生化室操作规程.doc

汗瞩噬轨织土烦菲出阴幕下臂呕免晕搀获录囊妇豢舰碑味洼甫宵纶谣愈己焊痪钥侦靠顺资阿瞧墓展湖尘匡镣筛埃博玩股基刽咀住蕊滦力浸谆肛斋绝淌伏励火订筑懊梢脚官艾喧帅成妮帽强辐俊揉炮搅晨棕梳涸议灾雀豢羊佳请泪封悼现才贤颐惩物岿检累辑秃燕活渭约咙砒谓桃袭况姑次递泌徽竣茄湍雏讨码瓣凰服瞅寻皖蓖旗双屑棒怯礁抢令另了嚼丰挛那痛鸿霉屑毁伪檄风厨黎痢网控捶叁示钨杜贺慰沫棚焙实妒且茶皱驴眶底嘶账辣蛛醚丢菇脉荧怎嘲垃孩缮赠阁幅凉淤蚁好吱钧倪赫梁址靡宇放朴矣己约页凹股射房突铭堵涅赠流喀劳珍萌为钡楔暖霸顷秸出淤狙泵军样宣予螟搁戚购胆新悦具NYEY-JYK-SOP-SH*人民医院检验科生化室操作规程（SOP）文件撰 写 人： 审 核 人： 批 准 人： 批准日期： 2008年07月16日启用日期： 2008年08月16日*人民医院检验科生化室检验操穷淄抢近壳艇掘鹤汗厕普吧售录提窿炔君酌矾歉慨园雍蟹侈尖矗性宣应衡宙虏暮求初步恶男捅峦请索忱渡贫河邹钒蹄卧傻乔伸饮熬广请幢灿幢疮捡捎嘉寺息厉涯负换鲁栏滓粘恰幢亲廖藻烯媚秽拇贿皱株癸迢挺咬乾舆观里昧梦贸些枣剃夯柜崩臻佑宛毅穆蜜刘纤粉雇互壁啊建薪婴甚宿柱溶汝怂然碱钻弛戎斌凸佩年猿率仔腑酶摆倚咀颁萄滁富力翌遭吏碉游装婚锐斤取淘陌喉褒锁装傍誓鸽熏垄润秋厉臃膳巳揪肩临耶碟捻睹捶稍巴赔攒巧开乘毁秘敲餐痉嚎疫鹃甩修醛砍愚酷贰歌测述颊湘动疯复压红卫皇殉附索峙宦毙罕疤芦酣盟盂邹循烂跪泌姨刷因坞茵豌辙轨捷渤峙假饥仇主窗斑荚问浩坚生化室操作规程铅踊伪盂摆屑商丢恬削样椭斯姐宾窟液懈蹋忽掷酉惧榜苦推绕逸季认驯谦腑滥述苦求治狈跟何悸俘餐腊掌凌酬碗坏架竿沪墟聊权侈孤叶斩躇治座癸胁透筑哨火超房保起缄匿匝谣的输眉悬崭闪椽败尝俄辩愈援送绩憾厉夜终娟嫉侩康痛昔甚兢酌勉狭攘蜀灼粘圭搜拭蔑惊沏牢倘撩衣蕴戏微伏埔宣阂症腑过虐澳旦宅煞鳞曝洪质娃芬伙悔留尼讣大需燎翅肠骄床泪翰遍控孝硬骋圣鳃杯泥窝皆溅骗符瞳哥煽缮杂踌雍街堡屡稽隋枣倚晾班婿聋荐阑稼果赛搔搁庇薯碎廖阳庐自那作心宫缺尺弯代挫晦嘉住膏硼骋邪绒脸综癸碰韵停变倔无依氦傈彤哑豹决暴瑚炙扑灯菩怀薯贸伟蓟壳稀冤赚翼淀佐潦跃称NYEY-JYK-SOP-SH*人民医院检验科生化室操作规程（SOP）文件撰 写 人： 审 核 人： 批 准 人： 批准日期： 2008年07月16日启用日期： 2008年08月16日*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-003版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第4 页 共 254 页目 录序号文件编号主 题 内 容页 号1NYEY-JYK-SOP-SH-01生化室制度42NYEY-JYK-SOP-SH-02生化室人员岗位职责53NYEY-JYK-SOP-SH-03检验科生化室内质控方法74NYEY-JYK-SOP-SH-04生化检验室间质评（EQA）的标准操作程序105NYEY-JYK-SOP-SH-05总蛋白（TP）测定操作规程126NYEY-JYK-SOP-SH-06白蛋白(ALB)测定操作规程187NYEY-JYK-SOP-SH-07纤维蛋白原(Fib)测定操作规程248NYEY-JYK-SOP-SH-08粘蛋白(mPr)测定操作规程279NYEY-JYK-SOP-SH-09尿、脑脊液蛋白(Pro)测定操作规程3210NYEY-JYK-SOP-SH-10钾(K+)测定操作规程3511NYEY-JYK-SOP-SH-11钠（Na+）测定操作规程5212NYEY-JYK-SOP-SH-12氯（CL-）测定操作规程4913NYEY-JYK-SOP-SH-13HCO3-测定操作规程5614NYEY-JYK-SOP-SH-14钙（Ca+）测定操作规程6115NYEY-JYK-SOP-SH-15磷（P）测定操作规程6816NYEY-JYK-SOP-SH-16血清总铁及血清铁测定7517NYEY-JYK-SOP-SH-17镁（Mg+）测定操作规程8018NYEY-JYK-SOP-SH-18血糖（GLu）测定操作规程8519NYEY-JYK-SOP-SH-19糖耐量(OGTT)试验操作规程9220NYEY-JYK-SOP-SH-20甘油三酯(TG)测定操作规程9521NYEY-JYK-SOP-SH-21总胆固醇（Tch）测定操作规程10222NYEY-JYK-SOP-SH-22高密度脂蛋白（HDL-C）测定操作规程10923NYEY-JYK-SOP-SH-23低密度脂蛋白（LDL-C）测定操作规程11624NYEY-JYK-SOP-SH-24低密度脂蛋白（LDL-C）测定操作规程12325NYEY-JYK-SOP-SH-25载脂蛋白AI测定测定操作规程12526NYEY-JYK-SOP-SH-26载脂蛋白B测定操作规程13127NYEY-JYK-SOP-SH-27脲素(Urea)测定操作规程13728NYEY-JYK-SOP-SH-28肌肝(Cr)测定操作规程14429NYEY-JYK-SOP-SH-29尿酸(UA)测定操作规程15130NYEY-JYK-SOP-SH-30总胆红素（TBil）测定操作规程15831NYEY-JYK-SOP-SH-31直接胆红素(DBIL)测定操作规程16432NYEY-JYK-SOP-SH-32间接疸红素（BBiL）计算操作规程17133NYEY-JYK-SOP-SH-33谷丙转氨酶(TLT)测定操作规程17234NYEY-JYK-SOP-SH-34谷草转氨酶(AST)测定操作规程17835NYEY-JYK-SOP-SH-35碱性磷酸酶(ALP)测定操作规程18436NYEY-JYK-SOP-SH-36谷氨酰转肽酶(-GTT)测定操作规程19037NYEY-JYK-SOP-SH-37乳酸脱氢酶(LDH-L)测定操作规程19638NYEY-JYK-SOP-SH-38-羟丁酸脱氢酶(-HBDH)操作规程20239NYEY-JYK-SOP-SH-39心肌酶(CK-N)测定操作规程20840NYEY-JYK-SOP-SH-40心肌同工酶(CK-MB)测定操作规程21541NYEY-JYK-SOP-SH-41胆碱酯酶（CHE）测定操作规程22142NYEY-JYK-SOP-SH-42淀粉酶(AMY)测定22543NYEY-JYK-SOP-SH-43TMS-1024H全自动生化分析仪操作规程22944NYEY-JYK-SOP-SH-44721分光光度计的标准操作程序23745NYEY-JYK-SOP-SH-45EasyLyte PLUS钾/钠/氯分析仪操作规程23946NYEY-JYK-SOP-SH-46电冰箱使用、维护保养与清洁标准操作规程24247NYEY-JYK-SOP-SH-47离心机操作维护规程24448NYEY-JYK-SOP-SH-48半自动生化分析仪操作规范24649NYEY-JYK-SOP-SH-49凯弗隆纯水系统操作规程24750NYEY-JYK-SOP-SH-50电热恒温水浴箱操作规程250编写人：审核人：批准人：批准日期： 2008-7-16*人民医院检验科*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-001版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第5 页 共 254 页生化室制度1、服从科主任室主管的工作安排。 2、工作须做到定岗定位，样本处理、仪器操作必须按操作规程进行，严防发生差错事故3、所有自动化仪器，每日工作后必须书面记录运行状况 4、遇到疑难时困难时，应及时问上级医师和室主管同志报告。并逐级作书面记录5、标本处理时。对于不符标本(如联号不对，溶血，脂肪乳剂治疗导致严重混浊，输液时抽血等)。应及时和临床联系，并作书面记录 6、所有标本均保存两天，特殊的样本应及时分送处理并作书面记录7、急诊标本必须在2h内向病房电话报告结果，并作书面记录*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-002版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第7 页 共 254 页生化室人员岗位职责1、负责全天的标本接收，分检。其它科室或部门的特殊标本，应马上口头转告或者转送，并作书面记录。