风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响.pdf

Chinese Journal of Wildlife 2024，45（2）：276-290Chinese Journal of Wildlifehttp：/风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响鲜义坤1，黄山2，3，刘张育4，5，徐亚琳2，3，黄明亚4，5，邹文勇2，3，武伟4，5，曾文2，3，钟红宇6，刘娟2，3，魏明2，3，黄润7，李果2，3，马黎民8，张贵权2，3*（1.四川省自然资源科学研究院，成都，610041；2.大熊猫国家公园珍稀动物保护生物学国家林业和草原局重点实验室，成都，611830；3.中国大熊猫保护研究中心，成都，611830；4.成都大帝汉克生物科技有限公司，成都，611130；5.四川省动物采食调控工程技术研究中心，成都，611130；6.四川农业大学动物医学院，成都，611130；7.吉林农业科技学院中药学院，吉林，132109；8.吉林农业大学动物科学技术学院，长春，130118）摘 要为了探究未成年圈养大熊猫（Ailuropoda melanoleuca）选择性摄食的风味机制，根据未成年圈养大熊猫摄食行为特点、熟悉的食物香气和喜欢的食物味道，自主研制出一种未成年圈养大熊猫的专用风味剂。经专业人员的嗅感和口感品评，该风味剂可以改善未成年圈养大熊猫所食竹叶的主要气味和味道。2022年6月2023年3月，用刺黑竹（Chimonobambusa purpurea）、斑苦竹（Pleioblastus maculatus）、金佛山方竹（Chimonobambusa utilis）和八月竹（Ch.szechuanensis）的竹叶饲喂7只（3，4）1.5岁段（1520月龄）圈养大熊猫幼仔、6只（2，4）2.5岁段（2730月龄）和6只（3，3）4.0岁段（4552月龄）圈养大熊猫亚成体。试验组竹叶喷雾风味剂，对照组竹叶不喷。试验期间，每天早饲和午饲时段各进行30 min的饲喂试验并相互交换两组竹叶所放位置。通过未成年圈养大熊猫的自由选择摄食试验及其摄食过程的录像回放，观测试验组和对照组竹叶的摄食先后顺序、最长连续摄食时间、摄食总时长、摄食竹枝数量和竹叶摄食量。结果表明：（1）风味剂可显著提升1.5岁段受试大熊猫幼仔最先摄食次数的占比；（2）风味剂可显著增加1.5岁段和2.5岁段受试未成年大熊猫摄食竹叶的最长连续摄食时间，平均增加率分别为339.32%和102.59%；（3）风味剂可显著增加1.5岁段和2.5岁段受试未成年大熊猫摄食竹叶的总时长，平均增加率分别为310.45%和129.91%；（4）风味剂可显著提高1.5岁段、2.5岁段和4.0岁段受试未成年大熊猫摄食竹枝数量，平均增食率分别为186.20%、80.87%和103.12%；（5）风味剂可显著提高1.5岁段、2.5岁段和4.0岁段受试未成年大熊猫摄食竹叶量，平均增食率分别为154.21%、118.02%和109.77%。因此，专用风味剂可以增强竹叶对未成年圈养大熊猫的诱食性，具有显著的增食竹叶效果。稿件运行过程收稿日期：2023-06-30修回日期：2023-07-26关键词：大熊猫；未成年；风味剂；竹叶；嗅感品评；口感品评；饲喂效果Key words：Giant panda（Ailuropoda melanoleuca）；Juvenile；Flavor agent；Bamboo leaf；Olfactory evaluation；Gustatory evaluation；Feeding effect中图分类号：S864.4文献标识码：A文章编号：2310-1490（2024）-02-0276-15DOI：10.12375/ysdwxb.20240206基金项目：大熊猫国际合作资金项目（林护发 2017 115号）；四川省科技计划重点研发项目（2019YFS0462）第一作者简介：鲜义坤（1963），男，研究员；主要从事珍稀濒危野生经济动物养殖研究。E-mail：*通信作者：张贵权，E-mail：鲜义坤等：风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响第2期Effect of a Flavor Agent on Bamboo Leaves Ingested by Captive Juvenile Giant PandasXIAN Yikun1，HUANG Shan2，3，LIU Zhangyu4，5，XU Yalin2，3，HUANG Mingya4，5，ZOU Wenyong2，3，WU Wei4，5，ZENG Wen2，3，ZHONG Hongyu6，LIU Juan2，3，WEI Ming2，3，HUANG Run7，LI Guo2，3，MA Limin8，ZHANG Guiquan2，3*（1.Sichuan Provincial Academy of Natural Resource Sciences，Chengdu，610041，China；2.Key Laboratory of SFGA on Conservation Biology of Rare Animals in the Giant Panda National Park，Chengdu，611830，China；3.China Conservation and Research Center for the Giant Panda，Chengdu，611830，China；4.Dadihank Biotech Corp.