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微生物学实验复习题
一、单选题
1．果汁、牛奶常用的灭菌方法为 （ A ）
（A）巴氏消毒（B）干热灭菌（C）间歇灭菌（D）高压蒸汽灭菌
2．称量牛肉膏时不可用称量 （ C ）
（A）小烧杯B）表面皿（C）滤纸 （D）称量纸
3、下列说法中正确的是 （ A ）
（A）在配制牛肉膏蛋白胨培养基时，调节培养基的PH值一般在加琼脂之前
（B）在配制牛肉膏蛋白胨培养基时，调节培养基的PH值一般在加琼脂之后
（C）配制牛肉膏蛋白胨培养基，需要将其PH值调节至6.4~6.6
（D）配制牛肉膏蛋白胨培养基，需要将其PH值调节至5.4~6.6
4、分装配制的配制牛肉膏蛋白胨培养基时，以下正确的是 （ A ）
（A）固体培养基分装量为试管高度的1/5（B）固体培养基分装量为试管高度的1/3
（C）固体培养基分装量为试管高度的2/3（D）固体培养基分装量为试管高度的1/2
5、高氏1号培养基主要用于培养的微生物是 （ C ）
（A）细菌 （B）霉菌（C）放线菌（D）各种微生物都可以
6、下列关于高压蒸汽灭菌的说法中错误的是： ( C )
（A）灭菌锅内加水量以水面与三脚架齐平为宜。
（B）达到所需灭菌时间后，关闭热源，等压力降为零后，打开排气阀，取出灭菌物品。
（C）高压蒸汽灭菌适用于塑料制品、培养基、工作服等灭菌。
（D）当锅内空气排尽后，关闭排气阀，等温度升到121℃开始记时，灭菌20min。
7．琼脂在培养基中的作用是 （ C ）
（A）碳源 （B）氮源 （C）凝固剂 （D）生长调节剂
8．革兰氏染色的关键步骤是 ( C )
（A）结晶紫(初染) （B）碘液(媒染) （C）酒精(脱色) （D）蕃红(复染)
9．新接种的放线菌培养的时间是 （ D ）
（A）1~2天 （B）3~4天 （C）3~5天 （D）5~7天
10．使用油镜时，物镜的倍数是 （ A ）
（A）100 （B）40（C）10 （D）5
11．从土壤中稀释分离、纯化微生物的实验中，设最初取0.5克土壤制成悬液，稀释至10-6,
取0.5ml悬液接入相应的牛肉膏蛋白胨培养基中，按细菌的条件, 培养1天后计数，发现共
有8个菌落，则由此可得每克土壤中所含细菌数量为 （ D ）
（A）1.6×106 （B）1.6×107（C）3.2×106 （D）3.2×107
12．革兰氏染色结果中，革兰氏阴性菌应为 （ B ）
（A）无色 （B）红色（C）黄色 （D）紫色
13．大多细菌培养的温度是 （ A）
（A）370C （B）280C （C）250C （D）450C
14．将有蔗糖的牛乳加入一定比例的水,混匀后, 消毒的温度是 （ A ）（A）850C （B）500C（C）1000C （D）370C
15．以下不作为细菌分类的实验是 （ C ）
（A）革兰氏染色实验 （B）细菌形态观察（C）细菌数量的测定（D细菌的生理生化反应
16．土壤中三大类群微生物以数量多少排序为 （ D ）
（A）真菌＞细菌＞放线菌 （B）细菌＞真菌＞放线菌
（C）放线菌＞真菌＞细菌 （D）细菌＞放线菌＞真菌
17．对金属制品和玻璃器皿通常采用的灭菌方法是 （ A）
（A）干热灭菌（B）灼烧；（C）消毒剂浸泡；（D）紫外线照射。 18．实验室常用于保存微生物的温度为 ( A)
（A）4℃ （B）28℃（C）37℃ （D）50℃
20．接种后，霉菌培养的时间是 （ B ）
（A）1~2天 （B）3~4天（C）4~6天 （D）5~7天
21．有荚膜的细菌用背景染色法染色后，荚膜的颜色为 （ C） （A）红色（B）黑色（C）无色 （D）紫色
22．在其它条件相同的情况下，物镜放大倍数越大，其工作距离越 （ B ）
（A）越大 （B）越小（C）不变 （D）变化 24．固体培养基中，琼脂使用浓度为 ( C ) （A）0.15~2.0% （B）0.2～0.7%
（C）1.5～2.0% （D）15~20%
26．接种环最佳的灭菌方法是 （ B ）
（A）干热灭菌 （B）灼烧；（C）消毒剂浸泡 （D）紫外线照射
27、半固体培养基中，琼脂使用浓度为 （ B ）
（A）0.15-0.2% （B）0.5-0.7%（C）1.5-2.0% （D）2.0-5.0%
28．霉菌适宜生长的pH范围为 （ B ）
（A）＜4.0 （B）4.0-5.0（C）6.0-6.8 （D）8.0
29．酒精消毒能力最强的百分数是： （ B ）
（A）95％ （B）75%（C）90% （D）50% 二、填空题
1．酵母菌通过0.1%美兰染色1~2分钟后，活细胞呈
呈 蓝 色；细菌经革兰氏染色后，金黄色葡萄球菌呈 蓝紫 色，大肠杆菌呈 淡红 色；枯草芽孢杆菌经孔雀绿初染，番红复染后，菌体 红 色，芽孢呈 绿 色。 2．蛋白胨易吸潮，所以称量蛋白胨时应注意的是。 3．分离微生物最常用的有两种方法，分别为 和
。 4．分离微生物的最终目的是 。
5．用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称。
6．培养细菌的温度是PH是线菌的温度是 28 、时间是 5~7d 、配制培养基的PH是 7.5~8.5；培养霉菌的温度是 28 、时间是 3~5d 、配制培养基的PH是 4.0~5.8 。 7．在其它条件相同的情况下，物镜放大倍数越大，焦距其工作距离，
所需光量 变大 。
9．湿热灭菌杀菌力强，因为是 、白质的空间结构和稳定性的氢键 。
