乳腺癌组织中泛素特异性蛋白...因15表达水平及其临床意义_蔡冰.pdf

安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）乳腺癌组织中泛素特异性蛋白酶18/干扰素刺激基因15表达水平及其临床意义蔡冰，尹香利，刘静作者单位：渭南市中心医院病理科，陕西 渭南714000摘要：目的 探究泛素特异性蛋白酶18（USP18）、干扰素刺激基因15（ISG15）在乳腺癌组织中的表达水平及临床意义。方法 采用Ualcan数据库分析USP18、ISG15在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达情况及二者与乳腺癌预后的关系；选取渭南市中心医院 2012 年 5 月至 2015 年 7 月诊治的 99 例乳腺癌病人癌组织、癌旁正常组织进行研究。分别检测 USP18、ISG15 mRNA及其蛋白表达情况；分析乳腺癌组织USP18、ISG15表达水平与病人临床病理特征、预后的关系；Cox回归分析乳腺癌病人预后的影响因素。结果 Ualcan数据库中乳腺癌组织USP18为18.404.17、ISG15 mRNA表达水平为168.5643.95高于正常乳腺组织（10.003.14、30.768.23）（P0.05）；乳腺癌组织USP18、ISG15 mRNA表达水平高低与乳腺癌预后无明显相关性。乳腺癌组织 USP18为 1.670.53、ISG15 mRNA 为 1.860.61及蛋白阳性表达率均高于癌旁正常组织（1.030.34、0.990.33）（P0.05）；乳腺癌组织USP18、ISG15表达水平均与淋巴结转移、乳腺癌分子亚型、肿瘤分化程度、TNM分期相关（P0.05）；乳腺癌病人癌组织中USP18表达水平与ISG15呈正相关（P0.05）；USP18阳性组、ISG15阳性组乳腺癌病人术后60个月生存率均低于USP18阴性组、ISG15阴性组（P0.05）；淋巴结转移、TNM分期、USP18、ISG15均是影响乳腺癌病人不良预后的独立危险因素（P0.05）。结论 乳腺癌病人癌组织 USP18、ISG15 表达水平均较高，两者均与乳腺癌病人预后关系密切，检测乳腺癌组织USP18、ISG15水平有助于评估乳腺癌病人预后。关键词：乳腺肿瘤；干扰素刺激基因15；泛素特异性蛋白酶18；预后Expression levels and clinical significance of USP18/ISG15 in breast cancer tissuesCAI Bing,YIN Xiangli,LIU JingAuthor Affiliation:Department of Pathology,Weinan Central Hospital,Weinan,Shaanxi 714000,ChinaAbstract：Objective To investigate the expression levels and clinical significance of ubiquitin-specific protease 18(USP18)and interferon stimulated gene 15(ISG15)in breast cancer tissues.Methods Ualcan database was used to analyze the expression of USP18 and ISG15 in normal breast tissue and breast cancer tissue and their relationship with breast cancer prognosis;the cancer tissue and normal tissue adjacent to cancer of 99 cases of breast cancer patients diagnosed and treated in Weinan Central Hospital during May 2012 to July 2015 were selected for study.The mRNA and protein expression of USP18 and ISG15 was detected,respectively;the relationship between the expression levels of USP18 and ISG15 in breast cancer tissues and clinicopathological features and prognosis was analyzed.Cox regression analysis was used to analyze the prognostic factors of breast cancer patients.Results The expression levels of USP18(18.404.17)and ISG15 mRNAs(168.5643.95)in