，Chengdu，611130，China；5.Sichuan Engineering Technology Research Center for Animal Feeding Regulation，Chengdu，611130，China；6.College of Veterinary Medicine，Sichuan Agricultural University，Chengdu，611130，China；7.School of Traditional Chinese Medicine，Jilin Agricultural Science and Technology University，Jilin，132109，China；8.College of Animal Science and Technology，Jilin Agricultural University，Changchun，130118，China）Abstract：In order to explore the flavor mechanism of selective ingestion by captive juvenile giant pandas（Ailuropoda melanoleuca），a special flavor agent was independently studied and developed for captive juvenile giant pandas，according to the ingestive behavior characteristics，familiar food aroma and favorite food taste of captive juvenile giant pandas.Through the olfactory and gustatory evaluations by professionals，the flavor agent could improve the main odors and tastes of bamboo leaves.From June 2022 to March 2023，the bamboo leaves of Chimonobambusa purpurea，Pleioblastus maculatus，Chimonobambusa utilis and Ch.szechuanensis were fed to seven about 1.5-year-old captive giant panda cubs（three males and four females），six about 2.5-year-old（two males and four females）and six about 4.0-year-old subadult captive giant pandas（three males and three females）.Only the test group s bamboo leaves were sprayed with the flavor agent，but not the control group.During each morning and mid-day feeding time，the feeding test was carried out for 30 minutes，and the placement of two different groups of bamboo leaves were swoppted.The sequences ingested the test group s bamboo leaves and control group s bamboo leaves，maximum continuous ingesting time，total ingesting time，the number of ingested bamboo branches and bamboo leaf intakes were quantified through free choice ingestion tests of the captive juvenile giant pandas and video replays of their ingestion processes.The results showed that：（1）The flavor agent could significantly increase the proportion of first ingestion times of the 1.5-year-old giant panda cubs.