非小细胞肺癌MET、KRAS、PIK3CA和BRAF基因突变状态与临床特征的关系分析.pdf

48中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.8基金项目：湛江市科技计划项目(项目编号：2023B01184)作者单位：524500广东省农垦中心医院参考文献1 王玉静,颜光启,杨鸣良.口腔颌面部骨折患者的口腔卫生影响因素及对策分析.重庆医学,2021,50(5):824-827.2 付坤,高宁,蔡菁华,等.游离股后内侧皮瓣在口腔颌面部缺损修复重建中的应用初探.中华口腔医学杂志,2021,56(3):276-278.3 庞超远,张文凯,王兵武,等.术中计算机断层扫描技术在颌面部陈旧性骨折修复治疗中的应用.口腔颌面外科杂志,2023,33(2):111-115.4 王玉洁,续飞,邹士琦,等.颌面部多发骨折合并颅底骨折行颏下径路气管插管 1 例.中国微创外科杂志,2019,19(5):470-472.5 Zhou W,An JG,Rong QG,et al.Three-dimensional finite element analysis of traumatic mechanism of mandibular symphyseal fracture combined with bilateral intracapsular condylar fractures.Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban,2021,53(5):983-989.6 史舅生,孔磊,尹若丰,等.临时骨牵引外固定架固定与切开复位内固定分期手术治疗高能量 Pilon 骨折疗效观察.中国骨与关节损伤杂志,2022,37(10):1098-1100.7 包柳明,程跃军,潘菲泉.坚固内固定术联合牵引复位固定术治疗口腔颌面部创伤性骨折的效果及并发症观察.中国药物与临床,2020,20(1):86-88.8 王晶,代成林,张淑悦.闭式冲洗留置负压引流治疗口腔颌面部间隙感染患者的疗效观察.临床口腔医学杂志,2021,37(2):107-111.9 朱柏恺,刘旌毅,吕政展,等.关节功能板联合正颌-正畸治疗对特发性髁突吸收患者上气道结构变化的影响.中国口腔颌面外科杂志,2022,20(4):354-359.10 倪文庆,戈伟.坚固内固定术联合牵引复位固定术对口腔颌面部创伤性骨折患者并发症和预后的影响.中外医学研究,2020,18(35):129-131.11 金泽高.坚固内固定术联合牵引复位固定术对口腔颌面部创伤性骨折患者并发症及预后的影响.实用医技杂志,2020,27(5):621-622.12 肖胜杰.坚固内固定联合牵引复位固定术对口腔颌面部创伤性骨折患者生活质量及并发症的影响.淮海医药,2020,38(1):61-63.收稿日期：2023-11-20非小细胞肺癌 MET、KRAS、PIK3CA 和 BRAF 基因突变状态与临床特征的关系分析戴伟平齐彬周平安张翔陈超鹏陈良陈文娅江庆森【摘要】目的分析非小细胞肺癌原癌基因(MET)、Kirsten 鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位(PIK3CA)、鼠类肉瘤病毒癌基因同源物 B1(BRAF)基因突变状态与临床特征的关系。方法选择 719 例非小细胞肺癌患者,通过二代测序(NGS)检测患者的 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF,分析基因突变状态与临床特征的关系。结果MET基因突变的临床特征：男性患者13例,女性患者 12 例；60 岁患者 8 例,60 岁患者 17 例；腺癌 11 例,非腺癌 14 例。KRAS 基因突变的临床特征：男性患者 15 例,女性患者 11 例；60 岁患者 8 例,60 岁患者 18 例；腺癌 14 例,非腺癌 12例。PIK3CA基因突变的临床特征：男性患者12例,女性患者10例；60岁患者9例,60岁患者13例；腺癌 15 例,非腺癌 7 例。BRAF 基因突变的临床特征：男性患者 11 例,女性患者 12 例；60 岁患者 13 例,60 岁患者 10 例；腺癌 12 例,非腺癌 11 例。结论非小细胞肺癌 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF 基因突变状态与临床特征存在一定关系。