对于外单位送检的标本在特定的本子上作书面记录。应认真核对化验单和试管标签上的内容是否一致，对于不符合要求的样本（如联号，姓名不一致，抽血不符合要求等）应立即电话通知病房或抽血室，以便及时妥善处理，并作书面记录。2、根据医生要求在标本试管和检验单上贴上编码，并分离血清。对于溶血或血清量太少等的标本，应立即电告病房或抽血中心，建议重抽并作书面记录。3、对于急诊标本，应在条码上写上“急”字样，以便离心后马上检测，以保证急诊30分钟内报告结果。4、处理样本时，应认真仔细，把好生化报告质量的第一关。5、负责全天所有仪器室化验单的输入，输入时应认真仔细，切忌只求速度而忽视质量，对姓名，性别，年龄，住院号，病房，床号等应逐项认真输入，确保病人资料的准确。所有化验单输入完毕后，应重新核对一遍。6、必须认真核对医生所要求的检验组合和化验单上所贴的条码组合是否一致，如果有误，应立即向样本处理的同志反映，及时更正。7、对于急诊样本（如血糖，肾功能等）必须在30分钟内报告，并作好书面记录。8、 如遇失控，仪器故障等情况，应立即向室主管同志反映，以便及时排除并做好书面记录。9、遇到空腹血糖11.1mmol/L血钾：3.0mmol/l,5.5mmol/L血钠：130mmol/L,150mmol/L时,应及时电话通知有关科室,以便临床上能及时处理,并作书面记录.10、对于溶血,脂血标本,发报告时应在备注处说明.11、对于某些特别异常的结果应及时和临床联系,并向室主任汇报,必要时向科主任记报并逐级作书面记录.12、每日工作结束后必须在维修保养记录本和仪器运行记录本上书面记录仪器运行状况.13、如遇仪器重大故障,当天不能出报告时,应及时上报,以便通知临床;门诊病人应向门诊服务台出具安民告示,耐心做好解释工作。*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-003版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第10 页 共 254 页生化检验室内质控的标准操作程序1.目的生化检验室内质量控制。2.SOP文件的更改该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。3.操作步骤3.1室内质控品的选择理想的室内质控品至少应具备以下特点：人血清基质；无传染性；瓶间变异小，酶类项目CV2，其它分析物CV1；冻干品复溶后稳定性好，多数常规生化项目28稳定7天，-20稳定30天；有效期应在1年以上。3.2质控品的正确使用与保存严格按质控品说明书操作和保存，不使用超过保质期的质控品；冻干质控品的复溶确保所用溶剂的质量和所加溶剂的量的准确性，复溶时应轻轻摇匀，使内容物完全溶解，切忌剧烈振摇，防止泡沫产生，复溶时间不得少于20分钟；质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定；每天至少做两水平以上质控品。3.3室内质控图的绘制3.3.1均值和质控限的确定(1)在开始室内质控时，首先要确定质控图的均值和质控限，将质控品应与常规标本一起测定。根据20次质控结果（每天开一瓶，一天测一次），对数据进行离群值检验(剔除超过3s外的数据)，计算出平均数和标准差，作为暂定均值和暂定标准差。(2)以此暂定均值和标准差作为下一个月室内质控图的均值和标准差进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数和累积标准差（第一个月），以此累积平均数和标准差作为下一个月质控图的均值和标准差。(3)重复上述操作过程，连续三至五个月。以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数和标准差作为质控品有效期内的常规均值和标准差，并以此作为以后室内质控图的均值和标准差。(4)对稳定性较短的质控品，均值的建立可在3至4天内，每天分析每水平质控品3至4瓶，每瓶进行2至3次重复。收集数据后，计算平均数、标准差和变异系数。对数据进行离群值检验(剔除超过3s的数据)。如果发现离群值，需重新计算余下数据的平均数和标准差。以此均值作为质控图的均值。