桥本氏甲状腺炎伴发病变中B...V600E基因突变率的研究_邓菊庆.pdf

实验研究收稿日期:2022 05 10基金项目:昆明市科技局重点项目(25318000001125)。作者简介:邓菊庆(1983 )女，硕士，主管技师，从事分子病理学工作 10 余年。通信作者:于璐，E mail:1772192143 。桥本氏甲状腺炎伴发病变中 BAF V600E 基因突变率的研究*邓菊庆1，杨忠存1，廖丽琼1，宋洁2，于璐1(昆明市第一人民医院1.病理科2.超声科，云南昆明650011)摘要:目的通过检测 BAF V600E 基因在桥本氏甲状腺炎(以下简称桥本)及伴发良、恶性病变中的突变情况，探讨该基因改变在疾病发生中的作用及意义。方法选取昆明市第一人民医院诊断为桥本及合并病变 78 例，进行 BAF V600E基因检测及资料收集，对结果进行分析及统计。结果在 21 例桥本组，57 例乳头状癌组(伴桥本及不伴桥本)BAFV600E 突变阳性病例分别为 0、23 例，桥本组与乳头状癌组比较，差异具有统计学意义(P 0.05)。结论BAF V600E基因突变的分子标记，可以作为乳头状癌早期诊断的参考指标之一，协助对桥本氏甲状腺炎恶性不典型病变的诊断。关键词:BAF 原癌基因 V600E 位点;桥本氏甲状腺炎;甲状腺乳头状癌中图分类号:736.1文献标志码:A文章编号:1006 4141(2023)01 0014 03Study on BAF V600E gene mutation rate in Hashimoto s thyroiditis and associated lesionsDENG Juqing1，YANG Zhongcun1，LIAO Liqiong1，SONG Jie2，YU Lu1(1.Department of Pathology;2.Department of Ultrasonography;The First Peoples Hospital of Kunming，Kunming Yunnan 650011，China)Abstract:Objective By detecting the mutation of BAFV600E gene in Hashimoto s thyroiditis(hereafter referred to asHashimoto HT)and associated benign and malignant lesions，to explore the role and significance of the gene change in the occurrenceof the disease.Methods 78 cases diagnosed HT concomitant lesions in The First Peoples Hospital of Kunming were collected andperformed BAF V600E gene detection and data collection，and the results analysis and statistic.esults In 21 cases of HT，BAFV600E mutation positive cases were 0 and 23 in 57 cases of papillary carcinoma(with and without HT)，there was statisticalSignificance in the difference of the comparison of HT group and papillary carcinoma group.Conclusions The molecular marker ofBAF V600E gene mutation，which can be used as one of the reference indicators for the early diagnosis of papillary carcinoma，assistin the diagnosis of malignant atypical lesions of Hashimotos thyroiditis.Key words:BAF V600E，Hashimotos thyroiditis，papillary thyroid carcinoma桥本氏甲状腺炎(以下简称桥本)是一种自身免疫炎症性疾病，以不同的抗甲状腺抗体免疫反应为特征。组织学上，以广泛淋巴细胞浸润及甲状腺上皮细胞逐渐减少并被纤维化取代为主要表现，更多出现在年轻女性中1，2。甲状腺癌是最多见的内分泌恶性肿瘤，近年来其发生率快速增加3，甲状腺乳头状癌(以下简称乳头状癌)是甲状腺癌中最多见的组织学类型，约占 90%3，4，通常乳头状癌的预后是很好的，有大于 95%的存活率并且常常对起始治疗反应良好4。桥本与乳头状癌之间的关联目前报道结果尚存在一定的争议3 5，本研究回顾性总结了具有 BAF 原癌基因 V600E 位点(B af proto oncogene，serine/threonine kinase，BAF V600E)突变检测结果，并同时有明确病理诊断结果的桥本氏甲状腺炎伴发性病例(包括伴发相关良性疾病如结节性甲状腺肿、不典型增生;伴发恶性疾病如乳头状癌)以及独立甲状腺乳头状癌之间BAF V600E 突变的情况，现报告如下。1资料与方法1.1临床资料回顾性分析昆明医科大学附属甘美医院(昆41云南医药 2023 年第 44 卷第 1 期明市第一人民医院)病理科 2018 年 3 月 2019 年1 月行 BAF V600E 突变检测的病例，共计 78 例，所有病例病理诊断均经 2 名以上病理科副主任医师复片复核。