breast cancer tissues in Ualcan database were higher than those in normal breast tissues(10.003.14),(30.768.23)(P0.05);there is no significant correlation between USP18 and ISG15 mRNA expression levels in breast cancer tissue and breast cancer prognosis.The mRNA expression levels and the positive expression rates of USP18(1.670.53)and ISG15(1.860.61)in breast cancer tissues were higher than those in normal tissues adjacent to cancer(1.030.34),(0.990.33)(P0.05);the expression levels of USP18 and ISG15 in breast cancer tissues were correlated with lymph node metastasis,breast cancer molecular subtype,tumor differentiation,and TNM staging(P0.05);there was a positive correlation between the expression level of USP18 and ISG15 in cancer tissues of breast cancer patients(P0.05);the 60-month survival rates of breast cancer patients in USP18 positive group and ISG15 positive group were significantly lower than those in USP18 negative group and ISG15 negative group(P0.05);lymph node metastasis,TNM staging,USP18,ISG15 were independent risk factors for poor prognosis of breast cancer patients(P0.05).Conclusion The expression levels of USP18 and ISG15 in breast cancer tissues of breast cancer patients are higher,which are closely related to the prognosis of breast cancer patients.Detection of USP18 and ISG15 levels in breast cancer tissues is helpful to evaluate the prognosis of breast cancer patients.Key words：Breast neoplasms;Interferon stimulated gene 15;Ubiquitin-specific protease 18;Prognosis临床医学引用本文：蔡冰，尹香利，刘静.乳腺癌组织中泛素特异性蛋白酶18/干扰素刺激基因15表达水平及其临床意义 J.安徽医药，2023，27（7）：1449-1454.DOI：10.3969/j.issn.1009-6469.2023.07.039.1449安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）乳腺癌发病率呈逐年增高趋势，对女性生存质量造成严重影响1。泛素特异性蛋白酶18（USP18）在喉鳞状细胞癌组织中呈过表达，其有助于评估喉鳞状细胞癌预后情况2；干扰素刺激基因15（interferon stimulated gene 15，ISG15）在乳腺癌组织中表达上调，其可能是诊治乳腺癌的潜在靶标3；且USP18可将ISG15从其靶向蛋白上水解出来，进而在调控细胞多种信号途径中发挥作用4。但USP18在乳腺癌病人癌组织中的表达水平与ISG15的相关性及与乳腺癌预后的关系尚未明确。基于此，本研究通过Ualcan数据库检索USP18、ISG15在乳腺癌中的表达情况及二者与乳腺癌预后的关系，并利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法、免疫组化法检测乳腺癌病人癌组织 USP18、ISG15 表达水平，旨在分析 USP18、ISG15相关性及两者与预后的相关性。