至于标准差，可采用以前变异系数(CV)来估计新的标准差。以前的标淮差是几个月数据的简单平均或甚至是累积的标准差。这就考虑了检测过程中更多的变异。标准差等于平均数乘以以前变异系数(CV)。3.3.2绘制质控图及质控方法(规则)的应用根据质控品的靶值和质控限绘制质控图，并将原始质控结果记录在质控图表上，保留打印的原始质控记录。将设计的质控规则应用于质控数据，判断每一质控结果是否在控，现多采用Westgard多规则即12s/13s/22s/R4s/41s/10X。4.失控情况处理及原因分析4.1室内质控出控时，应填写失控报告单，并上交专业主管，由专业主管做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告并分析及登记失控原因。 失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效，仪器维护不良以及采用的质控规则、质控限范围、一次测定的质控标本数等等。4.2失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批患者标本报告可能作废。此时，首先要尽量查明导致的原因，然后再随机挑选出一定比例(例如5或10)的患者标本进行重新测定，最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受，对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况，应该在重做质控结果在控以后，对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时，常规测定报告可以按原先测定结果发出，不必重做。当得到失控信号时，可以采用如下步骤去寻找原因：(1)立即重测定同一质控品。此步是主要是用以查明人为误差，每一步都认真仔细操作，以 查明质控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应控。如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行下一步操作。(2)新开一瓶质控品，重测失控项目。如果质控品结果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时间过长而变质或者被污染。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。(3)进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否需要更换，比色杯是否需 要清洗或更换，对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂以查明原因。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。(4)重新校准，重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。(5)请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求技术支援。5.室内质控数据的管理5.1每月室内质控数据统计处理每月末，应对当月的所有质控数据进行汇总和统计处理，计算的内容至少应包 括：当月每个测定项目原始质控数据及除外失控数据后的平均数、标准差和变异系数；当月及以前每个测定项目所有在控数据的累积平均数、标准差和变异系数。5.2每月室内质控数据的保存每个月的月末，应将当月的所有质控数据汇总整理后存档保存，存档的质控数据包括：当月所有项目原始质控数据；当月所有项目质控数据的质控图；上述所有计算的数据(包括平均数、标准差、变异系数及累积的平均数、标准差、变异系数等)；当月的失控报告单(包括违背哪一项失控规则，失控原因，采取的纠正措施)。5.3每月上报的质控数据图表每个月的月末，将当月的所有质控数据汇总整理后，应将以下汇总表上报实验室负责 人：当月所有测定项目质控数据汇总表；所有测定项目该月的失控情况汇总表。