（2）The flavor agent could significantly increase the maximum of continuous ingesting time of the 1.5-year-old and 2.5-year-old juvenile giant pandas，and the averaged increase rate was 339.32%and 102.59%，respectively.（3）The flavor agent could significantly increase total ingesting time of bamboo leaves by 1.5-year-old and 2.5-year-old tested juvenile giant pandas，and the averaged increase rate was 310.45%and 129.91%，respectively.（4）The flavor agent significantly increased the bamboo branch number ingested by 1.5-year-old，2.5-year-old and 4.0-year-old tested juvenile giant pandas，and the averaged increase rate was 186.20%，80.87%and 103.12%，respectively.（5）The flavor agent also significantly increased the bamboo leaf intake by 1.5-year-old，2.5-year-old and 4.0-year-old tested juvenile giant pandas，and the averaged increase intake rate was 154.21%，118.02%and 109.77%，respectively.Therefore，the special flavor agent could strengthen bamboo leaf ingestion inductivity by captive juvenile giant pandas and had significant effects on increasing bamboo leaf intake.277野 生 动 物 学 报第45卷风味剂或称调味剂、诱食剂，因有调味和诱食的作用，早已在人的食品和多种家养动物的饲料中广泛应用1 6-7。动物主要通过嗅觉和味觉感知饲料发出的风味（气味和味道）信息，以抉择与自己风味偏好一致或相近的饲料摄入2。不同种类的动物，嗅觉和味觉的灵敏度有所不同，喜好的饲料香气和味道都有所差异，摄食行为模式也不尽一致，风味剂的原料组成、风味类型、起效浓度和使用方式方法等因动物种类不同而异1 152-190。大熊猫（Ailuropoda melanoleuca）属我国特有的珍稀兽类，深受全球人民的喜爱。近些年，随着养殖技术的不断创新，大熊猫的人工饲养种群数量呈连续增长态势，2018年底增至548只3；2020年底达到630只，其中在我国本土有571只，以国际合作方式在其他19个国家有59只4。哺乳期特别是哺乳后期（0.51.5岁或断奶）的大熊猫幼仔生长发育快，在人工饲养条件下流质性母乳或奶粉还原乳不能满足日益增长的营养需求，需要逐步学会摄食固态性食物，如特制窝窝头、苹果、胡萝卜、竹笋、竹叶和竹秆等，其生活环境、个体生理和心理等都会发生较大变化，如何帮助大熊猫幼仔平稳、较快地进行食物过渡和食性转换是此阶段饲养管理的工作重点5，也是值得探究的科研课题。根据未成年圈养大熊猫摄食行为的特点、熟悉的食物香气和喜欢的食物味道，在研究圈养大熊猫幼仔喜食的母乳和“盆盆奶”的风味特征与香气成分69基础上，模拟未成年圈养大熊猫喜食食物的风味特征，采用多种食品级单体风味原料，经过多次配方筛选与生产工艺流程的改进，在国内外率先自主研制出未成年圈养大熊猫专用风味剂，于2022年6月在中国大熊猫保护研究中心卧龙神树坪基地（以下简称“卧龙神树坪基地”）和2022年10月2023年3月在中国大熊猫保护研究中心都江堰基地（以下简称“都江堰基地”）进行了饲喂试验，测试了未成年圈养大熊猫专用风味剂的实际饲喂效果。1材料与方法1.1供试材料1.1.1竹种及部位选取刺黑竹（Chimonobambusa purpurea）产于四川省崇州市文井江镇，竹龄 3 年，叶龄 12 年；斑苦竹（Pleioblastus maculatus）产于四川省都江堰市蒲阳街道办原向峨乡，竹龄3年以上，叶龄12年；金佛山方竹（Chimonobambusa utilis）和八月竹（Ch.szechuanensis）均产于四川省汶川县三江镇，竹龄2年，叶龄2个月1年2个月。