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上皮跨膜电阻仪EVOM使用基础手册.doc

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资源描述
使用手册 目录 手册说明 1 介绍 1 快速参考指南 2 电阻测量 2 电压测量 2 产品概述 3 配置清单 3 启封 3 调试 3 校准电阻仪 3 STX2 电极 4 仪表 4 设备诊疗 5 测试 EVOM2 仪表 5 电压测量前电极调整 5 操作说明 7 设备维护 11 电极 11 抛光/清洗STX2电极 11 STX2电极消毒 12 经典消毒方案 12 电极储存 12 EVOM2 充电器及电池 13 电池充电 13 附件 16 故障诊疗 18 EVOM2 仪表 18 STX2 电极 18 断开和统计仪链接进行诊疗 19 规格 22 附录 A: 电阻计算 23 电阻 23 插入“blank”电阻 23 单位面积电阻 23 附录 B: 直径24 mm(6孔)插入皿和STX电极 25 附录 C: 精度及可反复性性能提升 26 索引 27 符合说明 29 质量确保 30 退换货 30 手册说明 本手册中以下标志: 小心!操作可能造成仪器损坏。请仔细阅读相关说明 警告!操作可能造成人身伤害或威胁人身安全。请仔细阅读相关说明。 注释或提醒包含帮助信息。 介绍 EVOM是第一代专门测量常规组织培养跨上皮电阻设备。 EVOM2是其新一代产品,新设计更易于操作。EVOM2不仅能够定量测量细胞单层健康,而且能够定量测量细胞汇合。独创电路及STX2电极探测细胞单层汇合。当结合使用WPIendohm腔室,EVOM2还能够用来更正确地测量跨内皮电阻。 EVOM2产生交流电流,这么能够避免由直流电流产生电极金属沉积和对组织副作用,另外,阻抗测量不受膜电容和膜电压影响。 EVOM2内置可充电镍-氢电池,电流为2200毫安时。电池由外源电池充电器充电,完全充满电后能够使用8小时。当电池电量低于正常工作水平时,仪器会自动关闭。当插入交流电源时要使仪器安全工作,WPI提议在测量时将仪器和充电器断开。之所以这么做,是为了提供最大电子隔离以避免干扰,同时降低噪音以确保读数正确。 相关TEER自动测量,请考虑WPI’s REMS 自动进样器(WPI# REMS),它包含机械取样器,数据获取板,底座,基于windows软件和24孔或96孔用电极。 快速参考指南 相关使用EVOM2具体测量步骤请参阅第7页”操作说明” 电阻测量 1. 将EVOM2和充电器断开而且打开电源(I) 2. 将功效开关调至OHMs 3. 连接电极. 4. 测量. 电压测量 1. 将电极连接至EVOM2 2. 关闭电源,平衡电极 注意:电极必需浸入在溶液中进行平衡。 3. 将EVOM2和充电器断开而且打开电源(I)。. 4. 将功效开关调至MILLIVOLTS 。 5. 测量 安装 校准电阻器 图1为 1000W 电阻器 (WPI #91750)请阅读以下EVOM2检测说明 STX2 电极 STX2电极(图2)只能用于电阻测量, 能够直接从干燥储存环境拿来使用而不需要预处理。STX2电极由一对宽4毫米厚1毫米电极组成。每个电极包含一个外电极和一个内电极。(第8页图4)外 电极是小银板,用来传输样品膜 上电流,它们被称为电流电极。 内电极是小银/氯化银成份组成电压传感器,它们被称为电压电极。 仪表 在利用一个螺丝起子(需自购)校准R ADJ 螺口以后,EVOM2就能够使用了。 注意:要延长仪器使用寿命,请勿长时间将仪器置于阳光下,不然屏幕会变黑造成无法读数。 1. LCD显示器 2. 电源开关 3. 功效开关 4. 模拟输出 5. R ADJ 校准 6. 输入 7. 