人参皂苷Rd通过下调NF-...善小鼠动脉粥样硬化炎症反应_符丽珍.pdf

免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.2023 论著 文章编号1000-8861（2023）03-0248-07；DOI10.13431/ki.immunol.j.20230032人参皂苷Rd通过下调NF-B信号改善小鼠动脉粥样硬化炎症反应符丽珍，饶兰兰，赵勇，易必兴，叶莉华*摘要 目的 探究人参皂苷Rd在ApoE-/-小鼠中抗动脉粥样硬化（AS）的潜在机制。方法 将ApoE-/-小鼠随机分为6组（n=8）：对照组、模型组、阿托伐他汀钙（ATV）组、人参皂苷Rd治疗组（5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg）。给小鼠喂食西式饮食6周，然后同时给予人参皂苷Rd治疗6周。采集血样进行脂质分析、炎症因子水平检测和氧化应激水平检测。采集胸主动脉，分别进行苏木素-伊红（HE）和油红O染色，Western印迹检测蛋白表达。结果 人参皂苷Rd显著抑制了AS病变的发展和脂质积累，显著降低总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，显著升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。人参皂苷Rd下调促炎标志物的表达，如肿瘤坏死因子-（TNF-）、白细胞介素（IL）-6和IL-1。此外，人参皂苷Rd处理降低了丙二醛（MDA）活性并增强了超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。人参皂苷Rd处理也显著抑制诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）蛋白的表达，并抑制核因子-B（NF-B）通路的异常激活。结论 人参皂苷Rd 通过抑制NF-B通路激活对AS发挥抗炎和抗氧化作用。关键词人参皂苷Rd；动脉粥样硬化；低密度脂蛋白胆固醇；TNF-；NF-B中图分类号 R543.5文献标识码 AGinsenoside Rd alleviates inflammatory response of atherosclerosis inmice by down-regulating NF-B signalingFU Lizhen1,RAO Lanlan2,ZHAO Yong1,YI Bixing1,YE Lihua3,*1.Department of Geriatric Medicine,Second Affiliated Hospital of Hainan Medical University,Haikou 570203,China;2.Department of Pharmacy,Haikou Affiliated Hospital of Central South University Xiangya School of Medicine,Haikou 570208,China;3.Deparment of Dermatology,Haikou Affiliated Hospital of Central South University XiangyaSchool of Medicine,Haikou 570208,China*Corresponding Author:YE Lihua,E-mail:Abstract This study is aimed to investigate the potential mechanism of ginsenoside Rd against atherosclerosis(AS)in ApoE-/-mice.ApoE-/-mice were randomly divided into 6 groups(n=8):control group,model group,atorvastatin calcium(ATV)group,and 3 ginsenoside Rd treatment groups(5 mg/kg,10 mg/kg and 20 mg/kg).Micewere fed a Western-style diet for 6 weeks,and then simultaneously treated with ginsenoside Rd for 6 weeks.Bloodsamples were collected for lipid analysis,inflammatory factor level detection and oxidative stress level detection.Thethoracic aortas were collected for hematoxylin-eosin(HE)or oil red O staining,and Western blotting was used todetect protein