1资料与方法1.1一般资料选取2012年5月至2015年7月于渭南市中心医院行根治性切除术的乳腺癌病人99例为研究对象，均为女性，年龄（49.2810.22）岁，范围为3565岁，50岁者53例，50岁者46例；肿瘤长径3 cm的癌旁正常组织），液氮罐中冻存24 h，移至80 冰箱中冻存；剩余部分组织标本放置于福尔马林中固定，用于制备石蜡标本切片。1.2.3 qRT-PCR 法 检 测 组 织 标 本 USP18、ISG15 mRNA表达水平取出“1.2.1”中冻存的标本，研碎，利用TRIzol试剂盒（无锡百泰克生物技术有限公司）提取标本总RNA，应用Revert Aid First Strand cDNA Synthesis Kit（K1622，上海恒斐生物科技有限公司）将组织标本RNA反转录成cDNA。依照Perfectstart SYBR Green qPCR master mix试剂盒（TQ2300-02，北京索莱宝科技有限公司）说明书配制反应体系，运用qRT-PCR仪（ABI7500，上海普迪生物技术有限公司）进行扩增、检测。以 2Ct法计算 USP18、ISG15 mRNA 相对表达量。USP18、ISG15均以 GAPDH 为内参，引物序列详见表1。1.2.4免疫组化法检测组织标本USP18、ISG15蛋白表达水平取石蜡标本切片（厚约4 m），利用链霉亲和素-生物素复合物法染色，参考相关试剂盒说明书进行操作，一抗分别为兔抗人USP18多克隆抗体（上海群己生物科技有限公司，批号 H00011274-B01，稀释比为1 100）、ISG15多克隆抗体（艾美捷科技有限公司，批号A71120-100，稀释比为1 100），应用二氨基联苯胺显色、苏木素复染、梯度乙醇脱水，封片，显微镜（DMi1，上海徕卡显微系统贸易有限公司）下拍照。按染色程度（A）和阳性细胞比例（B）评分乘积判定USP18、ISG15蛋白表达情况：（1）染色程度：将无色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别定义为0、1、2、3 分；（2）阳性细胞百分比：将75%分别定义为0、1、2、3分。判定结果（AB）：3分定义为阴性，以3分定义为阳性7。1.3随访对99例乳腺癌病人术后进行960个月随访，以院内复查、微信为主要随访方式，以乳腺癌病人手术次日为随访起点，2020年7月或乳腺癌病表1USP18、ISG15、GAPDH引物序列基因USP18ISG15GAPDH引物5-3正向TGGACAGACCTGCTGCCTTAAC反向CTGTCCTGCATCTTCTCCAGCA正向CTCTGAGCATCCTGGTGAGGAA反向AAGGTCAGCCAGAACAGGTCGT正向CTATAAATTGAGCCCGCAGCC反向CGCCCAATACGACCAAATCC注：USP18为泛素特异性蛋白酶 18，ISG15为干扰素刺激基因15，GAPDH为甘油醛-3-磷酸脱氢酶。1450安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）人死亡为随访终点，记录乳腺癌病人预后生存状况。1.4统计学方法运用 SPSS 25.0软件处理数据。以x s表示连续变量资料，组间比较行独立样本t检验；以例（%）表示计数资料，乳腺癌组织 USP18、ISG15表达水平与临床病理特征关系进行2检验；乳腺癌病人组织中USP18、ISG15蛋白表达情况及乳腺癌病人癌组织中USP18表达水平与ISG15相关性进行2检验；利用Kaplan-Meier曲线及log-rank检验分析乳腺癌组织USP18、ISG15表达水平与乳腺癌病人预后的关系；Cox回归分析法分析乳腺癌病人预后的影响因素。P0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1Ualcan数据库中乳腺癌组织和正常乳腺组织USP18、ISG15 mRNA表达水平比较Ualcan数据库 中，乳 腺 癌 组 织 USP18 为 18.404.17、ISG15 mRNA 表达水平为 168.5643.95，均高于正常乳腺组织（10.003.14、30.768.23，P0.001）。2.2 乳 腺 癌、癌 旁 正 常 组 织 中 USP18、ISG15 mRNA及其蛋白表达水平比较与癌旁正常组织相比，乳腺癌组织USP18、ISG15 mRNA表达水平显著升高，分别为癌旁正常组织的 1.62、1.88 倍（P0.05）。免疫组化结果显示，USP、ISG15均主要定位于细胞质，如图1所示。乳腺癌组织USP18、ISG15阳性表达率均高于癌旁正常组织，分别为癌旁正常组织的3.38、2.11倍。见表2。2.3乳腺癌组织USP18、ISG15表达水平与临床病理特征关系乳腺癌组织 USP18、ISG15 表达水平均与淋巴结转移、乳腺癌分子亚型、肿瘤分化程度、TNM分期相关（P0.05）。见表3。2.4乳腺癌病人癌组织USP18表达水平与ISG15的相关性配对2检验显示，乳腺癌病人癌组织中USP18 表 达 水 平 与 ISG15 呈 正 相 关（P0.05）。2.6癌组织USP18、ISG15表达水平与乳腺癌病人预后的关系跟踪随访 99 例乳腺癌病人 960 个月，死亡 23 例，总生存率为 76.77%。