第九章肠杆菌科.ppt

第九章第九章 G G-兼性厌氧杆菌兼性厌氧杆菌本章细菌本章细菌(xjn)(xjn)含有含有3 3个科及个科及2 2个关系未确定的属个关系未确定的属 肠杆菌科肠杆菌科 弧菌科弧菌科 巴氏杆菌科巴氏杆菌科第一页，共五十三页。第一节第一节 肠杆菌科（有肠杆菌科（有2828个属）个属）共同特征：共同特征：1 1G G中中等等大大小小杆杆菌菌，运运动动者者周周身身鞭鞭毛毛，无无芽芽胞胞，无无荚膜（个别荚膜（个别(gbi)(gbi)有），非抗酸染色。有），非抗酸染色。2 2需氧兼性厌氧，普通培养基上生长好。需氧兼性厌氧，普通培养基上生长好。3 3糖发酵产酸（糖发酵产酸（+）或产酸产气。）或产酸产气。4 4接触酶阳性（志贺氏菌除外）。接触酶阳性（志贺氏菌除外）。5 5硝酸盐还原试验阳性（欧文氏菌除外）硝酸盐还原试验阳性（欧文氏菌除外）6 6在含在含0.5%0.5%胆盐的培养基上生长。胆盐的培养基上生长。第二页，共五十三页。一、埃希氏菌属一、埃希氏菌属 本属有本属有5 5个种：大肠埃希氏菌，蟑螂菌，个种：大肠埃希氏菌，蟑螂菌，费格森菌，赫曼氏菌，伤口菌。费格森菌，赫曼氏菌，伤口菌。其中最重要的是大肠菌，俗称大肠杆菌。其中最重要的是大肠菌，俗称大肠杆菌。（一）形态及染色特征（一）形态及染色特征 G G中等中等(zhngdng)(zhngdng)(zhngdng)(zhngdng)大小杆菌，八根鞭毛，能大小杆菌，八根鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜但常有微荚膜。运动，无芽胞，无荚膜但常有微荚膜。第三页，共五十三页。（二）培养特性（二）培养特性1 1普普通通培培养养基基上上：生生长长良良好好，37 37 2424h h 形形成成圆圆形形，光光滑滑，隆起，湿润，半透明灰白色菌落。隆起，湿润，半透明灰白色菌落。2 2普通肉汤：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，管壁有菌环。普通肉汤：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，管壁有菌环。3 3麦康凯琼脂：红色菌落（沙门氏菌无色）麦康凯琼脂：红色菌落（沙门氏菌无色）原原理理(yunl)(yunl)，麦麦康康凯凯平平板板含含有有乳乳糖糖有有胆胆盐盐，分分解解乳乳糖糖的的细细菌菌产产酸酸使使指指示示剂剂变变红红，胆胆盐盐有有利利于于肠肠杆杆菌菌科科细细菌菌生生长长，对对其其它它菌有抑制作用。菌有抑制作用。第四页，共五十三页。大肠杆菌微菌落大肠杆菌微菌落(jnlu)照照片片 第五页，共五十三页。大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌平板大肠杆菌平板(pngbn)菌落照片菌落照片第六页，共五十三页。4 4伊伊红红美美蓝蓝琼琼脂脂：黑黑色色带带金金属属闪闪光光的的菌菌落落(jnlu)(jnlu)（沙沙门门氏氏菌菌无色）。无色）。原原理理：伊伊红红，美美兰兰均均为为指指示示剂剂，又又能能抑抑G+G+生生长长，含含有有乳乳糖糖。大大肠肠杆杆菌菌分分解解乳乳糖糖产产酸酸时时细细菌菌带带正正电电荷荷，染染上上红红色色，再再与与美美兰兰结结合合形形成成紫紫黑黑色色菌菌落落，不不分分解解乳乳糖糖不不着着色色，伊伊红红美美蓝蓝不结合，故沙门氏菌无色。不结合，故沙门氏菌无色。5 5远藤氏琼脂：带金属光泽的红色菌落。远藤氏琼脂：带金属光泽的红色菌落。第七页，共五十三页。6 6 6 6SSSSSSSS琼脂（沙门氏菌琼脂（沙门氏菌琼脂（沙门氏菌琼脂（沙门氏菌志贺氏菌分离培养基）：红色小菌志贺氏菌分离培养基）：红色小菌志贺氏菌分离培养基）：红色小菌志贺氏菌分离培养基）：红色小菌落。落。落。落。7 7 7 7三糖铁（三糖铁（三糖铁（三糖铁（TSITSITSITSI）：）：）：）：斜面黄色，底部黄色，不产生斜面黄色，底部黄色，不产生斜面黄色，底部黄色，不产生斜面黄色，底部黄色，不产生H H H H2 2 2 2S S S S。原理：三糖铁含葡萄糖、乳糖，蔗糖。其中乳糖、蔗原理：三糖铁含葡萄糖、乳糖，蔗糖。其中乳糖、蔗原理：三糖铁含葡萄糖、乳糖，蔗糖。其中乳糖、蔗原理：三糖铁含葡萄糖、乳糖，蔗糖。