1、1基因工程的基本操作程序有:使目的基因与运载体相结合;将目的基因导入受体细胞;检测目的基因的表达是否符合特定性状要求;提取目的基因。正确的操作挨次是()ABC D解析:选C。平常要熟记基因工程的“四步曲”:目的基因的猎取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。2. 如图为表达载体的模式图,若结构X是表达载体所必需的,则X最可能是()A氨苄青霉素抗性基因B启动子C限制酶DDNA连接酶解析:选B。启动子是该表达载体所必需的,功能是启动插入基因的转录过程。氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因,但不是必需用它作标记基因。限制酶和DNA连接酶都不是表达载体所需要的。3下列关于图
2、中P、Q、R、S、G的描述,正确的是()AP代表的是质粒RNA,S代表的是外源DNABQ表示限制酶的作用,R表示RNA聚合酶的作用CG是RNA与DNA形成的重组质粒DG是重组质粒DNA解析:选D。质粒是小型环状DNA分子,因此P是质粒DNA,S是外源DNA,G是质粒和外源DNA通过DNA连接酶连接而成的重组质粒;质粒和外源DNA需经过同一种限制酶切割出相同的黏性末端。4(2022高考广东卷)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,下列叙述正确的是(双选)()A过程需使用逆转录酶B过程需使用解旋酶和PCR猎取目的基因C过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D过程可利用DNA
3、分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞解析:选AD。A项,过程是通过逆转录猎取DNA,逆转录过程需要用到逆转录酶。B项,过程指的是从cDNA文库中猎取目的基因,不需要利用PCR技术,也用不到解旋酶。C项,过程中使用的感受态细胞要用CaCl2溶液制备,而不是用NaCl溶液制备。D项,过程鉴定目的基因是否已经导入受体细胞,可以用标记的目的基由于探针来检测受体细胞中是否存在目的基因,即利用DNA分子杂交鉴定。5(2022湖南长沙高二检测)DNA探针是利用放射性同位素等标记的特定DNA片段。当DNA探针与待测的非标记单链DNA(或RNA)按碱基挨次互补结合时,形成标记DNADNA(或标记DNARNA)
4、的双链杂交分子,可检测杂交反应结果。用某人的胰岛素基因制成DNA探针,能与之形成杂交分子的是()该人胰岛A细胞中的DNA该人胰岛B细胞中的mRNA该人胰岛A细胞中的mRNA该人肝细胞中的DNAA BC D解析:选C。DNA单链能与其互补链及其转录产生的mRNA分子互补配对而形成杂交分子;人体细胞中都有胰岛素基因,但此基因只有在胰岛B细胞中才能得到表达。6(2022高考新课标全国卷)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的_基因;而cDNA文库中含有生物的_
5、基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中_出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物_的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的_,假如检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推想该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。解析:(1)基本组文库含有生物的全部基因,而cDNA文库中含有生物的部分基因。(2)植物甲具有极强的耐旱
6、性,其耐旱性与某个基因有关,若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,包含该生物的全部基因,然后再从中筛选出所需的耐旱基因。(3)若从植物甲中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,通常接受的方法是农杆菌转化法。将耐旱基因导入植物乙的体细胞后,经过植物组织培育得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测该耐旱基因是否合成了相应的蛋白质,即检测此再生植株中该基因的表达产物,假如检测结果呈阳性,说明已经合成了相应的蛋白质,这时再进行个体生物学检测,即在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱和不耐旱植株
7、的数量比为31,符合基因的分别定律,说明得到的二倍体转基因耐旱植株为杂合子,因此可推想该耐旱基因只整合到了同源染色体的一条上。答案:(1)全部部分(2)筛选(3)乙表达产物耐旱性(4)同源染色体的一条上1猎取目的基因的常用方法有:从基因文库中猎取目的基因和利用PCR技术扩增目的基因。2基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必需有启动子、终止子及标记基因。3将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。4培育转基因动物时,受体细胞一般是受精卵,目的基因的导入方法常用显微注射技术。5检测目的基因是否导入和转录,常用分子杂交技术;检测目的基因是否翻译,常用抗原抗体杂交技术;有的还需个体生物学水平的接种试验检测其活性。