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1.以下为人工合成reAnti基因,转入猪成纤维细胞,培育转基因克隆猪的过程示意图,请据图回答:
(1)构建的重组质粒除了要有reAnti基因和标记基因外,还要有________和________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后,要通过DNA分子杂交技术,来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的________上。
(3)从猪中取胎儿成纤维细胞,用________处理,然后进行分散培育。培育时,将培育瓶置于含________的混合气体培育箱中进行培育。
(4)去核前的卵母细胞应培育到________期。其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合,形成重组细胞,再利用物理或化学方法刺激,使之完成细胞________,在体外培育成重组早期胚胎。
(5)在进行过程⑦操作前,应用激素对受体母猪进行________处理。
解析 图中①~⑦依次表示猎取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、去核、核移植、早期胚胎培育、胚胎移植。
答案 (1)(Anti基因的)启动子 终止子 (2)染色体DNA (3)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 95%空气加5%CO2 (4)MII中 分裂和发育 (5)同期发情
2.下图为转基因植物培育过程示意图,请据图回答问题。
(1)图中b、c阶段分别是________,该过程中需在培育基中添加________,诱导细胞的分裂和分化。
(2)在转基因过程中,Ti质粒和含目的基因的DNA片段要用________进行切割,构建的基因表达载体除了目的基因、标记基因外,还必需有________。
(3)该过程选择愈伤组织为受体细胞的缘由是________,检测转基因植株的DNA是否插入了目的基因,常用________技术。
(4)上述过程涉及到的生物工程有________,植物叶肉细胞具有全能性的缘由是________________。
解析 图示转基因植物的培育过程,主要考查相关的一些基础学问,属识记水平。
答案 (1)脱分化、再分化 植物激素 (2)同一种限制酶 启动子、终止子 (3)细胞的全能性高 DNA分子杂交 (4)基因工程、植物细胞工程 每个细胞都具有该生物的全部遗传信息
3.下图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图。请据图回答:
(1)图中A为________,在构建该结构时,Bt毒蛋白基因要插入Ti质粒的________部位。
(2)①过程是_______________________________,利用农杆菌的优点在于______________________________________________________________。
(3)③过程为________,包括________和________过程。
(4)通过________________试验,才能最终确定是否成功培育出了抗虫棉植株。
解析 基因表达载体的构建是基因工程的核心内容。质粒上插入目的基因的位置是在T-DNA片段内。农杆菌可以感染受伤的植物细胞,通过基因转化把T-DNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上。植物组织培育主要包括脱分化和再分化两个过程。要确定是否成功培育出了抗虫棉植株,需要在植物个体水平上进行抗虫接种试验,假如该植株表现出了抗虫的特性,说明培育成功了,反之,则没有成功。
答案 (1)基因表达载体 T-DNA片段
(2)将基因表达载体转移到农杆菌细胞内 农杆菌可以感染受伤的植物细胞,通过基因转化把T-DNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上
(3)植物组织培育 脱分化 再分化
(4)植物个体水平上的抗虫接种
4.我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比一般大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的养分品质。如图为培育转基因水稻过程示意图,请回答:
(1)在上述工程中,铁结合蛋白基因称为________,猎取该基因后常用________技术进行扩增。
(2)构建重组Ti质粒时,通常要用同种限制酶分别切割________和________。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用________处理农杆菌,使重组Ti质粒易于导入。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培育时,通过培育基2的筛选培育,可以获得________;培育基3与培育基2的区分是________。
(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻________。
解析 本题中培育转基因水稻的目的是获得铁含量比一般大米高的大米,因此目的基由于铁结合蛋白基因,要大量获得一般接受PCR技术进行扩增。要构建重组质粒要用同种限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒。将外植体培育成试管苗的过程要用到不同的培育基,各培育基最明显的差别在于所添加激素的比例不同,同时培育基②为选择培育基,应含有潮霉素。
答案 (1)目的基因 PCR
(2)含目的基因的DNA片段 质粒 CaCl2
(3)含有重组质粒的愈伤组织 生长素和细胞分裂素的浓度比例及是否含有潮霉素
(4)种子中铁含量
5.如图是利用现代生物技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题:
(1)图中②所示的结构名称是________。
(2)图中过程③④所示的生物技术名称分别是________、________。
(3)过程③通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的缘由除了它体积大、易操作、养分物质丰富外,还由于它________________。
(4)过程④通常用②作受体细胞的缘由是____________________________
______________________________________________________________。
(5)与一般的异体移植相比,图示方法最大的优点是________,该种基因治疗所属类型为________。
答案 (1)内细胞团(胚胎干细胞) (2)核移植技术 转基因技术(基因工程、DNA重组技术) (3)含有促进细胞核全能性表达的物质 (4)这些细胞分化程度低,全能性高,可以定向诱导分化为各类细胞 (5)没有排斥反应 体外基因治疗
6.基因工程打破了物种之间沟通的界限,为花卉育种供应了新的技术保障。下图为花卉育种的过程(字母代表相应的物质或结构,数字代表过程或方法)。
(1)花卉基因工程可细分为花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等,不同的基因工程所需要猎取的________不同,①过程需要的酶有________。
(2)②所常用的方法是________,检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,需要接受________技术。
(3)除a外基因表达载体中还必需包含的部分是____________________。
(4)由外植体培育为转基因植株的③、④过程为________,图中b代表________,该过程的理论依据是________。
答案 (1)目的基因 限制酶和DNA连接酶 (2)农杆菌转化法 DNA分子杂交 (3)标记基因、启动子、终止子
(4)脱分化和再分化 愈伤组织 植物细胞的全能性
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