充电接口 Fig. 3—EVOM2 meter ①数字液晶显示器:数字液晶显示器上能够显示4位半数值,在测量电压时,它显示两个电极之间电势差,以毫伏表示最高999.9毫伏;在测量电阻时,它显示两电极之间阻抗即欧姆。尽管仪器能够显示13000W,但额定精度只到10000W. ②电源开关 I/O:棒状开关能够将仪器打开(I)或关闭(O) ③功效开关 (Ohms/Millivolts): 调拨到 Ohms 档, 仪器处于电阻测量模式;调拨到Millivolts 档, 仪器则处于电压测量模式. ④模拟输出:标准BNC连接许可将模拟数据输出到统计仪器. ⑤R ADJ 校准旋钮: 将1000W 电阻器接入到输入接口时,在电阻测量模式下,旋钮能够用来校准仪器显示到1000量程. ⑥输入: 将测试电阻器、STX2、STX3 或Endohm腔室电话线插头(RJ-11)插入到该口以连接到测量仪器. ⑦充电接口: 接入充电器插头,而且将充电器另一头接电源插座能够为EVOM2电池充电。但在充电时请勿测量电阻或电压. 设备诊疗 提议第一次使用EVOM2时先对设备进行测试,而且在后续要进行周期性检验。假如担心仪器或电极不能正常工作,能够参考以下内容来判定EVOM2工作状态: 测试EVOM2仪表 1. 将测试电阻器RJ-11插头插入仪器输入接口 2. 将功效开关置于欧姆档 3. 将EVOM2和充电器断开并打开电源。仪器将显示1000W 假如不是,用螺丝起子调整R-ADJ旋钮直到仪器显示1000W. 调整电极进行电压测量 1. 依据第7页“操作说明2-准备电极”操作提醒平衡电极. 注意:在测量电压前,必需先将电极浸入溶液中最少12小时进行平衡. 2. 将电极头部浸入到试验用培养基或0.1-0.15MKCl或NaCl电解质溶液中. 3. 将功效开关置于毫伏. 4. 将EVOM2和充电器断开,并打开电源 (I). 注意: 在一段时期内数次电压测量后会产生电压漂移. 5. 当仪器显示读数为0时,电极能够用来测量电压,假如仪器读数不为0,参考 “故障诊疗”. 操作说明 EVOM2 用来测量电阻时,电极在使用前不需要被平衡或预处理。假如测量结果出现不一致情况,能够对设备进行调整来赔偿。 测量阻抗或电压时,请遵照以下步骤: 1. 将EVOM2 和充电器断开. 2. 电极和仪器相连,将RJ插头接入到输入接口。. 3. 准备STX2 电极. A. 电极预处理. 测量电阻时:不需要进行任何预处理,能够直接从干储存环境中取出使用。 测量电压时:电极使用前则需要平衡。为了确保电压稳定性和较低电极间电势差,关闭EVOM2电源(O),而且在电极连接到EVOM2时,将电极浸入到电解液中(0.1 – 0.15M KCl)。当STX2 电压电极连接到设备且关闭电源时,在内部会形成短路。当电压电极回路短路几小时后,电极间不对称电势差就会减小,内部电极直流电势差只有几毫伏甚至更少,同时十分稳定,表1列出了平衡电极所需要时间。 表 1: STX2 电极平衡时间 电极所处环境 达成平衡时间 在干燥环境 24 小时 在溶液中 2 小时 B. 假如期望消毒话,能够参阅操作说明中“STX2消毒” 4. 将电极置于样杯中. STX2 电极设计用来测量组织培养孔中表皮细胞膜电压和电阻。因为电极之间长度有差异,许可外部长电极接触到含有外部培养基盘子底部,这么能够预防内部短电极接触组织培养杯底部。 (图4). 这种结构确保电极和细胞层之间适宜位置。另外,长电极 每次全部接触到容器底部,大 大提升了反复测量正确性。 将电极置于溶液中时,头部刚 好接触到容器底部而不会 使电极变形。见图5。 备注:电极浸入角度不正确(图6)或浸入深度不够(图7)会影响到阻 抗测量. 注意:要对同一个样品杯中取得可复制性结果,电极位置必需保持不变。要提升可反复性结果和测量稳定性,在测量过程中必需确保电极稳定性。 