expression.Data showed that ginsenoside Rd significantly inhibited the development of AS lesionsand lipid accumulation,significantly decreased total cholesterol(TC),triglyceride(TG)and low-density lipoproteincholesterol(LDL-C)levels,and significantly increased high-density lipoprotein cholesterol cholesterol(HDL-C)levels.Ginsenoside Rd also down-regulated the expression of pro-inflammatory markers such as tumor necrosisfactor-(TNF-),interleukin(IL)-6,and IL-1.Furthermore,ginsenosideRdtreatmentdecreasedmalondialdehyde(MDA)activityandenhancedsuperoxide dismutase(SOD)and glutathione peroxidase(GSH-Px)activities.Ginsenoside Rd treatment alsosignificantly inhibited the expression of inducible nitric基 金 项 目：2021 年 度 海 南 省 卫 生 健 康 行 业 科 研 项 目（21A200255）作者单位：570203海口，海南医学院第二附属医院老年内科（符丽珍，赵 勇，易必兴）；570208，中南大学湘雅医学院附属海口医院药学部（饶兰兰），皮肤科（叶莉华）*通信作者：叶莉华，E-mail:248免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.2023动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是由脂质代谢异常引起的一种以大、中动脉壁斑块形成为特征的疾病1。AS是心肌梗死、脑卒中等慢性心血管疾病的主要病理基础2，近年来，AS的患病率呈上升趋势，严重影响了老龄人口的健康。氧化应激、血液成分变化引发的炎症因子、内皮细胞损伤和脂质代谢紊乱被认为是导致AS的关键因素3。因此，需要深入研究AS的发病机制，寻找有效的治疗方法。根据中华人民共和国药典（2020年）的标准，人参具有补气安神和增强认知功能保护的功效4。人参皂苷Rd是从人参中提取的一种达玛烷型甾体苷，目前以膳食补充剂的形式出现，具有抗炎、抗肿瘤、神经保护作用、心血管保护和免疫调节等多种药理活性5。例如人参皂苷Rd通过抑制NF-B/MMP-9途径减轻脑缺血诱导的血脑屏障损伤6。Li等7研究证实人参皂苷Rd可预防动脉粥样硬化的发生，其潜在机制可能是通过电压非依赖性Ca2+通道抑制Ca2+内流，从而抑制SR-A活性和表达，随后减少巨噬细胞中氧化低密度脂蛋白的摄取和胆固醇的积累。然而，尚不清楚人参皂苷Rd在体内抑制AS病变的抗炎和抗氧化机制。因此，本研究采用高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠AS模型，采用人参皂苷Rd进行治疗，研究人参皂苷Rd在降低血脂、对抗氧化和炎症因子等方面对AS的保护效应。1材料与方法1.1主要试剂和仪器人参皂苷Rd（纯度98%）购自成都格普特生物科技有限公司；阿托伐他汀钙（ATV）购自大连美仑生物技术有限公司；苏木素伊红染色试剂盒和油红O购自北京索莱宝科技有限公司；总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）购自南京建成生物工程研究所；RIPA裂解缓冲液、核和细胞质蛋白提取试剂盒、二辛可宁酸（BCA）蛋白质测定试剂盒和 BeyoECLPlus 试剂购自上海碧云天公司；肿瘤坏死因子（TNF-）、白 细 胞 介 素 1（IL-1）、IL-6、IL-10ELISA试剂盒购自武汉云克隆科技股份有限公司；兔来源一抗-肌动蛋白（-actin）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、核因子B抑制因子（IB）、磷酸化（p）-IB和核因子kappa-B（NF-B）p65购自英国Abcam公司。Infinite M200 PRO 酶标仪（瑞士 Tecan）；Tanon5500凝胶成像系统（上海天能公司）；Olympus BX50倒置荧光显微镜（日本Olympus）。1.2动物模型的建立与药物治疗48只无特定病原体（SPF）雄性载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠（6周龄，体质量2022 g）购自北京维通利华实验动物科技有限公司，生产许可证号SCXK（京）2021-0011，适应性喂养1周。