【关键词】非小细胞肺癌；原癌基因；Kirsten 鼠类肉瘤病毒癌基因；磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位 ；鼠类肉瘤病毒癌基因同源物 B1；临床特征DOI：10.14164/11-5581/r.2024.08.012Correlation analysis of mutation status of MET,KRAS,PIK3CA and BRAF genes with clinical characteristics in non-small cell lung cancer DAI Wei-ping,QI Bin,ZHOU Ping-an,et al.Guangdong Provincial Agricultural Reclamation Center Hospital,Zhanjiang 524500,China【Abstract】Objective To analyze the correlation of mutation status of proto-oncogene(MET),Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog(KRAS),phosphatidylinositol-3-kinase(PIK3CA)and v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1(BRAF)genes with clinical characteristics in non-small cell lung cancer.Methods 719 patients with non-small cell lung cancer were selected.MET,KRAS,PIK3CA and BRAF of the patients were detected by next generation sequencing(NGS),and the correlation between gene mutation and clinical characteristics was analyzed.Results Clinical characteristics of MET gene mutation:13 male patients and 49中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.812 female patients;there were 8 patients 60 years old and 17 patients 60 years old;there were 11 cases of adenocarcinoma and 14 cases of non-adenocarcinoma.Clinical characteristics of KRAS gene mutation:15 male patients and 11 female patients;there were 8 patients 60 years old and 18 patients 60 years old;there were 14 cases of adenocarcinoma and 12 cases of non-adenocarcinoma.Clinical characteristics of PIK3CA gene mutation:12 male patients and 10 female patients;there were 9 patients 60 years old and 13 patients 60 years old;there were 15 cases of adenocarcinoma and 7 cases of non-adenocarcinoma.Clinical characteristics of BRAF gene mutation:11 male patients and 12 female patients;there were 13 patients 60 years old and 10 patients 60 years old;there were 12 cases of adenocarcinoma and 11 cases of non-adenocarcinoma.Conclusion There is a certain correlation between mutation status of MET,KRAS,PIK3CA and BRAF gene and clinical features in non-small cell lung cancer.