慢加急性肝衰竭患者血清白介素-17、白介素-6及肿瘤坏死因子-α的检测分析.docx

慢加急性肝衰竭患者血清白介素-17、白介素-6及肿瘤坏死因子-的检测分析 朱立娜 唐源 黄初军摘要目的 探讨白介素-17（IL-17）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-（TNF-）在慢加急性肝衰竭（ACLF）患者中的作用。方法 选取2015年1月2018年6月在本院住院治疗的59例肝损伤患者作为对照组，59例ACLF患者作为观察组。ACLF患者根据疾病分期进一步分为早期组（20例）、中期组（20例）、晚期组（19例）3组。采用流式细胞仪方法检测所有患者的血清IL-17、IL-6及TNF-的浓度并进行比较。结果 观察组血清IL-17、IL-6及TNF-的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度组间比较，差异有统计学意义（P0.05），具有可比性。其中观察组患者根据疾病分期进一步分为早、中、晚期组。早期组（20例），男12例，女8例;年龄（49.9112.87）岁。中期组（20例），男11例，女9例;年龄（42.0210.42）岁。晚期组（19例），男10例，女9例;年龄（45.6311.52）岁。三组患者的年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义（P0.05），具有可比性。纳入标准：患者诊断符合肝衰竭诊治指南（2012年版）1、慢性乙型肝炎防治指南（2015版）4的诊断与分期标准。排除标准：伴恶性肿瘤者;合并其他严重的全身性疾病和精神病患者。所有入选患者均签署知情同意书，且本研究经我院医学伦理委员会审核批准。1.2方法所有患者于入院后抽取空腹静脉血标本，经3000 r/min离心10 min，后取血清于-80超低温冰箱内保存待检。采用流式细胞仪方法检测患者血清IL-17、IL-6，TNF-的浓度，所有流程按照说明书进行。1.3观察指标比较观察组与对照组及ACLF早、中、晚期组患者血清IL-17、IL-6，TNF-的浓度。1.4统计学方法采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数标准差（xs）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用F检验，以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1观察组与对照组患者血清IL-17、IL-6、TNF-水平的比较观察组患者血清IL-17、IL-6及TNF-的浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P0.05）（表1）。2.2 ACLF不同分期患者血清IL-17、 IL-6、TNF-水平的比较ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度组间比较，差异有统计学意义（P0.05）;晚期组的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度高于中期组及早期组，中期组的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度高于早期组，差异均有统计学意义（P0.05）（表2）。3讨论ACLF是我国主要的肝衰竭类型1，ACLF发病仍主要由感染HBV引起，其发病机制十分复杂，尚未完全明确5。有研究表明肝衰竭发生发展过程中有大量的免疫细胞、细胞因子的参与6。以往研究发现，其对肝脏的损伤主要观点为“三重打击”学说7-8，即免疫损伤、缺血缺氧和内毒素血症。而细胞因子风暴在肝衰竭发生发展过程中起到至关重要的作用，不仅参与肝衰竭的免疫损伤过程，还参与缺血缺氧损伤及内毒素血症对肝细胞的打击过程，且与肝衰竭发展过程中肝细胞坏死和预后密切相关9。研究认为原发性肝损伤发生后出现内毒素血症，激活肝脏Kupffer细胞释放大量细胞因子（如：TNF-、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17等）10-12，这些细胞因子在介导肝脏损伤的同时又进一步引起大量非特异性炎性细胞聚集于肝脏，从而对肝脏造成严重的二次损伤，同时出现了微循环障碍，即肝脏的缺血缺氧性损伤，最终导致肝衰竭。罗光成等13在ACLF患者中发现其IL-6、IL-8、TNF-浓度明显增加，与患者的预后成负相关。这些细胞因子按功能可分为促炎细胞因子（IL-2、IL-5、IL-6、TNF-、IFN-等）、抗炎细胞因子（IL-4、IL-10等）14。近年来研究新发现Th17细胞是一类辅助性CD+4T细胞亚群，它受转化生长因子（TGF-）、白细胞介素-6（IL-6）和IL-23诱导分化，分泌IL-1715-16。IL-17A被认为是Th17细胞分泌的最具代表性的细胞因子。IL-17作为重要的炎症介质，主要通过刺激靶细胞释放前炎症细胞因子，诱导分化细胞因子IL-6、TNF等，促进炎症反应，IL-17在急性肝损伤中起促进作用7，有研究发现肝脏炎症反应与IL-17成正相关17-18，IL-6和TNF-两者均是强效促炎细胞因子，肝细胞坏死程度与IL-6、TNF-密切相关，IL-6、TNF-的高表达，反应了肝衰竭严重程度和預后不良3。