分析方法的验证专项方案改后.doc

XXX产品HPLC分析办法

确认方案

XXX制药有限公司

确认方案审批表
确认方案名称：XXX产品HPLC分析办法确认方案
确认方案编号：KY-ZL-YZ-FF-00400
审批
程序
部门
签名
日期
起草
检查室

审核
检查室主任

质量保证部

批准人
质量负责人

目 录
1 概述
2 确认目
3 确认范畴
4 确认小构成员与职责
5 确认方案审核与批准
6 进度筹划
7 确认内容
8 变更与偏差
9 确认成果与评价报告
10 确认合格证书

1 概述
我公司产品XXX产品采自《中华人民共和国药典》二部，含量及关于物质、A、B、C检查均使用高效液相色谱仪进行检查，两个检查项目检查参数等条件完全相似，且我公司未对《中华人民共和国药典》二部中办法进行过任何变化，因而按照新版GMP规定，需要进行分析办法确认。本确认方案使用LC-AH型高效液相色谱仪对XXX产品采用《中华人民共和国药典》二部“含量”、“关于物质”及“A、B、C”检查办法进行确认，证明此办法在我司实验室合用性。依照《药物GMP指南（质量控制实验室与物料系统）》分册规定，“含量”、“关于物质”及“A、B、C”项需确认项目如下：
确认项目
精确度
精密度
专属性
定量限
含量
是
是
是
否
关于物质
否
是
是
是
A、B、C
否
是
是
是
“是”代表该项内容需确认，“否”代表该项内容不需要确认
2 确认目
通过对XXX产品含量及关于物质A、B、C检查办法确认，证明此办法在我司实验室合用性。
3 确认范畴
本确认方案合用于XXX产品含量及关于物质A、B、C、检查办法进行确认。
4 确认小构成员与职责