此外，所有动物都保持在以下标准条件下，包括12/12 h光/暗循环，环境温度（2123），湿度范围为30%50%，以及充足的标准食物和水。将小鼠分为6组（n=8）：对照组、模型组、阿托伐他汀钙（ATV）组、人参皂苷Rd低剂量（5mg/kg）组、人参皂苷Rd中剂量（10 mg/kg）组、人参皂苷Rd高剂量（20 mg/kg）组，人参皂苷Rd使用剂量根据Li等6的研究确定。对照组给予标准饮食12周，其他组给予西方饮食（0.25%胆固醇和15%可可脂）12周。喂食6周后，人参皂苷Rd组分别每天腹腔注射5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg人参皂苷Rd，ATV组每天口服ATV 3 mg/kg（人当量剂量：0.28 mg/kgd8），对照组和模型组每天注射等量的0.9%生理盐水，连续6周。治疗6周后，用1%戊巴比妥钠（50 mg/kg）对小鼠实施安乐死。取自眶后神经丛的血样并离心，收集血清用于后续实验检测。然后，采集胸主动脉用于组织学和分子研究。所有动物实验均经本院医学伦理委员会批准。1.3组织学病变观察将胸主动脉组织在4%多聚甲醛溶液中固定24 h后，脱水并包埋在石蜡中。石蜡包埋的动脉被横切成4 m厚的小块，脱蜡和再水化，然后行HE染色，光学显微镜下观察胸主动脉的动脉粥样硬化病变。通过油红O染色鉴定脂质沉积，使用 Image J软件分析病变的区域大小。oxide synthase(iNOS)and vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1)proteins,and inhibited the abnormalactivation of nuclear factor-B(NF-B)pathway.In summary,ginsenoside Rd exerts anti-inflammatory andantioxidant effects on AS by inhibiting the activation of NF-B pathway.Key words Ginsenoside Rd;Atherosclerosis;Low-density lipoprotein cholesterol;TNF-;NF-B249免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.20231.4血脂水平测定使用毛细管玻璃管从小鼠的眼睛（眼眶静脉丛）收集血液。每次可采集0.1 ml全血。血液以3 000 r/min离心15 min，收集血清。按照制造商的说明书操作，采用单一试剂COD-PAP法检测血清TC和TG水平，双试剂直接法检测LDL-C和HDL-C，使用酶标仪进行比色分析。1.5ELISA检测炎症因子水平根据制造商的说明测量血清中炎症因子水平，样品在37 下孵育30 min，然后分别在37 下暴露于生物素缀合的检测抗体和链霉亲和素-HRP 60 min。添加稳定的色原和终止溶液以终止反应，然后使用酶标仪在450 nm处测量吸光值。1.6Western印迹检测蛋白表达用RIPA裂解缓冲液制备胸主动脉组织的蛋白质样品。用核和细胞质蛋白提取试剂盒提取细胞质和核蛋白。通过BCA蛋白质测定试剂盒测定蛋白质浓度。用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分离每个样品的40 g蛋白质，然后转移到PVDF膜上。用5%脱脂牛奶封闭 1 h 后，一抗 iNOS（1 1 000）、核因子kappa-B（IB）抑制剂（1 1 000）、磷酸化（p）-IB(1 1 000)、核因子kappa-B（NF-B）（1 1 000）和-actin（Bioss,China,1 500）分别添加到膜中。然后将膜在4 下孵育过夜，加入HRP偶联二抗（1 2 000）。条带通过 BeyoECL Plus 试剂显现，条带密度通过Gel-Pro Analyzer 4.5 软件进行定量分析。1.7统计学分析所有统计分析均使用GraphPadPrism 6.0软件进行。实验数据表示为平均值标准差。实验组之间的差异通过单因素方差分析（ANOVA）确定。P0.05 认为差异有统计学意义。所有实验结果代表至少3个独立实验。2结果2.1人参皂苷Rd减轻ApoE/小鼠动脉粥样硬化的病理特征如图1所示，HE染色结果显示，与对照组比较，模型组ApoE-/-小鼠胸主动脉可见动脉粥样硬化斑块和动脉壁增厚，并发现了类似巨噬细胞和空泡肌瘤细胞的脂质泡沫。人参皂苷Rd 10和20mg/kg及ATV治疗明显改善了上述病理变化，人参皂苷Rd 5 mg/kg动脉粥样化病理变化较模型组无显著差异。2.2人参皂苷Rd降低ApoE/小鼠血脂水平如图2所示，油红O染色结果显示，与对照组相比，模型组ApoE-/-小鼠检测到更多的脂滴，脂质沉积面积明显增大（P0.01）。与模型组相比，人参皂苷Rd 10和20 mg/kg及ATV治疗明显减少喂食西方饮食诱导的小鼠胸主动脉中脂质累积（P0.05，P0.01）。