其中乳糖、蔗糖含量为糖含量为糖含量为糖含量为G G G G的的的的10101010倍，大肠杆菌三种糖均发酵倍，大肠杆菌三种糖均发酵倍，大肠杆菌三种糖均发酵倍，大肠杆菌三种糖均发酵(f jio)(f jio)(f jio)(f jio)产酸，产酸，产酸，产酸，足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵(f jio)(f jio)(f jio)(f jio)乳糖和乳糖和乳糖和乳糖和蔗糖，只发酵蔗糖，只发酵蔗糖，只发酵蔗糖，只发酵(f jio)(f jio)(f jio)(f jio)G G G G产酸，斜面部分先变黄，但产酸量产酸，斜面部分先变黄，但产酸量产酸，斜面部分先变黄，但产酸量产酸，斜面部分先变黄，但产酸量少且接触空气又受到氧化，另外分解含氮物质产碱，所以少且接触空气又受到氧化，另外分解含氮物质产碱，所以少且接触空气又受到氧化，另外分解含氮物质产碱，所以少且接触空气又受到氧化，另外分解含氮物质产碱，所以斜面又变为红色，而下端的酸不被氧化，一直呈黄色。斜面又变为红色，而下端的酸不被氧化，一直呈黄色。斜面又变为红色，而下端的酸不被氧化，一直呈黄色。斜面又变为红色，而下端的酸不被氧化，一直呈黄色。第八页，共五十三页。（三）生化特征（三）生化特征G G 乳乳 麦麦 蔗蔗 靛基质实验：靛基质实验：+（I I）；MR MR（甲基红试验）甲基红试验）+（M M）VPVP（乙酰甲基醇）（乙酰甲基醇）（ViVi）；）；柠檬酸基利用试验（柠檬酸基利用试验（C C）I M Vi C +I M Vi C +硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验+、H H2 2S S、尿素分解尿素分解(fnji)(fnji)三糖铁：斜面黄色三糖铁：斜面黄色/底部黄色，不产生底部黄色，不产生H H2 2S S。第九页，共五十三页。（四）抗原构造及血清型：四）抗原构造及血清型：四）抗原构造及血清型：四）抗原构造及血清型：大肠杆菌抗原主要有大肠杆菌抗原主要有大肠杆菌抗原主要有大肠杆菌抗原主要有O O O O抗原（菌体抗原，有抗原（菌体抗原，有抗原（菌体抗原，有抗原（菌体抗原，有173173173173种），种），种），种），K K K K抗原（被膜或荚膜抗原，有抗原（被膜或荚膜抗原，有抗原（被膜或荚膜抗原，有抗原（被膜或荚膜抗原，有80808080种），种），种），种），H H H H抗原（鞭毛抗抗原（鞭毛抗抗原（鞭毛抗抗原（鞭毛抗原，有原，有原，有原，有56565656种）。种）。种）。种）。1 1 1 1O O O O抗原：存在于细胞壁中，由脂多糖（抗原：存在于细胞壁中，由脂多糖（抗原：存在于细胞壁中，由脂多糖（抗原：存在于细胞壁中，由脂多糖（LPSLPSLPSLPS）中的特中的特中的特中的特异性多糖侧链组成，异性多糖侧链组成，异性多糖侧链组成，异性多糖侧链组成，O O O O抗原是抗原是抗原是抗原是S S S S型菌的一种耐热菌体抗型菌的一种耐热菌体抗型菌的一种耐热菌体抗型菌的一种耐热菌体抗原，原，原，原，121 2121 2121 2121 2h h h h不破坏不破坏不破坏不破坏(phui)(phui)(phui)(phui)其抗原性，当其抗原性，当其抗原性，当其抗原性，当S S S S型菌丢失特异型菌丢失特异型菌丢失特异型菌丢失特异性多糖侧链时，即变为性多糖侧链时，即变为性多糖侧链时，即变为性多糖侧链时，即变为R R R R型菌，型菌，型菌，型菌，O O O O抗原也随之丢失。抗原也随之丢失。抗原也随之丢失。抗原也随之丢失。第十页，共五十三页。2 2K K抗抗原原：位位于于菌菌体体表表面面的的荚荚膜膜或或被被膜膜中中，在在8080种种K K抗抗原原中中，除除K88K88，K99K99是是两两种种蛋蛋白白质质抗抗原原外外，其其余余均均为为多多糖糖。具具有有K K抗抗原原的的菌菌株株不不能能被被其其相相应应的的抗抗O O血血清清所所凝凝集集叫叫“O O不不凝凝集集性性”。因因为为K K抗抗原原可可抑抑制制活活细细菌菌在在相相应应抗抗O O血血清清中中的的凝凝集集反反应应，这这样样可可作作为为判判定定大大肠肠杆杆菌菌是是否否具具有有K K抗抗原原的的一一个个标准标准(biozhn)(biozhn)。据耐热性不同，据耐热性不同，K K抗原又分为：抗原又分为：L L、A A、B B 三型。三型。第十一页，共五十三页。L L型型K K抗抗原原：对对热热敏敏感感100 100 1 1h h破破坏坏其其抗抗原原性性，并并失失去去与与相相应应抗抗体体的的结结合合力力和和凝凝集集(nngj)(nngj)性性，位位于于被被膜膜中中，偶偶见见于于荚膜中。荚膜中。A A型型K K抗抗原原：耐耐100 100 1 1h h，但但121 121 2.52.5h h破破坏坏其其抗抗原原性性和和O O不不凝凝集集 性性，但但保保留留与与相相应应抗抗体体结结合合能能力力。位位于于荚荚膜膜中中，抗抗A A血清可使具有相应血清可使具有相应A A抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。