Kaplan-Meier生存分析显示，USP18阳性组乳腺癌病人平均生存时 间 为 50.61 个 月，95%CI：（46.57，54.66），短 于USP18阴性组平均生存时间为 57.56个月，95%CI：（35.05，60.06），log-rank 检验比较 USP18 阳性组与USP18阴性组生存率，差异有统计学意义（2=9.24，P=0.002）；ISG15 阳性组平均生存时间为 50.92 个月，95%CI：（47.12，54.71），短于 ISG15 阴性组平均生存时间为 57.98 个月，95%CI：（55.44，60.51），经Log-Rank检验结果显示，ISG15阳性组、阴性组生存率差异有统计学意义（2=8.97，P=0.003）。2.7Cox 回归分析乳腺癌病人预后的影响因素单因素Cox分析显示，淋巴结转移、乳腺癌分子亚型（哑变量赋值：Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、基底细胞样型分别赋值为 0、1、2、3）中HER-2过表达型、基底细胞样型、TNM分期、USP18、ISG15是影响乳腺癌病人不良预后的危险因素（P0.05），分化程度是影响乳腺癌病人预后的保护因素（P0.05）；多因素Cox分析结果显示，淋巴结转移、TNM分期、USP18、ISG15均是影响乳腺癌病人不良预后的独立危险因素（P0.05）。见表5。3讨论乳腺癌是多发于女性乳房腺上皮组织的妇科肿瘤，发病率较高，直接威胁女性生存情况8。因此，寻找与乳腺癌发病及预后有关的指标，给予合适干预，对改善女性病人生存状况有一定积极意义。USP18是泛素系统成员之一，其可介导蛋白泛素化，调控多种信号途径，影响细胞增殖、凋亡等生物学过程9-10。研究发现，USP18在结直肠癌中呈高表达，其可能通过泛素化途径调控Snail1蛋白表达，进而促进结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移，从而在结直肠癌病理发展中起促进作用11。此外，Tan等12表2乳腺癌病人99例乳腺癌组织、癌旁正常组织USP18、ISG15 mRNA及其蛋白表达水平比较组别癌旁正常组织乳腺癌组织t（2）值P值例数9999USP18 mRNA/x s1.030.341.670.5310.110.001ISG15 mRNA/x s0.990.331.860.6112.480.001USP18/例（%）阴性83（83.84）45（45.45）（31.91）0.001阳性16（16.16）54（54.55）ISG15/例（%）阴性71（71.72）40（40.40）（19.70）0.001阳性28（28.28）59（59.60）注：USP18为泛素特异性蛋白酶18，ISG15为干扰素刺激基因15。1451安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）通过基因富集分析、生物信息学分析发现USP18可能与乳腺癌病人癌细胞凋亡呈负相关、与乳腺癌病人不良预后关系密切，USP18可能通过激活有关途径，并上调表皮生长因子受体进而在乳腺癌发展中发挥重要作用。本研究显示，乳腺癌病人癌组织中USP18蛋白阳性表达率、USP18 mRNA表达水平较高，与Tan等12研究结果及Ualcan数据库检索结果相符，且乳腺癌组织 USP18 表达水平与淋巴结转移、乳腺癌分子亚型、肿瘤分化程度、TNM 分期相关，提示 USP18表达异常可能与乳腺癌分子亚型、病变进程有关，USP18可能是治疗乳腺癌的潜在靶标，测定癌组织USP18表达情况有助于临床制定较表3乳腺癌组织USP18、ISG15表达水平与临床病理特征关系/例（%）临床病理参数年龄 50岁 50岁肿瘤长径 2 cm 2 cm是否绝经 是 否淋巴结转移 无 有分化程度 低分化 中、高分化乳腺癌分子亚型 Luminal A型 HER-2过表达型 Luminal B型 基底细胞样型TNM分期 期 期例数53464851405964352574412023156633USP18阴性（n=45）26（49.06）19（41.30）22（45.83）23（45.10）16（40.00）29（49.15）38（59.38）7（20.00）6（24.00）39（52.70）26（63.41）4（20.00）13（56.52）2（13.33）37（56.06）8（24.24）阳性（n=54）27（50.94）27（58.70）26（54.17）28（54.90）24（60.00）30（50.85）26（40.62）28（80.00）19（76.00）35（47.30）15（36.59）16（80.00）10（43.48）13（86.67）29（43.94）25（75.76）2，P值0.60，0.4400.01，0.9410.81，0.36914.15，0.0016.21，0.01317.94，0.0018.98，0.003ISG15阴性（n=40）24（45.28）16