如表1所示，与对照组相比，模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著升高（P0.01），血清HDL-C水平显著降低（P0.01）。与模型组相比，人参皂苷Rd10和20 mg/kg及ATV治疗后小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著降低（P0.01），血清HDL-C水平显著显著升高（P0.01）。图 1人参皂苷Rd对ApoE/小鼠动脉粥样硬化病变的影响Fig 1The effect of ginsenoside Rd on atherosclerosis in ApoE/mice250免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.20232.3人参皂苷Rd抑制ApoE/小鼠的炎症反应ELISA结果显示（表2），与对照组相比，模型组小鼠血清TNF-、IL-1和IL-6显著升高，IL-10水平显著降低（P0.01）；与模型组相比，人参皂苷 Rd 10 和 20mg/kg及ATV治疗后小鼠血清TNF-、IL-1和IL-6显著降低，IL-10水平显著升高（P0.01）。Western印迹结果显示（图3），模型组小鼠胸主动脉中iNOS和VCAM-1蛋白表达较对照组显著上调（P0.01），人参皂苷Rd 10和20 mg/kg及ATV治疗后明显下调喂食西方饮食诱导的小鼠胸主动脉中 iNOS 和VCAM-1蛋白表达（P0.01）。2.4人参皂苷Rd抑制ApoE/小鼠的氧化应激反应如表3所示，与对照组相比，模型组小鼠血清SOD和GSH-Px显著降低，MDA水平显著升高（P0.01）；与模型组相比，人参皂苷Rd 10和20 mg/kg及ATV 治疗后小鼠血清 SOD 和 GSH-Px 显著升高，MDA水平显著降低（P0.01）。2.5人参皂苷 Rd 抑制 AS 小鼠 NF-B 通路的活化如图4所示，与对照组比较，模型组小鼠胸主动脉中 p-IB和胞核NF-B p65蛋白表达增加（P0.01）。同时，IB和胞质NF-B p65的蛋白表达降低（P0.01）。人参皂苷Rd 10和20 mg/kg或ATV可抑制这些变化，且人参皂苷Rd的作用呈剂量依赖性。3讨论作为国家临床指南的推荐，他汀类药物对预防动脉粥样硬化性心脑血管疾病的作用已被研究证实9。然而，这些化合物在治疗后也会对患者产生n=8,*P0.01,vs control group;#P0.05,#P0.01,vs model group.图 2人参皂苷Rd对小鼠胸主动脉脂质累积的影响Fig 2The effect of ginsenoside Rd on lipid accumulation in thoracic aorta of mice表 1各组小鼠血脂水平比较Tab 1Comparison of blood lipid levels in different groupsGroupControlModelATVGinsenoside Rd 5 mg/kg10 mg/kg20 mg/kgTC/(mmolL-1)17.37 2.0553.28 4.28a23.76 2.37b50.93 4.8139.89 3.45b21.44 2.16bTG/(mmolL-1)1.83 0.094.97 0.21a2.12 0.13b4.85 0.243.61 0.18b2.04 0.15bLDL-C/(mmolL-1)2.23 0.177.66 0.48a3.05 0.19b7.13 0.544.58 0.27b2.96 0.20bHDL-C/(mmolL-1)1.97 0.110.45 0.03a1.89 0.14b0.49 0.051.34 0.08b1.93 0.12ba)P0.01,vs control group;b)P0.01,vs model group.n=8.All data are represented as mean SD.251免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.2023表 2各组小鼠血清炎症因子水平比较Tab 2Comparison of serum inflammatory factors in mice of different groupsGroupControlModelATVGinsenoside Rd 5 mg/kg10 mg/kg20 mg/kgTNF-/(pgml-1)127.69 12.25234.77 18.42a148.37 2.37b227.52 18.54183.45 15.31b141.81 14.61bIL-1/(pgml-1)87.53 7.09154.74 15.13a102.51 10.21b147.62 13.65130.57 11.89b101.88 9.27bIL-6/(pgml-1)93.73 8.17167.62 16.48a108.53 9.34b161.85 