气相色谱法测定吡唑硼酸频哪酯及方法学验证.pdf

年 月云南化工 第 卷第 期 ，：气相色谱法测定吡唑硼酸频哪酯及方法学验证王武宝，高思国，刘水莲，范荣荣，任耀辉，马雪，张雨（济南尚博医药股份有限公司，山东济南 ）摘要：（目的）建立了测定吡唑硼酸频哪酯的气相色谱法方法，并进行了方法学验证。（方法）采用 苯基 甲基聚硅氧烷色谱柱（，）检测器：氢离子火焰检测器；载气：氮气；流速：；进样器温度：；检测器温度：；分流比：；进样量：；柱箱温度：初始，维持 ，按 升温至 ，维持 ，按 升温至 ，维持 ；氢气流速：；空气流速：；氮气流速：。结果表明，方法的专属性、重复性、线性、中间精密度及溶液稳定性试验结果均符合要求。（结论）本法操作简单，方法准确，可用于吡唑硼酸频哪酯的测定。关键词：气相色谱法；吡唑硼酸频哪酯；方法学验证中图分类号：文献标识码：文章编号：（），（，）：（，）；，；：，：；有机硼化合物的 反应在有机合成和组合化学等领域应用十分广泛，这是因为其独特的结构特征和良好的生物活性和药理作用 。吡唑基团存在于大量的天然和合成的小分子配体中，可与多种具有药理重要性的酶和受体相互作用，被广泛应用于合成潜在的酶抑制剂、癌症的硼中子俘获治疗法等，在抗肿瘤药物开发方面有着重要意义 。烷基吡唑硼酸是合成很多具有生物活性化合物的重要中间体。作为反应原料与频哪醇缩合成酯后，其稳定性提高，可长期储存，更便于用作有机合成的重要试剂和进一步的药物相关活性的研究。吡唑硼酸频那醇作为吡唑硼酸频那醇酯类的重要中间体之一，具有非常可观的发展前景，更能广泛地应用于生物医药行业。但是，目前未有相关文献报道检测吡唑硼酸频哪酯的方法。本文建立一种气相色谱法，操作简单，经验证，该方法结果准确，可用于检测吡唑硼酸频哪酯。材料与方法 仪器与试剂 气相色谱仪（安捷伦公司）；气相色谱仪（安捷伦公司）；型电子分析天平（梅特勒 托利多国际有限公司）；苯基 甲基聚硅氧烷（，）色谱柱（安捷伦公司）。吡唑硼酸频哪醇酯，济南尚博医药股份有限公司，批号 ；二氯甲烷，山东金岭化工股份有限公司，批号 ；四氢呋喃，潍坊振兴日升化工有限公司，批号 ；吡唑，济南安科诺新材料有限公司，批号 ；色谱纯乙腈（）。检测方法色谱 柱：苯 基 甲 基 聚 硅 氧 烷（，）；检测器：氢离子火焰检测器；载气：氮气；流速：；进样器温度：；检测器温度：；分流比：；进样量：；柱箱温度：初始 ，维持 ，按 升温至 ，维持 ，按 升温至 ，维持 ；氢气流速：；空气流速：；氮气流速：。对照品溶液制备：精密称定 吡唑硼酸频哪醇酯样品置于 容量瓶中，加乙腈溶解后定容至 年 月云南化工 第 卷第 期 ，刻度线，摇匀，作为对照品溶液。方法学验证 专属性二氯甲烷溶液制备：移取约 稀释剂，置于 容量瓶中，再精密称定 二氯甲烷，置于容量瓶中，溶解后定容至刻度线，摇匀。四氢呋喃溶液制备：移取约 稀释剂，置于 容量瓶中，再精密称定 四氢呋喃，置于容量瓶中，溶解后定容至刻度线，摇匀。吡唑溶液制备：移取约 稀释剂，置于 容量瓶中，再精密称定 吡唑，置于容量瓶中，溶解后定容至刻度线，摇匀。对照品溶液制备：精密称定 吡唑硼酸频哪醇酯样品，置于 容量瓶中，用稀释剂溶解后定容至刻度线，摇匀。混合溶液制备：分别精密移取 二氯甲烷溶液、四氢呋喃溶液和吡唑溶液，置于 容量瓶中，加对照品溶液稀释定容至刻度线，摇匀。分别取空白溶液（乙腈溶液）、二氯甲烷溶液、四氢呋喃溶液、吡唑溶液、对照品溶液及混合溶液，各进 针，记录气相色谱图，获得各成分主峰的保留时间。重复性重复性试验中供试品溶液制备：精密称定 份吡唑硼酸频哪醇酯，分别置于 容量瓶中，每份 。