纳入标准:(1)病理诊断为桥本并伴随乳头状增生、不典型增生、滤泡性腺瘤、乳头状癌病例;(2)甲状腺乳头状癌病例(肿瘤含单灶及多灶)。具体如下:桥本伴良性病变组:21 例(包括桥本伴不典型增生、乳头状增生、滤泡性腺瘤等);桥本伴乳头状癌组:29 例;甲状腺乳头状癌组:28 例。排除标准:(1)未进行 BAF 基因检测病例;(2)未获得明确病理学诊断结果病例;(3)病理诊断组织学类型为髓样癌、滤泡癌、未分化癌等病例;(4)随访资料不完整病例。该研究已获得昆明市第一人民医院伦理委员会审批，审批号为:YLS2020 154。1.2方法BAF V600E 突变检测使用人类 BAF 基因V600E 突变检测试剂盒(荧光 PC 法):石蜡包埋病理切片，按照实验说明书进行样本处理:按照核酸提取、试剂准备、反应体系配置、加样、上机、运行 PC 反应程序，第一阶段:95 5min1 个循环;第二阶段:95 25 s、64 20 s、72 20 s 15 个循环;第三阶段:93 25 s、60 35 s、72 20 s 31 个循环;第三阶段60 时收集羟基荧光素(Carboxyfluorescein，FAM)和六氯荧光素(Hexachloro fluoresecein，HEX)信号，执行实时 PC，保存文件并分析结果。其余相关临床资料来源于患者原始病例。1.3统计方法所有数据经 SPSS26.0 数据统计软件包采用卡方检验及费希尔精确检验，P 0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1桥本、桥本伴发乳头状癌等病变病理形态学表现本研究中桥本组(包括桥本及桥本伴滤泡上皮不典型增生)、乳头状癌伴桥本、乳头状癌的常规苏 木 精 伊 红(hematoxylin eosin staining，HE)染色法镜下形态及免疫组织化学(Immuno-histochemistry，IHC)染色主要结果(见图 1)。图 1桥本、桥本伴不典型增生、桥本伴乳头状癌及乳头状癌的组织学表现A:桥本病理形态:淋巴细胞浸润，滤泡上皮嗜酸性改变(HE*20)。B:桥本伴滤泡上皮不典型增生(HE*20)。C:桥本伴滤泡上皮不典型增生:CK19(灶+)(IHC*20);D:乳头状癌伴桥本(HE*20);E:乳头状癌(HE*20);D、E:癌组织甲状腺滤泡上皮增生，呈多级乳头状分支，细胞核毛玻璃样，见核沟及核内包涵体，间质纤维化。F:乳头状癌:CK19(+)(IHC*20)。2.2桥本组，桥本伴乳头状癌组及乳头状癌组BAF V600E 突变检测结果良性桥本组 21 例，BAF V600E 突变检测阳性率0 例;恶性乳头状癌组57 例 BAF V600E 突变阳性病例23 例(伴桥本 29 例，BAF V600E 突变检测阳性 10 例，阳性占比 10/29，不伴桥本组，28例，阳性13 例，阳性占比13/28)，进行费希尔精确检验，得到 P 0.001，存在统计学差异(见表1)。51云南医药 2023 年第 44 卷第 1 期表 1良性桥本组、恶性乳头状癌组BAF V600E 突变分析 n(%)组别BAF 阴性BAF 阳性P良性桥本组21(100)0(0)0.001*恶性乳头状癌组34(59.65)23(40.35)2.3乳头状癌组与乳头状癌伴桥本组单、多灶癌发生情况比较乳头状癌组 23 例，多灶癌 10 例，多灶发生率43.47%;乳头状癌伴桥本组 27 例，多灶癌 14 例，多灶发生率 51.85%，进行卡方检验，得到 P=0.782 0.05，不存在统计学差异(见表 2)。表 2乳头状癌组与乳头状癌伴桥本组单、多灶癌比较 n(%)组别单灶多灶P乳头状癌组13(56.52)10(43.47)0.782*乳头状癌伴桥本组 13(48.15)14(51.85)注:*P 0.053讨论有报道显示在桥本中乳头状癌的高发生率、多灶性、乳头状癌形态强烈支持桥本可能是乳头状癌的癌前状态5。甲状腺的多灶癌包含多数为乳头状癌多灶发生，少数情况下也存在不同种类癌同时发生情况6，贾万优等7 报道同侧甲状腺髓样癌合并乳头状癌一例，本研究中多灶癌发生率在 2 组间差异无统计学意义(P 值为 0.782 0.05，差异无统计学意义)。报道还显示有甲状腺结节的病人中，桥本与更高比率的不确定细胞学结果及甲状腺恶性肿瘤的更高发生率相关，评价甲状腺结节是桥本中的一个重要部分8，本研究中乳头状癌组BAFV600E 突变率为 40.35%，与部分报道结果BAFV600E 突变率大于 70%9，10 相比较低，这可能与样本量相对较少有一定关系。Muzza 等6 最近进行的一项研究在大量伴或不伴甲状腺炎的乳头状癌中，ET 原癌基因(ETproto oncogene，ET 基因)重排更多见于与自身免疫相关的乳头状癌患者中，而 BAF V600E 突变仅在乳头状癌中发生的频率较高，这一结果与我们的研究相似。本研究结果显示乳头状癌组的BAF V600E 基因突变阳性检测率高于桥本伴良性病变组，差异具有显著统计学意义，说明 BAFV600E 基因突变在甲状腺乳头状癌患者中是高频事件，而在桥本伴良性病变患者中则是极低频率事件。提示 BAF V600E 基因突变的分子标记，可以作为乳头状癌早期诊断的参考指标之一，协助对桥本氏甲状腺炎不典型病变是否为恶性的诊断。参考文献 1 F agusa，P Fallahi，G Elia，et al Hashimotos thyroiditis:Epidemiology，pathogenesis，clinic and therapyJ BestPractice ec Clin Endocrinol Metab，2019(6):101367 2 DA Massimo alli，Marco 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