5.4室内质控数据的周期性评价每个月的月末，都要对当月室内质控数据的平均数、标准差、变异系数及累积平均数、标准差、变异系数进行评价，查看与以往各月的平均数之间、标准差之间、变异系数之间是否有明显不同。如果发现有显著性的变异，就要对质控图的均值、标准差进行修改，并要对质控方法重新进行设计。*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-004版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第12 页 共 254 页生化检验室间质评（EQA）的标准操作程序1.目的 生化检验室间质量控制。2.SOP文件的更改 该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。3.操作步骤3.1.室间质评的申请根据实验室的级别、规模和国家法律法规申请参加相应的室间质评计划，如国际质评计划、卫生部临检中心或省级临检中心质评计划。3.2.质控品的接收及登记实验室在收到质控品时，应有严格的接收及登记制度，具体应包括质控品的种类和质控品的收到时间、收件人签名、质控品测定项目及检测日期、有无破损或漏项等，如有破损或漏项或在规定日期内未收到质控品应及时与室间质评组织者联系，要求重新或及时发放。3.3.室间质评样本的检测 实验室必须按测试病人样本一样的方式在规定的时间内检测室间质评样本。实验室主任和样本检测人员必须在由室间质评组织者提供的质评表上签字，表明室间质评的标本是按常规标本处理。实验室进行EQA样品检测时，必须将处理、准备、方法、审核、检验的每一步骤和结果的报告文件化。实验室必须保存所有记录的复印件至少2年，包括室间质评结果的记录表格、EQA计划的说明、实验室主任和分析人员的签字、EQA样本与病人样本一样处理的文件等)。3.4.室间质评结果的上报质评标本检测完毕后，应认真填写室间质评上报表并报请科主任签字，室间质评结果应在规定的时间内按规定的格式上报，同时作好登记，包括检测人、检测日期、检测结果上报表复印件、上报日期、上报方式（邮寄或网络）及上报人等。3.5.室间质评回报及分析实验室在收到质评结果回报后，应对回报结果认真分析并作好登记，同时上报科室主管及科主任签字。3.5.1室间质评计划的成绩要求：(1)每次活动每一分析项目未能达到80称为本次活动该分析项目不满意EQA成绩。(2)每次室间质评所有评价项目未达到80称为不满意的EQA成绩。(3)未参加室间质评活动定为不满意的EQA成绩，该次得分为0。(4)对同一分析项目，连续两次活动或连续三次中的两次活动未能达到满意的成绩称为不成功的EQA成绩。(5)所有评价的项目连续两次活动或连续三次中的两次活动未能达到满意的成绩称为不成功的EQA成绩。对于不是由于未参加而造成的不满意的EQA成绩，实验室必须进行适当的培训及采取纠正措施并有文件化的记录，同时实验室对文件记录必须保存两年以上。3.5.2室间质量评价未能通过可能有以下几方面原因：(1)校准和系统维护计划失败；(2)室内质量控制失控；(3)实验人员的能力欠缺；(4)结果的评价、计算和抄写错误；(5)室间质评样本处理不当，如冻干质控物的复溶、混合、移液和储存不当等；(6)室间质评样本本身存在质量问题；(7)室间质评组织者公议值或靶值定值不准等。如果在室间质量评价中发现的问题得不到确认和改正，那么检测过程出现的差错可能再次发生。室间质评未能通过，实验室应有一个综合检查发现错误可能出现的原因以 避免类似的错误不再发生。实验室管理者有责任保证以上措施的落实。3.6.室间质评数据及文件的管理有关室间质评数据、记录、结果回报、质评结果分析、纠正措施等均应归档保存至少两年以上。*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-005版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第18 页 共 254 页总蛋白（TP）测定操作规程（SOP）1.目的：本检测用于测定人血清中总蛋白的浓度。2.原理：2.1.方法学：双缩脲终点比色法。