加稀释剂溶解后，定容至刻度线，摇匀。依次进样分析，记录气相色谱图，获得各份吡唑硼酸频哪醇酯的峰面积，计算吡唑硼酸频哪醇酯的质量分数。线性线性试验中供试品溶液制备：精密称定 吡唑硼酸频哪醇酯，置于 容量瓶中，加稀释剂溶解后 定 容 至 刻 度 线，摇 匀，配 制 成 质 量 浓 度 为 的溶液。分别移取 、的溶液至 容量瓶中，用稀释剂再次稀释定容至刻度线，摇匀，作为线性系列试验溶液，标记为 （）、（）、（）、（）、（）。各进 针，记录气相色谱图，获得不同质量浓度吡唑硼酸频哪醇酯的峰面积。以峰面积与相应质量浓度比值进行线性回归，得到回归方程。中间精密度中间精密度试验中供试品溶液制备：分析员 和于第一天分别精密称定 份吡唑硼酸频哪醇酯，置于 容量瓶中，每份 ，加稀释剂溶解后定容至刻度线，摇匀，依次进样分析；第二天分析员 按相同方法再配制 份供试品溶液，分别用两台仪器检测，依次进样分析；记录气相色谱图，获得不同人员、不同时间、不同仪器下吡唑硼酸频哪醇酯的峰面积，计算各条件下吡唑硼酸频哪醇酯的纯度及 值。溶液稳定性溶液稳定性试验中供试品溶液制备：精密称定 吡唑硼酸频哪醇酯，置于 容量瓶中，加稀释剂溶解后定容至刻度线，摇匀，于配制后 、依次进样分析，记录气相色谱图，获得不同进样时间下吡唑硼酸频哪醇酯的峰面积，计算纯度结果相对于 的变化。结果与分析 专属性结果空白溶液中的峰对样品检测无明显干扰，混合溶液中吡唑硼酸频哪醇酯和其他杂质都能被有效分离，产物峰前后分离度大于 （如表所示），专属性试验通过。表 专属性试验结果有关物质名称分离度二氯甲烷四氢呋喃 吡唑 吡唑硼酸频哪醇酯 重复性结果通过计算供试品的纯度，针 值为 （如表 所示），小于 ，重复性试验通过。表 重复性试验结果序号纯度 平均值 线性结果线性回归方程为 ，相关系数为 ，大于 （如表 所示），线性试验通过。表 线性试验结果编号峰面积回归方程及线性系数 年 月云南化工 第 卷第 期 ，中间精密度结果通过计算供试品的纯度，不同分析员同一天测定结果 值为 ，同一分析员不同天测定结果 值为 ，同一分析员不同仪器测定结果 值为 （如表 、表 、表 所示），均小于 ，中间精密度试验通过。表 中间精密度试验结果 项目序号纯度 分析员 仪器一 第一天 分析员 仪器一 第一天 表 中间精密度试验结果 项目序号纯度 分析员 仪器一 第一天 分析员 仪器一 第二天 表 中间精密度试验结果 项目序号纯度 分析员 仪器二 第二天 分析员 仪器一 第二天 溶液稳定性结果供试品溶液 、纯度结果相对于 的变化，均在 以内，内溶液稳定（如表 所示），稳定性试验通过。表 溶液稳定性试验结果时间 纯度 相对于 变化 结论采用气相色谱法测定吡唑硼酸频哪酯，并进行了方法学验证，包括专属性、重复性、线性、中间精密度和溶液稳定性，结果表明，该方法能够准确测定吡唑硼酸频哪酯的有关物质，且方法操作简单、准确。参考文献：张玉娟，邢磊，陈国良 甲基 吡唑 硼酸频那醇酯的合成 精细化工中间体，（）：丁翔 （乙氧基）吡唑 硼酸频那醇酯的合成方法 浙江化工，（）：刘娥 甲基 硝基 吡啶硼酸频哪酯合成工艺的改进 化学研究与应用，（）：郑永胜，郭举，陈丹，等（甲基 氨基）丁烷基硼酸频那醇酯盐酸盐的合成研究 化学研究与应用，（）：，（）：收稿日期：作者简介：王武宝（），男，山东临沂人，博士，高级工程师，研究方向：主要从事药物合成和质量研究。：通讯作者：刘水莲（），女，山东济南人，硕士，助理工程师，研究方向：主要从事方法开发、验证等质量研究。：