【Key words】Non-small cell lung cancer;Proto-oncogene;Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog;Phosphatidylinositol-3-kinase;V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1;Clinical characteristics非小细胞肺癌是一种最常见的肺癌类型,约占肺癌病例的 85%,是一种恶性肿瘤,诊断通常通过胸部 X线、CT 扫描、痰液细胞学检查、活检等方法进行,治疗方法包括手术切除、化疗、放疗和靶向治疗等,具体选择根据患者的具体情况、病变的分期和基因突变情况来确定1-3。尽管非小细胞肺癌的治疗仍然具有挑战性,但近年来的科学研究和医学进展为患者提供了更多的治疗选择和希望。早期检测和早期治疗对于提高非小细胞肺癌患者的生存率至关重要。非小细胞肺癌基因突变是指肺癌细胞中的基因发生异常的改变,这些改变可以影响细胞的正常功能和调控机制,基因突变是肺癌发生和发展的重要驱动因素之一。基因突变的检测对于指导非小细胞肺癌的个体化治疗非常重要,通过检测基因突变状态可以选择合适的靶向治疗药物,提高患者的治疗效果和生存率,基因突变检测通常通过基因测序技术,如聚合酶链式反应(PCR)、NGS等进行4。为此,现选择 2020 年 3 月 2022 年 12 月在本院就诊并接受治疗的 719 例非小细胞肺癌患者,分析非小细胞肺癌 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF 基因突变状态与临床特征的关系,将结果报告如下。1资料与方法1.1一般资料选择 2020 年 3 月 2022 年 12 月到本院就诊并接受治疗的 719 例非小细胞肺癌患者,男性患者 368 例,女性患者 351 例；平均年龄为(67.2 3.54)岁；MET 基因突变患者 25 例、KRAS 基因突变患者 26 例、PIK3CA 基因突变患者 22 例、BRAF 基因突变患者 23 例。纳入标准：确诊为非小细胞肺癌；对实验知情同意；临床资料完整。排除标准：无法配合完成检查及实验；实验过程中病情恶化。1.2 方 法 通 过 NGS 检 测 患 者 的 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF,具体操作流程：通过手术获取或者经过活检获得、收集非小细胞肺癌组织样本,确保样本质量良好；从样本中提取 DNA,并检测浓度,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 DNA 降解程度。使用 Rapid DNA Lib Prep Kit for Illumina 试剂盒构建含目标基因的全基因组文库,建库过程中使用 UMI 接头保证数据结果的准确性,使用液相探针进行杂交捕获,确保文库的高均一性及高捕获效率。使用 Illumina HiSeq X Ten 测序仪进行靶向 NGS 测序,测序原始数据经过滤后进行生物信息学分析。1.3观察指标分析 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF基因突变状态与临床特征(性别、年龄、组织类型)的关系。2结果MET 基因突变的临床特征：男性患者 13 例,女性患者 12 例；60 岁患者 8 例,60 岁患者 17 例；腺癌 11 例,非腺癌 14 例。KRAS 基因突变的临床特征：男性患者 15 例,女性患者 11 例；60 岁患者 8 例,60 岁 患 者 18 例；腺 癌 14 例,非 腺 癌 12 例。PIK3CA 基因突变的临床特征：男性患者 12 例,女性患者 10 例；60 岁患者 9 例,60 岁患者 13 例；腺癌 15 例,非腺癌 7 例。BRAF 基因突变的临床特征：男性患者 11 例,女性患者 12 例；60 岁患者 13 例,60 岁患者 10 例；腺癌 12 例,非腺癌 11 例。见表 1。表 1MET、KRAS、PIK3CA、BRAF 基因突变与临床特征的关系分析(n)临床特征类别MET 基因突变(n=25)KRAS 基因突变(n=26)PIK3CA 基因突变(n=22)BRAF 基因突变(n=23)性别男13151211女12111012年龄60 岁8891360 岁17181310组织类型腺癌11141512非腺癌141271150中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.83讨论非小细胞肺癌起源于肺组织中的非小细胞类型的上皮细胞,包括腺癌、鳞癌和大细胞癌,腺癌是最常见的非小细胞肺癌亚型,起源于肺内腺体细胞,通常发生在肺的外周区域,可以表现为痰中带血、气喘、咳嗽等症状5；鳞癌起源于肺内上皮组织的鳞状细胞,通常发生在肺的中心部位,可能导致咯血、咳嗽、胸痛等症状；大细胞癌是一种非小细胞肺癌亚型,起源于肺内的大型上皮细胞,通常在肺的外周区域形成肿块,有时也会出现在中心部位。