐津忠,鲁小翔.金莲花中黄酮类化合物的提取及其抗氧化性研究 J.食品科学,2003,24(6):88-91.5 许雅娟,赵艳景.邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的研究 J.西南民族大学学报,2006,32(6):1207-1211.6 连喜军.DPPH 法研究不同品种甘薯抗性淀粉抗氧化性 J.粮食与油脂,2009(6):26-29.7 孙涛,付雪艳.DPPH 法测定沙棘籽原花青素清除自由基的能力 J.宁夏医科大学学报,2009,31(1):26-29.8 罗毅.食品的酸价和过氧化值的测定 J.职业与健康,1997,13(6):42.9 中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会.GB/T5009.44-2003 肉与肉制品卫生标准的分析方法 S.北京:中国标准出版社,2004.10 中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会.GB/T5009.37-2003 食用植物油卫生标准的分析方法 S.北京:中国标准出版社,2004.211第 2 期 侯君,等:复方槐米抗氧化剂抗氧化作用研究