高效液相色谱-质谱法测定酒中甜蜜素含量的研究.pdf

!58#$!中国食品卫生杂志%&()*)+,-.(/0,11,2&3 4 )()56!7 年第 58 卷第 7 期实验技术与方法高效液相色谱 质谱法测定酒中甜蜜素含量的研究肖晶!方从容!杨大进!王紫菲!刘玉洁!国家食品安全风险评估中心北京$!66655$摘$要!目的$本文采用-=0%V*V*法对市售 76 种酒中甜蜜素进行测定%方法$采用/Z NHB Q L-=0%:VX)&%!E#59!A Ah!66 A A!9 b!A$色谱柱分离!甲醇 69!e乙酸#6 m!6$作为流动相洗脱!运用三重四极杆质量分析器定性定量分析%结果$该方法测定酒中甜蜜素具有良好的线性关系!测定方法检出限为 69 6!6!J A W!定量限为69 65!J A W!加标回收率为 b89 6ed!68e!精密度 H 0值为!69 8ed!59!e%76 种酒样品中!有!7 个样品检测出甜蜜素!含量水平为 69 65b d E!J A W%结论$该方法测定酒中甜蜜素!具有较高的灵敏度和选择性!样品测定结果表明存在乱用甜蜜素现象%关键词!甜蜜素&酒&高效液相色谱 质谱&食品添加剂中图分类号!:*5659 7$文献标识码!/$文章编号!66#E#8D56!7#67 658#67C 3 3).*-*&+2&$*#.,%,/-.-3*A*30%P D Q?6=!R=!;B F K+B CJ$1 F CJ%K CJ?K CJ$3 F CJ2 F Y B C$kF CJI B R M B$0 B H 3 HY B M%GB CF(F Q B K CF W%M Q Q M?R K?1 K K S*F R M Q L.B T U/T T M T T A M CQ$X M B Y B CJ!66655#9 0 2 )-,%:0;3,*3$/Z K A?M GM CT B MF CF W L Q B Z F W A M Q GK S PF T M S K C-=0%V*V*F TM T Q F PW B T GM S R K?SM Q M?A B CF Q B K C K RT K SB HAZ L Z W F A F Q MB C 76 B CMT F A W M TR?K A A F?UM Q T _=3 8&$2$-=0%T M F?F Q B K C F TM?R K?A M S K C F C/Z NHB Q L-=0%:VX)&%!EZ K W HA C 59!A Ah!66 A A$!9 b!A#B Q G A M Q GF CK W 69!e F Z M Q B ZF Z B S 6 m!6#F TA K PB W MGF T M _:?B W M 3 2#/2$:GMW B A B QK RSM Q M Z Q B K C K R T K SB HAZ L Z W F A F Q M F T!6!J 0 _:GM?M Z K M?B M T K R*K SB HAZ L Z W F A F Q M M?M b89 6e g!68e$F CS Q GMH 0 F T!69 8e g!59!e_/A K CJ 76 B CMT F A W M T$!7 T F A W M T M?MR K HCS Q KZ K CQ F B C T K SB HAZ L Z W F A F Q M$GK T MW M M W F T 69 65b gE!J A W _?&,/#2*&$:GMA M Q GK S B TT B A W M B Q G GB J G T M CT B Q B B Q LF CS T M W M Z Q B B Q LF CS T HB Q F PW MR K?Q GMSM Q M?A B CF Q B K C K RT K SB HAZ L Z W F A F Q MB C B CM _:GM?M T HW Q TB CSB Z F Q M S Q GM?M T M CZ MK R F PHT MK R T K SB HAZ L Z W F A F Q M _3%A&)$2%*K SB HAZ L Z W F A F Q M&B CM&-=0%V*V*&R K K S F SSB Q B M收稿日期!56!7 67!7作者简介肖晶$女$研究员$研究方向为理化检测技术和检验方法标准$)A F B W B F K Z R aT B CF _ Z K A$甜蜜素T K SB HA Z L Z W F A F Q M$A K W F T T M T#$化学名为环己基氨基磺酸钠$是食品生产中常用的合成甜味剂$被广泛应用于各类食品 4 X5bD6!56!