C______30_____分钟。 三、判断题°C_____2_______小时；湿热杀灭芽孢的温度为__121___________°10．细菌的芽孢耐热，通常干热杀灭芽孢的温度为_____160~170__________
（ F ）1．大肠杆菌的V、P实验和甲基红实验均为阳性。 改正： 产气肠杆菌的V、P实验才是阳性
（ F ）2．乳酸菌饮料发酵中，培养温度为370C，培养时间为24小时。
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改正：420C 培养3~4h
( F )3、乳酸菌饮料发酵中，牛乳和水的比例为1：2，于500C下消毒。 改正：1:7 80~85下消毒
( F ) 4． 在吲哚试验中，加入吲哚试剂后要充分振荡试管，以使混合均匀。 改正：切勿摇动试管
( F ) 5．显微镜的放大倍数愈高，其视野面积愈大。 改正：面积越小
( F )6．摆斜面的长度应不超过试管长度的1/5。 改正：1/2
( T ) 7．霉菌最适的pH为中性~微酸性。 改正：
( F ) 8．放线菌菌落表面湿润，易用接种环挑起。 改正：
( T )9．所有放线菌菌落表面干燥，呈粉绒状。 改正：
（ F ）10．在芽孢染色中，涂片上加入孔雀绿染液后，自然干燥1分钟。 改正：
( F ) 12．细菌的荚膜染色实验中，为确保细菌能固定在载玻片上，可用微火加热。 改正：自然干燥
（ F ）13．制备牛肉膏蛋白胨培养基时，PH值应为中性偏酸。 改正：中性偏碱 四、名词解释
1、菌苔和菌落：单个细菌或一小堆同种细胞在适宜的培养基表面或内部生长，繁殖一定程
度可形成肉眼可见的，有一定形态结构的子细胞生长群体 众多菌落连成一片 2、抗生素和菌落
抗生素是由微生物或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的次级代谢产物能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质
3、芽孢和荚膜：芽孢是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低，
不易着色。 荚膜是一些细菌细胞外的一层胶状黏液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。
4、消毒和灭菌：消毒是一种采用较温和的理化因素，及杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。 灭菌是采用强烈的理化因素是任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖的能力的措施。 五、简答题
1、请分别画出枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌在显微镜视野下的形态图。 2、画出平板划线接种的两种方法的示意图，简述其划线方法.
3、为什么芽孢染色需要加热？为什么芽孢及营养体能染成不同的颜色？
答：芽孢壁厚、透性低、不易着色。用着色力强的染色剂如孔雀绿或石炭酸复红在加热条件下能进入菌体和芽孢内，进入菌体的染料经水洗脱色，而芽孢内的染料难以洗脱，从而对芽孢进行染色。
4、简述手提式压力蒸汽灭菌锅的使用方法。 答：（p4）1、加水 使水面与三角搁架相平为宜
2、装料 放回内层锅，装入待灭物品。注意不要装得太拥挤；要防止液体溢出； 3、加盖 插排气软管；以对称的方式同时旋紧螺栓；打开排气阀
4、排气 加热，当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排净 5、升压 当锅内空气排净时，即可关闭排气阀，压力开始上升 6、保压 当锅内的压力升到所需压力时，控制热源，计时
7、降压 达到时间后，关闭热源，让压力自然下降到零后，放净蒸汽
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8、无菌检查 将已灭菌的培养基于37培养24h 5、试述细菌、放线菌、霉菌菌落形态的特点 答：
7、简述革兰氏染色法的原理
答：其原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。G+菌的细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞壁内使细胞呈蓝紫色;儿G-菌肽聚糖层薄，网状结构交联少，且类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，再经番红复染后细胞呈红色。
8在制备细菌装片时为什么要固定？可用什么方式固定？固定时应注意什么？ 不能将载片在火上烤，防止细菌变形、死亡。 六、填图及填表
1. 下列事件是采用何种措施控制有害微生物的。
酸菜中的乳酸菌 酒精擦手
培养皿在烘箱中1200C，2小时 市售牛奶 新洁尔灭拖地
培养基在高压锅中1210C，30分钟
消毒 V V
防腐 V V
灭菌 V V
2. 此图是青霉形态结构示意图，请写出各部位名称。
①分生孢子 ②小梗 ③梗基 ④分生孢子梗
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3、此图是黑曲霉形态结构示意图，请写出各部位名称。

① 足细胞 ②分生孢子梗 ③初生小梗 ④顶囊 ⑤次生小梗 ⑥分生孢子