B B型型K K抗抗原原：100 100 1 1h h 破破坏坏其其抗抗原原性性与与相相应应抗抗体体的的凝凝集集性性，但保留其与相应抗体结合力。但保留其与相应抗体结合力。第十二页，共五十三页。3 3H H抗原：不耐热，是一种蛋白质，抗原性抗原：不耐热，是一种蛋白质，抗原性好，好，8080破坏其抗破坏其抗 原原性，每一个有动力的细菌仅含一种性，每一个有动力的细菌仅含一种H H抗原，抗原，且无两相变异，无鞭毛细菌无且无两相变异，无鞭毛细菌无H H抗原。根据抗原。根据大肠杆菌抗原的鉴定大肠杆菌抗原的鉴定(jindng)(jindng)(jindng)(jindng)，可用，可用OKHOKH排排列表示其血清型即大肠杆菌抗原结构式：列表示其血清型即大肠杆菌抗原结构式：O8K23 O8K23（L L）H19H19表示该菌具有表示该菌具有O O抗原抗原8 8，L L型型K K抗原抗原2323，H H抗原为抗原为1919。第十三页，共五十三页。（五）致病性（五）致病性 大大多多数数是是在在正正常常条条件件下下不不致致病病的的共共栖栖菌菌，但但特特定定条条件件下下，如如移移位位侵侵入入肠肠外外组组织织或或器器官官(qgun)可可致致肠肠杆菌病；但也有极少数是病原性大肠杆菌。杆菌病；但也有极少数是病原性大肠杆菌。第十四页，共五十三页。据毒力因子与发病机制不同可分五类：据毒力因子与发病机制不同可分五类：（1 1）产肠毒素大肠杆菌（）产肠毒素大肠杆菌（ETECETEC）：）：引起人和引起人和幼畜腹泻（黄痢）。幼畜腹泻（黄痢）。（2 2）产类志贺毒素大肠杆菌（）产类志贺毒素大肠杆菌（SLTECSLTEC）：）：引引起猪水肿病，犊牛出血性肠炎。起猪水肿病，犊牛出血性肠炎。（3 3）肠致病性大肠杆菌（）肠致病性大肠杆菌（EPECEPEC）：）：兔腹泻，兔腹泻，猪腹泻。猪腹泻。（4 4）败血性）败血性(xuxng)(xuxng)(xuxng)(xuxng)大肠杆菌（大肠杆菌（SEPECSEPEC）：）：猪，猪，犊牛败血症，鸡的大肠杆菌败血症，气肠犊牛败血症，鸡的大肠杆菌败血症，气肠炎，脑膜炎，肠炎，肉芽肿。炎，脑膜炎，肠炎，肉芽肿。（5 5）尿道致病性大肠杆菌（）尿道致病性大肠杆菌（UPECUPEC）：）：犬、猪犬、猪的尿道感染。的尿道感染。第十五页，共五十三页。（一一）产产肠肠毒毒素素大大肠肠杆杆菌菌：由由粘粘附附表表性性菌菌毛毛和和肠肠毒毒素素两两类类毒毒力力因因子构成，具致病力与二者密切相关，缺一不可。子构成，具致病力与二者密切相关，缺一不可。1 1粘粘附附素素性性菌菌毛毛：又又叫叫粘粘附附素素或或定定居居因因子子，其其对对应应的的抗抗原原叫叫粘粘附附素抗原或定居因子抗原。已发现的粘附素有素抗原或定居因子抗原。已发现的粘附素有F4F4（K K8888）、）、F F5 5（K K9999）、）、F6F6（987P987P），），F F4141，F F4242，F F1717。它不是导致宿主腹泻的它不是导致宿主腹泻的直接致病因子，但是构成直接致病因子，但是构成ETECETEC感染的重要毒力因子。感染的重要毒力因子。ETECETEC必必须须首首先先粘粘附附于于宿宿主主的的小小肠肠上上皮皮细细胞胞，才才能能避避免免肠肠蠕蠕动动和和肠肠液液分分泌泌的的清清除除作用，并得以在肠内定居和繁殖，进而发挥致病作用。作用，并得以在肠内定居和繁殖，进而发挥致病作用。2 2 在在体体内内(t(t ni)ni)或或体体外外生生长长时时产产生生并并分分泌泌到到细细胞胞外外的的一一种种蛋蛋白白质质毒毒素素，根根据对热的耐受性不同分为：据对热的耐受性不同分为：第十六页，共五十三页。不耐热肠毒素（不耐热肠毒素（LTLT）：）：65 30min65 30min灭活，有抗原性。作用于小灭活，有抗原性。作用于小 肠和兔回肠引起肠液积蓄，引起水样腹泻。肠和兔回肠引起肠液积蓄，引起水样腹泻。耐热肠毒素（耐热肠毒素（STST）：）：100 30min100 30min不灭活，无抗原性。又可分为：不灭活，无抗原性。又可分为：STaSTa：来源猪，牛来源猪，牛STST：对人和猪、牛、羊均有肠毒性。对人和猪、牛、羊均有肠毒性。ST bST b：来源于人来源于人STST：仅在猪源仅在猪源ETECETEC中产生。中产生。ETECETEC的致病机理：通过口腔进入宿主的小肠的致病机理：通过口腔进入宿主的小肠(xiochng)(xiochng)，以其菌毛粘附素黏，以其菌毛粘附素黏附于肠粘膜上，以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用，从而定居于肠内，附于肠粘膜上，以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用，从而定居于肠内，大量繁殖。