部门及职务
确认工作中职责
检查员
确认执行人：负责起草确认方案，执行确认方案，负责验
证过程中有关检查操作，收集整顿数据，起草确认报告。
质量保证部
负责确认方案、确认报告审核；审核确认过程中发生偏差解决方案，以及采用纠正行动。
检查室主任
确认小组组长：组织确认实行，负责确认方案审核、组织起草确认报告并审核。
质量负责人
确认总负责人：负责确认方案、报告批准
5 确认方案起草与审批
5.1 确认方案起草与审批：确认方案由检查室起草，确认小组会审，质量负责人批准实行。
5.2 确认方案培训：确认方案经批准后，实行前由确认方案起草部门组织确认方案参加者进行培训。
5.3 确认方案修改：确认方案如需修改，由质量负责人批准实行，在确认报告中体现。
6 进度筹划
整个确认活动实行时间：
确认时间：从_____年___月__日 至_____年__ 月__ 日；
起草报告：从_____年___月__日 至_____年__ 月__ 日；
7 确认内容
7.1确认前仪器及材料检查
7.1.1确认前，对下列实验用仪器和材料进行检查
7.1.1.1岛津 高效液相色谱仪
7.1.1.2 TG-332A型分析天平
7.1.1.3色谱柱：C18（4.6*250㎜）
7.1.1.4对照品和试剂：产品X二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、产品X对照品、羟苯甲酯对照品、羟苯乙酯对照品、羟苯乙酯对照品、庚烷磺酸钠，乙腈（色谱级），甲醇（色谱级），磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸、蒸馏水
7.1.1.5其她某些辅助玻璃仪器（如量瓶、移液管等）
7.1.2可接受原则：仪器和用品经校验且在效期内；对照品、试液、试剂与试药符合验证规定且在效期内；色谱柱使用状态正常。
7.1.3成果记录：将成果记录在附件1《确认前仪器及材料检查表》 中。
7.2确认涉及文献检查
7.2.1确认前，对与本次确认有关文献进行检查
7.2.1.1XXX产品成品检查操作规程（KY-ZL-SOP-CP-00400）
7.2.1.2 型高效液相色谱系统原则操作及维护保养规程（KY-SB-SOP-JY-03700）
7.2.1.3 型高效液相色谱系统维护保养及清洁操作规程（KY-WS-SOP-JY-03700）
7.2.1.4TG-332A型分析天平原则操作规程（KY-SB-SOP-JY-02300）
7.2.1.5TG-332A型分析天平维护保养及清洁原则操作规程（KY-WS-SOP-JY-02300
7.2.1.6高效液相色谱法原则操作规程 （KY-ZL-SOP-ZK-03300）
7.2.1.7XXX产品HPLC分析办法验证方案（KY-YZ-SOP-JY-00400）
7.2.1.8XXX产品生产工艺规程（KY-SC-JB-GY-00400）
7.2.1.9检查办法验证（确认）管理程序（KY-ZL-SMP-05800）
7.2.2可接受原则：所有文献都应为现行版本，且通过批准。
7.2.3成果记录：将成果记录在附件2《确认前文献检查表》中。
7.3人员培训确认
7.3.1检查并确认所有参加执行确认人员与否已得到培训，并在培训记录上签字。
7.3.2可接受原则：验证小构成员均已通过培训，并在培训记录上签字。
7.3.3确认成果：将确认成果填入附件3《人员培训、参加状况确认记录》中。
7.4 确认项目
7.4.1 “含量”项确认
7.4.1.1重复性/精确度
7.4.1.1.1空白基质制备：精密称定硼酸：13.125g硼砂：0.6g玻璃酸钠：1g羟苯乙酯：0.5g按照XXX产品生产工艺规程（KY-SC-JB-GY-00400）配制加注射用水至1000ml。
7.4.1.1.2对照液制备：称取产品X对照品用注射用水配制成1ml含2.5mg溶液，取本品用流动相定量稀释制成每1ml中含0.1mg溶液摇匀，作为对照液备用。对照液平行制备2份，标记为S-1、S-2（浓度为标示量100%）。
7.4.1.1.3样品制备：称取产品X对照品用空白基质水溶解后定容，摇匀，备用。平行制备浓度梯度为标示量80%、100%、120%样品各3份，标记为A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9。
7.4.1.1.4照《高效液相色谱仪原则操作规程》测定。
色谱条件与系统合用性实验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（取磷酸二氢钾6.8g，用0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000ml，再加三乙胺5ml，混匀，用磷酸调节PH值至2.5），流动相B为甲醇；检测波长为277nm；按下表进行线性梯度洗脱。另取产品X对照品、产品X二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、羟苯甲酯、羟苯乙酯与羟苯丙酯对照品各适量，加甲醇适量（产品X每10mg加甲醇1ml）使溶解，用流动相定量稀释成每1ml中含产品X0.5mg、产品X二醇物40ug与对硝基苯甲醛3ug、羟苯甲酯40ug、羟苯乙酯50ug和羟苯丙酯20ug混合溶液。精密吸取该溶液10µl注入色谱仪，作为系统合用性溶液。记录色谱图。各相邻峰间分离度均应符合规定）（应不不大于1.5）。
时间（分钟）
流动相A(%)
流动相B(%)
0
15
40
50
60
68
68
35
68
68
32
32
65
32
32
7.4.1.1.5测定：精密量取上述A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液用流动相定量稀释制成每1ml中含0.1mg溶液，摇匀，精密量取10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图。
1）取S-1精密量取10ul，注入液相色谱仪记录色谱图，该溶液持续进样2针。
2）取S-2精密量取10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，该溶液持续进样1针。