14.62143.76 12.27b103.97 10.20bIL-10/(pgml-1)23.74 2.8510.45 0.96a19.86 1.73b9.83 1.0515.22 1.24b20.37 2.07ba)P0.01,vs control group;b)P0.01,vs model group.n=8.All data are represented as mean SD.1:Control group;2:Model group;3:ATV group;4:Ginsenoside Rd 5 mg/kg group;5:Ginsenoside Rd 10 m/kg group;6:Ginsenoside Rd 20 mg/kggroup.n=8,*P0.01,vs control group;#P0.01,vs model group.图 3蛋白质印迹检测iNOS和VCAM-1蛋白的表达Fig 3The expression of iNOS and VCAM-1 proteins detected by Western blotting表 3各组小鼠血清SOD、GSH-Px和MDA水平比较Tab 3Comparison of serum SOD,GSH-Px and MDA levels in mice of different groupsGroupControlModelATVGinsenoside Rd 5 mg/kg10 mg/kg20 mg/kgSOD/(Uml-1)157.72 32.0973.46 10.23a138.84 22.50b75.93 9.52117.71 19.39b145.35 25.07bGSH-Px/(Uml-1)547.87 157.22214.94 75.40a496.01 130.08b227.14 63.37385.28 91.84b521.88 146.34bMDA/(Uml-1)19.78 4.2658.60 8.30a29.01 5.35b55.29 10.6143.86 7.27b25.19 3.38ba)P0.01,vs control group;b)P0.01,vs model group.n=8.All data are represented as mean SD.许多不良反应，如横纹肌溶解症和急性肾功能衰竭等10。因此，需要开发有效的天然植物药物来治疗AS。AS的发生是一个复杂的病理过程，涉及多种诱发因素。人参皂苷Rd已被证明具有广泛的药理活性5。在本研究中，我们通过ApoE-/-小鼠模型提供了人参皂苷Rd抗AS作用的证据，并首次将其与他汀类药物的作用进行了比较。ApoE-/-小鼠于1992年首次创建，可能会自发发展为高胆固醇血症和AS。ApoE-/-小鼠的病理过程、组织病理学分布和结构与人类非常相似。因此，ApoE-/-小鼠是AS研究的理想模型11。本研究结果表明，给予西方饮食的ApoE-/-小鼠主动脉中发现了明显的粥样斑块形成和脂质积累，TC、TG和LDL-C等血脂水平显著升高，HDL-C水平显著降低。人参皂苷Rd 10和20 mg/kg显著抑制了喂食西方饮食的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成和脂质积累，并显著降低TC、TG和LDL-C水平，升高HDL-C水平。因此，人参皂苷Rd对脂质代谢和AS发挥保护作用。AS是一种慢性炎症性疾病，炎症和多种促炎细胞因子在 AS 的发生发展中发挥着重要作用12。252免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.2023TNF-和IL-6是AS的关键炎症因子，靶向促炎分子TNF-和IL-6以及黏附分子的治疗可以实现抗AS作用13。本研究结果表明，人参皂苷Rd治疗有效降低了西方饮食诱导的ApoE-/-小鼠血清中TNF-、IL-6和IL-1的含量，甚至优于ATV。此外，由活性氧自由基和抗氧化剂的平衡紊乱引起的氧化应激，包括过量的活性氧产生和抗氧化能力的降低，与包括 AS 在内的多种心血管疾病的发展有关14。SOD和GSH-Px是2种众所周知的抗氧化酶，它们将高反应性自由基转化为反应性较低的自由基，以防止水和分子氧的形成，或与一些有害化合物形成共轭物，从而产生安全而非有毒的物质15。MDA是氧化应激的主要生物标志物，MDA 表位构成动脉粥样硬化炎症的关键介质16。在本研究中，人参皂苷Rd治疗显著增强了小鼠血清中 SOD 和 GSH-Px 的活性，降低MDA的活性。这可能是人参皂苷Rd抗AS活性的机制之一。NF-B是一种调节炎症反应的转录因子，可被激活以促进AS和血栓的形成。正常情况下，NF-B与其抑制蛋白IB结合，以无活性状态存在于细胞质中。在炎症和氧化损伤后，IB 被激活以促进NF-B的磷酸化。活化的NF-B易位到细胞核中，作为炎症基因的转录因子17。NF-B激活会增加iNOS 和 VCAM-1 的表达，从而激活 AS 的发展18。iNOS的激活促进了血管壁内的炎症过程和AS的进展19。