非小细胞肺癌的危害主要体现在以下几个方面：高死亡率：非小细胞肺癌是全球范围内最常见的癌症之一,并且是导致癌症相关死亡的主要原因之一,由于该疾病通常在晚期才被发现,导致治疗的难度增加,使得患者的存活率较低6；侵袭和转移：非小细胞肺癌具有侵袭性和转移性的特点,可以通过血管和淋巴管系统扩散到其他部位,如肝脏、骨骼、脑部等,导致远处转移和多器官受累7；呼吸功能受损：非小细胞肺癌发生于呼吸系统,其肿瘤的生长和扩散可能导致气道受阻、肺功能下降,从而引起呼吸困难、咳嗽、胸痛等症状8；并发症：非小细胞肺癌患者常伴随一系列并发症,如肺炎、肺不张、气胸等,这些并发症会进一步加重患者的病情,对其生活质量产生负面影响9。在非小细胞肺癌中,常见的基因突变包括 KRAS、MET、PIK3CA、BRAF 等,这些基因突变可以导致细胞信号传导通路的异常激活、细胞增殖和生存的增加,从而促进肿瘤的生长和扩散10。KRAS 是重要的癌基因之一,其编码了一种三磷酸鸟苷(GTP)酶,参与调控细胞内的信号传导通路11。KRAS 基因突变是非小细胞肺癌中最常见的基因突变之一,通常发生在腺癌亚型的肿瘤中,KRAS突变会导致KRAS蛋白的异常激活,进而影响细胞的正常生理功能12。KRAS 突变激活了细胞增殖、生存和转移相关的信号通路,推动肿瘤的生长和发展。需要注意的是,KRAS 基因突变在非小细胞肺癌中通常被认为是一种“驱动突变”,这意味着其是肿瘤发生和发展的主要驱动因素之一。KRAS 基因是最常见的突变 RAS 亚型,大约占所有癌症类型中致癌 RAS 突变的 85%13。这些突变通常与胰腺癌、结肠癌、肺癌等癌症的发生密切相关。在突变RAS亚型中,KRAS 的突变率最高,因此对 KRAS 基因的研究和了解对于人类癌症的诊断和治疗具有重要意义。MET 基因编码了一种受体酪氨酸激酶,被称为肉瘤肾上腺素受体,MET 信号通路在正常细胞中参与调控细胞增殖、生存和迁移等生物学过程。MET 基因突变可以导致 MET 蛋白的异常激活或过度表达,进而影响细胞的正常功能。近年来,针对 MET 基因突变的靶向治疗药物也得到了发展,如一些 MET 抑制剂可以干扰 MET 信号通路的正常功能,抑制肿瘤细胞的增殖和生存14。此外,与其他靶向治疗药物相比,MET 抑制剂对于经典的表皮生长因子受体(EGFR)和间变性淋巴瘤激酶(ALK)突变阴性的非小细胞肺癌患者也可能具有一定的治疗效果。需要指出的是,MET 基因突变在非小细胞肺癌中相对较为罕见,其发生率较低,然而对于那些 MET 基因突变呈阳性的患者,靶向治疗药物可能提供一种有效的治疗策略,改善患者的预后和生存率,因此对于非小细胞肺癌患者的个体化治疗,包括MET 基因突变的检测是非常重要的。PIK3CA 是一种重要的癌基因,其编码了磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K)酶,参与调控细胞内的信号传导通路。PIK3CA 基因突变是非小细胞肺癌中常见的基因突变之一,这种突变会导致 PI3K 酶的异常激活,进而影响细胞的生长、增殖和存活。PIK3CA 突变可以激活 PI3K/AKT/mTOR 信号通路,推动肿瘤细胞的增殖和生存。PIK3CA 基因突变在非小细胞肺癌中通常被认为是一种“驱动突变”,即其为肿瘤发生和发展的主要驱动因素之一。PIK3CA 突变可能导致肿瘤对某些常规化疗和靶向治疗药物的抵抗。目前针对 PIK3CA突变的靶向治疗药物正在研究和开发中,一些 PI3K 抑制剂和 mTOR 抑制剂已经进入临床试验阶段,用于治疗 PIK3CA 突变的非小细胞肺癌患者,这些药物可以干扰 PI3K/AKT/mTOR 信号通路的正常功能,抑制肿瘤细胞的增殖和生存15。准确检测和确定 PIK3CA 基因突变状态对于非小细胞肺癌患者的个体化治疗非常重要,基因测序技术可以用于检测 PIK3CA 突变的存在。根据患者的具体情况和基因突变的特点,医生会制定合适的治疗方案以提高患者的治疗效果和生存率,然而目前针对 PIK3CA 突变的靶向治疗药物仍处于研究和开发阶段,临床应用还有待进一步的研究和验证。BRAF是一种重要的癌基因,其编码了BRAF蛋白,参与调控细胞内的信号传导通路。