（34.78）20（41.67）20（39.22）17（42.50）23（38.98）35（54.69）5（14.29）4（16.00）36（48.65）25（60.98）2（10.00）12（52.17）1（6.67）34（51.52）6（18.18）阳性（n=59）29（54.72）30（65.22）28（58.33）31（60.78）23（57.50）36（61.02）29（45.31）30（85.71）21（84.00）38（51.35）16（39.02）18（90.00）11（47.83）14（93.33）32（48.48）27（81.82）2，P值1.13，0.2880.29，0.5900.12，0.72615.34，0.0018.27，0.00423.30，0.00110.15，0.001注：USP18为泛素特异性蛋白酶18，ISG15为干扰素刺激基因15。表4乳腺癌病人癌组织中USP18表达水平与ISG15相关性/例USP18阴性阳性2，P值例数4554ISG15阴性（n=40）34642.34，0.001ISG15阳性（n=59）1148表5影响乳腺癌病人预后因素的Cox回归分析自变量淋巴结转移分化程度Luminal A型Luminal B型HER-2过表达型基底细胞样型TNM分期USP18ISG15单因素分析HR2.420.691.000.351.351.272.562.202.7895%CI（1.51，3.90）（0.54，0.84）（0.08，1.56）（1.04，1.76）（1.02，1.56）（1.55，4.23）（1.43，3.38）（1.61，4.80）P值0.0010.0010.0510.1690.0250.0160.0010.0010.001多因素分析HR2.240.911.000.371.210.552.381.992.4595%CI（1.44，3.47）（0.75，1.12）（0.02，5.14）（0.95，1.53）（0.14，2.13）（1.49，3.79）（1.35，2.94）（1.52，3.96）P值0.0010.3710.6990.4620.1230.3840.0010.0010.001注：1.USP18为泛素特异性蛋白酶18，ISG15为干扰素刺激基因15。2.“”表示乳腺癌分子亚型设置了哑变量，以Luminal A型为参照，无数据。1452安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）为精准的个体治疗方案，推测高表达USP18可能通过泛素化途径调节多种蛋白异常表达，促进乳腺癌细胞异常增殖、转移，影响其凋亡，从而促进乳腺癌病情进展13。ISG15是一种类泛素蛋白，其能通过酶级联反应修饰靶蛋白，调节蛋白活性，参与转录调控、染色体修复、应激反应、RNA 剪接、蛋白质翻译等过程14-16。研究发现，ISG15在乳腺癌细胞中表达水平显著升高，其可能参与乳腺癌发展进程，ISG15可能是乳腺癌发生转移的关键标志物17；另外，王军武等18发现ISG15在乳腺癌病人中呈高表达，ISG15可作为评估乳腺癌病人病情的潜在指标。本研究中，乳腺癌病人癌组织中 ISG15 蛋白阳性表达率、ISG15 mRNA 表达水平较高，与 Ualcan数据库检索结果一致，ISG15阳性表达率随淋巴结转移、TNM分期升高/分化程度降低而呈升高趋势，且与乳腺癌分子亚型有关，提示ISG15可能与乳腺癌病变进展及不同分子亚型乳腺癌显著相关，检测癌组织ISG15表达水平有利于判定乳腺癌分子亚型，制定有效的干预方案，究其原因，高水平ISG15可能通过修饰靶蛋白，影响有关信号通路，调节相关蛋白表达，从而影响乳腺癌病变过程19。此外，本研究显示，乳腺癌病人癌组织中 USP18 表达水平与 ISG15 呈正相关，提示USP18可能与ISG15共同影响乳腺癌发生发展，可能原因，USP18可影响ISG15水平，进而影响乳腺癌进程。进一步研究显示，USP18阳性组、ISG15阳性组乳腺癌病人术后 60个月生存率低于USP18 阴性组、ISG15 阴性组，提示癌组织 USP18、ISG15 表达水平均与乳腺癌病人不良预后关系密切，USP18、ISG15表达水平越高，乳腺癌病人预后可能越差，USP18、ISG15可辅助评估乳腺癌病人预后情况，但本研究与 Ualcan 数据库检索结果并不一致，这可能与个体差异、分组情况、随访年限有关，后期将扩大样本、延长随访年限，确定本研究的准确性。Cox分析结果显示，淋巴结发生转移、TNM分期越高、USP18、ISG15表达水平升高均可能提高乳腺癌病人发生不良预后风险，及时检测乳腺癌组织USP18、ISG15表达情况可能有利于及早评估乳腺癌病人预后状况。综上，USP18、ISG15在乳腺癌病人癌组织均表达上调，两者均与乳腺癌病人预后有关，测定癌组织USP18、ISG15 水平有利于临床判断乳腺癌病人病情、评估乳腺癌病人预后。