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1．基因工程的基本操作程序有：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。正确的操作挨次是( )
A．③②④① B．②④①③
C．④①②③ D．③④①②
解析：选C。平常要熟记基因工程的“四步曲”：目的基因的猎取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。
2. 如图为表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是( )
A．氨苄青霉素抗性基因
B．启动子
C．限制酶
D．DNA连接酶
解析：选B。启动子是该表达载体所必需的，功能是启动插入基因的转录过程。氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因，但不是必需用它作标记基因。限制酶和DNA连接酶都不是表达载体所需要的。
3．下列关于图中P、Q、R、S、G的描述，正确的是( )
A．P代表的是质粒RNA，S代表的是外源DNA
B．Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用
C．G是RNA与DNA形成的重组质粒
D．G是重组质粒DNA
解析：选D。质粒是小型环状DNA分子，因此P是质粒DNA，S是外源DNA，G是质粒和外源DNA通过DNA连接酶连接而成的重组质粒；质粒和外源DNA需经过同一种限制酶切割出相同的黏性末端。
4．(2022·高考广东卷)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是(双选)( )
A．过程①需使用逆转录酶
B．过程②需使用解旋酶和PCR猎取目的基因
C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备
D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
解析：选AD。A项，过程①是通过逆转录猎取DNA，逆转录过程需要用到逆转录酶。B项，过程②指的是从cDNA文库中猎取目的基因，不需要利用PCR技术，也用不到解旋酶。C项，过程③中使用的感受态细胞要用CaCl2溶液制备，而不是用NaCl溶液制备。D项，过程④鉴定目的基因是否已经导入受体细胞，可以用标记的目的基由于探针来检测受体细胞中是否存在目的基因，即利用DNA分子杂交鉴定。
5．(2022·湖南长沙高二检测)DNA探针是利用放射性同位素等标记的特定DNA片段。当DNA探针与待测的非标记单链DNA(或RNA)按碱基挨次互补结合时，形成标记DNA—DNA(或标记DNA—RNA)的双链杂交分子，可检测杂交反应结果。用某人的胰岛素基因制成DNA探针，能与之形成杂交分子的是( )
①该人胰岛A细胞中的DNA ②该人胰岛B细胞中的mRNA ③该人胰岛A细胞中的mRNA ④该人肝细胞中的DNA
A．①③④ B．①②③
C．①②④ D．②③④
解析：选C。DNA单链能与其互补链及其转录产生的mRNA分子互补配对而形成杂交分子；人体细胞中都有胰岛素基因，但此基因只有在胰岛B细胞中才能得到表达。
6．(2022·高考新课标全国卷Ⅱ)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题：
(1)理论上，基因组文库含有生物的________基因；而cDNA文库中含有生物的________基因。
(2)若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中________出所需的耐旱基因。
(3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的______________，假如检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的________是否得到提高。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时，则可推想该耐旱基因整合到了________________________________________________________________________
(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。
解析：(1)基本组文库含有生物的全部基因，而cDNA文库中含有生物的部分基因。(2)植物甲具有极强的耐旱
性，其耐旱性与某个基因有关，若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，包含该生物的全部基因，然后再从中筛选出所需的耐旱基因。(3)若从植物甲中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，通常接受的方法是农杆菌转化法。将耐旱基因导入植物乙的体细胞后，经过植物组织培育得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测该耐旱基因是否合成了相应的蛋白质，即检测此再生植株中该基因的表达产物，假如检测结果呈阳性，说明已经合成了相应的蛋白质，这时再进行个体生物学检测，即在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的数量比为3∶1，符合基因的分别定律，说明得到的二倍体转基因耐旱植株为杂合子，因此可推想该耐旱基因只整合到了同源染色体的一条上。
答案：(1)全部 部分 (2)筛选 (3)乙 表达产物
耐旱性 (4)同源染色体的一条上
1．猎取目的基因的常用方法有：从基因文库中猎取目的基因和利用PCR技术扩增目的基因。
2．基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必需有启动子、终止子及标记基因。
3．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
4．培育转基因动物时，受体细胞一般是受精卵，目的基因的导入方法常用显微注射技术。
5．检测目的基因是否导入和转录，常用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译，常用抗原—抗体杂交技术；有的还需个体生物学水平的接种试验检测其活性。
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