上述4种竹子均为人工栽培，竹叶新鲜，叶片舒展，呈嫩绿色至深绿色，均属都江堰基地和卧龙神树坪基地每次饲喂试验时的当期常喂竹种。试验时从购回的同捆竹子中挑选出新鲜、干净和枝繁叶茂的竹子顶部（包括竹秆、所有竹枝及其叶片和叶柄）作为试验用材，砍去无枝叶或枝叶较少的部分竹秆。随机分成竹子种类和根数相同、竹秆粗细和枝叶数量大致相近的对照组和试验组，分别对两组称质量，记录为喂前质量。试验组竹子在竹秆底部和中部竹节位置贴上口序纸作为标记，便于观察、识别，向试验组的竹叶喷雾风味剂，而对照组竹子的竹节不贴口序纸，竹叶也不喷风味剂。1.1.2专用风味剂专用风味剂是由多种食品级呈香和呈味原料调制而成，奶香，味甜，液态，喷雾使用。1.2受试动物受试19只未成年大熊猫圈养于卧龙神树坪基地和都江堰基地，临床健康状况良好，基本信息详见表1。日粮以竹子为主，以特制窝窝头（配合性精饲料）、胡萝卜和苹果为辅，自由采食和饮水，圈舍内随意活动，按照卧龙神树坪基地和都江堰基地既定的饲养规程进行日常饲喂和管理，在每次饲喂试验开始前先由固定的饲养员照常喂给一些规定的食物，并非在严重饥饿状态下进行饲喂试验。1.3自由选择摄食试验方法清扫（洗）试验用大熊猫圈舍的内舍，然后间隔摆放事先备好的对照组和试验组竹子，开启摄像机录像，放入受试大熊猫，关闭试验用内舍的所有出入口，全部人员离开内舍，锁门，任大熊猫自由选择摄食。试验历时30 min，结束后放出受试大熊猫，从内舍中取出受试大熊猫食后剩余的对照组和试验组竹子，分别称质量，记录为食后质量，然后观测竹枝被食枝数。试验期间在每天的早饲时段（09：0010：00）和午饲时段（14：0015：00）各进行1次试验。每次饲喂试验都要相互交换对照组和试验组竹子的摆放位置，以消除两组竹子的摆放位置对受试大熊猫摄食两组竹叶的影响。对照组或试验组竹子在试验内278鲜义坤等：风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响第2期舍里的摆放位置距受试大熊猫入口较远者即为下文中的“远处”，距入口较近者即为“近处”。“青露”和“青花”、“茅茅”和“宝元”、“青宝”和“青仔”、“满满”和“南小月”、“巧月”和“皓月”多数饲喂试验都是 2只一起进行，但有时一只幼仔或亚成体在树上休息等原因不能被唤回，也进行了单只的饲喂试验。此外，其他幼仔或亚成体因个体较大而试验内舍面积相对较小，只能进行单只试验。通过现场记录和录像回放，记录每次30 min试验过程中大熊猫最先摄食组别（对照组或试验组）的次数和连续摄食时间。专用风味剂饲喂未成年圈养大熊猫试验的地点、日期、时间和供试竹种等信息见表2。1.4竹叶风味的品评方法从选好的、即将进行饲喂试验的供试竹枝上随机多点摘取若干整片新鲜竹叶，所采样品可代表受试大熊猫当次试验所食的竹叶。竹叶样品在装有冰袋的保温箱中运输，在冰箱中-18 保存。鉴于研究人员已对大熊猫所食的斑苦竹鲜叶10、刺黑竹鲜叶和八月竹鲜叶11进行过气味品评，因此，仅以金佛山方竹鲜叶为例，研究对照组和试验组竹叶的风味差异情况。将采集的金佛山方竹叶随机分成叶片数量相同、大小相近的对照组和试验组，试验组叶片在叶柄部贴口序纸作为标记，然后向整个叶片喷雾风味剂，喷雾的方法和剂量同饲喂试验。每位专业品评小组成员单独品评，先进行嗅感气味品评，后进行口感味道品评，具体方法参见文献 6，1011。气味的相对强弱采用10分定义的标度方法计分：“0”表示“不存在的”；“2”表示“微微的”；“4”表示“轻微的”；“6”表示“明确的”；“8”表示“显著的”；“10”表示“非常显著的”1011。每个气味品评指标的最终得分结果是去掉1个最高评分和1个最低评分后的算术平均值。表1受试未成年圈养大熊猫的基本信息Tab.1 Basic information of the captive juvenile giant pandas序号No.12345678910111213141516171819呼名Name青宝 Qingbao青仔 Qingzai青露 Qinglu青花 Qinghua茅茅 Maomao宝元 Baoyuan林溪 Linxi娥眉 Emei檂檂 Nongnong漫漫 Manman 1深深 Shenshen巢天骄 Chaotianjiao顿顿 Dundun满满 Manman 2家宝 Jiabao巧月 Qiaoyue玲琅 Linglang南小月 Nanxiaoyue皓月 Haoyue性别Gender出生日期Date of birth2021-09-122021-09-122021-08-062021-08-062021-08-042021-08-042021-07-272020-09-102020-08-282020-08-272020-08-272020-08-032020-07-292018-09-192018-08-172018-08-092018-07-122018-07-102018-06-27谱系号Pedigree number1342134113301329132813271322130213011299129812921289116711551150113611351130试验期间During testing年龄段Age group1.5岁段2.5岁段4.0岁段月龄Age（month）171516202930272929455146524748是否断奶Weaning or not否否否是是否否是是是是是是是否同圈In the same pen or not是是是与茅茅和宝元同住是是是与南小月同住独居与皓月同住独居与满满同住与巧月同住279野 生 动 物 学 报第45卷1.5受试大熊猫摄食竹枝的计数方法若竹枝上的竹叶被食，可肉眼观察到叶片、叶柄和竹枝上遗留的咬切痕迹，据此可计数出受试大熊猫摄食的竹枝数。