PRMT5和CDKN2B在宫颈癌组织的表达及临床意义.pdf

【】./.肿瘤防治专题 和 在宫颈癌组织的表达及临床意义胡晓菡周强孙武陈静沈瀚李强基金项目:江苏省医学科研项目()作者单位:南京大学医学院附属鼓楼医院检验科(胡晓菡、沈瀚)病理科(周强)肿瘤科(孙武)妇产科(陈静、李强)通信作者:沈瀚:.【摘 要】目的 研究蛋白精氨酸甲基转移酶()、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂()在宫颈癌中的表达及临床意义 方法 收集 年 月 年 月南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科诊治宫颈癌患者 例 免疫组织化学法检测宫颈癌和癌旁组织中、表达采用 相关分析 与表达的相关性比较不同临床特征宫颈癌癌组织中、表达的差异 曲线评估、表达对宫颈癌患者无进展生存预后的影响多因素 回归分析宫颈癌患者无进展生存预后的影响因素 结果 癌组织中 蛋白阳性率.(/)高于癌旁组织.(/)(.)宫颈癌组织中 阳性率.(/)低于癌旁组织.(/)(.)宫颈癌中 与 呈负相关(.)期、有淋巴结转移宫颈癌组织中 阳性率高于 期、无淋巴结转移者而 阳性率则降低(/./.、./.、./.、./.)阳性组 年累积无进展生存率.(/)低于 阴性组.(/)(.)阴性组 年累积无进展生存率.(/)低于 阳性组.(/)(.)分期 期、合并淋巴结转移、阳性、阴性是影响宫颈癌患者无进展生存预后的独立危险因素().(.).(.).(.).(.)结论 宫颈癌组织中 表达升高 表达降低两者与宫颈癌患者的不良临床病理特征有关是评估宫颈癌预后的标志物【关键词】宫颈癌蛋白精氨酸甲基转移酶 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 预后肿瘤标志物【中图分类号】.【文献标识码】.:():.【】To investigate the expression and clinical significance of protein arginine methyltransferase 5(PRMT5)and cyclin dependent kinase inhibitor 2B(CDKN2B)in cervical cancer.The clinical data of 88 cervicalcancer patients who treated in the Department of Obstetrics and Gynecology,Gulou Hospital Affiliated to Nanjing University School of Medicine from March 2019 to March 2020 were collected.Immunohistochemical method was used to detect theexpression of PRMT5 and CDKN2B in cervical cancer and adjacent tissues.The correlation between PRMT5 and CDKN2Bexpression was analyzed using Spearman correlation analysis.The differences of PRMT5,CDKN2B in cervical cancer tissueswith different clinical characteristics were compared.KaplanMeier curve was used to evaluate the impact of PRMT5 andCDKN2B expression on the progression free survival prognosis of cervical cancer patients.Multivariate Coxregression analysis was used to analyze factors influencing the progression free survival prognosis of cervical cancer patients.The positive rate of PRMT5 protein in cancer tissue was 70.45%(62/88),which was higher than 6.82%(6/88)in adjacent tissues(2=75.155,P=0.001).The positive rate of CDKN2B in cervical cancer tissue was 22.73%(20/88),lower than?79.55%(71/88)in adjacent tissues(2=75.336,P0.001).There was a significant