抗球虫药物残留危害及检测方法应用进展.pdf

14抗球虫药物残留危害及检测方法应用进展李 梁 谷守国 郑徐建 王雪松*（唐山市食品药品综合检验检测中心，河北唐山 063000）摘 要：抗球虫药物在畜禽疫病防控方面起着重要作用，保障畜禽健康和畜禽产品的供应，但是抗球虫药物残留在动物性食品中，甚至存在部分药物残留超标现象，对环境以及人体健康造成巨大的负面影响，应采取措施加强抗球虫药物的残留检测。目前抗球虫药的检测方法主要有分光光度法、微生物法、免疫学法、色谱法等，本文对抗球虫药物残留危害及检测方法进行了简单分析，以期为抗球虫药物残留的监测提供理论依据。关键字：抗球虫药；药残危害；检测方法 作者简介：李梁（1985），男，汉族，硕士，高级兽医师，研究方向：农产品质量安全。E-mail： *通讯作者：王雪松（1993），男，满族，硕士，畜牧师，研究方向：农产品质量安全。E-mail： 项目基金：唐山市科技计划项目（23150208A）球虫病是一种严重影响畜禽养殖的肠道寄生虫病,可以导致家禽生产出现严重损失。预防球虫病的主要方法是采用在动物饲料或饮水中加入抗球虫药,以预防和控制动物球虫病的发生和发展。通常抗球虫药物的使用易使动物产生耐药性，畜禽养殖中一般采用用药量加倍等方法，但这往往导致动物耐药性和药物残留严重。不规范使用抗球虫药，非法使用违禁药物对我国养殖业的发展以及人类健康带来重大风险和安全隐患1。1 抗球虫药物分类1.1 聚醚类离子载体抗生素 聚醚类抗生素是预防和治疗鸡球虫病应用最广泛的药物，主要包括盐霉素、莫能菌素、马杜霉素、海南霉素、拉沙菌素等。聚醚类抗生素主要作用于无性生殖阶段，可扰乱虫体内的阳离子浓度，进而破坏正常的渗透压，导致细胞崩解，从而杀死球虫。盐霉素是家禽预防球虫病的常用药物，不易产生耐药性，添加到饲料中还可以改善动物的生长性能，蛋鸡产蛋期禁用。海南霉素是我国自行研制的抗鸡球虫药物，药物的毒性低，安全性高，蛋鸡养殖中禁用。1.2 化学合成抗球虫药 化学合成类药物，包括磺胺喹噁啉、妥曲珠利、地克珠利、二硝托胺、尼卡巴嗪、氨丙啉、氯羟吡啶、癸氧喹酯、氯苯胍等。磺胺喹噁啉对鸡巨型、布氏和堆型艾美耳球虫作用最强，能够影响细菌核蛋白合成，从而抑制细菌和球虫的生长繁殖，对雏鸡有毒性，蛋鸡产蛋率下降，蛋壳变薄，产蛋鸡禁用；地克珠利具有干扰虫体细胞核的分裂和线粒体呼吸代谢的功能，对球虫发育的各个阶段均有作用，且毒性低，对鸡柔嫩、堆型、毒害、布氏、巨型艾美耳球虫作用极佳，药效期短需连续用药，较易引起球虫的耐药性；癸氧喹酯是一种新型的喹诺酮类高效畜禽用抗球虫药，在球虫的无性繁殖阶段发挥作用，通过干扰 DNA 合成而阻止其发育，目前与我国允许使用的兽药饲料添加剂无任何配伍禁忌，毒性低，耐受性好；氯羟吡啶作用峰期主要在于孢子发育阶段，不能杀灭球虫，对球虫仅有抑制发育作用，须连续用药达到抗球虫效果，产蛋期禁用。1.3 中草药制剂抗球虫药 中草药可以抑制或灭杀球虫，增强动物机体的免疫力，缓解临床症状等作用。目前常用的中药材包括青篙素、常山、姜黄素、苹果醋、白芍、蒲公英、旱莲草、鸭踌草、地锦草、败酱草、翻白草等，由于其价格低廉、副作用小、不易产生耐药性等优点被广泛应用。大量研究表明，中草药有抗球虫的效果，例如大蒜的大蒜素、蛹虫草对抗柔嫩艾美耳球虫的效果优于咪唑苯脲与氯苯胍；常山、柴胡等多种中草药组成的中药配方，治疗鸡球虫病可提高鸡的存活率和治愈2023 年第 10 期 总第 98 期生态环境15率，提高饲料转化率，治疗效果较地克珠利好。2 抗球虫药物残留的危害2.1 环境污染 药物及其代谢产物随着排泄物或直接进入环境中，这些药物残留还是具有一定的活性，对生态环境和生物安全风险巨大，目前污水处理及粪便堆肥处理无法彻底清除药物残留，可能影响土壤和水体中微生物活性，还可能危害水生生物及植物生长，进而使生态系统遭受影响。