VCAM-1是关键的细胞黏附分子，通过引发炎症发挥促AS的作用20。平滑肌细胞和巨噬细胞是晚期动脉粥样硬化病变中最突出的细胞类型，应用免疫组化技术在平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞中都能检测到NF-B的激活21。因此，抑制 IB/NF-B通路也是AS的一种治疗选择。我们的数据显示人参皂苷Rd通过增强IB表达和抑制IB磷酸化有效抑制胞核中的NF-B p65的激活，并下调iNOS和VCAM-1的表达。因此，人参皂苷Rd可能通过阻断AS小鼠的NF-B通路来缓解AS。综上所述，人参皂苷Rd可以显著抑制AS小鼠主动脉粥样硬化斑块的形成，抑制炎症反应、氧化应激和NF-B信号通路，对AS有保护作用。我们提供的证据表明人参皂苷Rd可能是预防AS形成和发展的潜在药物。1:Control group;2:Model group;3:ATV group;4:Ginsenoside Rd 5 mg/kg group;5:Ginsenoside Rd 10 m/kg group;6:Ginsenoside Rd 20 mg/kggroup.a)The phosphorylation level of IB protein detected by Western blotting;b)the expression of NF-B p65 in the nucleus detected by Westernblotting;c)the expression of NF-B in cytoplasm detected by Western blotting.n=8,*P0.01,vs control group;#P0.01,vs model group.图 4人参皂苷Rd对AS小鼠NF-B通路活化的影响Fig 4Effects of ginsenoside Rd on NF-B pathway activation in AS mice253免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol.39No.3 Mar.2023【参考文献】1曾 妮，许妹萍，庄丽明.丹参素对大鼠动脉粥样硬化的作用及其机制J.免疫学杂志，2020，36(10):884-889,896.2Wang J,He X,Chen W,et al.Tanshinone IIA protectsmice against atherosclerotic injury by activating the TGF-/PI3K/Akt/eNOS pathwayJ.Coron Artery Dis,2020,31(4):385-392.3Guo H,Chen L,Li C,et al.Anti-hyperlipidemic effects ofthe compound Danshen tablet:roles of antioxidation,anti-inflammation,anticoagulation,and anti-apoptosisJ.AnnTransl Med,2021,9(9):744.4Song X,Wang L,Fan D.Insights into recent studies onbiotransformationandpharmacologicalactivitiesofginsenoside RdJ.Biomolecules,2022,12(4):512.5Ma X,Chen Y,Jiang S,et al.A bioassay-based approachforthebatch-to-batchconsistencyevaluationofXuesaitong injection on a Zebrafish thrombosis modelJ.Front Pharmacol,2021,12:623533.6Zhang X,Liu X,Hu G,et al.Ginsenoside Rd attenuatesblood-brain barrier damage by suppressing proteasome-mediated signaling after transient forebrain ischemiaJ.Neuroreport,2020,31(6):466-472.7Li J,Xie ZZ,Tang YB,et al.Ginsenoside-Rd,a purifiedcomponent from panax notoginseng saponins,preventsatherosclerosis in apoE knockout miceJ.Eur J Pharmacol,2011,652(1/3):104-110.8Pang SC,Peng L,Zhang JP,et al.Bushenkangshuai tabletreduces atherosclerotic lesion by improving blood lipidsmetabolism and inhibiting