解毒化瘀退黄方对乙肝相关CNLCⅣ期湿热瘀阻证患者炎症介质的影响及临床疗效.pdf

实验研究 基金项目:国家自然科学基金资助项目(.)广西自然科学基金资助项目(.)广西中医药大学研究生教育创新计划项目(.)作者简介:杨钒男硕士生研究方向:肝胆系病证防治:.通信作者:石清兰女博士教授研究方向:中医药防治慢性肝病:.解毒化瘀退黄方对乙肝相关 期湿热瘀阻证患者炎症介质的影响及临床疗效杨钒石清兰柏文婕毛德文封佩佩杨敏陶向君黄乾铭潘佩佩(.广西中医药大学广西 南宁.广西中医药大学第一附属医院广西 南宁)摘要:目的 观察解毒化瘀退黄方对乙肝相关中国肝癌分期()期湿热瘀阻证患者的临床疗效及安全性 方法 选取 年 月至 年 月于我院肝病科确诊为乙肝相关 期湿热瘀阻证患者 例随机分为对照组、观察组每组 例对照组采用西医治疗观察组给予西医治疗解毒化瘀退黄方口服疗程均为 周随访 周 比较两组治疗前及治疗、周后肿瘤大小、肿瘤个数、中医证候积分、细胞因子、肿瘤标志物、生化指标、分级评分、体力及功能状态评分、患者生存率 结果治疗 周后观察组瘤体大小较对照组增长缓慢观察组的临床证候积分、白细胞介素()、白细胞介素()、甲胎蛋白()、甲胎蛋白异质体()、总胆红素()、凝血酶原时间()、分级较对照组降低且 较对照组升高观察组 较对照组降低延缓治疗 周后观察组瘤体大小及个数较对照组增长缓慢观察组的临床证候积分、肿瘤坏死因子()、异常凝血酶原()、谷丙转氨酶()、谷草转氨酶()、分级均较对照组降低且白蛋白()较对照组升高观察组 较对照组降低延缓 较对照组升高较慢观察组较之对照组的临床疗效及生存率较高 结论 解毒化瘀退黄方能抑制乙肝相关 期湿热瘀阻证患者的肿瘤增长降低中医证候积分、分级评分水平改善肝功能延缓体力及功能状态的恶化明显提高乙肝相关 期湿热瘀阻证患者的临床疗效及带瘤生存质量关键词:解毒化瘀退黄方中国肝癌分期 期炎症介质临床疗效中图分类号:.文献标志码:文章编号:():./.(.):.药学研究 .:原发性肝癌()是 年全球癌症死亡的第三大原因包括肝细胞癌()、肝内胆管癌()和混合型肝细胞癌胆管 癌()种 其 中 占 乙肝病毒()感染导致的慢性肝病是原发性肝癌的主要病因 该病发病隐匿晚期疗效极差死亡率高 其治疗方法主要包括手术切除、肝动脉化疗栓塞、无水酒精瘤内注射、射频消融及分子靶向治疗等然多数治疗仅适用于早中期肝癌而在乙肝相关中国肝癌分期()期中由于肿瘤浸润、转移、免疫力下降、肝功能不全等原因其治疗手段局限疗效极差 近年来团队中西医结合治疗乙肝相关 期患者取得了切实有效的成果 解毒化瘀退黄方是毛德文教授在阐释慢性重症肝病的中医发病机制基础上结合多年临床实践化裁而来具有解毒化瘀、祛瘀生新、散结退黄之功效 现将解毒化瘀退黄方治疗乙肝相关 期湿热瘀阻证患者的结果报道如下 资料与方法.药品与试剂 肿瘤坏死因子(批号:)、白细胞介素(批号:)、白 细 胞 介 素 (批 号:)、甲胎蛋白(批号:)、甲胎蛋白异质体(批号:)试剂盒购自江苏酶免实业有限公司异常凝血酶原(批号:)购自上海纪宁实业有限公司解毒化瘀退黄方茵陈 、大黄(后下)、赤芍 、白花蛇舌草 、郁金 、蒲公英 、三棱 、莪术 、炒白术 、炙甘草 为广西中医药大学第一附属医院本院自制制剂由医院药剂科统一配制.研究对象及分组选取 年 月至 年 月于广西中医药大学第一附属医院(以下简称“我院”)肝病科门诊及病房确诊为乙肝相关 期湿热瘀阻证的患者 例根据随机数字表法随机分为对照组、观察组每组 例对照组男 例女 例年龄 岁平均年龄(.)岁观察组男 例女 例年龄 岁平均年龄(.)