2.2 危害人体健康 肉、蛋、奶等动物源性食品中抗球虫药物的残留可以使人体发生过敏反应，并引起中毒反应，严重时威胁人体的生命健康。一些抗寄生虫药物残留能够导致基因突变或染色体畸变，长期食用含抗寄生虫药物残留的畜产品，会大大增加致癌、致畸以及致突变的几率2。2.3 影响畜牧养殖效益 抗寄生虫药物残留影响畜禽的生产性能，影响畜产品的销售，经济效益减少；如果出口贸易中畜产品被检出抗寄生虫药物残留超标，可能阻碍出口贸易。3 抗球虫药物残留原因 蛋鸡饲养主要以集约化、规模化养殖为主，蛋鸡饲养周期长，蛋鸡疾病的防治尤为重要。绝大多数药物在产蛋期不得使用，蛋鸡产蛋期违规使用治疗药物、不遵守停药期等风险较高，引起禽蛋产品药物残留，会对人体造成潜在的危害。3.1 不遵守休药期规定 遵守休药期规定是为了避免鸡蛋中兽药残留量超出国家标准，养殖企业使用药物不规范，造成鸡蛋中抗球虫药物超标，消费者食用药物超标的鸡蛋后可能危害到自身健康，药物超标还会影响出口贸易，给养殖业造成巨大的经济损失。3.2 不按规定使用抗球虫药物 主要是超量使用及违禁使用的问题，在产蛋期非法使用违规药物又不遵守休药期的现象常见，而且使用手段更加隐蔽。养殖人员缺乏抗球虫药物危害的知识和药物残留危害风险的意识，在用药过程中不按兽药使用说明，大剂量添加在饲料或饮水中，极易造成蛋鸡的中毒死亡，不仅给养殖户带来经济损失，还带来药物残留超标的风险。一些养殖者在经济利益的驱使下，无视国家规定，饲喂了违禁抗球虫药物，仍然销售含有违禁药物和兽药残留超标的鸡蛋。3.3 残留检测监控难度大 国家对于食品安全高度重视，食品安全法规、公告、标准不断更改修订。在动物抗寄生虫药物残留限量方面，药物分类有允许用于食品动物，但不需要制定残留限量的兽药、允许作治疗用，但不得使用在动物性食品中检出的兽药、食品动物中禁止使用的药品清单以及新批准兽药，这些药品目录每年都在更新，动物食品中兽药残留限量（GB 31650-2019）食品安全国家标准于 2020 年 4 月 1 日起开始实施，新标准增加了 267 种兽药的残留限量与技术要求。按照农兽药残留标准修订计划，2025 年兽药残留限量标准将达到 2 000 余项，部分兽药残留限量检测国家标准还需要进一步更新，为市场监管提供依据。4 抗球虫药物残留检测方法 目前关于抗球虫药物的检测方法，主要有分光光度法、微生物学检测法、免疫学检测法、高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法和超高效液相色谱-串联质谱法等。4.1 分光光度法 紫外分光光度法检测样品的成本廉价，且简便快捷，但检测的精密度相对较差，前处理耗时也比较长，该方法一般用于大浓度目标物质的检测。有研究用分光光度法测定畜禽产品中的磺胺类药物残留，该方法不仅简便、易行、快速，而且具有试剂消耗少，测定时不受样品中可能存在的氧化性或还原性物质的干扰，在常温下即可测定等优点，平均回收率为94.2%，变异系数为 1.73，变异系数 5，回收率高，各测定值在平均值附近分布比较密集，离散程度小3。4.2 微生物学检测法 微生物检测方法是测定抗生素残留的经典方法，其测定原理基于抗生素对微生物的抑制作用，主要方16法有平板法、嗜热链球菌抑制法、嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法等，微生物检测方法相对成本低，操作简单，但是检测灵敏度不高。目前很多关于微生物抑制法检测抗生素残留优化与改良的研究，提高了灵敏度，扩大其应用范围。