当心: 当把电极从一个样杯移动到另外一个量杯时,最好不要用蒸馏水冲洗银/氯化银电极。假如使用蒸馏水冲洗银/氯化银电极,在从一个样杯移动到另外一个量杯时,会需要几分钟时间进行复位,而在这个过程中会出现电压多个毫伏漂移。假如必需要清洗以避免将一个样本带入到另外一个样本中,电极请用试验用培养基冲洗。 提醒: 由Corning Costar生产Transwell 培养皿, 通常在过滤杯底部和培养板之间有较大距离。同时这个距离会因为每批产品不一样而不一样,而这个差异可能会造成短电极接触到细胞层而长电极也接触到培养杯底部。这种情况下,Transwell用户能够使用STX3电极替换STX2。STX3电极是一个可调整电极,或能够用砂纸将短电极上磨掉0.5毫米。见右图。将600级砂纸放置在桌子边缘,垂直握住电极使短电极接触砂纸而长电极 悬空,拖动电极在砂纸上轻轻滑动, 直到得到适宜长度。 图 8—打磨 STX2 电极 警告: 只有STX2电极绿色部分才能被打磨。 请勿打磨或损坏电极任何金属部位 5. 电阻测量. A. 功效开关置于欧姆档. B. 断开EVOM2 充电器,打开电源开关(I). C. 将电解液倒入空杯子中。 (比如, 不含细胞细胞培养皿) D. 将电极置于空白培养杯中. 这时会显示溶液电阻读数。这个空白电阻值应该加入到测量组织培养跨膜电阻里进行计算。具体内容参见附录A中电阻计算。 注意:空白电阻必需测量,然后从测得跨膜电阻减去,这么能够得到真实跨膜电阻。 6. 电压测量 A. 将功效开关置于毫伏档 B. 断开EVOM2充电器,打开电源开关(I). C. 将平衡好电极插入到细胞培养皿,仪器会显示稳定膜间电压读数。 注意:内部短电极将连接到设备地线作为参考电极。假如仪器读数为正,则细胞组织基底面(黏在插入杯底部)相对于顶层(暴露部分)电压为正;相反,假如读数为负,则细胞组织底层对顶层电压为负。 注意:操作步骤参考第2页“快速参考指南”。 设备维护 备件订购请参考表2中零件号。 其它附件参考13页表3。 表2: 备件 WPI 零件号 说明 STX2 电极 91750 1,000W 电阻器 电极 电极必需正确清洗、消毒和储存。 注意: 请勿灼烧电极,不然会引发金属融化,并使电极质量确保无法确保。 清洁STX2电极表面 在使用中,电极表面可能被蛋白质或其它物质覆盖。这种堆积或污染,会造成系统效率降低,引发10-20mV电压误差,或读数不稳(电阻测量不受影响)。假如需要处理这个问题,能够按以下步骤重新氯化电极或清洁电极表面。 重新氯化 – 将电极浸入未经稀释家用漂白水3分钟,浸泡后用清水立即冲洗,尽管这将重新氯化电极表面,不过不能纠正误差。 当心!确保只有电极尖端置于漂白液中,不能将漂白液 接触电极上部。 电极表面抛光--用600级砂纸轻轻打磨STX2电压电极顶端内侧银质小球(图9),轻轻除去银质小球表层即可。 当心:数次反复打磨最终会除去全部 Ag/AgCl 小球,假如打磨不再改善电压读数时,则需要更换电极。 提醒:假如没有600级砂纸,可用橡皮擦替换。 对STX2电极消毒 STX2 电极是未经消毒。能够用酒精、环氧乙烷、紫外线或杀菌剂如Cidex Plus (WPI #7364) 或 Sporicidin. 当心:电极不能用高压灭菌器消毒。 经典消毒方案 在层流净化罩中: 1. 将电极在Cidex Plus (wPI #7364) 浸泡15分钟,然后用15秒风干。 当心:电极每次在酒精中浸泡时间不能超出30分钟。 在酒精里长时间浸泡,会破坏电极表面保护层,从 而缩短电极使用寿命。 2. 用类似试验细胞培养液消过毒电解液或0.1-0.15M KCl 或 NaCl 溶液冲洗电极。 3. 现在电极能够用来测量电阻。 4. 测量电压时,在无菌电解质溶液中平衡电极。 提醒:电极能够存放在一个UV罩保持无菌状态。 