negative correlation between PRMT5 andCDKN2B in cervical cancer(r=0.734,P 0.001).The positive rates of PRMT5 and CDKN2B in cervical cancer tissues?with different FIGO stages and lymph node metastasis were statistically significant(P0.05).The cumulative 3year progres疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .?sion free survival rates of the PRMT5 positive and negative groups were 74.19%(46/62)and 92.31%(24/26),respectively,the cumulative 3year progression free survival rate of the PRMT5 positive group was lower than that of the PRMT5 negative group(Log Rank 2=4.386,P=0.017).The 3year progression free survival rates of the CDKN2B negative and positivegroups were 75.00%(51/68)and 95.00%(19/20),respectively,the cumulative 3year progression free survival rate of the CDKN2B negative group was lower than that of the CDKN2B positive group,and the difference was statistically significant(Log Rank 2=4.423,P=0.012).FIGO staging B2 to A,combined with lymph node metastasis,positive PRMT5,andnegative CDKN2B were independent risk factors affecting the progression free prognosis of cervical cancer patientsOR(95%CI)=1.407(1.159 1.696),1.464(1.201 1.784),1.614(1.189 2.192),1.595(1.191 2.136).The increased?expression of PRMT5 and the decreased expression of CDKN2B in cervical cancer tissue are related to the adverse clinicalpathological characteristics of cervical cancer patients,and are biomarkers for evaluating the prognosis of cervical cancer.【】Cervical cancer;Protein arginine methyltransferase 5;Cyclin dependent kinase inhibitor 2B;Prognosis;Tumor markers 宫颈癌是女性生殖道常见恶性肿瘤每年新发.万例 宫颈癌治疗以手术、放化疗为主但仍有部分患者出现肿瘤术后复发和转移 蛋白精氨酸甲基转移酶()是蛋白精氨酸甲基转移酶成员调控 修复、剪接和信号传导等生物学过程 研究表明 在胃癌、乳腺癌等许多恶性肿瘤中过表达能够转录激活 等癌基因的表达促进癌细胞增殖、侵袭和迁移 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂()属于/家族能够结合并抑制细胞周期素依赖激酶/的活性负调控细胞周期素 抑制细胞增殖在胃癌、甲状腺癌等多种人类恶性肿瘤中发挥肿瘤抑制的作用 宫颈癌中、的表达及临床意义尚不明确 本研究分析宫颈癌中、表达与临床病理特征及预后的关系探讨两者的临床意义报道如下 资料与方法.临床资料 收集 年 月 年 月南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科诊治宫颈癌患者 例年龄(.)岁病程 (.)