3）分别精密量取稀释后A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液各10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图。
4）计算S-1和S-2F值，相对原则偏差应≤2.0%，以外标法计算稀释后A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液含量。
成果计算
含量（cx）=CR×Ax/AR
cx-------- 为供试品浓度；
CR---------为对照品浓度；
Ax-------- 为供试品峰面积；
AR---------为对照品峰面积。
7.4.1.1.6可接受原则：稀释后A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9各浓度含量均应在标示量±3%，且各浓度样品含量RSD%值应≤2.0%。
7.4.1.1.7确认记录和数据
确认数据和成果记录于附件4《含量精密度/精确度确认数据和成果》中。
7.4.1.2专属性
7.4.1.2.1 测试办法：
7.4.1.2.1.1取空白基质进样1针，记录色谱图。
7.4.1.2.1.2 精密量取样品（用成品即可）用流动相A-B（68：32）定量稀释制成每1ml中含产品X0. 1mg溶液，作为供试品溶液，精密量取10ul，注入液相色谱仪，进样1针，记录色谱图，获得产品X保存时间。
7.4.1.2.1.3取产品X对照品用流动相定量稀释制成每1ml中含产品X0. 1mg溶液，作为对照品溶液，注入液相色谱仪，进样1针，记录色谱图，获得产品X保存时间。
7.4.1.2.1.4可接受原则：溶剂空白相应峰对样品测定有无明显干扰；供试品图谱中产品X主峰保存时间与对照品图谱中产品X主峰保存时间一致。
7.4.1.2.1.5 确认记录和数据
确认数据和成果记录于附件5《专属性确认数据和成果》中。
7.4.2“关于物质”及“A、B、C”项确认
7.4.2.1专属性
7.4.2.1.1精密量取样品（用成品即可）用流动相A-B（68：32）定量稀释制成每1ml中含产品X0.5mg溶液，作为供试品溶液。
7.4.2.1.2对照溶液；取产品X对照品、产品X二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、羟苯甲酯、羟苯乙酯与羟苯丙酯对照品各适量，加甲醇适量（产品X每10mg加甲醇1ml）使溶解，用流动相定量稀释成每1ml中含产品X0.5mg、产品X二醇物40ug与对硝基苯甲醛3ug、羟苯甲酯40ug、羟苯乙酯50ug和羟苯丙酯20ug混合溶液。作为对照溶液；照含量项下色谱条件，取对照品溶液10ul，注入液相色谱仪，调节检测敏捷度，使产品X二醇物峰高约为满量程64%。
7.4.2.1.3精密量取供试品溶液与对照品溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，进样1针，记录色谱图。
7.4.2.1.4可接受原则：供试品图谱中产品X、产品X二醇物、对硝基苯甲醛、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯各峰保存时间与系统合用性图谱中相对峰保存时间一致。溶剂空白相应位置无峰干扰。
7.4.2.1.5确认记录和数据
确认数据和成果记录于附件5《专属性确认数据和成果》中。
7.4.2.2精密度
7.4.2.2.1测试程序
7.4.2.2.1.1取含量项下系统合用性溶液作为对照溶液D-1；另按同法制备一份对照品作为对照溶液D-2。
7.4.2.2.1.2取样品用含量测定项下流动相A-B（68：32）定量稀释制成每1ml中含产品X0.5mg溶液，配制6分平行样品作为供试品溶液分别为B-1～B-6。
7.4.2.2.1.3 D-1进样2针，D-2进样1针，然后B-1～B-6分别进针，记录色谱图。
7.4.2.2.1.4各相邻峰之间分离度应≥1.5
7.4.2.2.1.5计算D-1和D-2F值，相对原则偏差应≤2.0%，以外标法计算B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6溶液中各关于物质含量。
计算：产品X二醇物（%）=S二醇物×C二醇物对照/ S二醇物对照×C供试品×100%
对硝基苯甲醛（%）=S对硝基苯甲醛×C对硝基苯甲醛对照/ S对硝基苯甲醛对照×C供试品×100%
羟苯甲酯（%）=S羟苯甲酯×C羟苯甲酯醛对照/ S羟苯甲酯对照×C供试品×100%
羟苯乙酯（%）=S羟苯乙酯×C羟苯乙酯对照/ S羟苯乙酯对照×C供试品×100%
羟苯丙酯（%）=S羟苯丙酯×C羟苯丙酯对照/ S羟苯丙酯对照×C供试品×100%
7.4.2.2.1.2可接受原则：6个样品B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6含量RSD%值应≤2.0%。
7.4.2.2.1.3确认记录和数据
确认数据和成果记录于附件6《关于物质及A、B、C精密度确认数据和成果》中。
7.4.2.3定量限
7.4.2.3.1在上述色谱条件下取产品X二醇物对照品用流动相稀释成每1ml中含产品X二醇物40ug溶液，进样，再逐渐稀释置恰当浓度，进样，直至当待测组分信噪比约为10倍时（即产品X二醇物峰高为噪音峰高约10倍时），相应浓度为该组分最小定量浓度(Cm2)，重复进样3次，记录色谱图。
7.4.2.3.2在上述色谱条件下取对硝基苯甲醛对照品用流动相稀释成每1ml中含对硝基苯甲醛3ug溶液,进样，再逐渐稀释置恰当浓度，进样，直至当待测组分信噪比约为10倍时（即对硝基苯甲醛峰高为噪音峰高约10倍），相应浓度为该组分最小定量浓度(Cm2)，重复进样3次，记录色谱图。
7.4.2.3.3因我司产品中加入是羟苯乙酯，故只做羟苯乙酯定量限，上述色谱条件下取对硝基苯甲醛对照品用流动相稀释成每1ml中羟苯乙酯50ug溶液,进样，再逐渐稀释置恰当浓度，进样，直至当待测组分信噪比约为10倍时（即对硝基苯甲醛峰高为噪音峰高约10倍），相应浓度为该组分最小定量浓度(Cm2)，重复进样3次，记录色谱图。
7.4.2.3.2计算公式