计数时只计从竹秆的箨环上直接长出的竹枝，不计从大竹枝上分出的小细枝。凡竹枝上有1个以上（含1个）叶片留有的咬切痕迹，均计为1个摄食竹枝。1.6数据处理与分析最先摄食次数的占比=最先摄食次数/同一位置所放的总次数100%。最长连续摄食时间是指圈养大熊猫幼仔或亚成体连续摄食竹叶的最长时间，包括嗅闻、摘叶、咬切、咀嚼和吞咽等一系列完整的摄食行为链，如此往复循环，其间没有游走、攀爬、休息和排便等非摄食行表2专用风味剂饲喂未成年圈养大熊猫试验的信息Tab.2 Information on a special flavor agent fed to the captive juvenile giant pandas饲养地点Feeding site都江堰基地Dujiangyan base卧龙神树坪基地Wolongshenshuping base都江堰基地Dujiangyan base呼名Name青露青花Qinglu Qinghua茅茅宝元Maomao Baoyuan青宝青仔Qingbao Qingzai林溪 Linxi漫漫 Manman 1深深 Shenshen巢天骄 Chaotianjiao顿顿 Dundun娥眉 Emei檂檂 Nongnong满满南小月Manman 2 Nanxiaoyue巧月皓月Qiaoyue Haoyue家宝 Jiabao玲琅 Linglang圈舍编号Pen No.检疫区J-02碟泉园D-08盼盼园P-03碟泉园D-08双楠园S-02双楠园S-02盼盼园P-01盼盼园P-01碟泉园D-03碟泉园D-03外环园1号馆101外环园1号馆102检疫区J-04检疫区J-01风味剂的饲喂试验 Feeding test of a special flavor agent起止日期Start and end dates2022年11月1623日2022年11月2427日2022年12月1519日2023年2月2024日2023年3月2731日2022年10月31日11月3日2022年11月47日2022年10月31日11月3日2022年11月47日2023年1月39日2023年1月39日2023年2月615日2023年2月1417日2022年6月1014日2022年6月1014日2022年11月2427日2022年11月2527日试验时间/dDuration54555444466435543饲喂竹种Fed bamboo species刺黑竹斑苦竹金佛山方竹金佛山方竹八月竹金佛山方竹八月竹斑苦竹刺黑竹斑苦竹刺黑竹八月竹金佛山方竹八月竹金佛山方竹金佛山方竹八月竹金佛山方竹八月竹八月竹八月竹斑苦竹斑苦竹饲喂方式Feeding style多数2只一起少数单独多数2只一起少数单独多数2只一起少数单独多数2只一起少数单独单独单独单独单独单独单独单独单独单独多数2只一起少数单独多数2只一起少数单独单独单独280鲜义坤等：风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响第2期为。动物对某种食物不间断地连续摄食的时间越长，可说明越喜食该食物。品评或测试指标的算术平均值=有效品评或每次测试指标所得数据之和/有效品评或测试次数。试验组测试指标的增加数（量）=试验组测试指标数据-对照组测试指标数据。试验组测试指标的增加率=试验组测试指标的增加数（量）/对照组测试指标数据100%。竹叶摄食量=竹子的喂前质量-竹子的食后质量。平均每只受试大熊猫的摄食竹叶量或摄食竹枝数=摄食竹叶量或摄食竹枝数/受试大熊猫只数。试验组和对照组竹子的食后质量均不包含竹子在30 min试验期间内自然蒸发的粗水分质量。试验组和对照组的所得数据通过 GraphPad Prism 8.0.2软件进行配对t检验，显著水平=0.05，极显著水平=0.01。2结果2.1供试金佛山方竹叶的风味品评2.1.1嗅感品评结果经专业人员对金佛山方竹整片鲜叶的嗅感品评，对照组竹叶和喷有风味剂的试验组竹叶的整体气味指标、主要香气指标和主要韵调指标品评结果见表3。整体气味指标品评结果显示，试验组竹叶气味强度和透发性的品评得分均值明显高于对照组（p0.05）。香气指标品评结果显示，奶香、青香分别在试验组和对照组竹叶中得分最高，试验组竹叶的奶香、甜气（p0.01）及油脂气（p0.05）均显著高于对照组；而对照组竹叶的青香明显强于试验组（p0.05），可能因喷有风味剂所致；对照组竹叶的新鲜感和嫩感明显强于试验组，差异分别为极显著（p0.01）和显著（p0.05）。