岁两组患者年龄、性别、并发症等一般资料的比较差异无统计学意义具有可比性(见表)本次研究获得我院伦理委员会批准(编号:)患者及家属均签署知情同意告知书.诊断标准.西医诊断标准 乙肝相关 期的诊断标准参照原发性肝癌诊疗规范(年版)慢性乙型肝炎防治指南(年版):确诊为 期 分或肝功能 级肿瘤情况不论、血管侵犯不论、肝外转移不论 乙药学研究 .肝病毒外壳部分含表面抗原()和(或)乙肝病毒的脱氧核糖核酸()阳性表 两组乙肝相关 期湿热瘀阻证患者一般资料比较(例)()一般资料对照组观察组统计值 值性别例()男(.)(.)女(.)(.).年龄(岁).并发症例()肝性脑病(.)(.).腹水(.)(.).肝肾综合征(.)(.).消化道出血(.)(.).中医证候诊断标准中医证候诊断符合中医湿热瘀阻证诊断标准参照 年国家药品监督管理局证候类中药新药临床研究技术指导原则制定湿热瘀阻证:主症右肋下积块胁肋刺痛拒按腹部胀满心烦易怒身目俱黄如橘色次症食少厌油发热口苦口干恶心呕吐肌肤瘀斑舌红或紫暗有瘀斑、瘀点苔黄腻脉弦涩或滑数 证型确诊:具备主症 项加次症 项结合舌脉可确诊.纳入标准符合乙肝相关 期西医诊断标准且无手术指征的患者符合中医证候诊断标准预计生存期在 周以上的患者自愿入组并签署知情同意书依从性好可随访者年龄 岁性别不限.排除标准有严重心血管、肾脏、脑等器官疾病者哺乳期或妊娠期患者继发肝恶性肿瘤患者病情危重或预计生存期少于 周患者.治疗方法.试验分组及方案 采用随机、对照的临床研究方法根据原发性肝癌的分期标准将乙肝相关 期湿热瘀阻证患者随机分为对照组、观察组每组各 例 对照组采用单纯的西医治疗观察组给予西医治疗解毒化瘀退黄方.试验用药.西医治疗西医治疗参照原发性肝癌诊疗规范(年版)本研究针对肝功能 级的乙肝相关 期患者予靶向治疗免疫治疗对症支持治疗包括积极镇痛、纠正贫血、纠正低白蛋白血症、加强营养支持、控制合并糖尿病病人的血糖水平、处理腹水、黄疸、肝性脑病等伴随症状同时给予口服抗乙肝病毒药物 疗程为 周随访期 周.中药治疗解毒化瘀退黄方煎服每天 次 疗程为 周随访期 周.观察指标.瘤体大小、个数变化 观察瘤体大小及个数的变化情况.证候积分所有证候分为无、轻、中、重 级分别计、分(见表)表 中医证候积分评分主症 分 分 分 分胁肋刺痛无偶有刺痛常有刺痛刺痛难忍心烦易怒无偶有常有整天腹胀无偶有常有整天身目发黄无轻度中度重度发热无偶有常有整天尿黄(晨起)无尿色较黄尿色黄尿色黄如浓茶食欲减退无食有减退明显减退纳呆不食恶心无进食后偶有进食后即有频频发作呕吐无呕势较缓呕势较猛呕势猛烈口苦无口中似有苦味口中发苦口味甚苦肌肤瘀斑无偶有成点状局部、片状瘀斑全身瘀斑.细胞因子、等采用相关 试剂盒进行检测.肿瘤指标、采用相关 试剂盒进行检测.肝功能指标及 分级评分 谷丙转氨 酶()、谷 草 转 氨 酶()、总 胆 红 素()、白蛋白()等采用全自动生化仪检测凝血酶原时间()采用全自动血凝仪检测比较两组治疗前后 分级评分.体力及功能状态评分以卡氏评分()量 表 及 评 分()标准对两组治疗前后进行对比.总体疗效标准两组总体疗效比较参照 版国家药品监督管理局证候类中药新药临床研究技术指导原则拟定 有效:症状、体征有所减轻、分级评分较原水平降低 且稳定 周以上 无效:症状、体征没有减轻甚至加重、分级评分等无复常甚至加重患者病情继续恶化 有效率有效/总例数.生存率 统计 周后各组患者生存率.不良反应观察治疗过程中有无不良反应情况.统计学方法 统计分析将采用 .统计分析软件进行统计 计数资料用频数表示采用卡方检验 计量资料用“例数均数标准差”()表示组间比较采用独立样本 检验组内比较采用单因素方差分析重复测量资料比较采用双因素重药学研究 .复测量方差分析以.