本研究创新点在于：利用Ualcan数据库分析了USP18、ISG15在乳腺癌中的表达情况，并从mRNA水平（qRT-PCR）和蛋白水平（免疫组化）验证了USP18、ISG15在乳腺癌中的表达情况，初步分析了USP18、ISG15间的相关性，及二者与乳腺癌临床病理特征及预后的关系，为临床评估乳腺癌病人病情及预后提供参考，但存在一定局限性，后期将进一步扩大样本量分析不同分子分型中ISG15、USP18与临床特征及预后的关系。（本文图1见插图7-3）参考文献1 WAKS AG，WINER EP.Breast cancer treatment：a reviewJ.JAMA，2019，321（3）：288-300.2 朱新华，曹鹏.喉鳞状细胞癌组织中USP18、BTG3表达变化及与预后的相关性 J.山东医药，2019，59（17）：69-72.3 TECALCO-CRUZ AC，CORTS-GONZLEZ CC，CRUZ-RAMOS E，et al.Interplay between interferon-stimulated gene 15/ISGylation and interferon gamma signaling in breast cancer cellsJ.Cell Signal，2019，54（2）：91-101.4 MUSTACHIO LM，LU Y，KAWAKAMI M，et al.Evidence for the ISG15-specific deubiquitinase USP18 as an antineoplastic target J.Cancer Res，2018，78（3）：587-592.5 焦德，路炜，张学东.低氧诱导因子-1，Delta样配体4在不同乳腺癌分子亚型组织中的表达及临床意义 J.中国老年学杂志，2016，36（17）：4248-4249.6 中华人民共和国卫生部医政司.乳腺癌诊疗规范（2011年版）J.中国实用外科杂志，2011，31（10）：902-907.7 杨安，王亚明，王静，等.Kiss-1和AEG-1在胃癌中的表达及其相关性 J.标记免疫分析与临床，2019，26（1）：64-69.8 BURGMANN DM，DOBLER F，ZEDER-GSS C，et al.Breast cancer in young womenJ.MMW Fortschr Med，2019，161（14）：43-47.9 DZIAMAEK-MACIOSZCZYK P，HARANA J，STOMPR T.Versatility of USP18 in physiology and pathophysiology J.Acta Biochim Pol，2019，66（4）：389-392.10CAI X，FENG S，ZHANG J，et al.USP18 deubiquitinates and stabilizes Twist1 to promote epithelial-mesenchymal transition in glioblastoma cellsJ.Am J Cancer Res，2020，10（4）：1156-1169.11HUANG F，ZHENG C，HUANG L，et al.USP18 directly regulates Snail1 protein through ubiquitination pathway in colorectal cancer J.Cancer Cell Int，2020，20（7）：346-353.12TAN Y，ZHOU G，WANG X，et al.USP18 promotes breast cancer growth by upregulating EGFR and activating the AKT/Skp2 pathway J.Int J Oncol，2018，53（1）：371-383.13荣欣欣，黄红梅，李静佳，等.乳腺癌中泛素蛋白连接酶E3A与泛素特异性蛋白酶25的表达及其临床意义 J.实用医学杂志，2020，36（1）：27-32.14BURKS J，FLEURY A，LIVINGSTON S，et al.ISG15 pathway knockdown reverses pancreatic cancer cell transformation and decreases murine pancreatic tumor growth via downregulation of PDL-1 expressionJ.Cancer Immunol Immunother，2019，68（12）：2029-2039.15KARIRI YA，ALSALEEM M，JOSEPH C，et al.The prognostic significance of interferon-stimulated gene 15（ISG15）in invasive breast cancerJ.Breast Cancer Res Treat，2021，185（2）：293-305.1453安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Jul，27（7）16TECALCO-CRUZ AC.Molecular