2.1.2口感品评结果专业人员对金佛山方竹鲜叶的咀嚼口感品评结果表明：对照组竹叶具有明显的青叶味和木质感，微苦，干涩；试验组竹叶具有明显的甜味和木质感，青叶味、苦味和涩味均有所减弱，略带奶香味。2.2最先摄食的观察通过对风味剂饲喂试验中未成年圈养大熊猫自由选择最先摄食对照组或试验组竹叶的现场观察，结合饲喂试验录像回放的确认，结果见表4。通过对7只1.5岁段（1520月龄）圈养大熊猫幼仔摄食4种竹叶的共计73次饲喂试验观察，发现最先摄食喷有风味剂的试验组竹叶的次数计56次，而最先摄食未喷风味剂的对照组竹叶的次数计17次，最先摄食试验组竹叶的次数比最先摄食对照组竹叶的次数多 表3对照组和试验组金佛山方竹叶的嗅感品评结果Tab.3 Olfactory evaluation results of Chimonobambusa utilis bamboo leaves in the control and test groups指标类别Indicator type整体气味指标Overall odor indicator主要香气指标Main scent indicator主要韵调指标Main note indicator评价维度Evaluative dimension强度 Intensity愉悦度 Pleasantness透发性 Diffusibility奶香 Milky aroma青香 Green aroma甜气 Sweet smell木香 Woody aroma油脂气 Oily smell新鲜感 Freshness多汁感 Juiciness嫩感 Tenderness有效品评/次Number of effective evaluation44444444444品评得分均值Mean of evaluation scores对照组Control7.258.007.2508.753.252.750.758.251.503.75试验组Test9.258.758.508.756.506.253.254.255.252.752.50p0.016 30.057 70.015 40.000 40.037 40.005 20.181 70.027 30.005 20.079 60.015 4281野 生 动 物 学 报第45卷表4未成年圈养大熊猫最先摄食对照组或试验组竹叶的观察结果Tab.4 Results of the first ingesting of bamboo leaves by captive juvenile giant pandas in the control and test groups年龄阶段Age group1.5岁段About 1.5-year-old2.5岁段About 2.5-year-old4.0岁段About 4.0-year-old汇总统计Total statistics呼名Name青露 Qinglu青花 Qinghua茅茅 Maomao宝元 Baoyuan青宝 Qingbao青仔 Qingzai林溪 Linxi阶段统计 Stage statistics漫漫 Manman 1深深 Shenshen巢天骄 Chaotianjiao顿顿 Dundun娥眉 Emei檂檂 Nongnong阶段统计 Stage statistics满满 Manman 2南小月 Nanxiaoyue巧月 Qiaoyue皓月 Haoyue家宝 Jiabao玲琅 Linglang阶段统计 Stage statistics饲喂竹种Fed bamboo species刺黑竹斑苦竹刺黑竹斑苦竹金佛山方竹金佛山方竹八月竹斑苦竹刺黑竹斑苦竹刺黑竹八月竹金佛山方竹金佛山方竹八月竹八月竹斑苦竹试验次数Test times1088597881073444456753910109108552164对照组“近处”Control group at closer place总次数Total times343253345322222133217555542473最先摄食First ingestion次数Times103021223141212132214552521947占比（%）Ratio33.330100.00040.0033.3366.6750.0060.0043.7550.00100.0050.00100.00100.00100.0066.67100.0082.35100.00100.0040.00100.0050.0079.1764.38对照组“远处”Control group at farther place总次数Total times7453445454122224343225545452891最先摄食First ingestion次数Times010001001300000111301020039占比（%）Ratio025.0000025.000020.007.320000033.3325.0033.3313.64020.00040.000010.719.89试验组“近处”Test group at closer