注意:当电极暴露在强光或紫外线中时,电极表面会形成一层黑色氧化膜,通常,氧化膜不会影响电极性能。为了避免氧化膜行成,应该避光储存。 电极存放 短期存放(两周以内):浸泡电极尖端在电解液中。确保电极线缆插头连接到EVOM2设备,方便确保系统内部短路而且确保电极对称性。 长久存放(两周以上):长久存放时,电极要用蒸馏水清洗而且放置在干燥、黑暗处。 EVOM2 充电器和电池 注意: 电池充电时确定EVOM2 电源开关已关闭。 EVOM2 充电器接交流电源能够给电池充电。配置通用电源可在多个国家使用。EVOM2 包含有6V 2200mAH 可充电镍氢电池。 电池充电 电池可进行500次充放电,能够在任何时候,且能够进行连续充电。 图 10–镍氢电池 警告:请使用EVOM2 充电器。 使用其它充电器能会损坏电池。 依据使用情况,电池寿命约1-2年。 镍氢电池在不使用情况下也会放电,放电速度和温度相关,温度越低,放电速度越低。假如电池长久处于放电状态可能会损坏电池。为预防电池损坏,最少每两个月对电池充电一次。假如EVOM2中电池失效,可使用备用电池(WPI #91736)。见16页“附件” 更换电池: 1.使用螺丝起子取下 EVOM2外箱上4个螺丝钉。 图 11–电池固定在EVOM2地盘上 2.电池安置在基板底部,使用飞利浦1号螺丝起子卸下固定电池两个螺丝钉。 3. 竖直地拔出连接在电路板上塑料连接头(图12)。注意连接头及不一样颜色电线位置。 4. 妥善地处理使用过电池。. 5. 电池连接头只能用单向安装。假如连接头不能很轻松地安装到位,不要强行压入。要安装电池,将锁扣立在连接头带有凸舌电路板上。锁扣装置必需紧靠锁紧架。(图13)。轻轻将连接头划过电路板上芯针,垂直向下推接头压到底。 警告:安装电池时请勿颠倒电池极性,不然可能会造成人身安全或对设备造成损害。 图 12–电池连接器安装到位 6. 安装电池固定板; 7. 安装外壳; 8. 对新电池充电二十四小时以上。 附件 表3列出了附件及其相关信息。大部分零件描述见后面。 表 3: 附件清单 WPI 料号 说明 仪表附件 3993 电极适配器 (2毫米针芯用) 2851 标准BNC电缆线, 6英尺 91736 镍氢可充电电池 91750 1000Ω电阻仪 表皮细胞测量用电极 STX2 替换电极盒 STX3 可调电极盒 表皮/内皮细胞测量用电极 ENDOHM-6 用于6毫米培养杯(24孔/板)和12毫米Millcell-CM杯 ENDOHM-12 用于12毫米培养杯(12孔/板) ENDOHM-24SNAP 用于24毫米和Costar Snapwell培养杯(6孔/板) HTS (高通量)内皮细胞测量用电极 STX100C STX100用于Costar Snapwell HTS 24孔板 STX100M STX100用于MilliporeCaCo96孔板 96STX100C96 STX100用于Corning HTS 96孔板 带有合成膜细胞培养杯 CALICELL-12 用于Endohm6/1212毫米标准池 CALICELL-24 用于Endohm-2424毫米标准池 其它配件 7364 戊二醛溶剂(夸脱) LAb-TRAX-4 4-通道数据采集系统 电极适配器 (WPI# 3993)能将以RJ-11形式4个接触点转换为4个独立2毫米针芯插孔。这么能够使用户将EVOM2连接到USSING系统或其它4电极系统。 STX2 可供EVOM2 使用,可用来测量培养表皮组织膜间电阻(TEER)和电压。电极上带有一对4毫米宽1毫米厚电极尖,每个电极尖含有一个外面(电压)电极和一个内面(电流)电极。 STX3能够用在EVOM2上来替换STX2电极。 和STX2电极不一样是STX3电极间距离是可调整。 STX100C 和 STX100F 是使用EVOM2可选电极。