表示差异有统计学意义 结果.两组治疗前后瘤体大小、个数变化比较 治疗前两组瘤体大小、个数比较差异无统计学意义治疗 周后对照组瘤体大小及个数较治疗前增加观察组较对照组瘤体大小增长缓慢(.)治疗 周后两组瘤体大小及个数均较治疗前增加两组瘤体大小和对照组瘤体个数较治疗 周后增加观察组瘤体大小及个数较对照组增加缓慢(.)结果见表 表 两组治疗前后瘤体大小、个数变化比较()组别时间瘤体大小/个数变化(个)治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.两组治疗前后临床证候积分比较 治疗前两组临床证候积分比较差异无统计学意义 治疗 周后两组临床证候积分均低于治疗前观察组较对照组临床证候积分降低(.)治疗 周后两组临床证候积分均低于治疗前和治疗 周后观察组较对照组降低(.)结果见表 表 两组治疗前后临床证候积分比较()组别时间证候积分(分)治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.两组治疗前后、比较治疗前两组的、比较差异无统计学意义 治疗 周后两组的、和 均低于治疗前观察组 及 均低于对照组(.)治疗 周后两组、和 均低于治疗前及治疗 周后观察组较对照组、和 降低(.)结果见表.两组治疗前后肿瘤标志物比较 治疗前两组的各项肿瘤标志物水平比较差异无统计学意义治疗 周后观察组、均低于治疗前且观察组、较对照组降低(.)治疗 周后对照组 低于治疗前观察组、均低于治疗前及治疗 周后观察组、较对照组降低(.)结果见表 表 两组治疗前后、比较()组别时间()()()治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.表 两组治疗前后肿瘤标志物比较()组别时间()()/治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.两组治疗前后肝功能、凝血功能比较治疗前两组的各项肝功能、凝血功能水平比较差异无统计学意义 治疗 周后两组的、均低于治疗前观察组、分级均低于治疗前且 高于治疗前观察组、分级较对照组降低且 较对照组升高(.)治疗 周后两组的、分级均低于治疗前且 高于治疗前两组的、均低于治疗 周后且 高于治疗 周后观察组、分级低于治疗 周后观察组、分级较对照组降低且 较对照组升高(.)结果见表.两组治疗前后体力及功能状态评分比较治疗前两组体力及功能状态评分比较差异无统计学意义 治疗 周后两组 均较治疗前降低对照组 较治疗前升高观察组 较对照组高(.)治疗 周后两组 均较治疗前及治疗 周后降低两组 均较治疗前和治疗 周后上升观察组较对照组更能延缓 降低和 升高(.)结果见表 药学研究 .表 两组治疗前后肝功能、凝血功能比较()组别时间/分级评分治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.表 两组治疗前后体力及功能状态评分比较()组别时间(分)(分)治疗前.对照组治疗 周后.治疗 周后.治疗前.观察组治疗 周后.治疗 周后.注:与治疗前比较.与治疗 周后比较.与对照组比较.两组疗效比较 周后观察组总有效率高于对照组(.)结果见表 表 两组疗效比较()组别有效(例)无效(例)有效率()对照组.观察组.两组不良反应情况两组在治疗过程中均未出现明显不良反应情况发生.两组治疗 周后生存率比较 治疗周期结束后对两组患者进行为期 周的随访结果显示对照组 患 者 中 例 死 亡 例 生 存 生 存 率 为.观察组患者中 例死亡 例生存生存率为.观察组较对照组治疗 个月后生存率更高(.)