place总次数Total times7453445454122224343225545452891最先摄食First ingestion次数Times7353435443822224232195443452582占比（%）Ratio100.0075.00100.00100.00100.0075.00100.00100.0080.0092.68100.00100.00100.00100.00100.0066.6775.0066.6786.36100.0080.00100.0060.00100.00100.0089.2990.11试验组“远处”Test group at farther place总次数Total times343253345322222133217555542473最先摄食First ingestion次数Times2402321221810100010300302526占比（%）Ratio66.67100.000100.0060.0066.6733.3350.0040.0056.2550.00050.0000033.33017.650060.00050.0020.8335.62282鲜义坤等：风味剂对未成年圈养大熊猫摄食竹叶的影响第2期39次。由于试验内舍面积较小，大熊猫常有“就近取食”的行为习惯，并非先嗅闻、比较对照组和试验组竹叶气味后再选择性摄食，大熊猫幼仔最先摄食试验组或对照组竹叶与其所放的位置可能密切相关。若以放于“远处”的试验组竹叶被最先摄食的频次或占比来评价风味剂的诱导摄食效果较为客观、合理，因为大熊猫幼仔或亚成体进入试验内舍后，首先与“近处”的对照组竹叶相遇，然后才是“远处”的试验组竹叶。在73次试验中，放于“远处”的试验组竹叶共计32次，其中有18次是被最先摄食，在总次数中的占比为56.25%；而放于“远处”的对照组竹叶共计41次，其中仅有3次是被最先摄食，在总次数中的占比仅为7.32%。试验组和对照组的这种占比经配对t检验后，发现两组间差异极显著（p0.05），可能与就近取食的摄食行为习惯有关。通过对 6只 4.0岁段（4552月龄）圈养大熊猫亚成体摄食2种竹叶的共计52次饲喂试验观察，发现最先摄食试验组竹叶的次数计30次，而最先摄食对照组竹叶的次数计22次，最先摄食试验组竹叶的次数比最先摄食对照组竹叶的次数多8次。在52次试验中，放于“远处”的试验组竹叶共计24次，其中 5次是被最先摄食，在总次数中的占比为20.83%；而放于“远处”的对照组竹叶共计28次，其中3次是被最先摄食，在总次数中的占比仅为10.71%。虽然试验组的这种占比高于对照组，但经配对t检验后，发现两组间的差异不显著（p0.05），可能也与就近取食的摄食行为习惯有关。2.3最长连续摄食时间通过对圈养大熊猫幼仔或亚成体连续摄食对照组或试验组竹叶的最长时间观测，可得知圈养大熊猫幼仔或亚成体更喜食哪个组的竹叶，这一指标在30 min的测试历程中具有唯一性，可作为评价风味剂饲喂效果的一种重要指标。通过96次饲喂试验全程录像的回放观测，所得最长连续摄食时间数据及其统计结果见表5。由表5可知，通过对7只1.5岁段圈养大熊猫幼仔共计65次的录像回放观测，发现平均每次试验每只受试大熊猫连续摄食试验组竹叶的最长时间为900.08 s，而连续摄食对照组竹叶的最长时间为204.88 s，经配对 t 检验，两组间差异极显著（p0.01）。试验组竹叶的最长连续摄食时间均值比对照组长695.20 s，试验组竹叶的最长连续摄食时间的平均增加率达339.32%。由此可见，专用风味剂可大幅度增加1.5岁段受试大熊猫对4种竹叶的最长连续摄食时间。通过对6只2.5岁段圈养大熊猫亚成体共计31次的录像回放观测，发现平均每次试验每只受试大熊猫连续摄食试验组竹叶的最长时间为638.42 s，而连续摄食对照组竹叶的最长时间为315.13 s，经配对t检验，两组间差异极显著（p0.01）。试验组竹叶的最长连续摄食时间均值比对照组长323.29 s，试验组竹叶的最长连续摄食时间的平均增加率达102.59%。由此可见，专用风味剂可大幅度增加2.5岁段受试大熊猫对3种竹叶的最长连续摄食时间。若将上述2个年龄阶段共计96次的录像回放观测数据合并计算，发现平均每次试验每只受试大熊猫连续摄食试验组竹叶的最长时间为815.58 s，连续摄食对照组竹叶的最长时间仅为240.48 s，经配对t检验，两组间差异极显著（p0.01）。试验组竹叶的最长连续摄食时间均值比对照组长575.10 s，试验组竹叶的最长连续摄食时间的平均增加率达239.15%。结果表明专用风味剂可大幅度增加1.5岁段和2.5岁段受试大熊猫对4种竹叶的最长连续摄食时间。2.4摄食总时长动物在一定时间内有食物比选的条件下对某种食物摄食总时间越长，也可说明越喜食该食物，因此，通过对圈养大熊猫幼仔或亚成体摄食对照组和试验组竹叶总时间长短的观测，也可得知圈养大熊猫幼仔或亚成体比较喜食哪个组的竹叶。在30 min的测试历程中，除“青露”2次、“青花”1次、“茅茅”283野 生 动 物 学 报第45卷3次和“宝元”1次均只摄食试验组竹叶外，其余均间断性摄食对照组或试验组竹叶