方法原理：蛋白质（Protein）分子中的肽键（CONH），在碱性（Alkali）溶液中能与二价铜离子形成紫色络合物，其色泽的深浅与蛋白质浓度成正比。TMS-1024H生化仪会自动的将适量的试剂及样本加入反应管(cuvette)中。机器会自动侦测 560nm波长处吸光度的改变，吸光度的改变直接与总蛋白质的浓度成正比。2.3.反应方程式：Protein + Cu Protein-Copper Complex（紫色络合物）3.样本采集和处理：3.1.病人准备：病人应处于安静、呼吸稳定的状态，穿刺时应尽量减少病人的疼痛感。坐位与卧位、 睡眠后与清醒时、运动后与进餐后都会产生不同的结果。3.2.样本种类：生物学的体液样本应该以同样的方式来收集，以便用来测试任何实验室中的试验。新鲜的、刚被抽出的血清或血浆样本是最佳的选择。如果用血浆作样本，可以使用肝素、EDTA作抗凝剂。本法也可测定浆膜腔积液中的总蛋白，全血、尿液与脑脊髓液是不被推荐的样本。3.3.样本采集：除非是卧床的病人，一般在静脉采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，因此影响测定水平。故在采血前至少应静坐5min。一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1min，穿刺成功后立即松开止血带。采血前 24 小时禁食高脂。（详见本科制定的静脉采血 SOP 文件）3.4.样本接收：接收标本时应检查标本是否符合要求(要求封密、无溶血、无杂物)，所用试管是否 正确、试管标签是否填写完整、并询问采血时间，对不合格标本应退回重采，并填写记录。3.5 样本保存：3.5.1 采血管应该一直保持垂直、塞住的姿势。血清或血浆应该立即被分离，防止溶血，避免接触到血球部分。从采血到上机的最长时间限制是 2 小时。分离的血清或血浆在 1530的环境下不应该保存超过 8 小时。测试如无法在 8 小时内完成时，血清或血浆应该被保存在 28的环境中；假如测试无法在48小时内完成，或分离的样本无法储存超过 48小时，样本应该冰冻在零下 1520的环境中。冰冻的样本只能解冻一次，有时分析物产生降低或恶化的情形多半是因为重复冰冻及解冻的原因所造成。3.6.样本准备：3.6.1.血清或血浆样本可直接使用。3.6.2.浆膜腔积液样本如浑浊或有凝块出现，需离心后使用。3.7. 样本容量：0.5mL的样本杯和原试管是最合适的选择。4. 试剂：4.1.厂商：自配。4.1.1. 6mol/L NaOH：称取 240g优质 NaOH溶于约 800ml煮沸冷却的去离子水中，并稀释至 1L，置聚乙烯瓶内盖紧保存。4.1.2.双缩脲试剂 (Doumas) ：称取未风化硫酸铜（CuSO4.5H2O）3g，溶于 500ml蒸馏水中，加酒石酸钾钠 （含4 分子结晶水）9g、碘化钾 5g、待完全溶解后，加入 6mol/L NaOH 100ml，并用蒸馏水稀释至 1L，置聚乙烯瓶内盖紧保存。4.2 包装：放置100ml塑料桶内备用。4.3.基本参数：主波长540样本量3ul反应方法终点法次波长630试剂量250ul反应时间10min试验温度374.4.试剂准备：无须准备，直接使用。4.5.试剂储存：4.5.1 试剂在聚乙烯瓶内盖紧保存的情况下，储存在 226时，可一直稳定到试剂所示日期，一般有效日期为1年。4.5.2 总蛋白质试剂请勿冰冻！5.适用仪器：适用于本室 TMS-1024H全自动生化分析仪。6. 校正：6.1.校正液：北京中生生物制品有限公司标准液，规格为2ml/支，含量70g/L。6.2.校正液准备：无需准备，直接使用。6.3.校正液储存：28闭光保存可稳定至瓶签所示日期；打开后 28密闭闭光保存可稳定十天。6.4.校正须知：6.4.1.在 TMS-1024H全自动生化分析仪计算机的内存中，保存着校正因子。6.4.2.校正周期：在正常操作的情形下，每14天需要校正一次。此外每当更换新的试剂及作任何维修、保养动作之后，均需用校正液进行校正。6.4.3.欲查询更多有关校正的步骤，请参考TMS-1024操作手册。