2022年高三生物(人教版)一轮复习-基础课时案43-基因工程原理及技术-基础回顾.docx

基础课时案43基因工程原理及技术2022备考最新考纲1基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术()。一、基因工程的基本工具1限制性核酸内切酶(1)来源：主要从原核生物中分别纯化而来。(2)作用：识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果：产生黏性末端或平末端。2DNA连接酶(1)作用：将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。(2)类型常用类型Ecoli DNA连接酶T4 DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端和平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3.载体(1)常用载体质粒(2)其他载体：噬菌体衍生物、动植物病毒等。深度思考如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，则图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确挨次如何？提示限制性核酸内切酶能将DNA分子切割为DNA片段，符合图中；DNA聚合酶在DNA复制过程中将脱氧核苷酸连接成DNA链，符合图中；DNA连接酶能连接不同的DNA片段，符合图中；解旋酶能打开DNA双链形成DNA单链，符合图中。故正确挨次应为。二、基因工程的操作程序1.2.组成3.方法4.深度思考基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC；限制酶的识别序列和切点是GATC。请据图分析：切割目的基因时宜选择限制酶还是限制酶切割质粒呢？请说明理由。提示由题图及题干信息知，目的基因两侧分别含GGATCC序列和GATC序列，若使用酶切割，只能切断一侧，不能切断另一侧，若使用酶切割，则可同时切断两侧，从而切出目的基因，同理，质粒中也含两种酶识别位点，且两识别位点均位于标记基因部位。若使用酶切割质粒，则可同时破坏两个标记基因，使用酶切割则可保留Gene 作标记基因，故切割目的基因应选择酶，切割质粒应选择酶。