/食品添加剂使用标准0明确规定$在蒸馏酒和发酵酒中不得使用甜蜜素$在冷冻饮品(水果罐头(腌渍的蔬菜(腐乳类(面包(糕点(饼干(复合调味料(饮料类(配制酒(果冻中最大使用量为 69 D8 J UJ&在果酱(蜜饯凉果中最大使用量为!9 6 J UJ&在凉果类(话化类(果丹饼#类食品中最大使用量为 E9 6 J UJ 甜蜜素滥用现象时有发生$如果长期过度食用甜味剂超标的食品$就会因摄入过量而对人体造成危害 因此监测和评估甜蜜素的风险十分重要 目前测定甜蜜素的方法$主要有气相色谱法)!g 5*(气相 质谱联用法)7 g#*(液相色谱法)8 g b*(液相 质谱联用法)E g*(离子色谱法)!6 g!*(光谱法)!5 g!#*和薄层扫描法)!8*本试验采用超高压液相 质谱联用技术测定市售 76 种酒白酒(黄酒和葡萄酒#中甜蜜素的含量 使用该检测方法测定酒中甜蜜素的含量更为灵敏(高效(准确!$材料与方法!9!$仪器与试剂/Z NHB Q L:V-W Q?F=M?R K?A F CZ M0%超高压液相色谱仪$j HF Q Q?K-W Q B A F:V=QV B Z?K A F T T质 谱 仪$/Z NHB Q L-=0%:VX)&%!E色谱柱59!A Ah!66 A A$!9 b!A#&分析天平$超声波清洗器$高纯水蒸馏器甜蜜素纯度 i 9 6e$迪马公司#$甲醇色谱纯#$乙 酸 优 级 纯#&实 验 室 一 级 用 水$电 导 率58 c#为 69 6!A*A 标准品溶液的制备%精密称取甜蜜素标准品$加水溶解$定容$制成浓度为!A J A W 甜蜜素标准溶液!9 5$色谱条件色谱 柱%/Z NHB Q L-=0%:VX)&%!E59!A A h高效液相色谱 质谱法测定酒中甜蜜素含量的研究!肖晶$等!588$!66 A A$!9 b!A#&流动相%甲醇 69!e乙酸6 m!6#&流速 69 58 A W A B C&柱温 76 c&样品室温 76 c&总分析时间#A B C!9 7$质谱条件负离 子 电 喷 雾 电 离 源 )*#&毛 细 管 电 压79 6 Un&锥孔电压 76 n&.10 M CT!和.10 M CT 5 分别为!79 8 和 69 8 n&源温度!56 c$脱溶剂温度 786 c&脱溶剂气流量 866 0 G 监测离子%母离子:I!bE9 6$子离子:I b9(:I 89&定量离子%:I bE9 65$结果与讨论59!$液相色谱条件的优化本试验采用色谱柱分离$考察不同比例甲醇水(乙腈 水(甲醇 酸水作为流动相梯度洗脱的效果 结果表明$甲醇 69!e乙酸6 m!6#作为流动相的分离效果较好$样品分析时间仅需#A B C59 5$质谱条件的优化对质谱参数进行优化$通过流动注射将标准溶液直接注射进入质谱仪$在正离子和负离子模式下进行全扫描$结果表明$负离子)*#模式下$各化合物的)V(F*g为最高强度峰 在选择母离子后$通过碰撞诱导解离%2#获得各化合物的碎片信息$并对碰撞能量等进行优化$当:I!bE9 6 在碰撞能量为 5E M n时$:I b9 和:I 89 碎片离子$的响 应 较 高:I!bE9 6 ib9 灵敏度高 于:I!bE i89$故选择:I!bE9 6 ib9 作为定量离子$:I!bE i 89 作为定性离子对其他质谱参数如毛细管电压(锥孔电压(源温度(脱溶剂气温度(脱溶剂气流量(.R 0 M CT!和.10 M CT 5(碰撞梯度等条件进行优化$结果如下%毛细管电压 79 6 Un$锥孔电压 76 n$.10 M CT!和.10 M CT 5分别为!79 8 和 69 8 n$源温度!56 c$脱溶剂温度786 c&脱溶剂气流量 866 0 G59 7$方法参数考察甜蜜素在 69 65!d!67!J A W 范围内具有良好线性关系$回归方程分别为 6 fg!5#9 7EC g E9 5#65#f 69 !#准确率试验添加了高(中(低不同水平$测得回收率为 b89 6ed!68e$精密度为!69 8ed!59!e 方法检出限为 69 6!6!J A W$定量限为69 65!J A W 59#$酒中甜蜜素的测定采集市售 76 种酒白酒(黄酒(葡萄酒各!6 种#进行检测 吸取样品适量$加水稀释并定容稀释倍数可根据实际样品的浓度调整#$混匀$经滤膜过滤$进行仪器分析 在被测 76 个样品中$!7 个样品检出甜蜜素$浓度水平为 69 65b d E!J A W 测定结果见表!$标准溶液和样品溶液总离子流图和提取离子色谱图见图!图!$标准溶液和样品溶液总离子流图和提取离子色谱图1 B J H?M!$:GM%2F CS Q GMM Q?F Z Q M S B K C Z G?K A F Q K J?F AK R T Q F CSF?S T F A W MF CS B CMT F A W M