尤其是用在高通量药品筛选上,它们结合了STX2和Endohm优点,可很好反复直接测量培养皿中跨膜电阻。 Endohm 作为EVOM2可选电极室用来测量低电阻培养细胞或高精度测量用,也能够用来研究化学物和其它原因引发紧密连接改变。插入膜上下同心电极对大大提升了测量稳定性和可反复性。和STX2不一样是,培养皿必需从培养板转运至Endohm进行测量。 CaliCell是一个由合成膜制作细胞培养皿,该膜模拟溶液中融合表皮细胞膜电阻。每个CaliCell培养皿在生产时就已经确定电阻值,据此系统电阻含有可比性。CaliCell 当用于产生低电阻融合细胞时尤其有用,甚至让人担心EVOM2没有正常工作。CaliCell 获取高电阻读数肯定EVOM2 处于工作状态。尽管电阻随时间改变会有所改变,但在室温下CaliCell 在几年之内全部会保持在一个合理常数。同时它也能够用多种电极配置来检测EVOM2(或USSING) 系统。 故障排除 EVOM2 仪器 大部分时间,系统故障全部和电极相关而非是仪表本身。最少二分之一仪表失效是因为开关被腐蚀而造成,经典原因是盐溶液泄露或仪器上培养基造成腐蚀。假如仪器远离盐溶液,则能够降低上述情况发生,仪表也工作正常。 STX2 电极 尽管STX2电极质保期只有30天,但依据其使用情况通常寿命是1-2年。使用过程中可能会碰到以下问题: 读数不稳定或电压读数偏高:假如电极失效,最普遍现象是读数不稳定或电压读数偏高。 电阻过低:假如仪器显示低于预期电阻值,不过读数稳定而且可重现,最可能是因为细胞培养,而不是电极或仪器。假如没有定量测试方法进行就地测试或湿试法测量电极。两个定性测试方法能够用来判定电极是否正常工作,而且会对电阻增加有所反应。 使用WPICaliCell测试电极,CaliCell是一个由合成膜制作细胞培养皿,该膜模拟溶液中融合表皮细胞膜电阻。每个CaliCell培养皿在生产时就已经确定电阻值,据此系统电阻含有可比性。 测量充满电解液培养皿和空白培养插之间电阻差值,假如电极保持静止,单独电解液电阻值应该低于50而且稳定。空白培养插正常情况下电阻值在80-200Ω之间,品牌和大小不一样会有差异。 提醒:正常使用时,统计使用每个不一样种类培养插或使用不一样培养基电阻值很有用,一旦担心电极有问题,能够比较目前读数和以前统计差异,从而能够用来判定电极是否工作正常。 故障 可能原因 处理方案 设备短暂运行然后电源关闭设备 设备短暂 运行后关 闭 充电不足 重新充电最少12小时 注意:充电时确定EVOM2电源已关闭。 无法充电 仪器电源输入接口连接失效 检验电源连接器是否和仪器电源输入接口正确连接。 充电器失效 用电压表校验电源输出电压是否正常,假如没有12V直流输出,换充电器 请更换电源。假如充电正常但设备无法开启,联络WPI客服人员。 设备无法开启 电池充电不足 电池电量不足时设备会自动关机。关机而且连接充电器进行最少12小时充电。完全充电需要二十四小时。为确保操作可靠性,仪器最好在使用前一天进行充电(充电时关闭电源)。 电池失效 替换电池或联络WPI客服。 参阅13页“电池更换” 电压读数不稳定 电池电量不足 确保充电器连接在带电插座上,1分钟后再次测量。假如电压输出不为0 (一般培养基)而且电池已充好电,仪器还有故障.在联络WPI技术支持前,重新对设备进行二十四小时充电而且反复操作。 电极周围有强电磁辐射源 将系统从电磁辐射区域移开。电磁辐射源包含:计算机,MPI设备,磁力搅拌器,等。 电源线或输出接口连接到统计仪上而造成影响 断开和统计仪连接然后再检验读数 故障 可能原因 处理方案 电压 读数 不为零 没有对电极 进行平衡 探针上面银/氯化银接触点可能因为电极对之间离子电荷分布不均匀而极化。能够先将探针电极浸入0.1MKCl溶液二十四小时让电路短路来中和这种离子电荷。