基础病:高血压 例糖尿病 例高血脂 例病理类型:宫颈鳞癌 例宫颈腺癌 例参照国际妇产科联盟分期标准(分期)进行宫颈癌临床分期 期 例 期 例肿瘤大小:者 例 者 例肿瘤浸润深度:)中性甲醛固定 常规石蜡包埋切片烤片 二甲苯透明化梯度酒精脱水柠檬酸盐抗原热修复 过氧化氢阻断内源性过氧化物酶 羊血清封闭、抗 体 孵 育 过 夜(兔 单 克 隆、抗体购自美国 公司货号 稀释比均为 )二抗室温孵育 显色 苏木素复染梯度酒精脱水中性树脂封片显微镜下(日本奥林巴斯公司)观察 染色面积评分:阳性面积 为 分 为 分 为 分 为 分 为 分 染色强度评分:无阳性染色(分)淡黄色(分)棕黄色(分)免疫组化评分为染色面积评分乘以染色强度评分 分为阴性 分为阳性.随访:所有患者自治疗结束后以电话及门诊复查方式进行随访 随访时间:治疗结束后 年内 个月随访 次第 年每 个月随访 次 复查内容根据患者实际情况选择腹盆腔 或 等影像学检查和血常规、肝肾功能等实验室检查 记录患者随访期内肿瘤复发转移情况患者生存情况等 随访截止时间为 年 月 日 无进展生存时间定义为自宫颈癌确诊到术后肿瘤复发、转移及患者肿瘤相关死亡的时间 随访终点为患者出现肿瘤进展或随访时间结束.统计学方法采用 .软件统计分析数疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .据 计数资料以频数或率()表示组间比较采用卡方检验 秩相关分析宫颈癌组织中 与 表达的相关性 绘制 生存曲线生存曲线比较采用 法 多因素 比例风险回归模型分析影响宫颈癌无进展生存预后的因素 .为差异具有统计学意义 结 果.、在宫颈癌及癌旁组织表达的比较 棕黄色阳性染色位于细胞浆和细胞膜棕黄色阳性染色位于细胞核见图 癌组织中 阳性率.(/)高于癌旁组织.(/)(.)癌组织中 阳性率.(/)低于癌旁组织.(/)(.)相关性分析发现宫颈癌中 与 表达呈显著负相关(.).、表达在不同临床病理特征中差异比较 分期 期、有淋巴结转移宫颈癌患者癌组织中 阳性率分别高于 分期 期、无淋巴结转移患者(均 .)分期 期、有淋巴结转移宫颈癌患者癌组织中 阳性率分别低于 分期 期、无淋巴结转移患者(均.)见表.宫颈癌中、表达与预后的关系 例宫颈癌患者随访中出现肿瘤进展 例 年无进展生存率为.(/)阳性和阴性组 年无进展生存率分别为.(/)和.(/)阳性组 年累积无进展生存率低于阴性组(.图 宫颈癌及癌旁组织中 及 蛋白表达(免疫组化染色).().)阳性及阴性组 年无进展生存率分别为.(/)和.(/)阴性组 年累积无进展生存率低于 阳性组(.)见图.多因素 回归分析宫颈癌无进展生存预后影响因素 以是否发生肿瘤进展为因变量(无 有)以上述结果中 .项目为自变量进行多因素 回归分析结果显示:分期 期、合并淋巴结转移、阳性、阴性是影响宫颈癌患者无进展生存预后的独立危险因素见表 表 不同临床病理特征患者、表达比较 例().参 数例数 阳性值 值 阳性值 值年龄(岁)(.).(.).(.)(.)病理类型鳞癌(.).(.).腺癌(.)(.)肿瘤大小()(.).(.).(.)(.)肿瘤浸润深度/全层(.).(.)./全层(.)(.)分期 期(.).(.).期(.)(.)肿瘤分化程度高中分化(.).(.).低分化(.)(.)淋巴结转移无(.).(.).有(.)(.)疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .图 宫颈癌组织、表达与宫颈癌患者无进展生存预后的关系.表 多因素 回归分析宫颈癌预后影响因素.因 素 值 值 值 值 值 .淋巴结转移.阳性.阴性.讨 论 宫颈癌是我国女性常见的恶性生殖系统肿瘤每年新发病例达.万例约占全球新发病例数的/近年来随着宫颈癌早期筛查的普及宫颈癌的发病人数逐渐增多 宫颈癌的治疗包括根治性子宫切除术加盆腔淋巴结清扫但术后仍有 的患者 年内出现肿瘤复发转移且出现肿瘤复发转移后治疗手段有限患者预后较差 研究宫颈癌的疾病机制寻找能够评估患者临床预后的肿瘤标志物对于术后高危进展患者的术后辅助治疗方式的选择具有重要意义 属于蛋白质精氨酸甲基化转移酶家族的 个成员之一通过甲基化蛋白精氨酸残基调控如 剪接、细胞周期、细胞死亡和代谢信号等通路研究表明子宫内膜癌中 能与雌激素受体 及类固醇受体共激活因子 相互作用促进细胞周期蛋白、的蛋白表达增强癌细胞的增殖和迁移能力并抑制其凋亡 本研究中宫颈癌组织 表达升高与既往学者在宫颈癌组织芯片中报道的结果一致但该研究选取的患者以高分期和高分级的患者为主研究群体的代表性存在一定的局限宫颈癌中 的表达上调与转录调控失常有关研究发现宫颈癌中转录因子 能够结合 基因上调 的表达进而形成 转录抑制复合物催化组蛋白二甲基化和脱乙酰化抑制 钙黏蛋白的表达促进肿瘤上皮间充质转化导致肿瘤侵袭和转移 另外 表达与不良临床病理特征有关提示 促进宫颈癌的肿瘤进展 研究表明 通过组蛋白 的对称二甲基化增强信号转录因子与转录活化因子 的转录促进宫颈癌细胞中程序性死亡因子配体 的表达抑制 细胞中干扰素、肿瘤坏死因子 和颗粒酶 的分泌促进肿瘤免疫逃逸及肿瘤恶性进展 亦有研究报道 还能抑制 泛素连接酶含/重复序列的蛋白 的表达增加 蛋白的稳定性促进胰腺癌的无氧糖酵解导致肿瘤的过度增殖 本研究中 阳性宫颈癌患者无进展生存预后较差表明 