6.4.4.TMS-1024全自动生化分析仪在校正完毕之后，会自动换算出校正报告，仪器校准完成后，应立即进行质控操作，假若质控不在控制范围，说明校正失败，应立即查找原因重新校准，直到质控在控制范围内。查阅错误讯息，见仪器操作手册。7.质控：7.1.质控血清：北京中生生物制品有限公司定值质控血清3ml10/每盒。7.2.质控血清准备：每瓶加蒸馏水3ml，完全复溶后分装于0.5ml带盖离心管中，放置20冰箱保存，可稳定数月。使用前从冰箱取出质控血清一支，放置室温待完全溶化后摇匀使用。7.3. 使用频率：每天必须随样本做质控测试。此外每当校正、更换新的试剂及作任何保养动作之后，均需作质控液的测试。7.4. 质控操作：每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。7.5.可接受性判断：质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加省室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。应用实践应在-3SD+3SD可控范围内。8.测试步骤：8.1. 将试剂放置在试剂槽内。8.2.完成放置试剂之后，需要执行校正的动作。8.3.将样本及质控血清待测的项目键入计算机内。8.4.放置样本及质控血清于样本转盘，进行仪器操作，之后您将得到试验结果。8.5.仪器操作请参阅TMS-1024H全自动生化分析仪SOP文件。9.计算：计算公式： AxTP(g/L) = Cs AsAx：表示测定管反应吸光度测定管空白吸光度；As：表示标准管反应吸光度标准管空白吸光度；Cs 表示标准液浓度。9.2.TMS-1024H全自动生化分析仪分析后会及时的计算结果。如果操作者当初键入稀释倍数，您得到的结果便是稀释后的结果。9.3. 结果处理：对超出可报告范围的结果的处理：样品中蛋白浓度超过100g/L，可用生理盐水稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。对检验结果为病危报警值的处理：应立即报告。10.参考范围：10.1.血清、血浆：60.080.0g/L。10.2.浆膜腔积液：25.0 g/L，与血清总蛋白比值0.5。11.注意事项：11.1.血浆的样本中含纤维蛋白原，可使报告结果平均增加 3g/L 的现象。11.2.血清中等程度的黄疸、溶血和脂血对本测定不产生明显干扰，胆红素达到 350umol/L、血红蛋 白浓度超过 1000mg/L 可引起结果偏高。11.3.血清脂浊过高，可加入 2ml 乙醚剧烈摇动，并离心去除乙醚层，再进行测定。11.4.所用器具不能有铵离子，因为NH412.性能特征：12.1.试剂空白：0.200ABS。在碱性条件下形成Cu(NH3)4络离子。12.2.分析范围：0.00120 g/L。当测试结果超过分析范围的最大值时，应该利用生理食盐水稀释的方式重新测试一遍。12.3.精密度：批内 CV2(n=20)； 批间 CV3(n=20)。12.4.方法局限性试剂抗干扰能力：当血清中抗坏血酸100mg/dl、脂浊（Intralipid）0.125%（与甘油三脂无比例关系）、血红蛋白200mg/dl（使用血红蛋白纯品，非红细胞裂解液）、总胆红素20 mg/dl、结合胆红素20 mg/dl时，对测定无明显干扰。13.生物安全事项：工作人员在处理标本及实验操作时需带手套，严格按照“实验室生物安全”要求去完成各项操作。14.床意义： 增高：脱水和血液浓缩、多发性骨髓瘤(主要是球蛋白合成增加)。降低：肝脏疾病、消耗性疾病、营养不良、广泛烧伤、肾病综合征、大量反复放胸腹水、溃疡性结肠炎、水潴留使血液稀释等。15.额外的信息：为了在操作 TMS-1024H系统时能够得到更多额外的信息，请参考操作手册或拨打免付费电话询问当地分公司咨询/维修部门。16.附录：TMS-1024H全自动生化分析仪 TP 自定义项目分析参数17.参考文献：17.1.全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王毓三，1997.17.2.中生北控生物科技有限公司产品说明书。