此时大量产生并释放肠毒素，对其靶细胞产生毒性作用。导致大量繁殖。此时大量产生并释放肠毒素，对其靶细胞产生毒性作用。导致肠绒毛细胞吸收功能降低，造成在肠管内水和电解质大量积蓄，引起水样肠绒毛细胞吸收功能降低，造成在肠管内水和电解质大量积蓄，引起水样腹泻和迅速脱水。腹泻和迅速脱水。第十七页，共五十三页。（二）产类志贺毒素大肠杆菌（二）产类志贺毒素大肠杆菌（SLTECSLTEC）又又称称产产VeroVero细细胞胞毒毒素素大大肠肠杆杆菌菌，系系一一类类在在体体内内或或体体外外生生长长可可产产生生(chnshng)(chnshng)类类志志贺贺毒毒素素的的病病原原性性大大肠肠杆杆菌菌。可可致致猪猪的的水水肿肿，以以头头部部，肠肠素素膜膜和和胃胃壁壁浆浆液液性性水水肿肿为为特特征征，常常伴伴有有共共济济失失调调，麻麻痹痹或或惊惊厥厥等等神神经经症症状状，发发病病率率低低但但致致死死率率高高，有有两两类毒力因子：类毒力因子：1 1粘粘附附性性菌菌毛毛：F18F18，它它有有助助于于细细菌菌在在猪猪肠肠粘粘膜膜上上皮皮细细胞胞定居和繁殖。定居和繁殖。第十八页，共五十三页。2 2 2 2致水肿病致水肿病致水肿病致水肿病2 2 2 2型类志贺毒素（型类志贺毒素（型类志贺毒素（型类志贺毒素（SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e）：）：）：）：是蛋白质性细菌毒素，用粗制是蛋白质性细菌毒素，用粗制是蛋白质性细菌毒素，用粗制是蛋白质性细菌毒素，用粗制的或纯化的的或纯化的的或纯化的的或纯化的SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e静脉或腹腔注射适龄仔猪，可复制出水肿病，静脉或腹腔注射适龄仔猪，可复制出水肿病，静脉或腹腔注射适龄仔猪，可复制出水肿病，静脉或腹腔注射适龄仔猪，可复制出水肿病，SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e是致该病发生的主要毒素因子。是致该病发生的主要毒素因子。是致该病发生的主要毒素因子。是致该病发生的主要毒素因子。SLTECSLTECSLTECSLTEC的致病机理：以的致病机理：以的致病机理：以的致病机理：以F18F18F18F18菌毛粘附于小肠上皮细胞，定居和繁殖的细菌毛粘附于小肠上皮细胞，定居和繁殖的细菌毛粘附于小肠上皮细胞，定居和繁殖的细菌毛粘附于小肠上皮细胞，定居和繁殖的细菌在肠内产生菌在肠内产生菌在肠内产生菌在肠内产生SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e并被吸收，造成细胞死亡和组织病变。另外，并被吸收，造成细胞死亡和组织病变。另外，并被吸收，造成细胞死亡和组织病变。另外，并被吸收，造成细胞死亡和组织病变。另外，SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e也是一种也是一种也是一种也是一种(y zhn)(y zhn)(y zhn)(y zhn)血管毒素，可引起血管内皮组织损伤，改血管毒素，可引起血管内皮组织损伤，改血管毒素，可引起血管内皮组织损伤，改血管毒素，可引起血管内皮组织损伤，改变血管的通透性，导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状变血管的通透性，导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状变血管的通透性，导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状变血管的通透性，导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。第十九页，共五十三页。（六）微生物诊断（六）微生物诊断1 1取材：肠系膜淋巴结，心，肝，脾，涂片染色镜检：取材：肠系膜淋巴结，心，肝，脾，涂片染色镜检：G G中等大小杆菌。中等大小杆菌。2 2分离培养：接种麦康凯平板和血平板划线分离，挑取麦康凯分离培养：接种麦康凯平板和血平板划线分离，挑取麦康凯上的红色菌落或血平板上呈上的红色菌落或血平板上呈溶血的菌落（仔猪黄痢与水肿病菌溶血的菌落（仔猪黄痢与水肿病菌株）进行以下生化实验。株）进行以下生化实验。3 3三糖铁：斜面黄色三糖铁：斜面黄色/底部黄色，有气体产生。底部黄色，有气体产生。