当连接到仪器并将电源关闭,且把功效开关置于欧姆档时探针间形成短路。 电极污染 清洗电极(参考11页“抛光/清洗STX2电极”)。 电极间存在 可导电污染物 检验电极间表面区域是否存有连接内面和外面电极导电桥。假如不能清除则需要更换电极。 线路存在腐蚀物 在连接每个电极和手柄导线铜导体上涂有起保护作用透明绝缘物质。当探针使用过久时这种图层会损失而造成溶液中盐分依附在铜导体上,这时能够在铜导体上观察到有黑色物质,需要更换电极。 电阻读数异常偏高 电极接触 部位污染 在使用中,电极探针接触部位吸附并累积蛋白质或其它外部材料,这使得电极基础阻抗增加。能够用多种方法对电极进行清洗(参考11页“抛光/清洗STX2电极”)。 电阻 读数 异常 偏低 细胞培养或培养基问题 假如有足够时间让培养细胞进行融合,读数稳定但跟预期相比很低,问题可能出在细胞培养。电极失效通常不会有很低且稳定读数。使用电阻器验证仪器是否工作正常,仪器读数应该是1000Ω。 电阻 为负 电极间存在 可导电污染物 使用1000Ω测试电阻验证仪器是否工作正常,假如负读数仅在使用电极时出现,检验电极上是否有外源物质在电压电极和电流电极之间形成导电桥,清理这些物体并复位。. 故障 可能原因 处理方案 电阻 读数 不稳定 电极没有浸入到培养液中 使用电阻器验证仪器是否工作正常,仪器读数应该是1000W。假如电极和仪器断开或电极没有浸入到培养液中仪器读数就会不稳定。 测量过程中电极晃动 使用电阻器验证仪器是否工作正常,仪器读数应该是1000W。测量过程中尽可能保持电极不动,过多晃动会造成测量结果发生波动。 充电器和仪器连通 当充电器和仪器连通且充电器连接到交流电源时,因为没有电子隔离会造成读数不稳定。为确保读数稳定,测量时将充电器和仪器断开。 校准仪器 使用电阻器并经过调整前面板上 R ADJ校正螺钉使阻抗读数显示1000W(参考第5页“测试EVOM2仪器”) 电极探针太旧 使用电阻器验证仪器是否工作正常,仪器读数应该是1000W。正常使用情况下电极寿命为1-2年。 注意:假如EVOM2碰到故障不在故障排除列表中,能够致电WPI(中国)400全国无偿电话:400-688-5517,或 规格 膜电压量程. ±200.0 mV 精度 0.1mV 电阻量程 0 to 9999ΩW 电阻精度 1ΩW 交流方波电流 在12.5Hz 时实际电流为±10µA 电源 内置可充电6V2200毫安时镍氢电池 外接12V直流充电器 充电时间 12小时 电池供电时间 ~8小时* 模拟输出 1-10V (1mV/ohm) 外形尺寸 7.25”w x 4.25”H x 2.30”D (19cm x11cm x 6cm) 重量 3 lb (1.4 kg) 电极连接 RJ-11连接器 (电话线接头) 校验电阻器 外置 工作环境 50-100℉ (10-38℃) 相对湿度0-90% * 当电池电量低于最小工作电量时,仪器将自动关闭。电池充电后能够支持设备使用约8个小时。充电时请确定EVOM2 仪器处于关闭状态。 附录A:电阻计算 电阻 测得组织培养膜总电阻包含了空白电阻(以下)。必需测量空白电阻而且在总电阻中减去空白电阻以取得实际膜电阻。 比如,假设测得0.15M KCl 溶液和12孔细胞培养插上膜电阻为130Ω,这就是该细胞培养插空白电阻(电阻会因培养皿制造商不一样会有差异)在这个例子中假设样本电阻测量值为800Ω,则膜实际电阻计算为: R总= 800Ω R空=130Ω W R空 + R膜 = R总 R膜 = R总 – R空 R膜 = 800Ω – 130Ω = 670Ω W “空白”培养插电阻值 当使用带有STX2EVOM2 测量空白培养插时,电阻值通常在120 to 180Ω(取决于培养插品牌),这不是因为空白过滤膜阻力形成背景电阻。