4.3 免疫学检测法 免疫学分析技术利用抗原与抗体的特异性结合，利用光电或放射性反应产生肉眼可分辨或仪器设备可分辨的检测技术，在兽药残留快速检测中，主要包括酶联免疫吸附法、免疫疫层析法、生物芯片技术、化学发光免疫分析法等。酶联免疫吸附法具有操作简便、检测时间短、通量高和成本低廉等优点，在兽药残留检测中被广泛应用，一般采用竞争法测定，通过加样、育温、洗涤、分析等关键步骤，由于现有商品化试剂盒质量优劣水平不一，可能对检测准确度有一定影响，需要对试剂盒参数进行对比，做出评判；实验室的操作环境和操作人员水平也易出现误差，需要严格按照产品说明书操作，要进行双平行试验，确保数据的准确度和精密度，以满足药物残留筛选检测。免疫层析法具有快速、简单、成本低廉和无需专业人员操作等特点，广泛应用于现场快速筛选，胶体金免疫层析法是以胶体金纳米颗粒作为标记物，在兽药残留定性检测中，通过显色目测即可得到结果，适用于现场快速筛查，也可利用专用仪器设备读取结果，以减少检测者主观因素影响。4.4 色谱法 高效液相色谱法具有选择性强、分离效能高、检测灵敏度高、分析速度快等特点，目前在兽药残留检测方面应用广泛，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。应用高效液相色谱法检测鸡蛋中 7 种磺胺类药物残留，方法采用乙酸乙酯进行提取，经水饱和正己烷洗涤净化，除去大部分鸡蛋中的干扰物，以 0.1%磷酸:乙腈（V:V=80:20）作为流动相，该方法提取效果良好，结果重复性及回收率满足实际检测需求5。4.5 质谱方法 一般以高效液相色谱为分离手段，以质谱为鉴定和测定手段，通过色谱与质谱结合，基于液质联用法较好的定性定量能力，高效液相色谱-串联质谱法在多组分兽残检测中得到广泛应用，有很多研究基于高效液相色谱串联质谱法，建立高效、快速、灵敏度高、准确度好、杂质干扰小的兽残检测方法。有学者6建立了可同时检测动物源食品中盐霉素、甲基盐霉素、马杜霉素、莫能菌素和拉沙里菌素多残留的液相色谱串联质谱方法。检出限小于 0.005 mg/kg,加标回收率83.8%99.2%，相对标准偏差 3.8%10.3%，该方法适用于动物源性食品中聚醚类药物的多残留检测。5 展望 在养殖过程中，抗球虫药物残留问题经常发生，不仅直接影响养殖户的经济效益，还给人类健康带来风险，对养殖业的发展造成负面影响。目前抗球虫药物的常规检测主要依赖于色谱技术,该技术存在成本高、操作步骤繁琐，需要专业的操作及数据分析人员，分析仪器体积庞大。加速研究高通量智能化、操作简单、快速检测方法，开发精准检测、方便携带、满足现场快速检测的设备，具有非常重要的意义。参考文献1 唐仁勇，蔡婧，郭秀兰,等.抗寄生虫药物在畜禽产品中的残留危害及安全控制对策 J.黑龙江农业科学，2021（8）:123-1282 陈莹娴,马月姣,李建成.抗球虫药物残留的免疫检测技术 J.畜牧兽医学报，2021,52(04):899-908.3 李西波,侯玉泽,李静静.分光光度法检测牛奶中的磺胺类药物残留 J.中国乳业，2008,83(11):54-56.4 王雅娟,张杨杨,郭亚文,等.动物源性食品中抗球虫 药物残留的 色谱和质谱检测技术研究进展J.中 国兽医学报,2018,38(12):2424-2431.5 马世柱,陈楠,黎小鹏,等.高效液相色谱法测定鸡蛋中磺胺类药物残留 J.现代农业科技，2018(11):235-236+239.6 施祖灏,张小燕,卜士金,等.高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中9 种化学合成类抗球虫药多残留J.色谱，2012,30(09):883-888.