4 4接接种种普普通通肉肉汤汤：24362436h h 均均匀匀混混浊浊，底底部部有有粘粘稠稠(zhn(zhn chu)chu)沉沉淀淀，液液面面有菌环。有菌环。5 5生化试验：生化试验：G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC +-+-6 6动物致病性试验：动物致病性试验：2424h h 肉汤培养小白鼠腹腔肉汤培养小白鼠腹腔0.2-0.40.2-0.4mlml，242448h48h小鼠死亡。小鼠死亡。第二十页，共五十三页。7 7对对ETECETEC各各种种粘粘附附性性抗抗原原鉴鉴定定(jindng)(jindng)：应应先先将将待待检检菌菌在在粘粘附附素素专专用用培培养养基基上上培培养养。培培养养物物用用已已知知的的各各种种粘粘附附素素单单因因子子血血清清或或克克隆隆抗抗体体作作玻玻板板凝凝集集，或或用用免免疫疫荧荧光光，ELISAELISA等等作作其其它它血血清清学学方方法法鉴鉴定定，也也可可用用MRHMRH及及其其抑抑制制试试验验MRHIMRHI以以及及体体外外肠肠上上皮皮细细胞胞吸吸附附与与吸吸附附抑抑制制试试验验加加以鉴定。以鉴定。第二十一页，共五十三页。8 8 8 8对对对对ETECETECETECETEC肠毒素的检测：肠毒素的检测：肠毒素的检测：肠毒素的检测：LTLTLTLT检测方法有检测方法有检测方法有检测方法有 Y1Y1Y1Y1小鼠肾上小鼠肾上小鼠肾上小鼠肾上腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞（腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞（腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞（腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞（CHOCHOCHOCHO）培养法，平板免疫培养法，平板免疫培养法，平板免疫培养法，平板免疫溶血试验溶血试验溶血试验溶血试验(shyn)(shyn)(shyn)(shyn)，夹心红细胞免疫试验，夹心红细胞免疫试验，夹心红细胞免疫试验，夹心红细胞免疫试验(shyn)(shyn)(shyn)(shyn)，夹心，夹心，夹心，夹心ELISAELISAELISAELISA，兔回肠结扎试验，兔皮肤蓝斑试验法。兔回肠结扎试验，兔皮肤蓝斑试验法。兔回肠结扎试验，兔皮肤蓝斑试验法。兔回肠结扎试验，兔皮肤蓝斑试验法。STSTSTST检检检检测方法有乳鼠胃内投服试验测方法有乳鼠胃内投服试验测方法有乳鼠胃内投服试验测方法有乳鼠胃内投服试验GM1-ELISAGM1-ELISAGM1-ELISAGM1-ELISA。9 9 9 9对对对对SLT-2eSLT-2eSLT-2eSLT-2e检测：用该毒素的粗提或纯化物作检测：用该毒素的粗提或纯化物作检测：用该毒素的粗提或纯化物作检测：用该毒素的粗提或纯化物作VeroVeroVeroVero细细细细胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以STI-2eSTI-2eSTI-2eSTI-2e血清或单抗血清或单抗血清或单抗血清或单抗作中和试验鉴定之。作中和试验鉴定之。作中和试验鉴定之。作中和试验鉴定之。第二十二页，共五十三页。（七）防治（七）防治1 1以以抗抗粘粘附附毒毒素素(d(d s)s)免免疫疫为为基基础础的的含含单单价价或或多多价价菌菌毛毛抗抗原的灭活菌苗或亚单位苗。原的灭活菌苗或亚单位苗。2 2以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或LI-BLI-B亚单位苗。亚单位苗。3 3表表达达一一种种或或两两种种粘粘附附素素的的基基因因工工程程苗苗 K K8888 K K9999双双价价基基因因工程苗。工程苗。第二十三页，共五十三页。二、沙门氏菌属二、沙门氏菌属 沙门氏菌属是肠杆菌科一个大属，有沙门氏菌属是肠杆菌科一个大属，有25002500多个血清型，寄生多个血清型，寄生(jshng)(jshng)(jshng)(jshng)于人及动物肠于人及动物肠道，引起各种疾病。道，引起各种疾病。（一）形态染色特征（一）形态染色特征 G G中等大小杆菌，除鸡白痢和鸡伤寒中等大小杆菌，除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌外，都有鞭毛，能运动，无芽胞，沙门氏菌外，都有鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜。无荚膜。第二十四页，共五十三页。（二）培养特性（二）培养特性麦康凯平板：无色菌落，麦康凯平板：无色菌落，伊红美蓝琼脂：无色（大肠杆菌伊红美蓝琼脂：无色（大肠杆菌(d chn n jn)(d chn n jn)黑色带金属光泽）黑色带金属光泽）运腾氏：无色（大肠杆菌为红色带金属闪光菌落）。运腾氏：无色（大肠杆菌为红色带金属闪光菌落）。（三）生化特性：（三）生化特性：三糖铁斜面：斜面红色三糖铁斜面：斜面红色/底部黄色（若有底部黄色（若有H H2 2S S产生，底部为黑色）产生，底部为黑色）5 5生化试验：生化试验：G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC -+-+-+-+第二十五页，共五十三页。（四）抗原及变异（四）抗原及变异（四）抗原及变异（四）抗原及变异具有具有具有具有O O O O，H H H H，K K K K和菌毛和菌毛和菌毛和菌毛4 4 4 4种抗原。种抗原。种抗原。种抗原。O O O O和和和和H H H H抗原是其主要抗原，构抗原是其主要抗原，构抗原是其主要抗原，构抗原是其主要抗原，构成成成成血清型鉴定的物质基础。血清型鉴定的物质基础。血清型鉴定的物质基础。血清型鉴定的物质基础。1 1 1 1O O O O抗原：细胞壁表面的耐热多糖抗原，抗原：细胞壁表面的耐热多糖抗原，抗原：细胞壁表面的耐热多糖抗原，抗原：细胞壁表面的耐热多糖抗原，100 2.5100 2.5100 2.5100 2.5h h h h不不不不被破坏，一个菌体可有几种被破坏，一个菌体可有几种被破坏，一个菌体可有几种被破坏，一个菌体可有几种(j zhn)(j zhn)(j zhn)(j zhn)O O O O抗原，以小写阿拉抗原，以小写阿拉抗原，以小写阿拉抗原，以小写阿拉伯数字表示。将具有共同伯数字表示。将具有共同伯数字表示。将具有共同伯数字表示。将具有共同O O O O抗原的各个血清型菌归入一群，抗原的各个血清型菌归入一群，抗原的各个血清型菌归入一群，抗原的各个血清型菌归入一群，以大写英文字母表示，如以大写英文字母表示，如以大写英文字母表示，如以大写英文字母表示，如A A A A（含有共同含有共同含有共同含有共同O2O2O2O2抗原），抗原），抗原），抗原），B B B B（O4O4O4O4），），），），C1C4C1C4C1C4C1C4，D1D3HZD1D3HZD1D3HZD1D3HZ共计共计共计共计51515151个个个个O O O O群，包括群，包括群，包括群，包括58585858种种种种O O O O抗原。抗原。抗原。抗原。第二十六页，共五十三页。2 2H H抗抗原原(kngyun)(kngyun)：蛋蛋白白质质性性质质的的鞭鞭毛毛抗抗原原(kngyun)(kngyun)，有有6363种种。H H抗抗原原可可分分为为第第1 1相相和和第第2 2相相两两种种。第第1 1相相H H抗抗原原用用小小写写英英文文字字母母表表示示，特特异异性性高高故故称称特特异异相相；第第2 2相相抗抗原原用用阿阿拉拉伯伯数数字字表表示示，为为许许多多沙沙门门氏氏菌菌所所共共有有故故称称非非特特特特异异相相。多多数数沙沙门门氏氏菌菌有有第第1 1和和第第2 2两两相相H H抗抗原原称称为为双双相相菌菌，常常发发生生位位相变异。相变异。例如将一个双相菌在平板上划线在所得菌落中，有的有例如将一个双相菌在平板上划线在所得菌落中，有的有第第1 1相相H H抗原，有的有第抗原，有的有第2 2相相H H抗原。若任意挑取抗原。若任意挑取1 1个菌落，个菌落，在培养基上多次传代，其后代又可出现部分是第在培养基上多次传代，其后代又可出现部分是第1 1相而相而另一部分是第另一部分是第2 2相的菌落，这种两个相的相的菌落，这种两个相的H H抗原可以交相抗原可以交相产生的现象称为位相变异。在鉴别对只能检出产生的现象称为位相变异。在鉴别对只能检出1 1个相，而个相，而测不出另一个相。测不出另一个相。第二十七页，共五十三页。3 3K K抗原：被膜抗原，与毒力有关，又称抗原：被膜抗原，与毒力有关，又称ViVi抗原，抗原，60 160 1h h破坏破坏其凝集性和免疫原性。有其凝集性和免疫原性。有K K抗原的菌株不能相应的抗抗原的菌株不能相应的抗O O血清凝集血清凝集。在多次传代后。在多次传代后K K抗原会丢失。抗原会丢失。用已知的沙门氏菌用已知的沙门氏菌O O和和H H单因子血清作玻板凝集试验，确定一个单因子血清作玻板凝集试验，确定一个沙门氏血清型或抗原，对有沙门氏血清型或抗原，对有K K抗原的还须用抗原的还须用K K抗血清鉴定之。抗血清鉴定之。