是新的评估宫颈癌患者无进展生存预后的肿瘤标志物 笔者分析 阳性的宫颈癌患者肿瘤往往合并淋巴结转移、较高的 分期等高危复发进展的因素导致术后治疗进展风险增加 另外 还能促进肿瘤耐药性形成降低术后辅助治疗疗效导致患者不良预后 等研究表明 的表达能够促进微管调节蛋白 的表达导致肺癌肿瘤细胞对紫杉醇等化疗药物的获得性耐药性的形成 又称为 该基因编码蛋白作为细胞周期依赖激酶抑制剂能与细胞周期蛋白依赖激酶 或 结合形成复合物抑制细胞周期依赖激酶的激活在控制细胞周期 期进展中发挥作用 研究发现甲状腺癌中 表达缺失导致细胞周期依赖性蛋白丝/苏氨酸激酶的激活促进肿瘤细胞的过度增殖 本研究中宫颈癌组织 表达下调这与既往学者利用甲基化特异 在宫颈癌组织中发现 基因的高甲基化沉默的研究结果一疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .致但该研究样本量较小仅纳入 例宫颈癌患者结果可能存在偏倚 宫颈癌中 的表达与表观遗传学修饰有关 研究表明 基因的异常甲基化导致 表达缺失增加宫颈癌、卵巢癌等恶性肿瘤发生的易感性 本研究发现宫颈癌中 表达与 分期、淋巴结转移有关表明 促进宫颈癌的恶性进展 等报道胃癌中 转录因子 的表达能够通过诱导组织分化诱导非蛋白质编码 的转录促进其与 蛋白的结合降低 的稳定性抑制的蛋白表达导致肿瘤细胞过度增殖 本研究中 阴性的宫颈癌患者无进展生存预后较差提示 是新的评估患者预后的肿瘤标志物 笔者分析 阴性的宫颈癌肿瘤增殖能力强 分期较高肿瘤容易出现淋巴结转移术后复发转移风险较高 另外 阴性的宫颈癌对化疗及靶向治疗存在耐药性降低术后辅助治疗的有效性导致肿瘤复发和转移 研究表明人白血病细胞 中 通过靶向抑制 基因的表达增强癌细胞对地西他滨等化疗药物治疗的耐药性 另外有研究报道在吉非替尼获得性耐药的肺癌患者中 表达存在明显的缺失型突变检测 基因表达情况有助于评估靶向药物治疗敏感性 因此宫颈癌中 的表达下调促进肿瘤的发生发展是新的评估宫颈癌患者预后的肿瘤标志物 本研究中宫颈癌组织 与 表达呈负相关提示两者在宫颈癌中存在相互作用的关系 分析其原因 的表达上调能够与果蝇 基因增强子 相互作用促进组蛋白 和 表达增加 基因的启动子区 的甲基化水平沉默 的表达诱导肿瘤细胞过度增殖 综上所述宫颈癌中 表达升高表达降低均与 分期、淋巴结转移相关 分期 期、合并淋巴结转移、阳性、阴性是影响宫颈癌患者无进展生存预后的独立危险因素 临床医师可根据癌组织中、表达同时结合传统的 分期及淋巴结转移等临床病理特征对宫颈癌患者的预后进行评估对于高危复发进展的患者积极诊治和随访以改善临床预后 本研究也存在局限性样本量较小随访时间较短有待今后设计多中心大样本前瞻性的临床试验进一步研究利益冲突:所有作者声明无利益冲突作者贡献声明胡晓菡:设计研究方案实施研究过程论文撰写周强:提出研究思路分析试验数据论文审核孙武:实施研究过程资料搜集整理陈静:实施研究过程资料搜集整理沈瀚:进行统计学分析李强:论文修改参考文献 .:.():.:./.罗学芹.宫颈癌治疗前后 感染情况及临床特征与病情复发的关系.吉林医学():.:./.张琮赵佩杨盛等.通过调控 表达对缺氧复氧诱导大鼠心肌细胞损伤的影响.中国老年学杂志():.:./.():.:./.():.:./.():.:././.():.:./.:.():.:./.:.():.:./.万晶晶姚莉李梦琳等.联合 检测在宫颈癌病情及预后评估中的价值.疑难病杂志():.:./.():.:././.():.:./.疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .():.:././.():.:./.():.:./.王明政金妙妙宋佳璐等.过表达 调控/轴对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究.广东医学():.:./.():.:./.:.():.:././.():.:./.():.:././.():.:./.刘艳红李虎杨翔等.子宫内膜癌组织、表达及临床意义.疑难病杂志():.:./.王燕翔李彧白王丽伶等.宫颈癌患者血清、的表达水平及其临床意义.疑难病杂志():.:./.():.:./.(收稿日期:)(上接 页).():.:./.刘凡施文瑜刘益飞等.三阴性乳腺癌组织长链非编码、的表达及其临床意义.中国现代医学杂志():.:./.():.:./.:.():.:./.():.:./.():.:./.:.():.:./.曹琳尹红朱静等.靶向调控/信号通路对乳腺癌转移的作用.南昌大学学报:医学版():.:./.汪伶俐田武国赵健洁等.靶向 调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究.疑难病杂志():.:./.袁南贵罗雪平胡玉萍等.、在乳腺癌中表达及其与患者预后的关系.疑难病杂志():.:./.().():.:./.():.:./.(收稿日期:)疑难病杂志 年 月第 卷第 期 .