inflammatory response via TLR4and NF-B signaling pathwayJ.Evid Based ComplementAlternat Med,2018,2018:1758383.9Yao T,Lu W,Ke J,et al.Residual risk of coronaryatherosclerotic heart disease and severity of coronaryatherosclerosisassessedbyApoBandLDL-Cinparticipants with statin treatment:A retrospective cohortstudyJ.Front Endocrinol(Lausanne),2022,13:865863.10 李 花,许 济.前列地尔联合阿托伐他汀对老年急性脑梗死患者血脂及颈动脉粥样硬化的影响J.解放军医药杂志,2020,32(6):42-45,50.11 Zhang Q,Hu J,Wu Y,et al.Rheb(Ras homolog enrichedin brain 1)deficiency in mature macrophages preventsatherosclerosis by repressing macrophage proliferation,inflammation,and lipid uptakeJ.Arterioscler ThrombVasc Biol,2019,39(9):17871801.12 李一唯，汪 婷，鲍婷，等.亚麻籽油对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠M-MDSC及炎症因子的影响J.免疫学杂志,2021,37(9):737-745.13 陈 婧,薛晓琳,叶 超,等.益气化痰活血法对血脂异常痰浊阻遏证小鼠动脉粥样硬化相关炎性因子IL-6、TNF-表达的影响J.现代中西医结合杂志,2022,31(4):445-448,496.14 曹程浩,董晓瑞,黄 斌.丹参饮合二陈汤加减对颈动脉粥样硬化血管内膜损伤的保护作用J.中国实验方剂学杂志,2021,27(7):86-91.15 Zhao R,Xiao H,Jin T,et al.Naringenin promotes cellautophagytoimprovehigh-fat-diet-inducedatherosclerosis in ApoE-/-miceJ.Braz J Med Biol Res,2021,54(4):e9764.16 张克连,郭静宜,戴若竹.虾青素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的降脂、抗氧化和抗炎作用研究J.中国免疫学杂志,2020,36(7):794-798.17 Liu Y,Cheng P,Wu AH.Honokiol inhibits carotid arteryatheroscleroticplaqueformationbysuppressinginflammation and oxidative stressJ.Aging(Albany NY),2020,12(9):8016-8028.18 Zhang Y,Feng X,Du M,et al.Salvianolic acid Battenuates the inflammatory response in atherosclerosis byregulating MAPKs/NF-B signaling pathways in LDLR-/-miceandRAW264.7cellsJ.IntJImmunopatholPharmacol,2022,36:3946320221079468.19 Gliozzi M,Scicchitano M,Bosco F,et al.Modulation ofnitric oxide synthases by oxidized LDLs:role in vascularinflammation and atherosclerosis developmentJ.Int J MolSci,2019,20(13):3294.20 Li P,Xing J,Zhang J,et al.Inhibition of long noncodingRNAHIF1A-AS2confersprotectionagainstatherosclerosis via ATF2 downregulationJ.J Adv Res,2020,26:123-135.21 Brand K,Page S,Rogler G,et al.Activated transcriptionfactornuclearfactor-kappaBispresentintheatherosclerotic lesionJ.J Clin Invest,1996,97(7):1715-22.（收稿日期：2022-09-06；修回日期：2022-12-01）（编辑李海鸥）254