如鼠伤寒沙门氏菌血清型为：如鼠伤寒沙门氏菌血清型为：1 1，4 4，55，1212i1i1，2 2表示该菌有表示该菌有O O抗原：抗原：1,4,5,12 1,4,5,12 四种四种(s zhn)(s zhn)；第；第1 1相相H H抗原为抗原为I I，若若转变为第转变为第2 2相相H H抗原，则是抗原，则是1 1，2 2；括号中抗原表示该抗源可能无。；括号中抗原表示该抗源可能无。第二十八页，共五十三页。（五）致病性（五）致病性1 1是一种人畜共患病，最常侵害幼、青年动物使之发生败血症是一种人畜共患病，最常侵害幼、青年动物使之发生败血症，胃肠炎及其他组织局部炎症。成年动物为散发性或局限性，发，胃肠炎及其他组织局部炎症。成年动物为散发性或局限性，发生败血症的怀孕母畜可表现流产生败血症的怀孕母畜可表现流产(li chn)(li chn)。主要传播途径为消化道。主要传播途径为消化道。据其对宿主的嗜好不同分据其对宿主的嗜好不同分3 3种类型种类型有广泛嗜性沙门氏菌：能引起人和各种动物的沙门氏菌病，如有广泛嗜性沙门氏菌：能引起人和各种动物的沙门氏菌病，如 鼠伤寒和肠炎沙门氏菌。鼠伤寒和肠炎沙门氏菌。专嗜性沙门氏菌：只对人或某种动物产生特定的疾病，如鸡白专嗜性沙门氏菌：只对人或某种动物产生特定的疾病，如鸡白 痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和炎鸡发病。痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和炎鸡发病。偏嗜性沙门氏菌：如猪霍乱和都柏林沙门氏菌分别是猪和牛羊偏嗜性沙门氏菌：如猪霍乱和都柏林沙门氏菌分别是猪和牛羊 的强适应性菌，但也能感染其它动物。的强适应性菌，但也能感染其它动物。第二十九页，共五十三页。（六）免疫性（六）免疫性体液免疫和细胞免疫都起重要作用。体液免疫和细胞免疫都起重要作用。动物注射疫苗后，母牛的初乳和奶中含有特异动物注射疫苗后，母牛的初乳和奶中含有特异(ty)(ty)抗体，抗体，阻断了细菌对肠道上皮的吸附和穿入，为后代提供抗感阻断了细菌对肠道上皮的吸附和穿入，为后代提供抗感染能力。用无毒性的沙门氏菌或热灭活的菌体免疫动物染能力。用无毒性的沙门氏菌或热灭活的菌体免疫动物后，尽管其有高滴度特异后，尽管其有高滴度特异(ty)(ty)抗体，但仍可免疫失败，抗体，但仍可免疫失败，这肯定了细胞免疫在抗沙门氏菌中具有重要作用，致敏这肯定了细胞免疫在抗沙门氏菌中具有重要作用，致敏T T细胞的转移可以提供保护卫细胞的转移可以提供保护卫.第三十页，共五十三页。（七）微生物诊断（七）微生物诊断1 1取材：肠系膜淋巴结，粪便，心血，肝，脾，涂片染色取材：肠系膜淋巴结，粪便，心血，肝，脾，涂片染色镜检可见镜检可见G G中等大小中等大小(dxio)(dxio)杆菌。杆菌。2 2分离培养：分离培养：麦康凯，伊红美蓝，麦康凯，伊红美蓝，SSSS琼脂等培养基上，挑取中等大小的无琼脂等培养基上，挑取中等大小的无色菌落，接种三糖铁培养基上。色菌落，接种三糖铁培养基上。3 3三糖铁：斜面红色，底部黄色或黑色（三糖铁：斜面红色，底部黄色或黑色（H2SH2S产生）产生）4 4生化试验生化试验 G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC -+-+-+-+第三十一页，共五十三页。5 5血清型鉴定：血清型鉴定：分分群群：取取一一张张洁洁净净玻玻片片，取取2 2满满杯杯沙沙门门氏氏菌菌多多价价O O血血清清（A-FA-F群群）至至玻玻片片上上，再再挑挑取取沙沙门门氏氏菌菌纯纯培培养养物物与与多多价价O O血血清清混混匀匀，2 2minmin内内凝凝集集者者可可初初步步确确定定(qudng)(qudng)为为沙沙门门氏氏菌菌。同同时时设设立立空空白白对对照照。再再用用代代表表A A群群（A A群群中中都都含含有有O2O2血血清清）B B（O4O4），C1C1（O7O7），C2C2（O8O8）D D（O9O9），E E（O3O3）的的O O因因子子血血清清作作同同样样玻玻板板凝凝集集反反应应，视视其其被被哪哪一一群群O O因因子子血血清清所所凝凝集集，则则确定被检菌为该群。确定被检菌为该群。定定型型：菌菌群群确确定定后后，用用该该群群所所含含的的各各种种O O因因子子血血清清与与被被检检菌菌作作玻玻板板凝凝集集反反应应，以以确确定定其其含含有有哪哪些些O O抗抗原原，同同样样用用该该群群中中H H因因子子血血清清与与被被检检菌菌作作玻玻片片凝凝集集反反应应，以以确确定定H H抗抗原原。据据O O和和H H抗抗原原查查沙沙门门氏氏菌菌抗抗原原表表可可检出为哪种沙门氏菌。检出为哪种沙门氏菌。第三十二页，共五十三页。