BRAF 基因突变在非小细胞肺癌中相对较少见,但会在一小部分非小细胞肺癌患者中被发现,最常见的 BRAF 突变是 V600E突变,其导致 BRAF 蛋白的异常激活,这种突变会引起细胞信号通路的异常激活,促进细胞的增殖和存活。对于非小细胞肺癌患者中的 BRAF V600E 突变已经开发了针对 BRAF 的特定靶向治疗药物,如 BRAF 抑制剂,这些药物可以抑制 BRAF 信号通路的异常激活,从而抑制肿瘤细胞的增殖和生存16-19。此外,BRAF 突变还可以进一步分为 BM1 和 BM2 两种类型,这些亚型的患者往往表现出较差的预后20。然而需要注意的是,BRAF 抑制剂单药治疗的效果有限,组合治疗或与其他靶向药物的联合应用可能会提高治疗效果。准确检测和确定 BRAF 基因突变状态对于非小细胞肺癌患者的个体化治疗非常重要。基因测序技术可以用于检测BRAF 突变的存在,靶向治疗药物的选择应根据具体的基因突变类型进行,并结合患者的整体状况进行综合51中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.8考虑。本研究采用 NGS 技术进行检测,可以同时检测多个基因位点,提高检测的准确性。此外,NGS 技术还可以用于检测未知的基因突变类型,为临床诊断和治疗提供更多的信息。本次实验结果显示,非小细胞肺癌MET、KRAS、PIK3CA、BRAF 基因突变与患者性别、年龄及组织类型有一定关系。相关研究表示,在老年非小细胞肺癌患者中,MET 扩增和 MET14 号外显子跳跃突变的发生率显著高于年轻患者。既往研究发现,MET14 号外显子跳跃突变更多见于老年患者,患者的中位年龄为 6975 岁。另外,一项对非小细胞肺癌患者的研究发现,3.7%的患者存在 PIK3CA 基因突变。在鳞状细胞癌患者中,存在 PIK3CA 基因的比例为 8.7%,而在肺腺癌患者中,存在 PIK3CA 基因突变的比例为3.0%。PIK3CA 基因的突变可以导致 PI3Ks 的催化活性异常增强,从而促使细胞发生癌变。因此,PIK3CA 基因突变被认为是肺腺癌发生的一个重要因素。总 之,非 小 细 胞 肺 癌 MET、KRAS、PIK3CA、BRAF 基因突变状态与临床特征存在一定关系。非小细胞肺癌对患者的生命和生活产生了极大的危害,早期预防、早期基因突变的筛查和早期治疗对于提高患者的生存率和生活质量至关重要。参考文献 1 胡瑶,孙晋.小细胞肺癌原发灶18F-FDG PET/CT 代谢参数与外周血炎症标志物的相关性研究.南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(4):536-541.2 李雨奇,罗晓燕,张鹏博,等.双期18F-FDG PET/CT 原发灶影像组学对非小细胞肺癌淋巴结转移的预测价值.局解手术学杂志,2023,32(2):142-145.3 肖寿勇,吴四云,饶孙银,等.期非小细胞肺癌原发肿瘤切除术后患者放疗效果分析.社区医学杂志,2021,19(15):917-920.4 眭玉霞,邓晓宇,伍铮,等.非小细胞肺癌驱动基因突变与临床病理特征的关系.临床与实验病理学杂志,2020,36(9):1023-1028.5 刘光峨,杨玲,李佩洁,等.贵州黔北地区 922 例非小细胞肺癌 EGFR、ALK、ROS-1 基因突变状态及其临床病理特征分析.中华肿瘤防治杂志,2020,27(21):1691-1697.6 贺佳子,黄清洁,李莉,等.396 例非小细胞肺癌 EGFR、KRAS、ALK 和 BRAF 基因突变状态及其临床病理特征.临床与病理杂志,2020,40(9):2252-2258.7 Samuel C,Virginia F,Patrick B,et al.Durvalumab consolidation therapy in a patient with stage B unresectable NSCLC harboring a MET exon 14 splice site alteration.Lung Cancer,2021(158):15-17.8 李向敏,樊再雯,张兰兰.原发 EGFR(19 del)和 PIK3CA(Exon 2)共突变非小细胞肺癌 1 例报道并文献复习.肿瘤防治研究,2020,47(5):398-400.9 潘静.肺原发癌及脑转移病灶切除术联合盐酸厄洛替尼治疗非小细胞肺癌脑转移患者的临床研究.黑龙江医学,2020,44(2):213-214.10 李雪蓉,肖雄,冯洪燕,等.18F-FDG PET/CT 非小细胞肺癌原发灶代谢参数和纵隔淋巴结 SUVmax 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