53血红蛋白的提取与分离习题专练.doc

5.3 血红蛋白的提取与分离习题专练
1．凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。
A．分子的大小 B．相对分子质量的大小 C．带电荷的多少 D．溶解度
2．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。
A．相同 B．相反 C．相对 D．相向
3．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个 （ ）

4.用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质 （ ）
A．路程较长，移动速度较慢 B．路程较长，移动速度较快
C．路程较短，移动速度较慢 D．路程较短，移动速度较快
5.将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是 （ ）
A．无色透明的甲苯层 B．脂溶性物质的沉淀层
C．血红蛋白的水溶液 D．其他杂质的暗红色沉淀物
6.在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是 （ ）
A．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程
B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和
C．防止血红蛋白被02氧化
D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
7.使用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的迁移速度完全取决于 （ ）
A．电荷的多少 B．分子的大小 C．肽链的多少 D．分子形状的差异
8．洗涤红细胞的目的是 （ ）
A．去除血清 B．去除杂蛋白 C．除去血小板 D．除去水
9．电泳利用了待分离样品中各种分子 以及 、 的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。
10．分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为4层：第一层为______，第二层为______固体，是______的沉淀层，第三层是___ ___液体，是______的水溶液，第四层是其他杂质的______沉淀物。
11.对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题：
（1）蛋白质的提取和分离一般分为四步：_________、________、_________和纯度鉴定。
（2）如果要从红细胞中分离出血红蛋白，实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠
檬酸钠，这样做的目的是__________________________________。
（3）血红蛋白的提取又可以细分为：红细胞的洗涤、______________、分离血红蛋白溶
液和_______。其中分离血红蛋白溶液时需要用到_______（仪器）分出下层红色透明液体。
（4）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是__________________。②透析的原理是______________________________。
（4）装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡必须重新装。
这是因为____________________________________________。
12、下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(图I)和洗脱(图Ⅱ)示意图，请据图回答下列问题。
(1)在加样示意图中，正确的加样顺序是 。
(2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是
①注意不要破坏 。
②贴着管壁加样。
③使吸管管口沿管壁 移动。
(3)等样品 时，才加入缓冲液。
待 接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
13、科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。
(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。
(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的 ，确定该蛋白质的抗菌效果。
(4)细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。