第三十三页，共五十三页。（八）免疫防治（八）免疫防治1 1灭活疫苗或弱毒疫苗有一定作用灭活疫苗或弱毒疫苗有一定作用(zuyng)(zuyng)。2 2加强卫生检验，防止饲料和环境污染。加强卫生检验，防止饲料和环境污染。三三 耶尔森氏菌属，克雷伯菌属，变形杆菌属耶尔森氏菌属，克雷伯菌属，变形杆菌属 第三十四页，共五十三页。第二节、巴氏杆菌科第二节、巴氏杆菌科巴氏杆菌科包括：巴氏杆菌科包括：1 1巴氏杆菌属：巴氏杆菌属：（1 1）多杀性巴氏杆菌（最重要）多杀性巴氏杆菌（最重要(zhngyo)(zhngyo)一种）一种）（2 2）嗜肺巴氏杆菌，鸡巴氏杆菌，产气巴氏杆菌，鱼巴氏杆菌）嗜肺巴氏杆菌，鸡巴氏杆菌，产气巴氏杆菌，鱼巴氏杆菌 ，马巴氏杆菌，杀鱼巴氏杆菌，（，马巴氏杆菌，杀鱼巴氏杆菌，（1313种）。种）。2 2曼氏杆菌属：溶血性曼氏杆菌，（过去归于巴氏杆菌属，称曼氏杆菌属：溶血性曼氏杆菌，（过去归于巴氏杆菌属，称 为溶血性巴氏杆菌）。为溶血性巴氏杆菌）。第三十五页，共五十三页。3 3里氏杆菌属：鸭疫里氏杆菌（过去叫鸭疫巴氏杆菌）。里氏杆菌属：鸭疫里氏杆菌（过去叫鸭疫巴氏杆菌）。4 4放放线线杆杆菌菌属属：猪猪胸胸膜膜(xingm)(xingm)肺肺炎炎放放线线杆杆菌菌，林林氏氏放放线线杆杆菌菌，驹驹放放线杆菌，猪放线杆菌。线杆菌，猪放线杆菌。5 5嗜嗜血血杆杆菌菌属属：昏昏睡睡嗜嗜血血杆杆菌菌，副副猪猪嗜嗜血血杆杆菌菌，血血红红蛋蛋白白杆杆菌菌，流流感感嗜嗜血杆菌血杆菌8 8种。种。6 6泰勒菌属：马生殖道泰勒菌（过去叫马生殖道嗜血杆菌）（泰勒菌属：马生殖道泰勒菌（过去叫马生殖道嗜血杆菌）（1 1种）种）。第三十六页，共五十三页。（二）培养特性（二）培养特性需需氧氧兼兼性性厌厌氧氧，营营养养要要求求严严格格，普普通通培培养养基基上上生生长长贫贫瘠瘠，加加入入血血液液血血清生长好。清生长好。1 1血平板：圆形光滑，湿润，边缘整齐的露珠血平板：圆形光滑，湿润，边缘整齐的露珠(lzh)(lzh)状小菌落，不溶状小菌落，不溶 血。血。2 2血清肉汤：开始清度混浊，血清肉汤：开始清度混浊，4646天后管底出现粘稠沉淀，表天后管底出现粘稠沉淀，表 面有菌环。面有菌环。3 3麦康凯平板：不生长。麦康凯平板：不生长。第三十七页，共五十三页。4 4 4 4血清琼脂：菌落血清琼脂：菌落血清琼脂：菌落血清琼脂：菌落(jnlu)(jnlu)(jnlu)(jnlu)在在在在45454545折光下观察，新分离的强折光下观察，新分离的强折光下观察，新分离的强折光下观察，新分离的强毒株可见到荧光，据有无荧光及荧光色彩可分为三型：毒株可见到荧光，据有无荧光及荧光色彩可分为三型：毒株可见到荧光，据有无荧光及荧光色彩可分为三型：毒株可见到荧光，据有无荧光及荧光色彩可分为三型：FgFgFgFg型：菌落小，蓝绿色带金光，边缘有狭窄的红黄光带，型：菌落小，蓝绿色带金光，边缘有狭窄的红黄光带，型：菌落小，蓝绿色带金光，边缘有狭窄的红黄光带，型：菌落小，蓝绿色带金光，边缘有狭窄的红黄光带，对牛羊猪为强毒菌，对鸡等禽类毒力弱。对牛羊猪为强毒菌，对鸡等禽类毒力弱。对牛羊猪为强毒菌，对鸡等禽类毒力弱。对牛羊猪为强毒菌，对鸡等禽类毒力弱。FoFoFoFo型：菌落大，桔红色带金光，边缘有乳白色光带，对型：菌落大，桔红色带金光，边缘有乳白色光带，对型：菌落大，桔红色带金光，边缘有乳白色光带，对型：菌落大，桔红色带金光，边缘有乳白色光带，对鸡兔为强毒菌，对猪，牛，羊毒力弱。鸡兔为强毒菌，对猪，牛，羊毒力弱。鸡兔为强毒菌，对猪，牛，羊毒力弱。鸡兔为强毒菌，对猪，牛，羊毒力弱。NfNfNfNf型：无荧光，为型：无荧光，为型：无荧光，为型：无荧光，为FgFgFgFg和和和和FoFoFoFo型经多次传代后毒力下降转为无型经多次传代后毒力下降转为无型经多次传代后毒力下降转为无型经多次传代后毒力下降转为无毒株毒株毒株毒株第三十八页，共五十三页。（三）生化特征（三）生化特征(tzhng)(tzhng)葡萄糖葡萄糖 果糖果糖 甘露糖甘露糖 半乳糖半乳糖 大多数甘露醇大多数甘露醇 山梨醇山梨醇 木糖木糖 +乳糖乳糖 鼠李糖鼠李糖 杨甘杨甘 菊糖菊糖 靛基质靛基质+触酶触酶+氧化酶氧化酶+VP-MR-H2S+石蕊牛乳无变化石蕊牛乳无变化第三十九页，共五十三页。（四）抗原性（四）抗原性 2 2种抗原种抗原K K抗原（荚膜抗原）有抗原（荚膜抗原）有6 6种：种：A B C D E FA B C D E F（另一种不详）。另一种不详）。O O抗原（菌体抗原）有抗原（菌体抗原）有1616种：种：116116。用用符符号号表表示示时时荚荚膜膜抗抗原原用用大大写写英英文文字字母母表表示示放放在在前前面面，菌菌体抗原