然而,移除培养插中过滤膜,测得培养插电阻将保持不变,因为背景电阻关键取决于细胞培养插底部和细胞培养板底部之间间隙。 通常这个间隙大小为1mm,有些其它品牌培养皿间隙会稍微偏大。这个差异造成不一样品牌测得空白电阻也不一样。间隙越小,电阻就越高。过滤膜电阻实际上能够忽略。假如使用Endohm-24SNAP 或 Endohm-12 ,空白电阻靠近零,因为外部电极在过滤膜下面,基础没有间隙存在。 单位面积电阻 因为电阻和组织面积成反比,这里单位面积电阻是不一样于使用膜面积和能够被用于比较从不一样尺寸培养插中取得数据。 注意:使用带有 STX2电极EVOM2 测量直径24毫米及以上培养皿时,测得电阻不应该转换成单位面积电阻。推荐使用Endohm用于较大尺寸培养插(见第25页附录B:直径24毫米(6孔)培养皿和STX电极)。 单位面积电阻可由仪器测得电阻乘以过滤膜有效面积来计算,单位为Ωcm2。电阻和表面积成反比,所以,膜面积越大,电阻越小。 单位面积电阻=电阻(Ω) x膜有效面积* (cm2) l 对于特殊培养插参见参考相关制造参数 l 单位面积 = 1cm2 回到之前例子,当 R膜 = 670Ω时,假如有效膜面积直径(d)为1.05 cm,则单位面积电阻为: 单位面积电阻=电阻 x 膜有效面积=670Ωx pd2/4 = 670W x (3.14)*(1.05cm)2/4 = 580Wcm2 W 580W为每1 cm2电阻值。 膜面积越大,电阻越小,单位是Ωcm2,而不是W/cm2。这可能会让尝试用除法方法计算单位面积电阻新用户感到迷惑。更具体说明能够加强对这个概念了解:假设 1cm2 膜电阻为500W,那么5cm2 膜电阻为100W,而不是2,500W,因为电阻和面积成反比,对应地,假如5cm2膜电阻为100W,那么1cm2膜电阻是100W x 5cm2 = 500Wcm2,因为膜面积为1/5时电阻将增加5倍。 附录B:直径24 mm(6孔)培养皿和STX电极 注意:用WPI STX系列电极测得直径24毫米(配6孔板)培养插电阻将比用Endohm-24测得电阻高1.8到2.2倍,因为STX电极无法将均匀一致电流密度在较大膜上经过过滤膜和培养板之间较窄间隙传输。所以, STX 电极经过24毫米培养插中获取电阻读数不能用于计算单位面积电阻。STX 电极只是用于定性测量单层细胞健康状态和定量测量细胞融合程度。相对于较小培养插如12毫米和6毫米而言,这不是一个问题。当Endohm配合EVOM2使用时,它提供了可反复和正确膜电阻值,这些电阻值和采取精心设计USSING系统获取数据一致。同时也和STX2电极从12毫米和6毫米培养插中获取数据一致。 注意: 单位面积阻力和膜面积无关,取得数据会因为培养插大小不一样而不一样。 附录C:提升系统精度和可反复测量性 不管何时,在确保EVOM2 仪和电池充电器断开情况下进行操作,这么经过隔离电子干扰确保正确测量。假如测量过程中保持仪器和电池充电器相连,电子噪音将会干扰系统。为在测量中测量结果更正确,WPI提议将仪器和交流电源断开。 对于测量低电阻值细胞培养或想得到更正确测量结果,用户应该考虑采取Endohm替换STX2电极。尽管测量中细胞要从培养孔中转移到 Endohm腔内,但能够取得精度愈加好膜电阻测量结果。 经过在膜上下使用同心结构电极,Endohm 能够将背景电阻由150W降低到5W甚至更少(Endohm会较高)。电流电极结构能够使膜间电流密度更均匀一致,见图Figures 13和14。 图13叙述了STX2电极测量TEER原理。图14叙述了Endohm测量TEER原理。 Endohm搭配EVOM2进行膜电阻测量是一个正确、方便、经济方案。
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