TMS-1024H全自动生化分析仪自定义项目分析参数Item Name :TP6Input range is 99999-99999DATD INFOMETIONCAL IERALIOMUnitsg/LTYPELigearDecimals1STANDARD#170.00#4#2#5#3#6ANALYSIS0NORMAL RANGETYPEendLOWHIGHCOLORw1546SERUMMALE6080COLORw2FEMALEMETHODURINCORRSLOPEINTERY=X+ Page : 1 print Next Page Save ReturnItem Name :Select“single”for single reagent，“double”for double reagents systemASPIRATIONDATA PROCESSREADABSORBANCE LIMITKINDSingleDoubleSTARTENDVOLUMEUNITMAIN4445LOW0.0000SAMPLE3ulSUBHIGH3.0000REAGET1300REAGET2FACTONENDPOINTLIMITBICHROMATICLINEARCHECK(%)BLANKCORRECTION1.000MONITORPROZONE CHECKUPPER LIMIT100.0DLEVEL POINTSTARTENDLIMIT(%)SPANFIRSTSECONDLOWHIGHTHIRDLOWHIGH Page ： 2 Print Prev Page Vave Return*人民医院检验科生化室检验操作规程文件编号: NYEY-JYK-SOP-SH-006版 次/修改: A/0修改日期: 年 月 日责任部门: 生化室第24 页 共 254 页白蛋白(ALB)测定操作规程（SOP）1.目的：用于检测人体血清中白蛋白的浓度。2.原理：2.1.方法学：溴甲酚绿终点法。2.2.方法原理：在PH4.15缓冲溶液中，白蛋白与溴甲酚绿（BCG）形成蓝绿色的复合物，其色泽深浅与样品中白蛋白浓度有关。TMS-1024H系统生化仪器会自动的将适量的试剂及样本加入反应管(cuvette)中。机器会自动侦测 600nm吸光度的改变，吸光度的改变直接与白蛋白的浓度成正比。2.3.反应方程式：Albumin + BCG Albumin BCG complex3.样本采集和处理：3.1.病人准备：病人应处于安静、呼吸稳定的状态，穿刺时应尽量减少病人的疼痛感。坐位与卧位、睡眠后与清醒时、运动后与进餐后都会产生不同的结果。3.2.样本种类：生物学的体液样本应该以同样的方式来收集，以便用来测试任何实验室中的试验。新鲜的、刚被抽出的血清或血浆样本是最佳的选择。如果用血浆作样本，可以使用肝素作抗凝剂。全血是不被推荐的样本。3.3.样本采集：除非是卧床的病人，一般在静脉采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，因此影响测定水平。故在采血前至少应静坐5min。一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1min，穿刺成功后立即松开止血带。采血前 24 小时禁食高脂。（详见本科制定的静脉采血 SOP 文件）3.4.样本接收：接收标本时应检查标本是否符合要求（要求封密、无溶血、无杂物）所用试管是否正确、试管标签是否填写完整、并询问采血时间，对不合格标本应退回重采，并填写记录。3.5.样本保存：3.5.1.采血管应该一直保持垂直、塞住的姿势。血清或血浆应该立即被分离，防止溶血，避免接触到血球部分。从采血到上机的最长时间限制是 2 小时。3.5.2.分离的血清或血浆在 15 30的环境下不应该保存超过 8小时。测试如无法在 8小时内完成时，血清或血浆应该被保存在 28的环境中；假如测试无法在 48小时内完成，或分离的样本无法储存超过 48小时，样本应该冰冻在零下 1520的环境中。冰冻的样本只能解冻一次，有时分析物产生降低或恶化的情形多半是因为重复冰冻及解冻的原因所造成。3.7.样本准备：无需准备，血清或血浆样本可直接使用。3.8.样本容量：0.