结果见表 表 两组治疗 周后生存率比较()组别生存(例)死亡(例)生存率()对照组.观察组.讨论中医学认为原发性肝癌主要是由于正气亏虚气血阴阳失调、脏腑功能紊乱从而产生瘀血、痰浊、热毒等病理因素相互搏结蕴结于内迁延日久所致正气亏虚、脾失健运是其发病的基础气滞血瘀及以湿毒、疫毒为主的癌毒内蕴是导致其致病、难愈、进展的关键因素 周宜强等认为“癌乃毒瘀坚积”此处的“毒”包括热毒、湿毒、瘀毒、寒毒等并指出以黄疸为主者多热毒以腹胀为主者多湿毒以肝区疼痛为主者多为瘀毒等在原发性肝癌发生发展过程中细胞因子的稳定表达是维护机体稳态的关键因素若细胞因子表达异常则会导致机体免疫平衡被打破导致多种疾病的发生促炎细胞因子能反映肿瘤进展过程中不同的炎症机制而炎症的产生会有利于肿瘤的微环境最终参与肿瘤进展过程 是诊断原发性肝癌的敏感指标之一其主要存在于肿瘤周围的毛细血管及肿瘤当中可伴随着恶性肿瘤的生长而逐渐扩散到肝癌患者的外周血中具有极强的敏感性且随着原发性肝癌的发展 水平也显著提高期肿瘤患者的 水平明显高于期的肿瘤患者 和 在各种癌症的免疫反应及炎症反应信号通路中起着重要的作用在肝癌中具有高表达的特点两者高表达均可促进肝癌的发生和发展团队前期在治疗肝衰竭方面率先提出了“毒浊致病”学说认为包括诸如肝炎病毒、药物、酒精等肝毒性物质及内毒素血症等的“毒”是肝衰竭的主要致病之因由“毒”触发的“瘀”“浊”是致病的主要因素治疗原则为清热解毒、活血化瘀、豁浊化痰研发出了解毒化瘀方茵陈 、赤芍 、白花蛇舌草、大黄(后下)、郁金、石菖蒲 在肝衰竭的临床治疗中取得了明显疗效 在此基础上团队认为热毒、湿毒、瘀毒、浊毒是原发性肝癌发病的关键因素及导致疾病进展的主要病理产物而“浊”的实质主要是机体免疫应答过程中出现的各类失衡的免疫物质及其相互作用产生的一系列免疫应答产物与肝衰竭发病存在“毒”“瘀”“浊”的共性均可以解毒化瘀论治 解毒化瘀退黄方即是在解毒化瘀方的基础上加以健脾益气、破瘀消积之品方中茵陈为君清利郁于中焦、结于肝胆之湿热毒邪为退黄之要药配伍大黄、白花蛇舌草、蒲公英为臣其中大黄能畅阳明腑热使湿热之毒从后阴而出白花蛇舌草、蒲公英清热解毒助茵陈以退黄赤芍既清入血之邪毒又行留滞之瘀莪术化瘀生新、破结与大黄相配以消凝瘀败血与茵陈相伍则去入血之湿毒郁金化痰浊、辟秽毒、药学研究 .醒清窍、理升降而畅三焦合赤芍共为佐药配伍炒白术燥湿健脾、固护中焦正气、运化水湿与甘草相得益彰使补正与解毒化浊、散瘀消积俱备与原发性肝癌的中医病因病机十分契合 现代药理学研究表明茵陈具有抗肿瘤、抗炎等作用茵陈色原酮可通过抑制 的活化从而阻断其诱导的 途径激活达到对肿瘤的一定抑制作用 大黄具有抗肿瘤、抗菌抗炎等作用其有效化学成分大黄素对各类肝脏疾病(如肝癌、肝纤维化等)具有一定的防治作用网络药理学研究发现 是大黄素及其类似物抗肿瘤得中心基因之一 白花蛇舌草在预防肿瘤、抗肿瘤、防止肿瘤复发和转移等方面发挥作用白花蛇舌草有效成分 羟基甲基蒽醌可通过抑制/的活性对肝癌 细胞发挥抑制作用可降低肿瘤小鼠 的表达改善肿瘤微环境 莪术、三棱相互配伍有抗肿瘤作用且与其减少 荷瘤小鼠体内炎症介质、的表达正相关 白术可以有效降低消化道肿瘤细胞中促炎细胞因子 和 的水平 通 过 影 响 肿 瘤 细 胞 微 环 境 中 发 挥 抗 肿 瘤作用本研究发现在乙肝相关 期湿热瘀阻证患者中经解毒化瘀退黄方治疗后、和 的水平显著下降且三者水平与患者肿瘤大小及个数、证候积分、肿瘤标志物、肝功能水平、体力及功能状态评分、临床疗效、患者生存率等明显相关也就是说随着、和 水平的降低肿瘤大小及个数的增长均得到明显的抑制患者证候积分显著下降肿瘤标志物、肝功能水平明显改善体力及功能状态评分恶化延缓患者临床疗效和生存率均得以提高 由此我们认为这可能与解毒化瘀退黄方降低、和 的水平从而导致机体炎症反应减少改善机体内环境有关且该方安全性高切实提高了 期湿热瘀阻证患者的临床疗效为解毒化瘀法治疗原发性肝癌提供了实践依据值得临床推广参考文献:.:.