本研究结果显示，观察组IL-17、IL-6、TNF-水平高于对照组（P0.05），提示IL-17的作用与IL-6、TNF-相似，均属于促炎性细胞因子，且IL-17、IL-6、TNF-是ACLF发生、发展的促进因素。本研究结果还显示，在ACLF患者中，不同分期间存在统计学差异，晚期组的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度高于中期组及早期组，中期组的血清IL-17、IL-6及TNF-浓度高于早期组，差异均有统计学意义（P0.05），提示IL-17、IL-6、TNF-促炎性细胞因子与ACLF的病情程度密切相关。综上所述，IL-17、IL-6、TNF-参与ACLF的发生与发展过程，是促进ACLF肝功能恶化的因素，其浓度与ACLF的分期相关，该结果与以往研究结果一致19。因此，临床上清除ACLF患者的炎性细胞因子IL-17、IL-6、TNF-，对肝细胞功能恢复、病情缓解有很大帮助。可进一步观察IL-17、IL-6、TNF-对ACLF患者预后的影响，为ACLF提供更多的治疗方法。参考文献1中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组，中华医学会肝病学分会重型肝病与人工肝学组.肝衰竭诊治指南（2012年版）J.中华临床感染病杂志，2012，5（6）：321-327.2Arroyo V，Moreau R，Jajan R，et al.Acute-onchronic liver failure：A new syndrome that will re-classify cirrhosisJ.J Hepatol，2015，62（S1）：131-143.3刘政芳，黄伟，李芹.动态检测慢加急（亚急）性肝衰竭病人细胞因子的临床意义J.安徽医药，2017，21（2）：263-266.4中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南（2015年版）J.实用肝脏病杂志，2016， 19（3）：5-16.5刘春涛，武瑞，俞海燕，等.血浆透析滤过对慢加急性肝衰竭患者血清细胞因子水平及预后的影响J.中国现代医生，2018，56（29）：13-16.6Herkel J.Regulatory T cells in hepatic immune tolerance and autoimmune liver diseasesJ.Digest Dis，2015，3（2）：70-74.7Ye J，Livergood RS，Peng G.The role and regulation of human Th17 cells in tumor immunityJ.Am J Pathol，2013，182（1）：10-20.8汤艳丽，陈瑜，马雄，等.白介素17在脂多糖诱导小鼠急性肝损伤中的作用J.内科理论与实践，2016，11（2）：91-94.9胡铧东，刘寿荣.人工肝支持系统治疗肝衰竭的进展及其对细胞因子的影响J.中国现代医生，2016，54（24）：163-168.10Yang Q，Shi Y，He J，et al.The evolving story of macro phages in acute liver failureJ.Immunol Lett，2012，147（1-2）：1-9.11郭永紅，周云，张颖，等.慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者Th1/Th2细胞的细胞因子变化及肝功能指标的关系J.检验医学，2014，29（3）：274-278.12叶晓玲，程书权.非生物型人工肝及其联合应用的研究进展J.中华临床医师杂志（电子版），2014，8（11）：2150-2155.13罗光成，黄云丽，闫惠平，等.HBV相关慢加急肝衰竭患者血清细胞因子水平与疾病预后的关系研究J.检验医学，2014，29（1）：26-30.14Stanley AC，Lacy P.Pathways for cytokine secretionJ.Physiology，2010，25（4）：218-229.15李娜，张家祥.Th细胞亚群失衡在免疫性肝损伤中的研究进展J.安徽医科大学学报，2016，51（9）：1384-1387.16Martin JC，Baeten DL，Josien R.Emerging role of IL-17 and Th17 cells in systemic lupus erythematosusJ.Clin Immunol，2014，154（1）：1-12.17Akberova D，Kiassov AP，Abdulganieva D.Serum cytokine levels and their relation to clinical features in patients with autoimmune liver diseasesJ.J Immunol Res，2017，2017：9 829 436.18李伟伟，耿晓松，侯丽娟，等.Th17细胞及其相关因子在自身免疫性肝炎患者的表达及意义J.肝脏，2018，23（5）：407-410.19谭年花，陈斌.慢加亚急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症时Th17/Treg表达变化的实验研究J.湖南中医杂志，2019，35（3），134-138.（ -全文完-