pathways of interferon-stimulated gene 15：implications in cancerJ.Curr Protein Pept Sci，2021，22（1）：19-28.17LI YH，BAI WJ，ZHANG LL.The overexpression of CD80 and ISG15 are associated with the progression and metastasis of breast cancer by a meta-analysis integrating three microarray datasetsJ.Pathol Oncol Res，2020，26（1）：443-452.18王军武，夏天，伍晓汀.ISG15蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义 J.西南国防医药，2016，26（9）：988-991.19彭鑫宇，刘佳妮，杨阳，等.干扰素联合顺铂介导STAT信号通路对乳腺癌细胞抗增殖作用的研究 J.实用药物与临床，2021，24（9）：782-787.（收稿日期：2022-03-23，修回日期：2022-05-06）20102021年糖尿病溃疡发病机制的研究热点与趋势分析张筱杉，程志新，王冠，季博作者单位：山东中医药大学附属医院周围血管病科，山东 济南250014通信作者：季博，男，副主任医师，研究方向为周围血管疾病，Email：基金项目：山东省中医药科技发展计划项目（2019-0200）摘要：目的 分析20102021年糖尿病溃疡（DU）发病机制的研究现状、热点及发展趋势。方法 检索20102021年Web of Science核心合集数据库发表的有关DU发病机制的文献，应用CiteSpace软件，对文献的数据进行计量和可视化分析。结果 共纳入706篇文献，20102021年DU发病机制的研究发文量整体呈增长趋势；发文量最高的国家、机构、作者分别为美国、迈阿密大学、Aristidis V；知识基础涉及负压伤口治疗、糖尿病伤口治疗、细胞机制等内容。结论 近十年来DU发病机制的研究热度呈上升趋势，伤口愈合、基因表达、生长因子为研究热点，组织修复、细胞凋亡、炎症为未来研究的趋势。关键词：糖尿病溃疡；负压伤口疗法；表皮生长因子；发病机制；CiteSpace软件；研究热点；趋势；可视化分析Research hotspots and trend analysis of the pathogenesis of diabetic ulcer from 2010 to 2021ZHANG Xiaoshan,CHENG Zhixin,WANG Guan,JI BoAuthor Affiliation:Department of Peripheral Vascular Diseases,Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan,Shandong 250014,ChinaAbstract：Objective To analyze the research status,hotspots and development trend of the pathogenesis of diabetic ulcer(DU)from 2010 to 2021.Methods The literatures on the pathogenesis of DU published in the Web of Science core collection database from 2010 to 2021 were retrieved.The CiteSpace software was used to carry out quantitative and visual analysis of the literature data.Results A total of 706 articles were included.From 2010 to 2021,the number of research papers on the pathogenesis of DU showed an overall increasing trend.The countries,institutions and authors with the highest number of papers were the United States,University of Miami,and Aristidis V.The knowledge base involved negative pressure wound therapy,diabetic wound treatment and cellular mechanism.Conclusion In the past decade,the research on the pathogenesis of DU has shown an increasi