():.():.国家卫生健康委员会.原发性肝癌诊疗指南(年版).临床肝胆病杂志():.国家卫生健康委员会医政医管局.原发性肝癌诊疗规范(年版).临床肝胆病杂志():.王贵强王福生庄辉等.慢性乙型肝炎防治指南(年版).临床肝胆病杂志():.阳国彬刘松林刘玉芳.中医药辨治原发性肝癌研究概况.中医药临床杂志():.周宜强行青春张书文.中医药治疗原发性肝癌的临床思路和方法.河南中医():./.():.张丹霞张永虎桂若虎等.甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体与肿瘤坏死因子 检测在原发性肝癌诊断中的应用价值.中国当代医药():.李莹莹刘红春宋银森等.原发性肝癌诊断中甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体、检测的应用及临床意义分析.黑龙江中医药():./.():.赵娟李辉徐沛演等.原发性肝癌患者、水平与预后的关系研究.中国实用医药():.姚元谦吕建林毛德文等.解毒化瘀颗粒对肝衰竭的疗效与作用机制研究.中医药导报():.石清兰吴金玉毛德文等.解毒化瘀方对慢加急性肝衰竭患者免疫重建的影响.中药新药与临床药理():.柏文婕毛德文石清兰等.解毒化瘀颗粒对慢性肝衰竭毒热瘀结证患者炎症状态的影响.中国实验方剂学杂志():.柏文婕潘佩佩石清兰等.基于“浊毒致病”学说探讨肝性脑病病因病机.中国中医基础医学杂志():.石清兰黄祖鸿柏文婕等.肝性脑病“四步曲”防治策略的构建与实践.中西医结合肝病杂志():.(下转第 页)药学研究 .最近有研究者经过分子对接发现黄芩苷可能与 有很强的结合力 本研究试验结果显示黄芩苷能明显抑制假病毒系统的细胞侵袭力这种抑制可是由于其与细胞表面受体间的相互作用产生的而不是来源于黄芩苷与病毒表面 蛋白的直接聚合 此外通过体外试验证实病毒抑制率在感染 时加入黄芩苷时无差异变化在 、随着病毒细胞共孵育时间延长而降低说明本试验中发现的黄芩苷抗病毒作用发挥在感染早期 由此我们大胆推测本研究发现的黄芩苷对假病毒体系入侵过程的抑制作用可能是由于黄芩苷对于 蛋白与 结合过程的影响所导致的 本研究提供了一个初步的探讨具体机制还需要进一步研究参考文献:.():.:.()():.():.():.():.():.():.():.().():.():.():.():.():.(收稿日期:)(上接第 页)黄丽平许远航邓敏贞等.茵陈的化学成分、药理作用机制与临床应用研究进展.天然产物研究与开发():.():.何元松李焐仪孟保华.大黄的研究现状.成都大学学报(自然科学版)():.王浩泽卢慧颖张彦哲等.大黄素对肝脏疾病的防治作用与安全性研究进展.中国药学杂志():.秦春明.网络药理的大黄素及其类似物抗肿瘤分子机制研究.中国药物经济学():.浦飞飞陈凤霞夏平.白花蛇舌草抗肿瘤化学成分和作用机制的研究进展.癌症进展():.孙超吴铭杰江泽群等.白花蛇舌草有效成分 羟基甲基蒽醌通过/信号通路诱导肝癌细胞凋亡作用机制.中华中医药杂志():.粟星.基于系统药理学揭示白花蛇舌草治疗非小细胞肺癌的作用机制研究.石河子:石河子大学.李静.基于 通路莪术三棱配伍抗肝癌的作用机制研究.哈尔滨:哈尔滨商业大学.哈文韬赵孙燕魏晓为等.白术水提物通过 通路抑制胃癌 细胞的潜在机制.中国肿瘤生物治疗杂志():.(收稿日期:)药学研究 .