式中：hi：测试溶液中产品X二醇物、对硝基苯甲醛峰高；
hb：基线噪声峰高；
h0：空白溶液色谱图中基线峰高。
7.4.2.3.3可接受原则：上述杂质定量限应不大于产品中各类杂质限度原则10%。
7.4.2.3.4确认记录和数据
确认数据和成果记录于附件7《定量限确认数据和成果》中。
8 变更与偏差
若确认方案需要变更，须按方案制定期审批程序进行批准；若系统发生重大变更，应重新制定确认方案。
确认过程中应严格按照本确认方案执行，浮现个别项目不符合原则成果时，应按偏差管理规程进行解决，有异常事项未解决时，不得进行下一步工作。
所有偏差、异常状况解决过程均应记录备案，并登记到附件8中。
9 确认成果与评价报告
由质量保证部和检查室主任对分析办法确认成果进行审核，检查所有测试项目已经完毕；变更和偏差都已经得到解决和批准；每个项目均应符合它们确承认接受原则；确认记录完整。由检查室填写确认报告，由确认小组长在报告中订立评审结论，提交确认总负责人进行批准。附件9中。
10 确认合格证书
确认成果与评价报告经批准人批准签字后，质量受权人签发验证合格证书。附件10。

附件目录
附件
附件名称
附件1
确认前仪器及材料检查表
附件2
确认前文献检查表
附件3
人员培训、参加状况确认记录
附件4
含量精密度/精确度确认数据和成果
附件5
专属性验证数据和成果
附件6
关于物质及A、B、C精密度确认数据和成果
附件7
定量限确认数据和成果
附件8
变更偏差状况确认记录
附件9
确认成果与评价报告
附件10
确认合格证书

