PCR试题答案版.doc

PCR培训班考试试题
一、 选择题（共20题，每题2分）
1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )
①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体
A、 ①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥

2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反映的浓度一般为（ D ）
A、0.3-1mmol/L B、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L

3、多重PCR需要的引物对为（ D）
A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物

4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反映，其特异性决定因素为（ B）
A、模板 B、引物 C、dNTP D、镁离子

5、在PCR反映中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )
A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多
C、A、B都可 D、缓冲液中镁离子含量过高

6、 PCR技术的发明人是（A ）
A、 Mullis B、史蒂文.沙夫 C、兰德尔.才木

7、 PCR产物短期寄存可在（ A ）保存。
A、4℃ B、常温 C、-80℃ D、高温

8、 PCR产物长期储存最佳置于（ D ）。
A、4℃ B、常温 C、16℃ D、-20℃

9、 PCR的基本反映过程涉及（A ）
A、 变性、退火、延伸 B、变性、延伸 C、变性、退火

10、 在实际工作中，基因扩增实验室污染类型涉及(　D　　)
A、 扩增产物的污染 B、天然基因组DNA的污染 C、试剂污染和标本间交叉污染
D、A、B、C都也许

11、PCR技术于哪一年发明（ A ）
A、1983 B、1971 C、 1987 D、1993

12、 Taq DNA聚合酶酶促反映最快最适温度为（C ）
A、37℃ B、50-55℃ C、70-75℃ D、80-85℃

13、 如下哪种物质在PCR反映中不需要（ D ）
A、 Taq DNA聚合酶 B、dNTPs C、镁离子 D、RNA酶

14、 PCR检测中，通过n个循环的扩增，拷贝数将增长（ C ）
A、 n B、2n C、2n D、n2

15、 PCR基因扩增仪最核心的部分是（ A ）
A、 温度控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热盖

16、 如下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ）
A、 各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、以便工作

17、 PCR实验室一般涉及( D )
A、 试剂准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含

18、 PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，并且改善了检测细菌和病毒的措施。若要检测一种人与否感染了艾滋病病毒，你觉得可以用PCR扩增血液中的（D）。
A、 白细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸

19、 如果反映体系中加入模板DNA分子100个，则通过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个。
A、100×30 B、100×30×2 C、100×302 D、100×230

20、 PCR扩增产物的分析措施重要有（ D ）
A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是
二、判断题（共20题，每题2分）
1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间获得平衡。（√ ）
2、在PCR反映中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同步作为DNA合成的原料。（ √ ）
3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先合适加温的措施破坏氢键，使模板DNA解旋。（√ ）
4、PCR反映中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依托碱基互补配对原则完毕。（√ ）
5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√ ）
6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√ ）
7、PCR技术需在体内进行。（×）
8、PCR反映体系中的缓冲液相称于细胞中的体液。（√）
9、核酸的复制是由5＇——→ 3＇方向进行的。（√）
10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）
11、HBsAg转阴性后一段时间才浮现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）
12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（√）
13、PCR反映体系中Mg2+的作用是增进Taq DNA聚合酶活性。（√）
14、若标本中具有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有
较大变化都会影响Taq酶活性。（√）
15、 每个子代DNA分子中均保存一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保存复制。（√）
16、 发生溶血的标本对PCR成果没影响。（×）
17、 “平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√）
18、 逆转录聚合酶链式反映（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR措施检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）
19、 在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故清除，事实上55℃仍可充足延伸，完毕扩增复制。（√）
20、 PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）
三、 简答(共两题，每题10分)
1、 PCR技术
答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增长（要点3：3分）。
2、简述定量PCR检测操作的全过程。
答：标本的采集，保存（2分）——→样品前解决（2分）——→待样品充足裂解后点样上机反映（2分）——→反映结束后观测成果（2分）——→发报告（2分）