附件1
确认前仪器及材料检查表
序号
名 称
仪器编号
试液、试药批号
证书编号
有效期至

确认原则
确认成果
确认所用仪器通过校验且在有效期内，试药、试液均在有效期内，原则滴定液通过标定且在有效期内。

确认结论：

检查人/日期

复核人/日期

附件2
确认前文献检查表
文献名称
文献编号
与否现行文本
检查办法验证（确认）管理程序
KY-ZL-SMP-05800

TG -332A型分析天平原则操作规程
KY-SB-SOP-JY-02300

TG-332A型分析天平维护保养及清洁原则操作规程
KY-WS-SOP-JY-02300

LC-AHT型高效液相色谱系统原则操作规程
KY-SB-SOP-JY-03700

LC-AHT型高效液相色谱系统维护保养及清洁原则操作规程
KY-SB-SOP-JY-03700

高效液相色谱法原则操作规程
KY-ZL-SOP-ZK-03300

XXX产品成品检查操作规程
KY-ZL-SOP-CP-00400

XXX产品生产工艺规程
KY-SC-JB-GY-00400

XXX产品HPLC分析办法确认方案
KY-YZ-SOP-JY-00400

检查人

检查日期

检查成果

附件3
人员培训、参加状况确认记录
授课地点

日 期

授课内容

部门
职务
培训人
检查室
检查室主任

部门
职务
受培训并参加方案实行人员
检查室
检查员

检查室
检查员

质量保证部
质监处处长

质量保证部
质量授权人

确认原则
确认成果
确认所有参加执行本确认人员已经得到培训，并在培训记录中签字。

确认结论：

检查人/日期

复核人/日期

附件4
含量精密度/精确度确认数据和成果
1 S-1
No
1
2
3
平均值
RSD
产品X峰面积

2 S-2
No
1
2
平均值
RSD
产品X峰面积

3 80%浓度
No
A-1
A-2
A-3
平均值
RSD
含量
产品X峰面积

4 100%浓度
No
A-4
A-5
A-6
平均值
RSD
含量
产品X峰面积

5 120%浓度
No
A-7
A-8
A-9
平均值
RSD
含量
产品X峰面积

6 确认结论
可接受原则
验证成果
与否符合
各浓度含量RSD%值应≤2.0%

各浓度含量均应在标示量±3%

确认结论：
检查人/日期

复核人/日期

附件5
专属性验证数据和成果
确认项目
对照品
保存时间
样品
保存时间
检查成果
检查人
检查日期
含量专属性
产品X

关于物质
专属性
产品X二醇物

对硝基苯甲醛

羟苯甲酯

羟苯乙酯

羟苯丙酯

检查人/日期

复核人/日期

备注
附检查原始记录
确认结论：
检查人/日期

复核人/日期

附件6
关于物质及A、B、C精密度确认数据和成果
1 D-1
No
1
2
3
RSD
平均值
产品X二醇物峰面积

对硝基苯甲醛峰面积

羟苯甲酯峰面积

羟苯乙酯峰面积

羟苯丙酯峰面积

2 D-2
No
1
2
RSD
平均值
产品X二醇物峰面积

对硝基苯甲醛峰面积

羟苯甲酯峰面积

羟苯乙酯峰面积

羟苯丙酯峰面积

3 样品
No
产品X二醇物
峰面积
对硝基苯甲醛峰面积
羟苯甲酯峰面积
羟苯乙酯峰面积
羟苯丙酯峰面积
B-1

B-2

B-3

B-4

B-5

B-6

RSD

平均值

含量

4确认结论
可接受原则
验证成果
与否符合
各关于物质含量RSD%值应≤2.0%

确认结论：

检查人/日期

复核人/日期

附件7
定量限验证数据和成果
1.定量限测定成果
项目
名称
信噪比
最小定量浓度
（µg/mL）
产品X二醇物

对硝基苯甲醛

羟苯乙酯

检查人/日期

复核人/日期

2确认结论
确认结论：
检查人/日期

复核人/日期

附件8
变更偏差状况记录

序号
发生日期
偏差/变更内容描述
解决办法
签名/日期

确认原则
确认成果
在本方案实行过程中所发生偏差或变更，已解决完毕并已作好记录。

确认结论：

检查人/日期

复核人/日期

附件9
确认成果与评价报告
分析办法名称

验证参加人员

验证时间
年 月 日至 年 月 日
检测项目
验证状况
与否通过
1
精密度

3
专属性

4
定量限

质量保证部确认结论:

签名/日期：
验证小组长评审结论：

签名/日期：
验证总负责人批准意见：

签名/日期：

附件10

XXX制药有限公司
确 认 合 格 证 书

项目名称：

XXX产品HPLC分析办法

依照国内GMP规定，根据我公司《验证管理文献》，经对该项目进行验证，成果符合规定。
特发此证

签发人：
年 月 日